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文檔簡介
ICS35.240.68
CCSB05
64
寧夏回族自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)
DB64/T1865—2023
賀蘭山東麓釀酒葡萄霜霉病監(jiān)測預(yù)警技術(shù)
規(guī)程
Rulesfortheinvestigationandforecastofwinegrapedownymildewintheeastern
foothillsofHelanMountains,Ningxia
2023-02-21發(fā)布2023-05-21實(shí)施
寧夏回族自治區(qū)市場監(jiān)督管理廳發(fā)布
DB64/T1865—2023
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定
起草。
請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。
本文件由賀蘭山東麓葡萄產(chǎn)業(yè)園區(qū)管委會提出、歸口并組織實(shí)施。
本文件起草單位:寧夏大學(xué)、寧夏農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所、寧夏回族自治區(qū)食品檢測研究院、
寧夏農(nóng)墾玉泉營苗木繁育有限公司、寧夏西鴿酒莊、寧夏志輝源石酒莊、寧夏立蘭酒莊、寧夏新牛酒莊、
寧夏賀蘭山東麓葡萄酒產(chǎn)業(yè)園區(qū)管委會。
本文件主要起草人:顧沛雯、張怡、張繼豐、張瑤、呂毅、馮延濤、袁園、陳麗瓊、毛雪、邵青松、
張厚寶、白明、李治鋒、何金柱、蘇文平、葉曉宏、拓維庶、康宏。
I
DB64/T1865—2023
賀蘭山東麓釀酒葡萄霜霉病監(jiān)測預(yù)警技術(shù)規(guī)程
1范圍
本文件規(guī)定了釀酒葡萄霜霉病監(jiān)測預(yù)警技術(shù)的術(shù)語和定義、病害調(diào)查方法、監(jiān)測預(yù)警資料的收集、
統(tǒng)計(jì)和匯報(bào)等。
本文件適用于寧夏賀蘭山東麓地區(qū)釀酒葡萄霜霉病病情調(diào)查和測報(bào)。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,
僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本
文件。
GB/T8321農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則
NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則
DB64/T1024葡萄霜霉病防治技術(shù)規(guī)程
3術(shù)語和定義
下列術(shù)語和定義適用于本文件。
3.1
病害監(jiān)測預(yù)警(Diseasemonitoringandearlywarning)
根據(jù)植物病害流行規(guī)律,推測未來一段時(shí)間內(nèi)病害分布擴(kuò)散和為害趨勢的綜合性科學(xué)技術(shù)。
3.2
幼果園(Youngorchard)
賀蘭山東麓產(chǎn)區(qū),樹齡在7年以下的葡萄園。
3.3
盛果園(Orchardwithahighyield)
賀蘭山東麓產(chǎn)區(qū),樹齡在7年~15年之間的葡萄園。
3.4
老果園(Oldorchard)
賀蘭山東麓產(chǎn)區(qū),樹齡在15年以上的葡萄園。
3.5
油斑期(Oilspotstage)
多見于葡萄霜霉病的初次侵染時(shí)期,葡萄下部葉片零星出現(xiàn)圓形或不規(guī)則形水漬狀黃色退綠斑,葉
片背面尚未見霉層出現(xiàn)的時(shí)期。
3.6
病害嚴(yán)重度(diseaseseverity)
表示植株或器官的罹病面積,即病斑面積占總面積的比率。
2
DB64/T1865—2023
3.7
