新疆農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)教案NO：1實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）時(shí)數(shù)2學(xué)時(shí)指導(dǎo)教師班級(jí)時(shí)間周次節(jié)次實(shí)驗(yàn)(實(shí)訓(xùn))項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)一顯微鏡油鏡的使用及細(xì)菌形態(tài)的觀察實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）項(xiàng)目類別□課程實(shí)驗(yàn)□課程實(shí)習(xí)□崗位綜合實(shí)訓(xùn)□技能訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）項(xiàng)目性質(zhì)□演示性□驗(yàn)證性□應(yīng)用性□設(shè)計(jì)性□綜合性實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）組織實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）地點(diǎn)同時(shí)實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）人數(shù)/組數(shù)每組人數(shù)【實(shí)踐教學(xué)能力目標(biāo)】1、要求學(xué)生掌握顯微鏡油鏡的使用及保養(yǎng)方法。2、認(rèn)識(shí)細(xì)菌的形態(tài)大小?！韭殬I(yè)素質(zhì)滲透點(diǎn)】1、初步認(rèn)識(shí)本課程的性質(zhì)、地位，激發(fā)興趣，熱愛(ài)專業(yè)。2、逐步培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確、規(guī)范意識(shí)。樹(shù)立良好的職業(yè)習(xí)慣?！窘虒W(xué)策略】1、利用先進(jìn)的教學(xué)手段，實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行電教片放映，增強(qiáng)學(xué)生感性認(rèn)識(shí)2、教師示范，進(jìn)一步講解說(shuō)明，學(xué)生分組操作。3、觀察學(xué)生操作，個(gè)別指導(dǎo)。4、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容始終與技能考核項(xiàng)目貫穿起來(lái)，避免個(gè)別學(xué)生有應(yīng)付的思想。【實(shí)施過(guò)程】教學(xué)內(nèi)容及目標(biāo)內(nèi)容：顯微鏡油鏡的使用及細(xì)菌形態(tài)的觀察目標(biāo)：要求學(xué)生掌握顯微鏡油鏡的使用及保養(yǎng)方法，認(rèn)識(shí)細(xì)菌的形態(tài)，基本構(gòu)造和特殊構(gòu)造設(shè)備材料：顯微鏡香柏油二甲苯擦鏡紙細(xì)菌染色標(biāo)本片方法及步驟：（一）顯微鏡油鏡的使用1、油鏡的識(shí)別：油鏡是顯微鏡物鏡的一種，因使用時(shí)必須浸于香柏油內(nèi)，故稱油鏡。油鏡與其他物鏡有以下區(qū)別：（1）油鏡一般是所有物鏡中最長(zhǎng)的。（2）油鏡頭上標(biāo)有其放大倍數(shù)“100×”或“90×”。（3）不同廠家生產(chǎn)的顯微鏡,常在不同鏡頭上標(biāo)有不同顏色的線圈以示區(qū)別，使用時(shí)應(yīng)先熟悉一下油鏡頭上的線圈顏色,以防用錯(cuò)物鏡。2、基本原理：因光線在香柏油中的折射率（n=1.515）與在玻璃中的折射率（n=1.52）相近，故可減少因折射而射入鏡頭外的光線，提高了視野的亮度。3、使用方法：（1）對(duì)光：將聚光器升至最高，將光圈放大至最大，調(diào)節(jié)凹面反光鏡，使射入鏡頭中的光線最強(qiáng)。（2）裝片：在細(xì)菌染色標(biāo)本片的欲檢部位滴一滴香柏油后，將標(biāo)本片安放于載物臺(tái)上，用彈簧片固定，將待檢部位移至聚光器上，先用低倍鏡尋找適當(dāng)?shù)囊曇?，再換用油鏡頭觀察。（3）調(diào)焦：先用粗調(diào)節(jié)螺旋將載物臺(tái)上升或使油鏡頭下降，使油鏡頭與標(biāo)本片幾乎接觸，然后，邊用眼睛觀察目鏡，邊用細(xì)調(diào)節(jié)螺旋向相反方向緩慢旋轉(zhuǎn)，直至出現(xiàn)完全清晰的物像為止。