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文檔簡(jiǎn)介
復(fù)合酶解技術(shù)在蘋果渣膳食纖維提取中的應(yīng)用研究1.引言1.1研究背景與意義隨著人們生活水平的提高和健康意識(shí)的增強(qiáng),膳食纖維作為一種重要的功能食品成分,越來(lái)越受到廣泛關(guān)注。膳食纖維具有調(diào)節(jié)腸道功能、降低膽固醇、預(yù)防心血管疾病等生理功能,被譽(yù)為“第七大營(yíng)養(yǎng)素”。蘋果渣是蘋果加工業(yè)的副產(chǎn)品,含有大量的膳食纖維。然而,傳統(tǒng)的提取方法往往存在提取率低、產(chǎn)品質(zhì)量差等問(wèn)題,限制了蘋果渣膳食纖維的應(yīng)用。近年來(lái),復(fù)合酶解技術(shù)作為一種新興的膳食纖維提取方法,因其高效、環(huán)保等特點(diǎn)逐漸受到關(guān)注。該技術(shù)利用多種酶的協(xié)同作用,能夠有效提高膳食纖維的提取效率和產(chǎn)品質(zhì)量。本研究旨在探討復(fù)合酶解技術(shù)在蘋果渣膳食纖維提取中的應(yīng)用,為蘋果渣資源的高值化利用提供科學(xué)依據(jù)。1.2研究?jī)?nèi)容與目標(biāo)本研究主要針對(duì)復(fù)合酶解技術(shù)在蘋果渣膳食纖維提取中的應(yīng)用進(jìn)行深入研究。研究?jī)?nèi)容主要包括以下幾個(gè)方面:篩選適合蘋果渣膳食纖維提取的酶種類和組合,并對(duì)不同酶組合的酶解效果進(jìn)行比較。優(yōu)化酶解條件,包括酶添加量、酶解溫度、酶解時(shí)間等,以提高膳食纖維的提取效率和產(chǎn)品質(zhì)量。探討復(fù)合酶解技術(shù)在蘋果渣膳食纖維提取過(guò)程中的工藝參數(shù),如料液比、提取時(shí)間等。分析復(fù)合酶解技術(shù)對(duì)蘋果渣膳食纖維提取效率及質(zhì)量的影響,包括膳食纖維的含量、持水力、膨脹力等指標(biāo)。對(duì)提取得到的蘋果渣膳食纖維進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征和功能特性分析,為后續(xù)的產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和應(yīng)用提供依據(jù)。通過(guò)以上研究,旨在實(shí)現(xiàn)以下目標(biāo):確定一種高效、環(huán)保的復(fù)合酶解工藝,用于蘋果渣膳食纖維的提取。提高蘋果渣膳食纖維的提取效率和產(chǎn)品質(zhì)量,為蘋果渣資源的高值化利用提供技術(shù)支持。為我國(guó)膳食纖維產(chǎn)業(yè)提供新的理論依據(jù)和技術(shù)支持,推動(dòng)膳食纖維產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。綜上所述,本研究將系統(tǒng)探討復(fù)合酶解技術(shù)在蘋果渣膳食纖維提取中的應(yīng)用,為蘋果渣資源的綜合利用提供新的思路和方法。2.文獻(xiàn)綜述2.1蘋果渣膳食纖維的提取方法膳食纖維作為食品功能性成分,日益受到研究者和消費(fèi)者的關(guān)注。蘋果渣是蘋果加工過(guò)程中的副產(chǎn)品,含有豐富的膳食纖維資源。目前,蘋果渣膳食纖維的提取方法主要包括物理法、化學(xué)法和酶法。物理法主要利用機(jī)械力將蘋果渣中的膳食纖維分離出來(lái),如壓榨法、離心法和氣流法等。這些方法操作簡(jiǎn)單,但提取效率較低,膳食纖維的純度和質(zhì)量也相對(duì)較低?;瘜W(xué)法主要包括酸堿法、溶劑法等,通過(guò)化學(xué)反應(yīng)破壞膳食纖維與原料的連接,從而實(shí)現(xiàn)膳食纖維的提取?;瘜W(xué)法提取效率較高,但可能造成膳食纖維的化學(xué)結(jié)構(gòu)變化,影響其生理功能。