病害發(fā)展曲線下面積(Areaunderthediseaseprogressioncurve,AUDPC)
是霜霉病流行期,每天感染百分比累加所得的值,AUDPC值越高表明品種的感病性越強(qiáng),反之則表
明品種的抗病性越強(qiáng)。其計(jì)算公式,按式(1)計(jì)算:
(1)
AUDPC=(Xi+1+Xi)/2(Ti+1?Ti)
式中:AUDPC—病害發(fā)展曲線下面積,這一參數(shù)能夠有效描述病情發(fā)展累積情況;n—總調(diào)查次數(shù);
Xi—第i次調(diào)查的嚴(yán)重度;Ti—為第i次調(diào)查的天數(shù)。
3.8
最佳防治時(shí)期預(yù)警(Earlywarningduringthebestcontrolperiod)
根據(jù)氣候因子、菌量等預(yù)測病原菌集中侵染的時(shí)期,以確定噴施殺菌劑適宜時(shí)機(jī),這種預(yù)警稱為最
佳防治時(shí)期預(yù)警。
3.9
分子病情指數(shù)(molecular—detecteddiseaseindex,MDI)
分子病情指數(shù)(MDI)的概念,即病原菌DNA濃度(pg)與寄主植物DNA濃度(ng)的比值,用于衡
量病害潛伏期菌量。
3.10
病情指數(shù)(diseaseindex,DI)
病情指數(shù)(DI)是全面考慮發(fā)病率與嚴(yán)重度的綜合指標(biāo)。計(jì)算公式有兩種:當(dāng)嚴(yán)重度用分級代表值
表示時(shí),病情指數(shù)=100×∑(各級病葉數(shù)×各級代表值)/(調(diào)查總?cè)~數(shù)×最高級代表值);當(dāng)嚴(yán)重度用百分率
表示時(shí),病情指數(shù)=普遍率×嚴(yán)重度×100
4病害調(diào)查方法
4.1孢子捕捉
使用孢子捕捉儀進(jìn)行孢子捕捉。選擇地塊相對平整,樹齡7~8年,架型不限,且易發(fā)病或種植感病
葡萄品種的果園1塊,安裝孢子捕捉儀。監(jiān)測果園地塊面積要求大于20畝以上,根據(jù)葡萄地行數(shù)平均,
自西向東,沿對角線方向,分別安裝3臺儀器。每臺儀器放置時(shí),距葡萄葉幕0.2m,吸風(fēng)口距地面高度
0.5m。每年春季日均溫超過15℃時(shí)開始捕捉,至霜霉病停止發(fā)病時(shí)結(jié)束,一般在6月中旬至9月下旬。
每3d調(diào)換涂有白凡士林的玻片,在18mm×18mm蓋玻片范圍內(nèi),用10×40倍鏡頭鏡檢觀察孢子數(shù),每玻片查
3~5個(gè)視野,計(jì)算每視野平均孢子數(shù),將結(jié)果記錄附錄表A.1,同時(shí)記錄天氣情況。
4.2定點(diǎn)系統(tǒng)調(diào)查
葡萄展葉后,即開始定園,定點(diǎn)、定期調(diào)查,直至秋季葡萄落葉結(jié)束。一般從4月下旬至10月下旬,
每7d~10d調(diào)查1次。若遇到降雨頻繁、果園枝葉郁閉或地勢低洼等條件時(shí),可適當(dāng)增加調(diào)查天數(shù),每3d~
5d調(diào)查1次。選擇上年或常年發(fā)病重的果園,且面積在10畝以上的幼果園、盛果園、老果園各1塊,每塊
園按5點(diǎn)取樣各固定5個(gè)新梢,每梢自上而下調(diào)查10張葉片。若氣候條件適宜,未見中心病株,應(yīng)擴(kuò)大調(diào)
查面積。細(xì)查其嚴(yán)重度級別(附錄表A.2),將結(jié)果記入附錄表A.3,計(jì)算病情指數(shù)和AUDPC。
4.3大田普查
3
DB64/T1865—2023
分別在葡萄開花前、落花后20d、果實(shí)膨大至著色初期、果實(shí)收獲后和葡萄落葉前普查5次。每次根
據(jù)當(dāng)?shù)仄咸哑贩N、栽培年限等,分類普查10塊~15塊面積大于10畝以上的葡萄園,每塊園按5點(diǎn)取樣調(diào)
查25個(gè)新梢,每梢自上而下調(diào)查10張葉片,分別記載嚴(yán)重度級數(shù)(附錄表A.2),將結(jié)果記入附錄表A.4,
計(jì)算病情指數(shù)。