（4）保養(yǎng)：油鏡用畢，先用粗調(diào)節(jié)螺旋將載物臺(tái)下移或使油鏡頭上升，將細(xì)菌標(biāo)本片取下，用擦鏡紙吸去香柏油，如油已干或模糊不清者，可在擦鏡紙上滴1－2滴二甲苯或無(wú)水乙醇后將玻片上的香柏油吸凈，并立即用干擦鏡紙拭去二甲苯；用同樣的方法將油鏡頭擦拭干凈。然后將低倍鏡轉(zhuǎn)至中央或?qū)⑽镧R轉(zhuǎn)成“八”字形，調(diào)節(jié)粗調(diào)節(jié)螺旋，使物鏡頭與載物臺(tái)接觸，下降聚光器。將顯微鏡用綢布蓋好后裝入鏡箱，置于陰涼干燥處。（二）細(xì)菌形態(tài)的觀察：1、細(xì)菌基本形態(tài)的觀察：（1）球菌標(biāo)本片的觀察（2）桿菌標(biāo)本片的觀察（3）螺旋菌標(biāo)本片的觀察2、細(xì)菌特殊構(gòu)造的觀察：（1）細(xì)菌莢膜標(biāo)本片的觀察（2）細(xì)菌鞭毛標(biāo)本片的觀察（3）細(xì)菌芽孢標(biāo)本片的觀察注意事項(xiàng)：1、當(dāng)油鏡頭與標(biāo)本片幾乎接觸時(shí)，不可再用粗調(diào)螺旋向上移動(dòng)載物臺(tái)或下降油鏡頭，以免損壞玻片甚至壓碎鏡頭。2、油鏡頭和玻片只能用擦鏡紙擦拭，不能用手、棉布或其他紙張擦拭。3、香柏油的用量以1－2滴、能淹到油鏡頭的中間部分為宜，用量太多則浸染鏡頭，太少則視野變暗不便觀察。4、為了增強(qiáng)視野的亮度，應(yīng)做到三點(diǎn)：聚光器調(diào)至最高，光圈調(diào)至最大，反光鏡用凹面鏡?！究己恕?、要求學(xué)生認(rèn)真寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及體會(huì)，為實(shí)驗(yàn)報(bào)告成績(jī)。2、學(xué)生要求操作準(zhǔn)確、規(guī)范，有強(qiáng)的自我責(zé)任感。納入平時(shí)成績(jī)。【實(shí)踐小結(jié)】【作業(yè)及思考】寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)報(bào)告單，畫(huà)出細(xì)菌的各種觀察圖片，標(biāo)明形狀、顏色并寫(xiě)體會(huì)思考題：1、油鏡與其他物鏡有什么區(qū)別？2、細(xì)菌形態(tài)觀察的實(shí)際意義？【指定學(xué)生閱讀材料】細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)的相關(guān)內(nèi)容及教材實(shí)驗(yàn)一的內(nèi)容課后分析：教研室主任審核簽名累計(jì)學(xué)時(shí)2新疆農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)教案NO：2實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）時(shí)數(shù)2學(xué)時(shí)指導(dǎo)教師班級(jí)時(shí)間周次節(jié)次實(shí)驗(yàn)(實(shí)訓(xùn))項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)二細(xì)菌標(biāo)本片的制備及染色方法實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）項(xiàng)目類別□課程實(shí)驗(yàn)□課程實(shí)習(xí)□崗位綜合實(shí)訓(xùn)□技能訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）項(xiàng)目性質(zhì)□演示性□驗(yàn)證性□應(yīng)用性□設(shè)計(jì)性□綜合性實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）組織實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）地點(diǎn)同時(shí)實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）人數(shù)/組數(shù)每組人數(shù)【實(shí)踐教學(xué)能力目標(biāo)】1、要求學(xué)生掌握掌握細(xì)菌標(biāo)本片的制備基染色方法。2、快速找到細(xì)菌形態(tài)?！韭殬I(yè)素質(zhì)滲透點(diǎn)】1、進(jìn)一步認(rèn)識(shí)本課程的地位、作用，激發(fā)興趣，熱愛(ài)專業(yè)。