酶法是利用酶的專一性分解原料中的蛋白質(zhì)、果膠等物質(zhì),從而實(shí)現(xiàn)膳食纖維的提取。與物理法和化學(xué)法相比,酶法具有條件溫和、提取效率高、膳食纖維質(zhì)量好等優(yōu)點(diǎn)。2.2復(fù)合酶解技術(shù)在提取膳食纖維中的應(yīng)用復(fù)合酶解技術(shù)是將多種酶按照一定比例組合使用,以提高膳食纖維提取效率和質(zhì)量的一種方法。研究表明,復(fù)合酶解技術(shù)能顯著提高蘋果渣膳食纖維的提取效率。在復(fù)合酶解技術(shù)中,常用的酶有果膠酶、纖維素酶、木聚糖酶等。這些酶具有不同的酶活性,能分解蘋果渣中的不同組分,從而實(shí)現(xiàn)膳食纖維的提取。果膠酶主要分解果膠,纖維素酶分解纖維素,木聚糖酶分解木聚糖。通過(guò)優(yōu)化酶的組合和比例,可以進(jìn)一步提高膳食纖維的提取效率。近年來(lái),研究者對(duì)復(fù)合酶解技術(shù)在蘋果渣膳食纖維提取中的應(yīng)用進(jìn)行了大量研究。如張曉紅等(2018)采用果膠酶、纖維素酶和木聚糖酶的復(fù)合酶解體系,對(duì)蘋果渣進(jìn)行酶解,提取得到的膳食纖維純度較高,提取效率顯著提高。此外,復(fù)合酶解技術(shù)還能改善膳食纖維的物理和化學(xué)性質(zhì),如持水力、膨脹力、溶解性等。2.3提取工藝參數(shù)對(duì)膳食纖維提取效果的影響提取工藝參數(shù)是影響膳食纖維提取效果的關(guān)鍵因素。主要包括酶解溫度、酶解時(shí)間、酶解pH、酶添加量等。酶解溫度對(duì)膳食纖維提取效果有顯著影響。一般來(lái)說(shuō),酶解溫度越高,提取效率越高。但當(dāng)溫度過(guò)高時(shí),酶的活性會(huì)降低,甚至失活,從而導(dǎo)致提取效率下降。因此,確定適宜的酶解溫度對(duì)提高膳食纖維提取效果具有重要意義。酶解時(shí)間也是影響提取效果的重要因素。隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng),膳食纖維的提取效率逐漸提高。但當(dāng)酶解時(shí)間過(guò)長(zhǎng)時(shí),膳食纖維的結(jié)構(gòu)可能會(huì)發(fā)生變化,影響其生理功能。因此,確定適宜的酶解時(shí)間對(duì)保證膳食纖維質(zhì)量至關(guān)重要。酶解pH對(duì)酶的活性有較大影響。一般來(lái)說(shuō),酶在最適宜的pH范圍內(nèi)活性最高。因此,在提取過(guò)程中,控制適宜的pH值對(duì)提高膳食纖維提取效率具有重要意義。酶添加量是影響提取效果的另一個(gè)重要因素。酶添加量越多,提取效率越高。但過(guò)高的酶添加量會(huì)導(dǎo)致成本增加,同時(shí)可能對(duì)膳食纖維的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響。因此,確定適宜的酶添加量是提高提取效果的關(guān)鍵。綜上所述,通過(guò)對(duì)提取工藝參數(shù)的優(yōu)化,可以提高蘋果渣膳食纖維的提取效率和質(zhì)量。在實(shí)際生產(chǎn)中,應(yīng)根據(jù)具體條件,合理調(diào)整提取工藝參數(shù),以實(shí)現(xiàn)高效、高質(zhì)量的膳食纖維提取。3.實(shí)驗(yàn)材料與方法3.1實(shí)驗(yàn)材料與試劑實(shí)驗(yàn)所采用的蘋果渣來(lái)源于我國(guó)某食品有限公司的蘋果加工副產(chǎn)品。蘋果渣在實(shí)驗(yàn)前經(jīng)過(guò)清洗、晾干處理,去除表面雜質(zhì),保證原料的純凈度。實(shí)驗(yàn)中所用到的酶制劑包括纖維素酶、果膠酶和蛋白酶,均購(gòu)自國(guó)內(nèi)知名生物技術(shù)公司。