5監(jiān)測預(yù)警數(shù)據(jù)收集
5.1葡萄園微氣象數(shù)據(jù)收集
葡萄出土后,利用田間設(shè)置的自動氣象測量儀,以小時(shí)為間隔,測量氣溫、降水和濕度等氣象資料,
數(shù)據(jù)傳輸?shù)綌?shù)據(jù)中心,進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析。
5.2葡萄栽培數(shù)據(jù)收集
收集葡萄種植品種、樹齡、栽培面積和生育期等數(shù)據(jù)(附錄表B.1)。
5.3葡萄霜霉病發(fā)生防治基本情況
記載葡萄霜霉病發(fā)生面積、發(fā)生程度、防治面積和防治措施等(附錄表B.2),總結(jié)發(fā)生特點(diǎn),并
進(jìn)行原因分析。
6監(jiān)測預(yù)警資料統(tǒng)計(jì)和預(yù)警匯報(bào)
6.1油斑期預(yù)警
在葡萄全部長出葉片后,春季平均氣溫上升為23℃~25℃,田間相對濕度大于等于90%,持續(xù)小時(shí)
數(shù)在8h~10h以上,則10h~15d后葡萄園中、下部葉片將出現(xiàn)病斑,若病斑背面尚未出現(xiàn)霉層,則確定
為油斑期預(yù)警,進(jìn)而確定最佳防治時(shí)期。
6.2孢子釋放期
根據(jù)田間孢子捕捉結(jié)果,孢子捕捉量出現(xiàn)突增日起到高峰后的突減日止,為一個(gè)孢子散發(fā)高峰期,
高峰期內(nèi)捕捉量最多的日期為高峰日。一個(gè)葡萄生長季節(jié)中有多個(gè)孢子釋放高峰。若氣候條件適宜,孢
子釋放高峰期后7d~10d田間出現(xiàn)病株。
6.3流行程度預(yù)警
葡萄霜霉病發(fā)生程度以全年最高病情指數(shù)和最高病葉率(3塊~5塊系統(tǒng)田平均)為指標(biāo)劃分成5級,
分級標(biāo)準(zhǔn)見附錄表C.1。將前期調(diào)查的中心病株調(diào)查、大田普查數(shù)據(jù)和AUDPC圖,結(jié)合品種抗性、氣候條
件等相關(guān)因子,將葡萄霜霉病流行程度劃分為5個(gè)級別,分別為大發(fā)生、中等偏重發(fā)生、中等發(fā)生、中
等偏輕發(fā)生和輕發(fā)生,確定葡萄生長季每月和全年病害發(fā)生嚴(yán)重程度(見附錄表C.2~C.5)。
6.4最佳防治時(shí)期預(yù)警
6.4.1田間微氣候數(shù)據(jù)確定最佳防治時(shí)期:依據(jù)賀蘭山東麓地區(qū)自然氣候條件,釀酒葡萄霜霉病病原
菌完成孢子成熟—孢子萌發(fā)—新孢子侵染的過程,需要10d~15d。在此過程中,如果沒有采取防治措
施,則有可能看到侵染葉片上的病斑或其上的白色霉層。最佳防治時(shí)期預(yù)警為田間平均溫度23℃~25℃、
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DB64/T1865—2023
平均濕度大于等于60%以上和葉面濕潤時(shí)間為8h~10h(濕度大于等于90%,持續(xù)小時(shí)數(shù))。最佳施藥
時(shí)間為預(yù)警后10d~15d的時(shí)間,以后再根據(jù)殺菌劑持效期、降雨、品種抗性和新的侵染循環(huán)確定下一
次噴藥時(shí)間。防治按DB64/T1024、GB/T8321和NY/T1276執(zhí)行。
6.4.2測定潛伏期病菌分子病指確定最佳防治時(shí)期:依據(jù)對田間樣品的MDI值和田間病情DI的相關(guān)
性分析,MDI均與采樣15d后的DI擬合性最高(見附錄C.3)。MDI大于0.0035時(shí),12d~15d后葡萄
霜霉病在果園零星發(fā)生,作為當(dāng)?shù)蒯劸破咸阉共》乐晤A(yù)警指標(biāo)。防治按DB64/T1024、GB/T8321和
NY/T1276執(zhí)行。
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A
A
附錄A
(規(guī)范性)
葡萄霜霉病病害調(diào)查資料