2、逐步培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確、規(guī)范意識(shí)。樹(shù)立良好的職業(yè)習(xí)慣。3、樹(shù)立良好的自我保護(hù)意識(shí)與保護(hù)別人的安全意識(shí)?！窘虒W(xué)策略】1、利用先進(jìn)的教學(xué)手段，實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行電教片放映，增強(qiáng)學(xué)生感性認(rèn)識(shí)2、教師示范，進(jìn)一步講解說(shuō)明，學(xué)生分組操作。3、觀察學(xué)生操作，個(gè)別指導(dǎo)。4、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容始終與技能考核項(xiàng)目貫穿起來(lái)，避免個(gè)別學(xué)生有應(yīng)付的思想?！緦?shí)施過(guò)程】細(xì)菌標(biāo)本片的制備基染色方法教學(xué)內(nèi)容及目標(biāo)1、要求學(xué)生掌握細(xì)菌標(biāo)本片的制備基染色方法。2、快速找到細(xì)菌形態(tài)。3、增強(qiáng)職業(yè)道德的教育。設(shè)備材料：病料細(xì)菌培養(yǎng)物接種環(huán)玻片酒精燈染色缸染色架染色液實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：（一）、細(xì)菌涂片的制備1、液體培養(yǎng)物及液體病料：（1）涂片用接種環(huán)取一滴培養(yǎng)液或液體病料，于玻片的中央均勻地涂布成適當(dāng)大小的薄層（2）干燥一般采用自然干燥，天氣較冷時(shí)也可于酒精燈火焰上方30－40cm處適當(dāng)加熱干燥。（3）固定分為火焰固定和化學(xué)固定兩種。火焰固定時(shí)，將干燥好的玻片涂面朝上，以其背面在酒精燈火焰上來(lái)回通過(guò)數(shù)次，略作加熱，以不燙手背為度；化學(xué)固定時(shí)，可將干燥好的玻片浸入甲醇中2－3min后取出晾干，或在涂片上滴加數(shù)滴甲醇使其作用2－3min后自然揮發(fā)干燥。此外，丙酮和酒精也可用作化學(xué)固定劑；作瑞特氏染色的涂片不需固定，因染色液中含有甲醇，有固定作用。（4）染色根據(jù)不同的材料和菌種選擇不同的染色法。2、固體培養(yǎng)物：用接種環(huán)取一滴生理鹽水于玻片的中央,用接種環(huán)挑取一個(gè)菌落于生理鹽水中混合,均勻地涂布成適當(dāng)大小的薄層,干燥,固定,染色。（二）、細(xì)菌觸片的制備：將固體病料（病變組織）作無(wú)菌切開(kāi),用切面在玻片中央接觸一下或稍用力印壓成一薄層,干燥,固定,染色。（三）、細(xì)菌的染色法：1、單染色法：又稱簡(jiǎn)單染色法，即只應(yīng)用一種染料進(jìn)行染色的方法。美藍(lán)染色法：在已干燥、固定好的涂片或觸片上滴加適量的美藍(lán)染色液，染色1－2min后，水洗，干燥（吸水紙吸干或自然干燥），鏡檢。2、復(fù)染色法：應(yīng)用兩種或兩種以上的染料或再加媒染劑進(jìn)行染色的方法。革蘭氏染色法：在已干燥、固定好的涂片上滴加適量的草酸銨結(jié)晶紫染色液，染色1－2min后，水洗，再加革蘭氏碘液，作用1－2min后，水洗，加95％酒精脫色0.5－1min后，水洗，稀釋石炭酸復(fù)紅（或沙黃、番紅）染色液復(fù)染0.5min后，水洗，干燥，鏡檢。注意事項(xiàng)：1、做細(xì)菌涂片時(shí)，不宜涂得過(guò)厚，以免影響制片效果。2、固定必須確實(shí)，火焰固定時(shí)不宜溫度過(guò)高，以免破壞菌體結(jié)構(gòu)。3、每種染液染色的過(guò)程中應(yīng)保持染色液不干，尤其加熱染色的染液，在染色過(guò)程中應(yīng)隨時(shí)添加，以免蒸發(fā)干，影響染色效果。4、每種染液染色后，應(yīng)用水將染液一起沖掉，不可先將染液傾去后再用水沖洗。【考核】1、要求學(xué)生認(rèn)真寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及體會(huì)，為實(shí)驗(yàn)報(bào)告成績(jī)。2、學(xué)生要求操作準(zhǔn)確、規(guī)范，有強(qiáng)的自我責(zé)任感。納入平時(shí)成績(jī)?！