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動(dòng)物飼養(yǎng)IVC系統(tǒng)使用流程及注意事項(xiàng)IVC(IndependentVentilatedCage,獨(dú)立通風(fēng)籠)系統(tǒng)通過精準(zhǔn)控制籠內(nèi)氣流、溫度、濕度,為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提供無菌、穩(wěn)定的飼養(yǎng)環(huán)境,廣泛應(yīng)用于SPF級(jí)(無特定病原體)小鼠、大鼠等小型動(dòng)物飼養(yǎng)。本流程依據(jù)《實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物設(shè)施與環(huán)境規(guī)范》(GB14925-2010)及設(shè)備操作標(biāo)準(zhǔn)制定,核心遵循“無菌操作、環(huán)境可控、動(dòng)物福利、安全高效”原則,覆蓋系統(tǒng)使用全周期。一、IVC系統(tǒng)使用前準(zhǔn)備(一)系統(tǒng)檢查與環(huán)境準(zhǔn)備設(shè)備狀態(tài)檢查:核心參數(shù)確認(rèn):?jiǎn)?dòng)系統(tǒng)前,通過控制面板檢查關(guān)鍵指標(biāo):通風(fēng)速率(籠內(nèi)氣流速度0.1-0.2m/s,換氣次數(shù)30-60次/小時(shí))、溫度(20-26℃,波動(dòng)≤±2℃)、相對(duì)濕度(40%-70%)、壓差(籠內(nèi)與環(huán)境壓差≥10Pa,負(fù)壓模式用于污染動(dòng)物飼養(yǎng),正壓模式用于SPF級(jí)動(dòng)物),確保符合飼養(yǎng)動(dòng)物的環(huán)境要求。硬件功能檢查:檢查風(fēng)機(jī)運(yùn)行狀態(tài)(無異常噪音、振動(dòng))、過濾器完整性(前置初效過濾器、籠架高效HEPA過濾器無破損、漏風(fēng),HEPA過濾器需記錄使用時(shí)長(zhǎng),累計(jì)6-12個(gè)月更換)、照明與報(bào)警系統(tǒng)(溫度/濕度超標(biāo)時(shí)能自動(dòng)報(bào)警)。飼養(yǎng)環(huán)境準(zhǔn)備:放置IVC系統(tǒng)的房間需提前消毒:采用紫外線照射(1.5W/m3,30分鐘)或過氧化氫霧化消毒(3%濃度,20ml/m3),房間溫度、濕度與系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境保持一致,避免溫差導(dǎo)致籠內(nèi)結(jié)露。準(zhǔn)備專用操作工具:無菌籠具(經(jīng)高壓蒸汽滅菌,121℃、30分鐘)、動(dòng)物轉(zhuǎn)移用無菌手套、消毒濕巾(75%乙醇或季銨鹽類消毒劑)、動(dòng)物標(biāo)識(shí)卡(記錄動(dòng)物品系、性別、飼養(yǎng)日期),工具需在超凈工作臺(tái)或無菌操作區(qū)備用。(二)人員準(zhǔn)備與防護(hù)人員資質(zhì):操作人員需經(jīng)IVC系統(tǒng)操作培訓(xùn)及實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物倫理培訓(xùn),熟悉設(shè)備原理、應(yīng)急處理流程,持證上崗。個(gè)人防護(hù)(PPE):進(jìn)入IVC飼養(yǎng)區(qū)需穿戴全套防護(hù)裝備:一次性無菌隔離衣、鞋套、帽子、N95口罩,操作籠具時(shí)戴無菌乳膠手套(每處理1籠動(dòng)物更換1副,避免交叉污染),高風(fēng)險(xiǎn)動(dòng)物飼養(yǎng)需額外佩戴護(hù)目鏡或面屏。二、IVC系統(tǒng)日常使用流程(一)動(dòng)物入籠操作(無菌操作核心環(huán)節(jié))籠具安裝:從無菌儲(chǔ)存區(qū)取出滅菌后的籠具,檢查籠蓋、飲水瓶、食槽是否完好,在超凈工作臺(tái)內(nèi)組裝:將滅菌飼料加入食槽(占食槽容積2/3,避免溢出)、滅菌水注入飲水瓶(水位至刻度線,確保飲水管無氣泡、通暢),將籠具平穩(wěn)放入IVC籠架的指定位置,扣緊籠蓋,確保籠體與通風(fēng)接口密封(無漏風(fēng)縫隙)。