一、選擇題（本大題共20小題，每題2分，共40分）1.土壤中細菌分離下列說法正確的是（）A.一般園田土和耕作過的沼澤土中，酵母和霉菌較多菌和放線菌較少B.土壤樣品采樣時，用采集器取離地1~5cm處的土C.土壤中細菌分離時，移液管口部滅菌后要放置棉花，用報紙包扎好D.涂布平板時，涂布器在培養(yǎng)盛中要正轉(zhuǎn)三圈，反轉(zhuǎn)三圈，涂布均勻【答案】D2.工業(yè)生產(chǎn)固體基料培養(yǎng)時為了避免雜黃污染常選用耐高溫的菌種，培養(yǎng)溫度常在（）左右。A.30℃B.40℃C.50℃D.60℃【答案】B3.葉片病原菌取發(fā)病葉片，沿病健交界處將葉片剪成（）cm2大小的葉片，備用。A.3~6B.1~2C.2~3D.2~8【答案】C4.菌種保藏移植間隔時間以保藏溫度影響最大，4℃保藏一般為（）A.3~6月B.12月C.2年D.28月【答案】A5.明膠顆粒保藏技術路線正確的是（）A.待保藏的菌種→活化→菌懸液制備→明膠顆粒制備→硅膠管準備→保藏→定期檢查B.待保藏的菌種→菌懸液制備→活化→明膠顆粒制備→硅膠管準備→保藏→定期檢查C.待保藏的菌種→活化→明膠顆粒制備→菌懸液制備→硅膠管準備→保藏→定期檢查D.待保藏的菌種→活化→菌懸液制備→硅膠管準備→明膠顆粒制備→保藏→定期檢查【答案】A6.明膠顆粒制備，將2%明膠溶液滅菌，待冷卻至（）℃，即不燙手背為宜。A.20B.30C.45D.50【答案】C7.硅膠管準備，將硅膠顆粒和玻璃棉放入培養(yǎng)皿，在（）℃下干熱滅菌2~3h。A.120B.130C.145D.160【答案】D8.硅膠管準備，將硅膠顆粒用無菌鑷子轉(zhuǎn)入無菌試管中，大約占試管的（）體積。A.1/2B.1/3C.1/4D.1/6【答案】B9.4℃斜面菌種保藏技術路線正確的是（）A.待保藏的菌種→選優(yōu)→接種培養(yǎng)→活化→保藏→定期檢查B.待保藏的菌種→接種培養(yǎng)→活化→選優(yōu)→保藏→定期檢查C.待保藏的菌種→活化→接種培養(yǎng)→選優(yōu)→保藏→定期檢查D.活化→待保藏的菌種→接種培養(yǎng)→選優(yōu)→保藏→定期檢查【答案】C10.根據(jù)菌落的形態(tài)進行初步篩選，選出平板中未退化的菌落，將其挑出，不得少于（）個菌落，接種于試管斜面上。A.12B.25C.45D.60【答案】B11.將滅過菌的葉片放入PDA固體培養(yǎng)基上，（）℃，培養(yǎng)（）d，觀察病原菌生長情況，記錄菌落特征。A.12、3B.25、3C.45、5D.60、8【答案】B12.搖瓶培養(yǎng)技術路線正確的是（）A.斜面菌種→活化→搖瓶接種→振蕩培養(yǎng)→收獲B.斜面菌種→振蕩培養(yǎng)→搖瓶接種→活化→收獲C.斜面菌種→活化→振蕩培養(yǎng)→搖瓶接種→收獲D.活化→斜面菌種→搖瓶接種→振蕩培養(yǎng)→收獲【答案】A13.外植體的表面滅菌，在接種前（）min打開無菌操作間和超凈工作臺的紫外燈進行環(huán)境滅菌。A.12B.25C.30D.60【答案】C14.傘菌屬、木耳屬有性繁殖的是（）A.卵孢子B.子囊孢子C.接合孢子D.擔孢子【答案】D15.根據(jù)菌落的形態(tài)進行初步篩選，選出平板中未退化的菌落，將其挑出，不得少于（）個菌落，接種于試管斜面上。A.12B.25C.30D.60【答案】B16.菌種復壯技術路線正確的是（）A.待復壯的菌種→活化→菌懸液制備→涂布平板→菌落形態(tài)鑒別→選種保藏→生產(chǎn)性狀測定→選優(yōu)保藏B.待復壯的菌種→活化→涂布平板→菌懸液制備→菌落形態(tài)鑒別→選種保藏→生產(chǎn)性狀測定→選優(yōu)保藏C.待復壯的菌種→活化→菌懸液制備→菌落形態(tài)鑒別→涂布平板→選種保藏→生產(chǎn)性狀測定→選優(yōu)保藏D.待復壯的菌種→菌懸液制備→活化→涂布平板→菌落形態(tài)鑒別→選種保藏→生產(chǎn)性狀測定→選優(yōu)保藏【答案】A17.接種時，應注意保持罐壓在（）MPa，停止攪拌，接種要快、準、穩(wěn)。A.1B.0.5C.0.05D.0.1【答案】C18.固體基料培養(yǎng)技術路線正確的是（）A.斜面菌種→活化→基料接種→培養(yǎng)→收獲B.