緦?shí)踐小結(jié)】【作業(yè)及思考】寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)報(bào)告單，畫(huà)出細(xì)菌的各種觀察圖片，標(biāo)明形狀、顏色并寫(xiě)體會(huì)思考題：1、細(xì)菌標(biāo)本片的制備方法？2、細(xì)菌形態(tài)觀察的實(shí)際意義？3、如何無(wú)菌取病料？【指定學(xué)生閱讀材料】細(xì)菌的標(biāo)本片的制備與染色相關(guān)內(nèi)容課后分析：教研室主任審核簽名累計(jì)學(xué)時(shí)4新疆農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)教案NO：3實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）時(shí)數(shù)2學(xué)時(shí)指導(dǎo)教師班級(jí)時(shí)間周次節(jié)次實(shí)驗(yàn)(實(shí)訓(xùn))項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)三細(xì)菌的分離培養(yǎng)及培養(yǎng)性狀的觀察實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）項(xiàng)目類別□課程實(shí)驗(yàn)□課程實(shí)習(xí)□崗位綜合實(shí)訓(xùn)□技能訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）項(xiàng)目性質(zhì)□演示性□驗(yàn)證性□應(yīng)用性□設(shè)計(jì)性□綜合性實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）組織實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）地點(diǎn)同時(shí)實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）人數(shù)/組數(shù)每組人數(shù)【實(shí)踐教學(xué)能力目標(biāo)】1、要求學(xué)生掌握掌握細(xì)菌分離的方法。2、掌握細(xì)菌培養(yǎng)性狀的觀察?！韭殬I(yè)素質(zhì)滲透點(diǎn)】1、進(jìn)一步認(rèn)識(shí)本課程的地位、作用，激發(fā)興趣，熱愛(ài)專業(yè)。2、逐步培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確、規(guī)范意識(shí)。樹(shù)立良好的職業(yè)習(xí)慣。3、樹(shù)立良好的自我保護(hù)意識(shí)與保護(hù)別人的安全意識(shí)?！窘虒W(xué)策略】1、教師示范，進(jìn)一步講解說(shuō)明，學(xué)生分組操作。2、觀察學(xué)生操作，個(gè)別指導(dǎo)。3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容始終與技能考核項(xiàng)目貫穿起來(lái)，避免個(gè)別學(xué)生有應(yīng)付的思想?！緦?shí)施過(guò)程】細(xì)菌的分離培養(yǎng)及培養(yǎng)形狀的觀察教學(xué)目的要求：1、要求學(xué)生掌握細(xì)菌的分離培養(yǎng)、純化的操作機(jī)能.2、要求學(xué)生掌握細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特性.設(shè)備材料：恒溫培養(yǎng)箱病料或細(xì)菌培養(yǎng)物接種環(huán)接種針酒精燈滅菌吸管各種細(xì)菌培養(yǎng)基無(wú)水碳酸鈉氫氧化鈉或氫氧化鉀凡士林及生理鹽水實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：（一）細(xì)菌的分離培養(yǎng)：1、病料的采?。簩⑿迈r肛門(mén)拭子用滅菌生理鹽水洗滌，洗滌液可用于分離培養(yǎng)；如為病理組織，可用燒紅的刀片在其表面燙一下，隨即用此刀片在燙過(guò)的地方切開(kāi)一小口，用滅菌接種環(huán)在切口內(nèi)蘸一下即可用于分離培養(yǎng)。2、平板劃線分離培養(yǎng)：目的是將病理材料中的細(xì)菌分散，以便使細(xì)菌單在，從而發(fā)育成單個(gè)菌落，防止長(zhǎng)成菌苔。