第十一單元生物技術(shù)與工程第52講微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用【課標(biāo)要求】1.滅菌是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的前提；2.闡明無(wú)菌技術(shù)是在操作過(guò)程中，保持無(wú)菌物品與無(wú)菌區(qū)域不被微生物污染的技術(shù)；3.說(shuō)明通過(guò)調(diào)整培養(yǎng)基的配方可有目的地培養(yǎng)某種微生物；4.概述平板劃線法和稀釋涂布平板法是實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行微生物分離和純化的常用方法；5.概述稀釋涂布平板法和顯微鏡計(jì)數(shù)法是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。考點(diǎn)1培養(yǎng)基和無(wú)菌技術(shù)考點(diǎn)透析知識(shí)1微生物的培養(yǎng)基1.概念：人們按照微生物對(duì)的不同需求，配制出供其的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。2.類型(1)根據(jù)物理性質(zhì)分①固體培養(yǎng)基——用于微生物的分離、純化、鑒定、活菌計(jì)數(shù)和保藏等。②——一般用于工業(yè)生產(chǎn)和擴(kuò)大培養(yǎng)(可通過(guò)振蕩、搖床等實(shí)現(xiàn)對(duì)培養(yǎng)基充分利用)。③半固體培養(yǎng)基。三者的區(qū)別在于是否加入凝固劑及加的量多少。常用的凝固劑有等。(2)根據(jù)成分分①——一般用于普通培養(yǎng)和工業(yè)化生產(chǎn)，如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。②合成培養(yǎng)基——多用于研究和育種。(3)根據(jù)用途分eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(基礎(chǔ)培養(yǎng)基,特殊培養(yǎng)基\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(,鑒別培養(yǎng)基等))))3.培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成(1)各種培養(yǎng)基一般都含有和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)作用主要來(lái)源水良好的溶劑、細(xì)胞結(jié)構(gòu)的重要組成成分培養(yǎng)基、空氣、代謝產(chǎn)物碳源提供碳元素，有機(jī)碳源是異養(yǎng)生物的物質(zhì)葡萄糖、蔗糖、淀粉、纖維素、牛肉膏、蛋白胨等氮源提供氮元素，合成、磷脂以及含氮代謝產(chǎn)物無(wú)機(jī)氮源，如銨鹽、硝酸鹽等；有機(jī)氮源，如酵母粉、、等無(wú)機(jī)鹽組成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和許多化合物，調(diào)節(jié)生命活動(dòng)；某些化能自養(yǎng)菌的能源如磷酸鹽等無(wú)機(jī)化合物(2)培養(yǎng)基的其他條件：滿足微生物對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及O2等的需求。培養(yǎng)微生物種類特殊要求乳酸桿菌培養(yǎng)基中添加霉菌培養(yǎng)基的pH調(diào)至細(xì)菌培養(yǎng)基的pH調(diào)至厭氧微生物需要提供的條件深度指津不同種類的微生物代謝特點(diǎn)不同，因此對(duì)培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求也不同。如，自養(yǎng)型微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要是無(wú)機(jī)鹽，碳源可來(lái)自大氣中的CO2，氮源可由含氮無(wú)機(jī)鹽提供。異養(yǎng)型微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要是有機(jī)物，即碳源、氮源主要由有機(jī)物提供，部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無(wú)機(jī)氮源。知識(shí)2無(wú)菌技術(shù)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。無(wú)菌技術(shù)主要包括：和。1.消毒和滅菌項(xiàng)目消毒滅菌概念使用較為的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體或內(nèi)部一部分微生物使用的理化方法殺死物體內(nèi)外的微生物，包括常用方法消毒法、巴氏消毒法、消毒法、紫外線消毒法滅菌(如高壓蒸汽滅菌法)、干熱滅菌、滅菌區(qū)別最大區(qū)別在于是否殺死芽孢和孢子2.