博士技能操作考試題目及答案

一、單項選擇題（每題2分，共10題）1.實驗中常用的移液槍量程不包括以下哪種？A.10μlB.100μlC.500μlD.1000ml2.蛋白質(zhì)電泳常用的凝膠是？A.葡聚糖凝膠B.瓊脂糖凝膠C.聚丙烯酰胺凝膠D.硅膠凝膠3.以下哪種顯微鏡分辨率最高？A.光學顯微鏡B.電子顯微鏡C.體視顯微鏡D.倒置顯微鏡4.細胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基是？A.LB培養(yǎng)基B.YPD培養(yǎng)基C.DMEM培養(yǎng)基D.沙氏培養(yǎng)基5.進行基因克隆時，常用的工具酶不包括？A.限制性內(nèi)切酶B.DNA連接酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.淀粉酶6.以下哪種物質(zhì)常用于核酸提取中的蛋白質(zhì)去除？A.乙醇B.氯仿C.異丙醇D.乙酸乙酯7.做Westernblot時，封閉液的作用是？A.增強抗體結(jié)合B.防止非特異性結(jié)合C.固定蛋白D.溶解蛋白8.微生物培養(yǎng)時，常用的滅菌方法是？A.煮沸滅菌B.紫外線滅菌C.高壓蒸汽滅菌D.過濾滅菌9.進行PCR反應時，不需要的成分是？A.引物B.dNTPC.模板DNAD.蛋白酶10.測定酶活性時，通常需要控制的條件不包括？A.溫度B.pH值C.底物濃度D.酶的顏色二、多項選擇題（每題2分，共10題）1.以下屬于分子生物學實驗技術的有（）A.基因測序B.細胞轉(zhuǎn)染C.組織切片D.蛋白質(zhì)純化2.細胞培養(yǎng)需要注意的條件有（）A.無菌環(huán)境B.合適的溫度C.適宜的氣體成分D.定期換液3.常用的核酸定量方法有（）A.紫外分光光度法B.凝膠成像分析C.熒光定量法D.重量法4.蛋白質(zhì)純化的方法包括（）A.離子交換色譜B.親和色譜C.凝膠過濾色譜D.疏水色譜5.實驗中常用的緩沖液有（）A.Tris-HCl緩沖液B.PBS緩沖液C.檸檬酸緩沖液D.甘氨酸緩沖液6.以下哪些儀器常用于生化分析（）A.酶標儀B.離心機C.氣相色譜儀D.液相色譜儀7.基因表達調(diào)控的層面包括（）A.轉(zhuǎn)錄水平B.轉(zhuǎn)錄后水平C.翻譯水平D.翻譯后水平8.微生物鑒定的常用方法有（）A.形態(tài)學觀察B.生理生化特性分析C.16SrRNA測序D.血清學鑒定9.實驗數(shù)據(jù)處理常用的軟件有（）A.ExcelB.SPSSC.GraphPadPrismD.Photoshop10.以下屬于細胞生物學研究技術的有（）A.免疫熒光技術B.流式細胞術C.基因編輯技術D.細胞融合技術三、判斷題（每題2分，共10題）1.所有的酶在高溫下都會失活。（）2.核酸在260nm波長處有特征吸收峰。（）3.細胞培養(yǎng)過程中，CO?的主要作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH。（）4.蛋白質(zhì)的等電點是其在電場中不移動時的pH值。（）5.高壓蒸汽滅菌可以殺死所有的微生物及其芽孢。（）6.進行PCR時，引物的長度越長越好。（）7.電子顯微鏡可以觀察到細胞的亞顯微結(jié)構(gòu)。（）8.親和色譜是利用蛋白質(zhì)與配體之間的特異性結(jié)合進行分離的。（）9.實驗中使用的玻璃器皿都可以用烘箱烘干。（）10.基因敲除是使基因功能增強的技術。（）四、簡答題（每題5分，共4題）1.簡述SDS電泳的基本原理。答案：SDS即十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳，SDS能使蛋白質(zhì)變性并帶上大量負電荷，消除蛋白質(zhì)原有電荷差異。在電場作用下，蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中按分子大小不同進行分離，小分子遷移快，大分子遷移慢。2.核酸提取過程中，如何去除雜質(zhì)？答案：通過多種方法。用氯仿等有機溶劑抽提可去除蛋白質(zhì)；用乙醇、異丙醇沉淀核酸，離心去除上清中的雜質(zhì)；還可利用核酸與雜質(zhì)在不同吸附柱上的吸附差異，通過過柱方式去除雜質(zhì)。3.簡述細胞凍存和復蘇的要點。答案：凍存要點：細胞密度合適，加入凍存液（含DMSO等），梯度降溫。復蘇要點：快速解凍，在37℃水浴中盡快融化細胞懸液，然后迅速接種到合適培養(yǎng)基中培養(yǎng)，維持細胞活性。4.列舉三種常用的基因克隆技術。答案：一是傳統(tǒng)的質(zhì)粒載體克隆技術，將目的基因插入質(zhì)粒載體導入宿主細胞；二是Gateway克隆技術，利用位點特異性重組實現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移；三是In-Fusion克隆技術，通過同源重組實現(xiàn)基因克隆。五、討論題（每題5分，共4題）1.在實驗中遇到實驗結(jié)果與預期不符的情況，應該從哪些方面進行分析？答案：可從實驗材料、實驗方法、實驗儀器和環(huán)境等方面分析。如材料是否合格、方法是否準確規(guī)范、儀器是否正常、環(huán)境條件是否合適等，逐一排查可能導致結(jié)果異常的因素。2.如何保證實驗數(shù)據(jù)的準確性和可靠性？答案：要規(guī)范實驗操作，嚴格按標準流程進行。選擇可靠的實驗材料和儀器設備并定期校準。進行多次重復實驗，減少偶然誤差。同時，對數(shù)據(jù)處理要科學嚴謹，正確運用統(tǒng)計分析方法。3.談談基因編輯技術在生物醫(yī)學領域的應用前景與潛在風險。答案：應用前景：用于疾病治療，如糾正基因缺陷治療遺傳?。凰幬镅邪l(fā)，構(gòu)建疾病模型篩選藥物。潛在風險：可能引發(fā)脫靶效應，導致非預期基因改變；存在倫理問題，如對人類生殖細胞編輯引發(fā)倫理爭議。4.舉例說明蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關系。答案：如血紅蛋白，其四級結(jié)構(gòu)決定功能。亞基特定空間結(jié)構(gòu)使它能結(jié)合和運輸氧氣。當亞基結(jié)構(gòu)改變，如鐮刀型細胞貧血癥中血紅蛋白亞基突變，結(jié)構(gòu)改變導致運輸氧氣功能異常，體現(xiàn)結(jié)構(gòu)是功能基礎，結(jié)構(gòu)改變功能也變。答案一、單項選擇題1.D2.C3.B4.C5.D6.B7.B8.C9.D10.D二、多項選擇題1.ABD2.ABC