（1）直接劃線分離培養(yǎng)：點(diǎn)燃酒精燈后，左手持皿，底朝下，蓋在上，以無(wú)名指和小指托底，拇指、食指和中指將皿蓋揭開(kāi)成20度的角度，角度不宜過(guò)大，以防空氣進(jìn)入；右手持接種環(huán)，在火焰上燒灼后取少許的材料涂在培養(yǎng)基邊緣，將接種環(huán)上多余的材料在火焰上燒掉，然后在培養(yǎng)基表面進(jìn)行“Z”字形劃線，然后將平皿蓋好，倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（2）分區(qū)劃線分離培養(yǎng)：用玻璃鉛筆在皿底外面劃線，將培養(yǎng)基分成3－6個(gè)小區(qū)，持皿方法同直接劃線，但每劃完一個(gè)小區(qū)應(yīng)將平皿旋轉(zhuǎn)一定角度，以便于劃線。分連續(xù)畫(huà)線與間斷畫(huà)線方法。（二）細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特性觀察：固體培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特性：細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖，可形成菌落。觀察菌落時(shí)，主要看以下內(nèi)容：（1）大?。翰煌?xì)菌，其菌落大小變化很大。常用其直徑來(lái)表示，單位是mm或μm。（2）形狀：主要有圓形、露滴狀、乳頭狀或油煎蛋狀、云霧狀、放射狀或蛛網(wǎng)狀、同心圓狀、扁平和針尖狀等。（3）邊緣特征：有整齊、波浪狀、鋸齒狀、卷發(fā)狀等。（4）表面性狀：有光滑、粗糙、皺褶、顆粒狀、同心圓狀、放射狀等。（5）濕潤(rùn)度：有干燥和濕潤(rùn)兩種。（6）隆起度：有隆起、輕度隆起、中央隆起和云霧狀等。（7）色澤和透明度：色澤有白、乳白、黃、橙、紅及無(wú)色等；透明度有透明、半透明、不透明等。（8）質(zhì)地：有堅(jiān)硬、柔軟和粘稠等。（9）溶血性：分為α－溶血、β－溶血和γ－溶血三種。注意事項(xiàng)：1、細(xì)菌的分離培養(yǎng)必須嚴(yán)格無(wú)菌操作。2、接種環(huán)或接種針在挑取菌落之前應(yīng)先在培養(yǎng)基上無(wú)菌落處冷卻，否則會(huì)將所挑的菌落燙死而使培養(yǎng)失敗。3、劃線接種時(shí)應(yīng)先將接種環(huán)的環(huán)部稍彎曲，同時(shí)用力適度；分區(qū)接種時(shí)，每區(qū)開(kāi)始的第一條線應(yīng)通過(guò)上一區(qū)的劃線。4、不同細(xì)菌所需要的培養(yǎng)時(shí)間相差很大，應(yīng)根據(jù)不同的菌種培養(yǎng)觀察足夠的時(shí)間?！究己恕?、要求學(xué)生認(rèn)真寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及體會(huì)，為實(shí)驗(yàn)報(bào)告成績(jī)。2、學(xué)生要求操作準(zhǔn)確、規(guī)范，有強(qiáng)的自我責(zé)任感。納入平時(shí)成績(jī)?！緦?shí)踐小結(jié)】【作業(yè)及思考】寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)報(bào)告單，畫(huà)出細(xì)菌分離的各種畫(huà)線方法并寫(xiě)體會(huì)思考題：1、細(xì)菌分離的畫(huà)線方法有哪些？2、細(xì)菌培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特性從哪些方面觀察？【指定學(xué)生閱讀材料】細(xì)菌的分離培養(yǎng)及培養(yǎng)形狀的觀察的相關(guān)內(nèi)容課后分析：教研室主任審核簽名累計(jì)學(xué)時(shí)6新疆農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)教案NO：4實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）時(shí)數(shù)2學(xué)時(shí)指導(dǎo)教師班級(jí)時(shí)間周次節(jié)次實(shí)驗(yàn)(實(shí)訓(xùn))項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)四細(xì)菌的藥物敏感實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）項(xiàng)目類別□課程實(shí)驗(yàn)□課程實(shí)習(xí)□崗位綜合實(shí)訓(xùn)□技能訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）項(xiàng)目性質(zhì)□演示性□驗(yàn)證性□應(yīng)用性□設(shè)計(jì)性□綜合性實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）組織實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）地點(diǎn)同時(shí)實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）人數(shù)/組數(shù)每組人數(shù)【實(shí)踐教學(xué)能力目標(biāo)】1、要求學(xué)生掌握藥敏實(shí)驗(yàn)的方法。