三種滅菌方法的比較類型濕熱滅菌干熱滅菌灼燒滅菌媒介沸水、流通蒸汽或高壓蒸汽熱空氣火焰的充分燃燒層方法高壓蒸汽滅菌：100kPa、121℃，維持15～30min160～170℃、1～2h直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒對(duì)象等耐高溫的和需要保持干燥的物品，如、等、試管口、瓶口等原理高溫或高溫、高壓使蛋白質(zhì)，導(dǎo)致微生物活體以及芽孢和孢子全部死亡3.操作對(duì)象或注意點(diǎn)(1)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和。(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行。(但是不耐高溫的培養(yǎng)基或成分可采用其他方法除菌，如血清可通過(guò)過(guò)濾除菌。)(3)為了避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作都應(yīng)在超凈工作臺(tái)并在附近進(jìn)行。(4)實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與接觸。解疑釋惑教材中的高壓蒸汽滅菌鍋利用的是濕熱滅菌原理。關(guān)于手動(dòng)式高壓蒸汽滅菌鍋的使用如下：操作步驟操作要領(lǐng)①加水向外層鍋內(nèi)加水(蒸餾水或純化水)，水面達(dá)到水位標(biāo)記線即可(水量過(guò)少會(huì)燒干)②裝鍋將待滅菌物品放在滅菌桶中(不要裝得太滿，至少留空間)，加蓋，旋緊固定螺栓③加熱排氣加熱滅菌鍋，打開(kāi)排氣閥，等冷空氣后，關(guān)閉排氣閥(否則壓強(qiáng)達(dá)標(biāo)時(shí)，溫度上不去，蒸汽的穿透力低，影響滅菌效果)④保溫、保壓100kPa、121℃下，15～30min(蘇教版為103kPa、121℃下15～20min)⑤出鍋壓力表指針降至“0”點(diǎn)，溫度下降后再打開(kāi)排氣閥思辨小練1.判斷下列說(shuō)法的正誤：(1)液體培養(yǎng)基含有水，而固體培養(yǎng)基不含水。()(2)以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物，其中碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)。()(3)(2023·山東卷T15B)平板涂布時(shí)涂布器使用前必須進(jìn)行消毒。()(4)(2023·山東卷T15A)不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)。()(5)對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌時(shí)，只需要在酒精燈火焰上燒紅環(huán)狀部分。()2.在科研和生產(chǎn)上，研究和應(yīng)用微生物的前提是，獲得純凈的微生物培養(yǎng)物。在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)微生物，一方面要為人們需要的微生物提供合適的和環(huán)境條件，另一方面確保其他微生物無(wú)法混入。典題說(shuō)法考向1微生物的培養(yǎng)基例1下列關(guān)于培養(yǎng)基和所含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的說(shuō)法，正確的是()A．通常情況下，瓊脂既可作為凝固劑，也可作為微生物的碳源B．蛋白胨為微生物的生長(zhǎng)主要提供碳源、氮源、磷酸鹽和維生素C．培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)維生素D．被污染的培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌后還能繼續(xù)使用考向2無(wú)菌技術(shù)例2(2025·鎮(zhèn)江期初)防止雜菌污染是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．利用微生物能夠寄生于多種細(xì)菌體內(nèi)使細(xì)菌裂解，可實(shí)現(xiàn)生物消毒B．利用紫外線對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行消毒前，噴灑消毒液可加強(qiáng)消毒效果C．利用干熱滅菌箱對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，應(yīng)在160℃的熱空氣中維持2～3hD．利用酒精燈對(duì)金屬用具進(jìn)行灼燒滅菌時(shí)，應(yīng)在酒精燈火焰充分燃燒層進(jìn)行考點(diǎn)2微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)考點(diǎn)透析知識(shí)1微生物的純培養(yǎng)1.純培養(yǎng)：在微生物學(xué)中，將接種于內(nèi)，在合適條件下形成的含的群體稱為培養(yǎng)物。由所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物，獲得的過(guò)程就是純培養(yǎng)。2.