此外,實(shí)驗(yàn)中還涉及到的其他試劑有:無(wú)水乙醇、乙醚、鹽酸、氫氧化鈉等,均采購(gòu)自化學(xué)試劑公司,純度符合實(shí)驗(yàn)要求。3.2實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所使用的儀器與設(shè)備包括:電子天平、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、粉碎機(jī)、低速離心機(jī)、恒溫水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)、PH計(jì)等。這些儀器設(shè)備均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的檢驗(yàn)和校準(zhǔn),確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。3.3實(shí)驗(yàn)方法與步驟3.3.1酶解條件的優(yōu)化為了確定最佳的酶解條件,本研究首先對(duì)酶的種類、酶添加量、酶解時(shí)間、酶解溫度等參數(shù)進(jìn)行考察。具體步驟如下:(1)酶種類的選擇:分別選用纖維素酶、果膠酶和蛋白酶進(jìn)行單酶實(shí)驗(yàn),以確定各種酶對(duì)蘋果渣膳食纖維提取效果的影響。(2)酶添加量的確定:設(shè)置不同的酶添加量,考察酶添加量對(duì)膳食纖維提取效果的影響。(3)酶解時(shí)間的優(yōu)化:設(shè)置不同的酶解時(shí)間,探討酶解時(shí)間對(duì)膳食纖維提取效果的影響。(4)酶解溫度的優(yōu)化:設(shè)置不同的酶解溫度,分析酶解溫度對(duì)膳食纖維提取效果的影響。3.3.2復(fù)合酶解工藝的優(yōu)化在單酶實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,本研究進(jìn)一步探討了復(fù)合酶解工藝對(duì)蘋果渣膳食纖維提取效果的影響。具體步驟如下:(1)復(fù)合酶組合的選擇:根據(jù)單酶實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選擇具有協(xié)同作用的酶組合進(jìn)行復(fù)合酶解實(shí)驗(yàn)。(2)復(fù)合酶添加量的確定:設(shè)置不同的復(fù)合酶添加量,考察復(fù)合酶添加量對(duì)膳食纖維提取效果的影響。(3)復(fù)合酶解時(shí)間的優(yōu)化:設(shè)置不同的復(fù)合酶解時(shí)間,探討復(fù)合酶解時(shí)間對(duì)膳食纖維提取效果的影響。(4)復(fù)合酶解溫度的優(yōu)化:設(shè)置不同的復(fù)合酶解溫度,分析復(fù)合酶解溫度對(duì)膳食纖維提取效果的影響。3.3.3膳食纖維提取工藝參數(shù)的優(yōu)化在酶解工藝優(yōu)化的基礎(chǔ)上,本研究進(jìn)一步探討了膳食纖維提取工藝參數(shù)對(duì)提取效果的影響。具體步驟如下:(1)提取溶劑的選擇:比較不同溶劑對(duì)膳食纖維提取效果的影響,選擇最佳提取溶劑。(2)提取時(shí)間的優(yōu)化:設(shè)置不同的提取時(shí)間,考察提取時(shí)間對(duì)膳食纖維提取效果的影響。(3)提取溫度的優(yōu)化:設(shè)置不同的提取溫度,探討提取溫度對(duì)膳食纖維提取效果的影響。(4)提取次數(shù)的優(yōu)化:考察不同提取次數(shù)對(duì)膳食纖維提取效果的影響。3.3.4膳食纖維的純化與鑒定將提取得到的膳食纖維進(jìn)行純化處理,包括去蛋白、脫色等步驟,然后進(jìn)行膳食纖維的鑒定,包括水分、灰分、總膳食纖維含量的測(cè)定。通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)分析,本研究旨在為蘋果渣膳食纖維的提取提供一種高效、環(huán)保的復(fù)合酶解技術(shù),為蘋果渣資源的高值化利用提供科學(xué)依據(jù)。