2、掌握細(xì)菌培養(yǎng)性狀的觀察?！韭殬I(yè)素質(zhì)滲透點(diǎn)】1、進(jìn)一步認(rèn)識(shí)本課程的地位、作用，激發(fā)興趣，熱愛(ài)專業(yè)。2、逐步培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確、規(guī)范意識(shí)。樹(shù)立良好的職業(yè)習(xí)慣。3、樹(shù)立良好的自我保護(hù)意識(shí)與保護(hù)別人的安全意識(shí)?！窘虒W(xué)策略】1、教師示范，進(jìn)一步講解說(shuō)明，學(xué)生分組操作。2、觀察學(xué)生操作，個(gè)別指導(dǎo)。3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容始終與技能考核項(xiàng)目貫穿起來(lái)，避免個(gè)別學(xué)生有應(yīng)付的思想?！緦?shí)施過(guò)程】細(xì)菌的藥物敏感實(shí)驗(yàn)教學(xué)目的要求：1、掌握消毒藥及治療藥物的殺菌或抑菌作用。2、學(xué)會(huì)藥物敏感性試驗(yàn)的操作技術(shù)。教學(xué)設(shè)備材料：接種環(huán)酒精燈試管架恒溫箱鑷子常用消毒劑浸有藥物的干燥濾紙片普通瓊脂平板大腸桿菌枯草桿菌和金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)物各種抗生素實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：細(xì)菌對(duì)抗生素等藥物的敏感試驗(yàn)測(cè)定細(xì)菌對(duì)抗生素等藥物的敏感度，可供臨診上正確選用藥物。1、取6－8h的大腸桿菌與金黃色葡萄球菌的肉湯培養(yǎng)物，以密集均勻劃線法，分別接種在兩個(gè)普通瓊脂平板表面。2、在平皿底部背面用蠟筆標(biāo)記“青霉素”、“鏈霉素”、“慶大霉素”、“鹽水”、“黃連素”。3、用滅菌鑷子夾取浸有藥物的干燥濾紙片，按標(biāo)記位置，輕輕貼在已接種好細(xì)菌的瓊脂培養(yǎng)基的表面，一次放好，不得移動(dòng)。圖1：藥物敏感性試驗(yàn)紙片的貼法4、置37℃藥物名稱抑菌圈直徑（mm）敏感度青霉素<10不敏感11-20中度敏感>20高度敏感土霉素四環(huán)素、新霉素鏈霉素、磺胺<10不敏感11-14中度敏感>14高度敏感慶大霉素卡那霉素<12不敏感13-14中度敏感>14高度敏感其他<10不敏感11-15中度敏感>15高度敏感附：干燥抗菌紙片的制備法：取直徑6mm的無(wú)菌濾紙片，浸于一定濃度的抗菌藥液中，如青霉素為100IU/ml鏈霉素、氯霉素等抗生素為2mg/ml，磺胺嘧啶針劑為0.1mg/ml，黃連素或其他中藥可根據(jù)需要稀釋原液。一般每毫升藥液中裝有濾紙片100片，浸泡1-2h后干燥備用，藥劑維持1－2個(gè)月有效。注意事項(xiàng)：1、試驗(yàn)用菌種對(duì)于被測(cè)定的抗生素應(yīng)具有高度敏感性。2、藥檢所下發(fā)的試驗(yàn)菌種為冷凍干燥品，保存于5－8℃3、實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要建立“無(wú)抗生素操作的觀念”。4、磺胺類藥物用無(wú)胨瓊脂平板，因蛋白質(zhì)會(huì)使磺胺失去作用?！究己恕?、要求學(xué)生認(rèn)真寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及體會(huì)，為實(shí)驗(yàn)報(bào)告成績(jī)。2、學(xué)生要求操作準(zhǔn)確、規(guī)范，有強(qiáng)的自我責(zé)任感。納入平時(shí)成績(jī)。