斜面菌種→基料接種→活化→培養(yǎng)→收獲C.斜面菌種→培養(yǎng)→基料接種→活化→收獲D.活化→斜面菌種→基料接種→培養(yǎng)→收獲【答案】A19.半固體培養(yǎng)基瓊脂使用量一般控制在（）A.1%~1.5%B.0.5%~1%C.0.2%~0.5%D.0.25%~0.6%【答案】C20.制備固體培養(yǎng)基時，采用高壓蒸汽滅菌法滅菌（）min。A.24B.2~3dC.13~15D.15~20【答案】D二、判斷題（本大題共10小題，每題2分，共20分）1.照射20min后關閉紫外燈，打開風機使超凈工作臺處于工作狀態(tài)。（）【答案】√2.性狀優(yōu)良的菌種菌落具有以下特征:孢子生長有減弱趨勢；菌種中度大小，有偏小趨勢，但不是極?。痪淦?。（）【答案】×3.性狀退化的菌種菌落具有以下特征:表面結構均勻，孢子生長均勻，孢子顏色不均勻，菌落表面產(chǎn)生自色斑點或禿斑等。（）【答案】×4.菌種復壯工作一次操作失敗，可以重復以上操作，直至復壯成功。（）【答案】√5.菌種復壯工作應該定期進行，隨時觀察，一旦菌種退化，盡快處理。（）【答案】√6.放線菌屬于真核微生物，能通過產(chǎn)孢絲產(chǎn)生孢子進行繁殖。（）【答案】×7.基料接種時先將基料加熱(100℃，30min)滅菌消毒，再接入10%基料量的菌種。（）【答案】√8.真菌一般在30℃下培養(yǎng)，細菌培養(yǎng)溫度一般在28℃下培養(yǎng)。（）【答案】×9.細菌的芽孢是一種休眠結構。（）【答案】√10.固體基料發(fā)酵的溫度控制以基料內(nèi)部溫度為準。（）【答案】×三、名詞解釋題（本大題共4小題，每題5分，共20分）1.活化【答案】將待保藏的菌種接種于培養(yǎng)基上培養(yǎng)(細菌30℃,真菌28℃),隨時觀察,待試管斜面長成,這樣的操作稱為活化。2.微生物營養(yǎng)物質(zhì)【答案】微生物的生長需要碳源(凡能供給微生物碳素營養(yǎng)的物質(zhì))、氮源(凡能供給微生物氨素營養(yǎng)的物質(zhì))無機鹽(包括主要元素和微量元素)、生長因子(凡是微生物生長不可缺少的微量有機物質(zhì))、能量(光能或化學能)和水六大營養(yǎng)要素。3.微生物培養(yǎng)基【答案】是以人工方法按照微生物的需要,用多種物質(zhì)調(diào)制而成的適合不同微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物需要的一種營養(yǎng)基質(zhì)。4.天然培養(yǎng)基【答案】利用天然的動植物組織、器官以及它們的抽提物等為原料制成的培養(yǎng)基。四、簡答題（本大題共2小題，每題5分，共10分）1.簡述微生物保藏的基本依據(jù)。【答案】菌種保藏，包含兩方面的內(nèi)容：一是菌種的保持，即保持其存活和不受污染；二是菌種的貯存，使其在相當長時期內(nèi)維持穩(wěn)定的遺傳潛力，兩者缺一不可。菌種保藏的基本依據(jù)是根據(jù)微生物的生理生化特點，人工制造環(huán)境條件，使微生物處于代謝不活潑、生長繁殖受抑制的休眠狀態(tài)，即采取低溫、干燥、缺氧等條件，使菌種暫時處于休眠狀態(tài)。2.簡述固體基料培養(yǎng)的操作步驟【答案】菌種活化菌種的活化與斜面菌種保藏法一致。基料接種基料指為培養(yǎng)微生物而配制的特定固體基質(zhì),如麩皮、鋸末、馬鈴薯塊玉米粒、固體曲?；辖臃N時先將基料加熱(100℃，30min)滅菌消毒，再接人10%基料量的菌種。培養(yǎng)及收獲固體基料發(fā)酵的溫度控制以基料表層溫度為準，細菌一般為30℃真菌為28℃。工業(yè)生產(chǎn)中往往為了避免雜菌污染，常選育耐高溫菌種，培養(yǎng)溫度常在40℃左右。培養(yǎng)一定時間后，及時收獲。五、綜合題（本大題共10分）簡述葉片病原菌分離操作步驟【答案】取樣取發(fā)病葉片,沿病健交界處將葉片剪成2~3cm2大小的葉片，備用。培養(yǎng)基制作一般使用PDA培養(yǎng)基進行分離,配方如下:馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂15~20g、水1000mL(pH自