A.1葡萄霜霉病空中孢子數(shù)量調(diào)查記載
葡萄霜霉病空中孢子數(shù)量調(diào)查見表A.1。
表A.1葡萄霜霉病空中孢子數(shù)量記載表
捕捉孢子數(shù)(個(gè)/視野)
調(diào)查日期天氣狀況備注
視野1視野2視野3平均累計(jì)
A.2葡萄霜霉病田間調(diào)查嚴(yán)重度分級標(biāo)準(zhǔn)
葡萄霜霉病田間調(diào)查嚴(yán)重度分級標(biāo)準(zhǔn)見表A.2。
表A.2葡萄霜霉病田間調(diào)查嚴(yán)重度分級標(biāo)準(zhǔn)
級別描述
0無病斑
1病斑面積占整個(gè)葉面積的10%以下
2病斑面積占整個(gè)葉面積的11%~25%
3病斑面積占整個(gè)葉面積的26%~40%
4病斑面積占整個(gè)葉面積的41%~65%
5病斑面積占整個(gè)葉面積的65%以上
A.3葡萄霜霉病系統(tǒng)調(diào)查記載
葡萄霜霉病系統(tǒng)調(diào)查記載表見表A.3。
表A.3葡萄霜霉病系統(tǒng)調(diào)查記載表
調(diào)查各級病葉數(shù)/片
果園類型油斑期病葉率/%病情指數(shù)AUDPC備注
日期0級1級2級3級4級5級
幼果園
盛果園
老果園
平均
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A.4葡萄霜霉病普查記載
葡萄霜霉病普查記載表見表A.4。
表A.4葡萄霜霉病普查記載表
調(diào)查日期地點(diǎn)調(diào)查面積/㎡品種各級病葉數(shù)/片病情指數(shù)病葉率/%備注
0級1級2級3級4級5級
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B
B
附錄B
(規(guī)范性)
葡萄霜霉病監(jiān)測預(yù)警數(shù)據(jù)收集
B.1葡萄栽培數(shù)據(jù)收集
不同酒莊葡萄園葡萄栽培數(shù)據(jù)收集見表B.1。
表B.1釀酒葡萄栽培相關(guān)數(shù)據(jù)
酒莊位置種植品種栽培模式樹齡栽培面積生育期灌溉方式備注
B.2葡萄霜霉病發(fā)生防治基本情況
記載葡萄霜霉病發(fā)生防治基本情況見表B.2。
表B.2釀酒葡萄栽培相關(guān)數(shù)據(jù)
酒莊發(fā)生田塊位置發(fā)生特點(diǎn)發(fā)生率/%發(fā)生程度防治面積防治措施備注
8
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C
C
附錄C
(規(guī)范性)
葡萄霜霉病監(jiān)測預(yù)警匯報(bào)
C.1葡萄霜霉病發(fā)生程度分級標(biāo)準(zhǔn)
葡萄霜霉病發(fā)生程度劃分標(biāo)準(zhǔn)見表C.1。
表C.1葡萄霜霉病發(fā)生程度劃分標(biāo)準(zhǔn)
發(fā)生級別(級)一二三四五
發(fā)生程度輕發(fā)生中等偏輕中等發(fā)生中等偏重大發(fā)生
最高病情指數(shù)≤1.01.1~1717.1~3434.1~50>50
最高病葉率/%≤55.1~3030.1~5555.1~80>80
注:最高病情指數(shù)是指在病害不同發(fā)生等級中數(shù)值最大的值。
C.2葡萄霜霉病孢子釋放期和流行程度預(yù)警
葡萄霜霉病孢子釋放期和流行程度預(yù)警模式匯報(bào)見表C.2~C.5。
表C.26月份葡萄霜霉病模式電報(bào)組建表
上報(bào)時(shí)間:7月5日前
序號查報(bào)內(nèi)容查報(bào)結(jié)果
1截止6月30日孢子釋放高峰數(shù)(次)
2截止6月30日累計(jì)孢子釋放量(個(gè)/視野)
3累計(jì)孢子釋放量比歷年同期平均值增減比率(±%)
4田間霜霉病始見期(月/日)
5霜霉病始見期比歷年平均值早晚(±天)
66月28日平均病葉率(%)
76月28日平均病葉率比歷年同期平均值增減比率(±%)
86月28日平均病指
96月28日平均病指比歷年同期平均值增減比率(±%)
107月份降雨量預(yù)報(bào)值(mm)