【實(shí)踐小結(jié)】【作業(yè)及思考】寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)報(bào)告單，寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)結(jié)果，說(shuō)明哪一種藥物為高敏藥物并寫(xiě)體會(huì)思考題：1、細(xì)菌的藥物敏感實(shí)驗(yàn)的操作及注意事項(xiàng)有哪些？2、藥敏片的制備方法？【指定學(xué)生閱讀材料】細(xì)菌的藥物敏感實(shí)驗(yàn)的相關(guān)內(nèi)容課后分析：教研室主任審核簽名累計(jì)學(xué)時(shí)8新疆農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)教案NO：5實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）時(shí)數(shù)2學(xué)時(shí)指導(dǎo)教師班級(jí)時(shí)間周次節(jié)次實(shí)驗(yàn)(實(shí)訓(xùn))項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)五病毒的血凝試驗(yàn)和凝集抑制試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）項(xiàng)目類別□課程實(shí)驗(yàn)□課程實(shí)習(xí)□崗位綜合實(shí)訓(xùn)□技能訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）項(xiàng)目性質(zhì)□演示性□驗(yàn)證性□應(yīng)用性□設(shè)計(jì)性□綜合性實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）組織實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）地點(diǎn)同時(shí)實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）人數(shù)/組數(shù)每組人數(shù)【實(shí)踐教學(xué)能力目標(biāo)】1、要求學(xué)生掌握病毒的紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)和凝集抑制試驗(yàn)的操作方法。2、掌握實(shí)驗(yàn)的判定方法。3、掌握1%紅細(xì)胞的制備?！韭殬I(yè)素質(zhì)滲透點(diǎn)】1、進(jìn)一步認(rèn)識(shí)本課程的地位、作用，激發(fā)興趣，熱愛(ài)專業(yè)。2、逐步培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確、規(guī)范意識(shí)。樹(shù)立良好的職業(yè)習(xí)慣。3、樹(shù)立良好的自我保護(hù)意識(shí)與保護(hù)別人的安全意識(shí)。【教學(xué)策略】1、教師示范，進(jìn)一步講解說(shuō)明，學(xué)生分組操作。2、觀察學(xué)生操作，個(gè)別指導(dǎo)。3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容始終與技能考核項(xiàng)目貫穿起來(lái)，避免個(gè)別學(xué)生有應(yīng)付的思想?！緦?shí)施過(guò)程】病毒的紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)和凝集抑制試驗(yàn)一、目的要求：1、要求學(xué)生掌握病毒的紅細(xì)胞凝集和凝集抑制試驗(yàn)的操作方法。2、要求學(xué)生掌握這兩個(gè)試驗(yàn)的判定方法。二、設(shè)備材料：小試管玻璃注射器離心管離心機(jī)試管架生理鹽水1%雞紅細(xì)胞懸液雞新城疫弱毒疫苗雞新城疫免疫血清吸管三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：（一）、病毒的紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)：具體操作：將含有不同稀釋倍數(shù)的病毒材料和生理鹽水按表1添加，每管各0.025ml，隨后每管再滴加1％雞紅細(xì)胞懸液0.025ml，充分振蕩約2min，后置20－30℃1％紅細(xì)胞液的制法：對(duì)成年雞可從翅靜脈采血。用5－10ml玻璃注射器先吸取5％枸櫞酸鈉溶液2ml。然后采雞血2－3ml，將此血液注入離心管中，用生理鹽水洗滌血細(xì)胞3次（用第一、二次洗滌2000r/min，離心5min；第三次3000r/min，離心8min）。