肉禽制品中合成色素的快速測(cè)定方法——微柱色譜法2001-11-09發(fā)布2001-12-01實(shí)施黑龍江省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布我國(guó)《食品添加劑衛(wèi)生管理辦法》和GB2760-1996食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了肉禽制品中(紅腸除外)不得添加任何食用合成色素。此外，我國(guó)現(xiàn)行的GB/TS009.35-1996食品中著色劑的測(cè)定方法，必須在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。為了滿足現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定的需要，本標(biāo)準(zhǔn)提供了肉禽制品中合成色素的快速測(cè)定方法——微柱色譜法。本標(biāo)準(zhǔn)由黑龍江省衛(wèi)生廳、哈爾濱市衛(wèi)生局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由哈爾濱市衛(wèi)生防疫站負(fù)責(zé)起草。1本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了肉禽制品中合成色素的快速測(cè)定方法——微柱色譜法。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T5009.35-1996食品中合成色素的測(cè)定方法，第二篇薄層色譜法(第二法)3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.2微柱色譜法利用微柱進(jìn)行的色譜分析。4原理肉禽制品樣品經(jīng)過處理后，根據(jù)水溶性酸性合成色素在酸性條件下被聚酰胺吸附的特性，提取合成色素；利用不同合成色素在吸附劑和展開劑之間的分配系數(shù)不同，通過微柱對(duì)不同合成色素進(jìn)行分離，并與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照柱比較測(cè)定。5試劑a)聚酰胺粉(尼龍6):30目～60目；c)0.85mol/L檸檬酸鈉溶液：稱取25.0g檸檬酸鈉，加水溶解，稀釋d)展開劑：0.85mol/L檸檬酸鈉溶液：氨水：乙醇(8+1+2);e)合成色素標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取純度為60%的胭脂紅、檸檬黃、莧菜紅、赤蘚紅各0.1000g,分別置100mL容量瓶中，加水溶解，定容至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于1.0mg商品合成色素。f)合成色素標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：取合成色素標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0mL,加水定容至10.0mL。此溶液每毫升相當(dāng)于0.10mg商品合成色素。26器材c)石棉網(wǎng)；d)脫脂棉；e)定性濾紙；f)玻璃漏斗。7試驗(yàn)方法7.1樣品處理：7.1.1肉制品樣品(紅腸去除腸衣)切碎混勻。稱取30g~50g樣品置于燒杯中，加100mL水，微火煮沸5min~7.1.2禽制品樣品去骨以后，切碎混勻。稱取30g~50g樣品置于燒杯中，加100mL水，微火煮沸3min~5min,7.2色素提?。喝?0mL濾液于15mL具塞比色管中，用1mol/L檸檬酸溶液調(diào)濾液pH值為4后，加人0.1g聚酰胺粉，充分振蕩，吸附3min~5min,待濾液中的色素完全被聚酰胺粉吸附后，傾去液體。用pH值為4的水洗滌聚酰胺粉表面的雜質(zhì)2次~3次，棄去洗液，將聚酰胺粉傾倒于干濾紙上，用濾紙吸干其表面水分，待用。7.3.1標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照柱制備：取合成色素標(biāo)準(zhǔn)工作液1.0mL,置15mL比色管中，加水至10mL,用1mol/L檸檬酸溶液調(diào)pH值為4后，加人0.1g聚酰胺粉，充分振蕩吸附3min~5min,傾去液體，用干濾紙將聚酰胺粉表面水分吸干。取微柱一支，截少許脫脂棉，與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照柱同時(shí)放入裝有4mL展開劑的比色管中，展開10min～15min,取出，與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照柱色帶7.4結(jié)果判定：本標(biāo)準(zhǔn)中標(biāo)準(zhǔn)色帶相當(dāng)于0.06mg純合成色素。在對(duì)食品樣品進(jìn)行快速半定量分析中，當(dāng)樣品測(cè)定量為7.4.1樣品柱上出現(xiàn)的色帶與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照柱上相對(duì)應(yīng)的色帶色度相近，Rf值一致，判定為被測(cè)樣品中檢出該種合成色素，其含量為20mg/kg。7.4.2樣品柱上出現(xiàn)的色帶顏色明顯淡于標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照柱上相對(duì)應(yīng)的色帶顏色，判定為被測(cè)樣品中該種合成色素含量小于20mg/kg。7.4.3樣品柱上出現(xiàn)的色帶顏色明顯濃于標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照柱上相對(duì)應(yīng)的色帶顏色，判定為被測(cè)樣品中該種合成色素含量大于20mg/kg。8方法靈敏度和準(zhǔn)確度8.1方法靈敏度：本標(biāo)準(zhǔn)最低檢出限胭脂紅、莧菜紅、檸檬黃各為0.01mg,赤蘚紅為0.02mg,當(dāng)取