117月份降雨量預(yù)報(bào)值比歷年同期平均值增減(±m(xù)m)
12預(yù)計(jì)7月份霜霉病侵染盛期(月/日)
13預(yù)計(jì)7月份霜霉病發(fā)生程度(級)
14傳真單位
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DB64/T1865—2023
表C.37月份葡萄霜霉病模式電報(bào)組建表
上報(bào)時(shí)間:8月5日前
序號查報(bào)內(nèi)容查報(bào)結(jié)果
17月份孢子釋放高峰數(shù)(次)
27月份累計(jì)孢子釋放量(個(gè)/視野)
3累計(jì)孢子釋放量比歷年同期平均值增減比率(±%)
47月28日平均病葉率(%)
57月28日平均病葉率比歷年同期平均值增減比率(±%)
67月28日平均病指
77月28日平均病指比歷年同期平均值增減比率(±%)
88月份降雨量預(yù)報(bào)值(mm)
98月份降雨量預(yù)報(bào)值比歷年同期平均值增減(±m(xù)m)
10預(yù)計(jì)8月份霜霉病侵染盛期(月/日)
11預(yù)計(jì)8月份霜霉病發(fā)生程度(級)
12傳真單位
表C.48月份葡萄霜霉病模式電報(bào)組建表
上報(bào)時(shí)間:9月5日前
序號查報(bào)內(nèi)容查報(bào)結(jié)果
18月份孢子釋放高峰數(shù)(次)
28月份累計(jì)孢子釋放量(個(gè)/視野)
3累計(jì)孢子釋放量比歷年同期平均值增減比率(±%)
48月28日平均病葉率(%)
58月28日平均病葉率比歷年同期平均值增減比率(±%)
68月28日平均病指
78月28日平均病指比歷年同期平均值增減比率(±%)
88月份霜霉病發(fā)生程度(級)
99月份降雨量預(yù)報(bào)值(mm)
109月份降雨量預(yù)報(bào)值比歷年同期平均值增減(±m(xù)m)
11預(yù)計(jì)秋季霜霉病侵染盛期(月/日)
12預(yù)計(jì)秋季霜霉病發(fā)生程度(級)
13傳真單位
10
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表C.5全年葡萄霜霉病模式電報(bào)組建表
上報(bào)時(shí)間:10月30日
序號查報(bào)內(nèi)容查報(bào)結(jié)果
1全年孢子釋放高峰數(shù)(次)
2全年孢子釋放高峰數(shù)比歷年平均值增減(±次)
3全年累計(jì)孢子釋放量(個(gè)/視野)
4累計(jì)孢子釋放量比歷年平均值增減比率(±%)
5全年最高病葉率(%)
6最高病葉率比歷年平均值增減比率(±%)
7全年最高病指
8全年最高病指比歷年平均值增減比率(±%)
9全年霜霉病平均施藥防治次數(shù)(次)
10全年霜霉病發(fā)生程度(級)
11傳真單位
C.3測定潛伏期病菌分子病指(MDI)的方法
C.3.1田間樣品的采集
在葉片未顯癥前采樣,采樣時(shí)在每個(gè)樣區(qū)內(nèi)按Z字形5點(diǎn)采樣的方法每點(diǎn)固定選擇5株葡萄樹,分上、
中、下部任意采集3片葉,每個(gè)樣區(qū)共計(jì)15片葉,混合后作為一個(gè)樣區(qū)進(jìn)行DNA提取。
C.3.2田間樣品DNA的提取
利用E.Z.N.A.?HPPlantDNAKit說明提取每樣區(qū)葡萄葉片總DNA,-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
C.3.3Real—timePCR定量檢測葉片DNA和樣品中病原菌DNA
C.3.3.1使用PrimerPremier5.0,根據(jù)GenBank中葡萄EF1-α基因(登錄號:XM002284888.3)設(shè)
計(jì)葡萄引物F-g-6/R-g-6擴(kuò)增釀酒葡萄葉片DNA。根據(jù)葡萄霜霉病菌cox2基因序列設(shè)計(jì)的引物F-cox-
Pv/R-Pv擴(kuò)增葡萄霜霉菌DNA。使用熒光定量PCR儀,進(jìn)行
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