洗去血清及白細(xì)胞，所余的純紅細(xì)胞（即將第三次洗凈的血細(xì)胞吸棄上層的生理鹽水和中層的白細(xì)胞層，用最后一層純紅細(xì)胞來(lái)稀釋）。用生理鹽水稀釋100倍，即配成1％雞紅細(xì)胞生理鹽水懸液。凝集反應(yīng)強(qiáng)度的判定標(biāo)準(zhǔn)：＃紅細(xì)胞凝集塊沉于管底，平鋪呈網(wǎng)狀。+++與＃基本相同，但邊緣不整齊，紅細(xì)胞微有下沉傾向。++紅細(xì)胞呈圓盤(pán)狀沉于管底部，但周圍有明顯的小凝集塊。+紅細(xì)胞沉于管底，呈圓盤(pán)狀，周圍微不整齊。－紅細(xì)胞呈圓盤(pán)狀沉于管底。以“++”作為判定的終點(diǎn)，亦即一個(gè)血凝單位。能使雞紅細(xì)胞凝集成“++”的病毒最高稀釋倍數(shù)，為該病毒的紅細(xì)胞凝集滴度。如表1的病毒血凝滴定為1：256，此即一個(gè)血凝單位。進(jìn)行紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)時(shí)，需用在0.025ml液體中含4單位的病毒，按此例需要256÷4＝64，即將病毒稀釋液稀釋至1：64即可。（二）、病毒的紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)：具體操作：采取雞新城疫免疫雞的血液，放入干凈的平皿內(nèi)（成一薄層），凝固后，用大頭針劃成菱形血塊，置于恒溫箱（37℃【考核】1、要求學(xué)生認(rèn)真寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及體會(huì)，為實(shí)驗(yàn)報(bào)告成績(jī)。2、學(xué)生要求操作準(zhǔn)確、規(guī)范，有強(qiáng)的自我責(zé)任感。納入平時(shí)成績(jī)?！緦?shí)踐小結(jié)】【作業(yè)及思考】寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)報(bào)告單，寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)結(jié)果，說(shuō)明該動(dòng)物血清抗體滴度并寫(xiě)體會(huì)思考題：1、病毒的紅細(xì)胞凝集和凝集抑制試驗(yàn)的應(yīng)用？2、1%紅細(xì)胞的的制備方法？3、4單位抗原的制備？【指定學(xué)生閱讀材料】病毒的紅細(xì)胞凝集和凝集抑制試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)的相關(guān)內(nèi)容課后分析：教研室主任審核簽名累計(jì)學(xué)時(shí)10新疆農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)教案NO：6實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）時(shí)數(shù)2學(xué)時(shí)指導(dǎo)教師劉穎班級(jí)時(shí)間周次節(jié)次實(shí)驗(yàn)(實(shí)訓(xùn))項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)六瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）項(xiàng)目類別□課程實(shí)驗(yàn)□課程實(shí)習(xí)□崗位綜合實(shí)訓(xùn)□技能訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）項(xiàng)目性質(zhì)□演示性□驗(yàn)證性□應(yīng)用性□設(shè)計(jì)性□綜合性實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）組織實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）地點(diǎn)同時(shí)實(shí)驗(yàn)（實(shí)訓(xùn)）人數(shù)/組數(shù)每組人數(shù)【實(shí)踐教學(xué)能力目標(biāo)】1、要求學(xué)生掌握瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)的操作方法。2、掌握打孔技術(shù)、加樣技術(shù)。3、掌握實(shí)驗(yàn)的判定方法?！韭殬I(yè)素質(zhì)滲透點(diǎn)】1、進(jìn)一步認(rèn)識(shí)本課程的地位