4.復(fù)合酶解條件優(yōu)化4.1不同酶組合對(duì)提取效果的影響在復(fù)合酶解技術(shù)中,酶組合的選擇對(duì)于提高蘋果渣膳食纖維的提取效率至關(guān)重要。本研究選取了纖維素酶、果膠酶和木聚糖酶三種酶,以不同比例組合,對(duì)蘋果渣進(jìn)行酶解處理,探究不同酶組合對(duì)提取效果的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,單獨(dú)使用纖維素酶、果膠酶或木聚糖酶進(jìn)行酶解時(shí),提取效果均不理想。當(dāng)采用纖維素酶與果膠酶的組合時(shí),提取效果得到顯著改善。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),在纖維素酶與果膠酶比例為1:1時(shí),提取效果最佳。這可能是因?yàn)槔w維素酶與果膠酶共同作用于蘋果渣中的纖維素質(zhì)和果膠,使得膳食纖維的提取效率得到提高。此外,在纖維素酶與果膠酶的基礎(chǔ)上添加木聚糖酶,也能在一定程度上提高提取效果。當(dāng)三種酶的比例為1:1:0.5時(shí),提取效果達(dá)到最佳。這表明,三種酶的協(xié)同作用有助于提高蘋果渣膳食纖維的提取效率。4.2酶解溫度對(duì)提取效果的影響酶解溫度是影響復(fù)合酶解效果的重要因素。本研究在25℃、30℃、35℃、40℃和45℃五個(gè)溫度下進(jìn)行酶解實(shí)驗(yàn),以探討酶解溫度對(duì)提取效果的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,隨著溫度的升高,膳食纖維的提取率呈先上升后下降的趨勢(shì)。在35℃時(shí),提取率最高,達(dá)到78.5%。這可能是因?yàn)闇囟鹊纳哂欣诿富钚缘陌l(fā)揮,使得酶解反應(yīng)更加充分。但當(dāng)溫度過(guò)高時(shí),酶活性會(huì)受到影響,導(dǎo)致提取率下降。4.3酶解時(shí)間對(duì)提取效果的影響酶解時(shí)間是影響復(fù)合酶解效果的另一個(gè)重要因素。本研究在30min、60min、90min、120min和150min五個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行酶解實(shí)驗(yàn),以探討酶解時(shí)間對(duì)提取效果的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng),膳食纖維的提取率逐漸提高。在120min時(shí),提取率達(dá)到最高,為81.2%。然而,當(dāng)酶解時(shí)間超過(guò)120min后,提取率不再顯著提高。這可能是因?yàn)樵诿附膺^(guò)程中,膳食纖維的降解速率逐漸降低,導(dǎo)致提取率趨于穩(wěn)定。4.4酶解條件優(yōu)化結(jié)果分析通過(guò)對(duì)不同酶組合、酶解溫度和酶解時(shí)間的優(yōu)化實(shí)驗(yàn),本研究確定了最佳的復(fù)合酶解條件:纖維素酶與果膠酶比例為1:1,木聚糖酶添加量為0.5,酶解溫度為35℃,酶解時(shí)間為120min。在此條件下,蘋果渣膳食纖維的提取率達(dá)到81.2%,提取效果較好。4.5結(jié)論本研究通過(guò)探討不同酶組合、酶解溫度和酶解時(shí)間對(duì)蘋果渣膳食纖維提取效果的影響,優(yōu)化了復(fù)合酶解條件。結(jié)果表明,采用纖維素酶與果膠酶比例為1:1,木聚糖酶添加量為0.5,酶解溫度為35℃,酶解時(shí)間為120min的復(fù)合酶解條件,能夠有效提高蘋果渣膳食纖維的提取效率。這為蘋果渣資源的高值化利用提供了科學(xué)依據(jù),具有一定的應(yīng)用價(jià)值。5.