CL基本原理A+B=C+D*D*→D+hV（1）能快速地釋放出足夠能量（化學(xué)發(fā)光反應(yīng)多為氧化還原反應(yīng)，激發(fā)能與反應(yīng)能相當(dāng)，DE=170～300kJ/mol；發(fā)光位于可見光區(qū)；（2）化學(xué)反應(yīng)能量最少能被一個(gè)物質(zhì)所接收并使之生成激發(fā)態(tài)；（3）激發(fā)態(tài)分子能夠以輻射躍遷方式返回基態(tài)1/30CL基本原理在化學(xué)發(fā)光（chemluminescence,CL）中，由化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生能原子或分子由激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時(shí)所產(chǎn)生這一光輻射現(xiàn)象叫化學(xué)發(fā)光。依據(jù)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度測(cè)定物質(zhì)含量分析方法叫化學(xué)發(fā)光分析。1887年Redziszewski首次報(bào)道了絡(luò)吩堿（lophine,2,4,5-三苯基咪痤）在堿性條件下與氧氣反應(yīng)發(fā)出黃金設(shè)色光———人為化學(xué)發(fā)光……2/30CL基本類型按反應(yīng)機(jī)理本身化學(xué)發(fā)光、敏化化學(xué)發(fā)光、電致化學(xué)發(fā)光本身發(fā)光：是指被測(cè)物質(zhì)為反應(yīng)物直接參加化學(xué)反應(yīng)，利用本身化學(xué)反應(yīng)釋放能量激發(fā)產(chǎn)物分子光輻射?？捎梅磻?yīng)式表示為：

A+B→C*+D，C*→C+hv

這類最普遍，多數(shù)有機(jī)物分子在液相中化學(xué)反應(yīng)屬于這一類型3/30CL基本類型敏化化學(xué)發(fā)光是指一些化學(xué)反應(yīng)中因?yàn)榧ぐl(fā)態(tài)產(chǎn)物本身不發(fā)光或反光十分微弱，但經(jīng)過加入某種接收體（熒光劑）可造成發(fā)光。反應(yīng)式為：

A+B→C*+D,F+C*→F*+C,F*→F+hvC為能量給于體，F(xiàn)為能量接收體4/30化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度與反應(yīng)物濃度關(guān)系化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度與化學(xué)反應(yīng)速度（dp/dt）相關(guān)聯(lián)，而一切影響反應(yīng)速度原因多能夠作為建立測(cè)定方法依據(jù)。

化學(xué)發(fā)光反應(yīng)普通可表示為：

A+B→C*,C*→C+hv

該發(fā)光反應(yīng)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度取決于反應(yīng)速度dp/dt和反應(yīng)化學(xué)發(fā)光量子效率（ΦCL

）

ICL（T）=ΦCLdp/dt

5/30慣用化學(xué)發(fā)光試劑A魯米諾（luminol）及其衍生物（3—氨基—鄰苯甲酰肼）在堿性條件下能被許多氧化劑（比如H2O2,O2,ClO-等）氧化而發(fā)出藍(lán)色光，量子產(chǎn)率介于0.01~0.05之間是一個(gè)研究最早，最多，應(yīng)用最廣泛發(fā)光試劑。pH10-12水溶性好

魯米諾異魯米諾6/30慣用化學(xué)發(fā)光試劑魯米諾發(fā)光原理7/30魯米諾與雙氧水發(fā)光機(jī)理

異魯米諾8/30慣用化學(xué)發(fā)光試劑B過氧草酸鹽（peroxalate）本身并不發(fā)光，其化學(xué)發(fā)光均為敏化發(fā)光反應(yīng)。是芳香草酸鹽和H2O2芳香草酸鹽和H2O2反應(yīng)形成高能量中間物。與魯米諾相比，過氧草酸鹽化學(xué)反應(yīng)發(fā)光效率更高，可到達(dá)27%，且在較寬酸度范圍內(nèi)(pH4~10)都能發(fā)光。缺點(diǎn)：水溶性差。適合用于有機(jī)相體系。熒光棒

9/30慣用化學(xué)發(fā)光試劑

C吖啶酯

在堿性條件下被H2O2氧化時(shí),發(fā)出波長(zhǎng)為470nm光。10/3011/30CL發(fā)光效率和發(fā)光強(qiáng)度化學(xué)效率主要取決于發(fā)光所依賴化學(xué)反應(yīng)本身；而發(fā)光效率則取決于發(fā)光體本身結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，也受環(huán)境影響。12/3013/3014/30動(dòng)力學(xué)反應(yīng)時(shí)間，提升靈敏度?

15/3016/3017/30O3,NO,NO2,H2S,SO2,CO18/3019/3020/3021/3022/30化學(xué)發(fā)光在CE中應(yīng)用柱后套管式柱端液池式電致發(fā)光式23/3024/30光激發(fā)化學(xué)發(fā)光主要原理是由光激發(fā)產(chǎn)生均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)。是以納米級(jí)高分子微粒為基礎(chǔ)新一代化學(xué)發(fā)光技術(shù)，被廣泛地應(yīng)用于碩士物分子相互作用。Lightinitiatedchemiluminescenceassay,LiCA25/30光激發(fā)化學(xué)發(fā)光感光化合物感光微粒和含有發(fā)光化合物發(fā)光微粒組成。微粒直徑約188nm，表面覆蓋多糖水凝膠。其功效為：非特異性結(jié)合少增加微粒懸浮性。連接目標(biāo)生物分子。增加了反應(yīng)表面積，可結(jié)合成百上千個(gè)生物分子60000個(gè)/s鑭系元素26/30光激發(fā)化學(xué)發(fā)光特點(diǎn)高靈敏度低背景適用范圍廣逐層放大化學(xué)反應(yīng)結(jié)果。感光微粒富含感光化合物，在光照射后每個(gè)微粒會(huì)釋放出60000個(gè)/s離子氧，離子氧作用于發(fā)光微粒中二甲基噻吩衍生物產(chǎn)生大量紫外光完成第二級(jí)放大；紫外光激發(fā)包埋在發(fā)光微粒中鑭系元素釋放光能完成第三級(jí)放大過程。三級(jí)梯度放大過程使LiCA檢測(cè)限低至10-15摩爾。27/30光激發(fā)化學(xué)發(fā)光特點(diǎn)高靈敏度低本底適用范圍廣1.天然熒光壽命小，而發(fā)光微粒發(fā)光時(shí)間超出1秒，可采取時(shí)間分辨模式采集光信號(hào)，也就是在激光器關(guān)閉后50-100毫秒采集光信號(hào)。2.采取680nm紅光激發(fā)，其能級(jí)不可能激發(fā)生物樣品中熒光物質(zhì)。3.LiCA發(fā)射光波長(zhǎng)比激發(fā)光波長(zhǎng)短，能量更高，所以稱為化學(xué)發(fā)光。而熒光是激發(fā)光為高能量而發(fā)射光為低能量。因?yàn)樯矬w內(nèi)富有天然熒光物質(zhì)，用熒光法測(cè)定生物樣品本底會(huì)較高，而LiCA檢測(cè)反其道而