微生物純培養(yǎng)的步驟：、、倒平板、、分離和培養(yǎng)等步驟。3.酵母菌的純培養(yǎng)(1)菌落：分散的微生物在適宜的表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的。(2)獲得單菌落的兩種常用方法：和。(3)酵母菌的純培養(yǎng)步驟注：倒平板的具體操作步驟如下圖所示：解疑釋惑平板倒置培養(yǎng)的目的主要有：既可以造成污染，又可以，等等。知識(shí)2分離純化，獲得單菌落的兩種方法1.純化方法(1)上圖A可表示用法接種獲得的平板，菌體的分離是通過(guò)操作實(shí)現(xiàn)的。(2)上圖B可表示用法接種獲得的平板，菌體的分散是通過(guò)一系列的操作實(shí)現(xiàn)的。(3)獲得圖A用到的接種工具是接種環(huán)，而圖B是涂布器。圖A、B都可用于觀察菌落特征。2.平板劃線的具體操作解疑釋惑灼燒接種環(huán)的不同目的①第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的微生物，避免污染；②每次劃線前：殺死殘留菌種，保證每次劃線菌種來(lái)自上次劃線；③劃線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者。思辨小練1.判斷下列說(shuō)法的正誤：(1)培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌。()(2)轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線。()(3)平板冷凝后應(yīng)將平板倒置，防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染。()(4)(2023·山東卷T15C)接種后未長(zhǎng)出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄。()2.如何判斷在制備和培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基是否被污染？典題說(shuō)法考向微生物的純培養(yǎng)例(2025·泰州靖江期中)實(shí)驗(yàn)小組對(duì)釀酒酵母菌進(jìn)行平板劃線的純培養(yǎng)操作，下列有關(guān)敘述正確的是()A．將配制好的馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基放入干熱滅菌箱內(nèi)滅菌B．在酒精燈火焰附近，將培養(yǎng)皿蓋完全打開(kāi)后倒入培養(yǎng)基C．從第一次劃線的末端開(kāi)始到第二次劃線結(jié)束，即完成接種D．將接種后的平板和未接種的平板倒置，放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)變式(2023·江蘇卷)下列關(guān)于細(xì)菌和酵母菌實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是()A．通常酵母菌培養(yǎng)基比細(xì)菌培養(yǎng)基有更高的碳氮比B．通常細(xì)菌的生長(zhǎng)速度比酵母菌快，菌落比酵母菌落大C．通常細(xì)菌培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法滅菌，酵母菌培養(yǎng)基用過(guò)濾除菌法除菌D．血細(xì)胞計(jì)數(shù)板既可用于酵母菌的數(shù)量測(cè)定，也可用于細(xì)菌的數(shù)量測(cè)定考點(diǎn)3微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)知識(shí)1微生物的選擇培養(yǎng)1.選擇培養(yǎng)的作用原理：人為提供的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí)。2.稀釋涂布平板法操作過(guò)程取樣，將10g土樣加入盛有90mL無(wú)菌水的瓶中，搖勻，取加入盛有的試管中，依次。取最后一支試管中菌液滴加到培養(yǎng)基表面進(jìn)行涂布。如下圖所示：(1)稀釋操作時(shí)：每支試管及其中的9mL水、移液管等均需滅菌；操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1～2cm處。(2)涂布平板時(shí)：①用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，取出時(shí)，讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上；②不要將的涂布器放入盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精；③酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移液管槍頭不要接觸任何物體；④培養(yǎng)皿蓋不能完全打開(kāi)，應(yīng)只掀開(kāi)一條縫。