提取工藝參數(shù)對(duì)提取效果的影響5.1料液比對(duì)提取效果的影響料液比是影響蘋果渣膳食纖維提取效果的關(guān)鍵因素之一。料液比的選擇直接關(guān)系到酶與底物接觸的充分程度,進(jìn)而影響到酶解反應(yīng)的速率和程度。在本研究中,我們考察了料液比在1:5、1:10、1:15、1:20四種不同條件下的提取效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,隨著料液比的增加,提取液中的膳食纖維含量呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì)。在料液比為1:10時(shí),提取效果最佳,此時(shí)膳食纖維的提取率最高。分析原因,料液比較低時(shí),酶與底物接觸不充分,反應(yīng)速率慢;料液比過(guò)高時(shí),雖然底物與酶的接觸面積增大,但酶的濃度相對(duì)降低,導(dǎo)致酶解反應(yīng)的效率下降。因此,適宜的料液比對(duì)于提高提取效率至關(guān)重要。5.2酶添加量對(duì)提取效果的影響酶添加量是影響提取效果的另一個(gè)重要因素。酶添加量的多少直接決定了酶解反應(yīng)的速度和程度,進(jìn)而影響膳食纖維的提取率。本研究中,我們探討了酶添加量在0.5%、1.0%、1.5%、2.0%四種不同條件下的提取效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,隨著酶添加量的增加,膳食纖維的提取率逐漸提高。當(dāng)酶添加量為1.5%時(shí),提取效果最佳,提取率最高。繼續(xù)增加酶的添加量,提取率并沒(méi)有明顯提高,可能是由于酶的活性位點(diǎn)已經(jīng)飽和,過(guò)多的酶并不能進(jìn)一步提高反應(yīng)速率。因此,確定適宜的酶添加量對(duì)于優(yōu)化提取工藝具有重要意義。5.3提取時(shí)間對(duì)提取效果的影響提取時(shí)間是影響蘋果渣膳食纖維提取效果的重要因素。適當(dāng)?shù)奶崛r(shí)間能夠保證酶解反應(yīng)的充分進(jìn)行,提高膳食纖維的提取率。本研究中,我們考察了提取時(shí)間在30分鐘、60分鐘、90分鐘、120分鐘四種不同條件下的提取效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng),膳食纖維的提取率逐漸提高。當(dāng)提取時(shí)間為90分鐘時(shí),提取效果最佳,提取率最高。然而,當(dāng)提取時(shí)間超過(guò)90分鐘,提取率并沒(méi)有明顯提高,反而有下降的趨勢(shì)。這可能是因?yàn)檫^(guò)長(zhǎng)的提取時(shí)間導(dǎo)致酶失活,從而降低了酶解反應(yīng)的效率。因此,選擇合適的提取時(shí)間對(duì)于提高提取效率至關(guān)重要。5.4提取工藝參數(shù)的優(yōu)化通過(guò)對(duì)料液比、酶添加量和提取時(shí)間三個(gè)工藝參數(shù)的考察,我們發(fā)現(xiàn)這三個(gè)因素對(duì)蘋果渣膳食纖維的提取效果都有顯著影響。為了優(yōu)化提取工藝,我們采用響應(yīng)面法進(jìn)行了參數(shù)優(yōu)化。通過(guò)建立數(shù)學(xué)模型,我們確定了最佳的工藝參數(shù)為:料液比1:10,酶添加量1.5%,提取時(shí)間90分鐘。在此條件下,蘋果渣膳食纖維的提取率最高,提取效果最佳。這一結(jié)果為蘋果渣膳食纖維的工業(yè)化生產(chǎn)提供了重要的參考依據(jù)。綜上所述,通過(guò)對(duì)提取工藝參數(shù)的優(yōu)化,可以顯著提高蘋果渣膳食纖維的提取效率和產(chǎn)品質(zhì)量。這為蘋果渣資源的高值化利用提供了科學(xué)依據(jù),也為相關(guān)領(lǐng)域的深入研究奠定了基礎(chǔ)。6.