動(dòng)物轉(zhuǎn)移:轉(zhuǎn)移前30分鐘啟動(dòng)IVC系統(tǒng)通風(fēng),待籠內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定后,在超凈工作臺(tái)或生物安全柜內(nèi)操作:打開待轉(zhuǎn)移動(dòng)物的原籠蓋,用無菌鑷子或雙手(戴無菌手套)輕柔抓取動(dòng)物(避免用力擠壓、損傷動(dòng)物),按“每籠飼養(yǎng)密度標(biāo)準(zhǔn)”(小鼠每籠≤5只,大鼠每籠≤3只,同品系、同性別)放入新IVC籠具,立即蓋緊籠蓋,防止動(dòng)物逃逸或外界污染。填寫動(dòng)物標(biāo)識(shí)卡:標(biāo)注籠號(hào)、動(dòng)物品系、數(shù)量、性別、入籠日期、操作人員姓名,粘貼在籠具外側(cè)顯眼位置。(二)日常巡檢與維護(hù)(每日1-2次)系統(tǒng)參數(shù)監(jiān)測(cè):每日上午、下午各記錄1次控制面板數(shù)據(jù):溫度、濕度、通風(fēng)速率、壓差,若出現(xiàn)參數(shù)超標(biāo)(如溫度>26℃、濕度<40%),立即檢查風(fēng)機(jī)、加熱器、加濕器是否故障,必要時(shí)啟動(dòng)備用系統(tǒng)(若有),同時(shí)將受影響籠具轉(zhuǎn)移至備用IVC或符合環(huán)境要求的臨時(shí)飼養(yǎng)區(qū)。檢查籠具密封狀態(tài):觀察籠蓋與籠體接口處是否漏風(fēng)(可在接口處貼紙條,若紙條飄動(dòng)異常說明漏風(fēng)),漏風(fēng)籠具需立即更換,避免籠內(nèi)環(huán)境失控。動(dòng)物狀態(tài)與飼養(yǎng)物資檢查:觀察動(dòng)物健康狀況:有無異常行為(如精神萎靡、打斗)、外觀異常(皮膚破損、脫毛、腹瀉),發(fā)現(xiàn)病弱動(dòng)物立即隔離,記錄并上報(bào)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物倫理委員會(huì)。補(bǔ)充飼養(yǎng)物資:若飼料剩余量<1/3、飲水瓶水位<1/4,需在無菌操作下補(bǔ)充滅菌飼料和水(補(bǔ)充前用消毒濕巾擦拭飼料袋、飲水瓶外壁),避免因物資不足影響動(dòng)物福利。(三)清潔消毒流程(定期+按需)日常清潔(每周1次):籠具清潔:將動(dòng)物轉(zhuǎn)移至備用無菌籠具后,使用過的籠具、飲水瓶、食槽放入專用清洗機(jī):先預(yù)清洗(去除殘留飼料、糞便),再用中性洗滌劑清洗(水溫40-50℃),最后高壓噴淋消毒(85℃以上熱水,作用10分鐘),烘干后經(jīng)高壓蒸汽滅菌(121℃、30分鐘)備用。系統(tǒng)表面清潔:用75%乙醇消毒濕巾擦拭IVC籠架、控制面板、門把手等表面,重點(diǎn)清潔籠具放置槽(避免糞便、飼料殘留堆積),嚴(yán)禁用水直接沖洗控制面板或風(fēng)機(jī)部位。深度消毒(每1-3個(gè)月,或更換動(dòng)物品系時(shí)):空籠系統(tǒng)消毒:移除所有籠具,關(guān)閉系統(tǒng)電源,拆除前置初效過濾器(更換新過濾器),用過氧化氫噴霧器對(duì)籠架內(nèi)部、通風(fēng)管道進(jìn)行霧化消毒(3%濃度,用量15-20ml/m3),密閉作用60分鐘后,啟動(dòng)系統(tǒng)通風(fēng)30分鐘,再用無菌空氣吹掃管道殘留消毒劑。HEPA過濾器檢測(cè):邀請(qǐng)專業(yè)機(jī)構(gòu)對(duì)籠架高效HEPA過濾器進(jìn)行完整性測(cè)試(如氣溶膠挑戰(zhàn)測(cè)試),若檢測(cè)不合格(漏風(fēng)率>0.1%),立即更換過濾器,更換后重新進(jìn)行消毒與檢測(cè)。三、IVC系統(tǒng)使用注意事項(xiàng)(一)生物安全與交叉污染防控?zé)o菌操作規(guī)范:不同品系、不同實(shí)驗(yàn)分組的動(dòng)物需分籠飼養(yǎng),籠具、工具專用,嚴(yán)禁交叉使用;操作污染動(dòng)物(如感染性實(shí)驗(yàn)動(dòng)物)后,需對(duì)IVC系統(tǒng)進(jìn)行強(qiáng)化消毒(增加過氧化氫消毒濃度至5%,作用時(shí)間延長(zhǎng)至90分鐘),并更換所有過濾器。