概念辨析分離純化菌種的兩種方法的比較項(xiàng)目平板劃線法稀釋涂布平板法接種用具接種環(huán)涂布器分離結(jié)果單菌落的獲得單菌落從后劃線的區(qū)域挑取只有達(dá)到合適的稀釋度才能得到單菌落應(yīng)用都會(huì)在培養(yǎng)基表面形成單菌落，達(dá)到分離純化微生物的目的；都可用于觀察菌落特征不能用于微生物的計(jì)數(shù)可對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)其他共同點(diǎn)都要用到固體培養(yǎng)基；都需進(jìn)行無(wú)菌操作；都可以在培養(yǎng)基上形成由單個(gè)微生物繁殖而來(lái)的純培養(yǎng)物——單菌落知識(shí)2微生物的計(jì)數(shù)1.測(cè)定微生物數(shù)量常用的方法方法間接計(jì)數(shù)法(法、活菌計(jì)數(shù)法)直接計(jì)數(shù)法(顯微計(jì)數(shù)法)原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌利用特定的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板(常用于較大的真核細(xì)胞，如酵母菌、霉菌孢子等，及某些較大的原核細(xì)胞)或(常用于相對(duì)較小的細(xì)菌等)，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量公式每克樣品中的菌體數(shù)：C×M÷VC：某一稀釋度幾次重復(fù)培養(yǎng)后的菌落平均數(shù)；M：稀釋倍數(shù)；V：涂布所用的稀釋液體積數(shù)(mL)每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)：①每小格平均細(xì)菌數(shù)×400×10000×；②5(或4)個(gè)中方格的菌體數(shù)×5(或4)×10000×稀釋倍數(shù)結(jié)果比實(shí)際值偏，因?yàn)?因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是用活菌數(shù)來(lái)表示)比實(shí)際值偏，因?yàn)榇朔ㄗⅲ合♂屚坎计桨宸ㄓ?jì)數(shù)中，為了使結(jié)果接近真實(shí)值，應(yīng)設(shè)置三個(gè)或三個(gè)以上的平板(平行重復(fù)原則，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力和準(zhǔn)確性)，計(jì)算菌落平均數(shù)。另外，為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確，要求選擇同一稀釋度的平板菌落數(shù)在的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。深度指津(1)微生物的計(jì)數(shù)方法非常多樣，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況選擇合適的方法。涉及一些新的微生物計(jì)數(shù)方法，應(yīng)根據(jù)具體情境，弄清其背后的原理。列舉兩個(gè)其他計(jì)數(shù)方法：①比濁法：隨著微生物的繁殖，液體培養(yǎng)基的渾濁程度會(huì)增加，因此可根據(jù)液體培養(yǎng)物的渾濁程度來(lái)估計(jì)微生物的數(shù)量，通常使用分光光度計(jì)測(cè)定光的透過(guò)率。②實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)：通過(guò)定量PCR技術(shù)檢測(cè)特定微生物的DNA，可以精確測(cè)定微生物的數(shù)量。(2)稀釋涂布平板法用于微生物分離時(shí)不需要平板上菌落數(shù)在30～300；稀釋涂布平板法用于篩選基因工程轉(zhuǎn)化的細(xì)胞時(shí)，不一定需要再次平板劃線處理，可以直接PCR擴(kuò)增以獲得陽(yáng)性克隆的細(xì)胞；如果是稀釋涂布平板法用于純化微生物時(shí)，才需要多次平板劃線操作，以減少一個(gè)菌落是由2個(gè)或多個(gè)連在一起的微生物細(xì)胞繁殖而來(lái)的概率。2.土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(1)分離原理：土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣?，這種物質(zhì)在把尿素分解成無(wú)機(jī)物的過(guò)程中起到作用。CO(NH2)2＋H2Oeq\o(→,\s\up9(脲酶))CO2＋2NH3(2)分離方法：利用以為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)。(3)鑒定方法：在培養(yǎng)基中加入指示劑，指示劑變紅說(shuō)明菌落中的菌體為分解尿素的細(xì)菌。(4)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目：統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)一般用法。(5)實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣→→微生物的培養(yǎng)與觀察→細(xì)菌的。