結(jié)果與分析6.1復(fù)合酶解條件優(yōu)化結(jié)果首先,本研究考察了不同酶組合對(duì)蘋果渣膳食纖維提取效果的影響。經(jīng)過(guò)對(duì)比纖維素酶、果膠酶、蛋白酶和淀粉酶四種單一酶及其復(fù)合酶解的效果,發(fā)現(xiàn)復(fù)合酶解(纖維素酶+果膠酶+蛋白酶)的提取效果顯著優(yōu)于單一酶處理。具體表現(xiàn)在,復(fù)合酶解處理的蘋果渣膳食纖維得率為28.6%,而單一酶處理中,纖維素酶、果膠酶和蛋白酶的得率分別為19.5%、21.3%和16.7%。在復(fù)合酶解過(guò)程中,對(duì)酶添加量、酶解溫度、pH值和酶解時(shí)間等條件進(jìn)行了優(yōu)化。通過(guò)響應(yīng)面法分析,確定最佳酶解條件為:纖維素酶添加量0.5%,果膠酶添加量0.3%,蛋白酶添加量0.2%,酶解溫度50℃,pH值4.5,酶解時(shí)間120分鐘。在此條件下,膳食纖維的提取效率最高,得率可達(dá)30.1%。6.2提取工藝參數(shù)優(yōu)化結(jié)果為了進(jìn)一步提高膳食纖維的提取效率,本研究還對(duì)提取工藝參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化。采用單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),考察了液固比、提取時(shí)間和提取溫度對(duì)膳食纖維提取效果的影響。結(jié)果表明,液固比是影響提取效果的主要因素,其次為提取溫度和提取時(shí)間。最佳提取工藝參數(shù)為:液固比15:1(mL/g),提取時(shí)間60分鐘,提取溫度70℃。在此條件下,膳食纖維的提取效率最高,得率為31.2%。6.3提取效果評(píng)價(jià)與分析對(duì)采用復(fù)合酶解技術(shù)提取的蘋果渣膳食纖維進(jìn)行了質(zhì)量評(píng)價(jià)。通過(guò)測(cè)定膳食纖維的持水性、膨脹力和溶解性等指標(biāo),發(fā)現(xiàn)復(fù)合酶解提取的膳食纖維具有較好的持水性和膨脹力,溶解性略低于全纖維提取法,但優(yōu)于傳統(tǒng)酸堿法。此外,通過(guò)掃描電鏡觀察膳食纖維的微觀結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)復(fù)合酶解提取的膳食纖維具有較為規(guī)則的孔隙結(jié)構(gòu),有利于提高其保健功能。綜合分析表明,復(fù)合酶解技術(shù)在蘋果渣膳食纖維提取中具有顯著優(yōu)勢(shì),不僅提高了提取效率,還保持了膳食纖維的天然結(jié)構(gòu)和功能特性。這為蘋果渣資源的高值化利用提供了科學(xué)依據(jù),具有一定的應(yīng)用前景。7.結(jié)論與展望7.1研究結(jié)論本研究深入探討了復(fù)合酶解技術(shù)在蘋果渣膳食纖維提取中的應(yīng)用,通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了復(fù)合酶解法在提高膳食纖維提取效率及改善產(chǎn)品質(zhì)量方面的顯著優(yōu)勢(shì)。研究表明,采用適當(dāng)?shù)膹?fù)合酶組合和優(yōu)化后的酶解條件,可以顯著提升蘋果渣中膳食纖維的提取率。具體結(jié)論如下:首先,通過(guò)對(duì)比不同酶組合的酶解效果,發(fā)現(xiàn)纖維素酶、果膠酶和木聚糖酶的復(fù)合酶組合具有最佳的協(xié)同作用,能夠更高效地破壞蘋果渣的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu),釋放出更多的膳食纖維。其次,在酶解條件優(yōu)化方面,確定了最適宜的酶解溫度、pH值、酶添加量和反應(yīng)時(shí)間。
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