動(dòng)物轉(zhuǎn)移、籠具更換必須在超凈工作臺(tái)或生物安全柜內(nèi)進(jìn)行,操作前后需用75%乙醇對(duì)手套、工具消毒,工作臺(tái)面需紫外線照射30分鐘消毒。廢棄物處理:動(dòng)物糞便、墊料(若使用)需裝入專用醫(yī)療廢物袋,密封后經(jīng)高壓蒸汽滅菌(121℃、30分鐘),再按感染性醫(yī)療廢物交由專業(yè)機(jī)構(gòu)處置;廢棄籠具、過濾器等耗材需消毒后分類回收,嚴(yán)禁隨意丟棄。(二)設(shè)備維護(hù)與故障處理常規(guī)維護(hù)要點(diǎn):過濾器維護(hù):初效過濾器每2-4周清洗1次(用清水沖洗,晾干后復(fù)用,累計(jì)清洗3次后更換),HEPA過濾器按使用說明書或檢測(cè)結(jié)果更換,更換時(shí)需戴無菌手套,避免手部接觸過濾器濾紙(防止污染或破損)。風(fēng)機(jī)與電機(jī)維護(hù):每3個(gè)月檢查風(fēng)機(jī)皮帶松緊度(過松會(huì)導(dǎo)致通風(fēng)速率下降,過緊易磨損皮帶)、電機(jī)軸承潤(rùn)滑狀態(tài)(按需添加專用潤(rùn)滑油),避免因機(jī)械故障導(dǎo)致系統(tǒng)停運(yùn)。常見故障處理:故障類型可能原因處理措施通風(fēng)速率下降初效過濾器堵塞、HEPA過濾器老化、風(fēng)機(jī)功率不足更換初效過濾器;檢測(cè)HEPA過濾器,必要時(shí)更換;聯(lián)系廠家檢修風(fēng)機(jī)溫度超標(biāo)(過高)加熱器故障、散熱不良、環(huán)境溫度過高關(guān)閉加熱器,檢查散熱風(fēng)扇;降低房間環(huán)境溫度;啟動(dòng)備用冷卻系統(tǒng)報(bào)警系統(tǒng)觸發(fā)溫度/濕度超標(biāo)、壓差異常、電源波動(dòng)立即檢查參數(shù),排除故障;若為電源波動(dòng),切換至備用電源(三)動(dòng)物福利與倫理要求飼養(yǎng)密度控制:嚴(yán)格遵守“每籠最大飼養(yǎng)數(shù)量”標(biāo)準(zhǔn),避免過度擁擠導(dǎo)致動(dòng)物應(yīng)激、打斗(如小鼠每籠5只以內(nèi),大鼠3只以內(nèi)),籠具內(nèi)可放置適量enrichment物品(如小鼠玩具、大鼠隧道),改善動(dòng)物生活環(huán)境。操作規(guī)范:抓取動(dòng)物時(shí)動(dòng)作輕柔,避免提拉動(dòng)物尾巴(小鼠)、耳朵,減少動(dòng)物恐懼應(yīng)激;若需對(duì)動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作(如給藥、取樣),需提前進(jìn)行麻醉或鎮(zhèn)靜,操作后觀察動(dòng)物恢復(fù)情況,確保無異常痛苦。倫理審查:所有動(dòng)物飼養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)方案需經(jīng)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物倫理委員會(huì)審查通過,飼養(yǎng)過程中記錄動(dòng)物健康狀況、死亡情況,定期提交倫理審查報(bào)告,嚴(yán)禁違規(guī)飼養(yǎng)、處置實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。四、系統(tǒng)停用與長(zhǎng)期維護(hù)短期停用(1-2周):移除所有動(dòng)物,對(duì)籠具、系統(tǒng)進(jìn)行徹底清潔消毒(參照深度消毒流程),關(guān)閉系統(tǒng)電源,拔掉插頭,用防塵罩覆蓋IVC籠架,防止灰塵堆積;定期(每3天)檢查房間環(huán)境,避免潮濕、高溫導(dǎo)致設(shè)備損壞。長(zhǎng)期停用(1個(gè)月以上):除清潔消毒外,需拆除所有過濾器(密封保存,避免受潮)、清空飲水瓶與食槽(干燥保存),對(duì)控制面板、風(fēng)機(jī)等核心部件進(jìn)行防銹處理(涂抹專用防銹劑);建立停用臺(tái)賬,記錄停用日期、維護(hù)情況,啟
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