概念辨析選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基的比較比較項(xiàng)目選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基原理添加某物質(zhì)或控制溫度或pH等允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，產(chǎn)生特定的顏色或其他變化用途從眾多微生物中分離所需微生物(目的菌)鑒別不同種類的微生物舉例①加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌；②以尿素為唯一氮源，分離出分解尿素的微生物①以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑；②利用剛果紅染色法篩選分解纖維素的微生物(出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈)；③用伊紅—亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌(菌落呈深紫色，并有金屬光澤)注：鑒定微生物除了利用表中的鑒別培養(yǎng)基進(jìn)行如指示劑鑒別、染色鑒別等方法，還可以根據(jù)菌落特征鑒別，即根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別。思辨小練判斷下列說(shuō)法的正誤：(1)選擇培養(yǎng)基可以鑒定某種微生物的種類。()(2)(2023·山東卷T15D)利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物。()(3)“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中，土壤取樣時(shí)需要對(duì)紙袋和鐵鏟都預(yù)先滅菌。()(4)分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時(shí)，可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨，使得培養(yǎng)基的酸堿度降低。()(5)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)就是活菌的實(shí)際數(shù)目。()(6)細(xì)菌適宜在酸堿度接近中性的潮濕土壤中生長(zhǎng)，大部分距離地表3～8cm，因此取樣時(shí)一般要鏟去表層土壤。()(7)剛果紅可以與纖維素形成透明復(fù)合物，所以可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。()典題說(shuō)法考向1微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)例1(2025·鎮(zhèn)江期初)聚乙烯醇(PVA)是化工污水中的一種難以降解的大分子有機(jī)物，PVA分解菌能產(chǎn)生PVA酶對(duì)其進(jìn)行降解。下列關(guān)于PVA分解菌的篩選與培養(yǎng)的敘述，正確的是()A．土壤樣品應(yīng)加到以PVA為唯一碳源的鑒別培養(yǎng)基中培養(yǎng)B．直接選擇水解圈直徑最大的菌株以利于快速獲得高效降解菌C．利用平板劃線法進(jìn)行計(jì)數(shù)得出的微生物數(shù)量常比實(shí)際值小D．可利用不含PVA的培養(yǎng)基對(duì)篩選出的PVA分解菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)考向2微生物培養(yǎng)的應(yīng)用例2(2025·南通期初)水體中氮素的去除對(duì)清潔水體有重要意義，異養(yǎng)硝化細(xì)菌能將硝酸銨轉(zhuǎn)化為氨，科研工作者從污水中篩選出異養(yǎng)硝化細(xì)菌ZW2和ZW5菌株，并研究其轉(zhuǎn)化能力，結(jié)果如圖。相關(guān)敘述正確的是()A．進(jìn)行ZW2和ZW5菌株初步篩選時(shí)，采用平板劃線法接種并計(jì)數(shù)B．初步篩選并培養(yǎng)后，一般依據(jù)菌落形狀等特征來(lái)區(qū)分不同的微生物C．分離ZW2和ZW5菌株時(shí)，培養(yǎng)基中需要添加剛果紅作為指示劑D．ZW2菌株的轉(zhuǎn)化能力較ZW5強(qiáng)，可以擴(kuò)大化培養(yǎng)用于水體凈化深度指津選擇培養(yǎng)基——4種常見(jiàn)制備方法或?qū)嵗涮拙毜谑粏卧锛夹g(shù)與工程第52講微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用一、單項(xiàng)選擇題1.(2025·淮安一聯(lián))微生物需要從外界吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并通過(guò)代謝來(lái)維持正常的生長(zhǎng)和繁殖，下列與此有關(guān)的說(shuō)法，正確的是()A．有的氮源可以作為細(xì)菌的能源物質(zhì)B．加入酚紅指示劑的培養(yǎng)基，可以篩選大腸桿菌C．大腸桿菌與分解尿素的細(xì)菌所利用的氮源相同D．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的一定是能分解尿素的細(xì)菌2.下列關(guān)于微生物實(shí)驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是()A．培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B．接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒C．接種后的培養(yǎng)皿要倒置，以防培養(yǎng)污染D．菌種分離和菌落計(jì)數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基3.人們?cè)谘芯俊⒗梦⑸飼r(shí)，需用無(wú)菌技術(shù)培養(yǎng)獲取純種微生物，并對(duì)其進(jìn)行計(jì)數(shù)或保存。下列有關(guān)敘述正確的是()A．用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)時(shí)，結(jié)果往往比實(shí)際值低B．培養(yǎng)基配制過(guò)程是計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、定容、滅菌、倒平板C．高壓蒸汽滅菌后，打開(kāi)排氣閥，待壓力表指針降至“0”后開(kāi)蓋取物D．獲得純種微生物后，利用涂布平板法接種至斜面培養(yǎng)基上，進(jìn)行低溫保存4.(2024·南京調(diào)研)為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如下圖所示。下列敘述正確的是()A．圖示采用的接種方法為稀釋涂布平板法B．圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C．該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的D．菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色5.(2025·如皋期初)瘤胃是牛、羊等反芻動(dòng)物具有的特殊的器官，其中的微生物多為厭氧菌，接觸空氣后會(huì)死亡。如圖表示從牛的瘤胃中分離和鑒定纖維素分解菌。下列敘述正確的是()A．牛體內(nèi)提取的瘤胃液不能使用干熱滅菌，應(yīng)使用濕熱滅菌B．甲和乙應(yīng)使用纖維素為唯一碳源的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C．乙和丁的接種方法均可分離純化并進(jìn)行計(jì)數(shù)D．實(shí)驗(yàn)中培養(yǎng)基表面加入一層無(wú)菌石蠟?zāi)艽龠M(jìn)目的菌生長(zhǎng)6.(2024·南通一模)南通某中學(xué)興趣小組從垃圾堆放點(diǎn)的土壤中分離出一株分解柴油的芽孢桿菌。相關(guān)敘述正確的是()A.配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)以柴油為唯一氮源，并加入瓊脂B．配制好的培養(yǎng)基應(yīng)先分裝至培養(yǎng)皿，再用濕熱滅菌法滅菌C．土壤樣液可先進(jìn)行富集培養(yǎng)，再進(jìn)行涂布篩選D．選擇平板中的菌落數(shù)必須在30～300之間7.下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分離及運(yùn)用的敘述，不合理的是()A．篩選培養(yǎng)基中應(yīng)含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)B．可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌C．在分離平板上長(zhǎng)出的菌落需進(jìn)一步確定其產(chǎn)纖維素酶的能力D．用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價(jià)值8.(2025·海安期初)研究者用酸筍開(kāi)發(fā)具有降低膽固醇功能的益生菌。先將酸筍發(fā)酵液接種到含有CaCO3的固體培養(yǎng)基上，篩選出乳酸菌，然后將乳酸菌接種到含有膽固醇的培養(yǎng)液中，篩選出能夠降解膽固醇的乳酸菌。相關(guān)敘述正確的是()A．腌制酸筍需要水封，為乳酸菌發(fā)酵提供無(wú)菌環(huán)境B．乳酸菌細(xì)胞內(nèi)能進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的細(xì)胞器有線粒體和核糖體C．菌落直徑與溶鈣圈直徑比值大的菌落為目標(biāo)菌落D．膽固醇既可以為乳酸菌的生長(zhǎng)提供碳源，也可以參與動(dòng)物細(xì)胞膜的組成9.(2025·蘇州期初)某興趣小組為研究“使用公筷對(duì)餐后菜品細(xì)菌數(shù)量的影響”，將每道菜分為3盤，一盤取樣冷藏，一盤使用公筷，一盤不用公筷，實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下圖。下列相關(guān)操作或敘述正確的是()A．固體培養(yǎng)基X對(duì)菜品中的細(xì)菌有