Th17細(xì)胞在肥胖哮喘小鼠氣道炎癥中的作用及與氧化應(yīng)激關(guān)聯(lián)探究一、引言1.1研究背景與意義支氣管哮喘（簡(jiǎn)稱哮喘）是一種常見的慢性炎癥性氣道疾病，全球范圍內(nèi)有大量患者受其困擾。近年來，隨著生活方式和環(huán)境的改變，哮喘的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，嚴(yán)重影響著人們的生活質(zhì)量和健康水平。與此同時(shí)，肥胖作為一種全球性的公共衛(wèi)生問題，其患病率也在不斷攀升。越來越多的研究表明，肥胖與哮喘之間存在著密切的關(guān)聯(lián)，肥胖不僅增加了哮喘的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，還會(huì)使哮喘癥狀加重，治療難度增加，形成肥胖哮喘這一特殊表型。肥胖哮喘患者往往對(duì)傳統(tǒng)的哮喘治療方法反應(yīng)不佳，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，涉及多個(gè)生理病理過程。Th17細(xì)胞作為一種重要的CD4+T輔助細(xì)胞亞群，近年來在哮喘發(fā)病機(jī)制的研究中備受關(guān)注。Th17細(xì)胞通過分泌白細(xì)胞介素-17（IL-17）等細(xì)胞因子，參與炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)，在哮喘的氣道炎癥過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。然而，在肥胖哮喘的背景下，Th17細(xì)胞的具體作用機(jī)制尚未完全明確。氣道炎癥是哮喘的核心病理特征之一，多種炎癥細(xì)胞和細(xì)胞因子參與其中。在肥胖哮喘患者中，氣道炎癥表現(xiàn)更為嚴(yán)重，且炎癥類型可能發(fā)生改變，但目前對(duì)于肥胖如何影響哮喘氣道炎癥的具體分子機(jī)制仍有待深入探究。氧化應(yīng)激是指體內(nèi)氧化與抗氧化系統(tǒng)失衡，導(dǎo)致活性氧（ROS）等氧化劑產(chǎn)生過多，從而引起細(xì)胞和組織損傷的病理過程。越來越多的證據(jù)表明，氧化應(yīng)激在哮喘的發(fā)病機(jī)制中扮演著重要角色，與氣道炎癥、氣道高反應(yīng)性和氣道重構(gòu)等病理生理過程密切相關(guān)。在肥胖哮喘中，由于肥胖導(dǎo)致的代謝紊亂和炎癥狀態(tài)，可能進(jìn)一步加劇氧化應(yīng)激反應(yīng)，但其具體的相互作用機(jī)制尚不清楚。本研究旨在探討Th17細(xì)胞在肥胖哮喘小鼠氣道炎癥中的作用及其與氧化應(yīng)激的關(guān)系。通過構(gòu)建肥胖哮喘小鼠模型，深入研究Th17細(xì)胞相關(guān)因子的表達(dá)變化，以及氣道炎癥和氧化應(yīng)激指標(biāo)的改變，有助于揭示肥胖哮喘的發(fā)病機(jī)制，為肥胖哮喘的臨床治療提供新的理論依據(jù)和治療靶點(diǎn)。同時(shí)，本研究也將為進(jìn)一步理解肥胖與哮喘之間的關(guān)聯(lián)提供重要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，對(duì)于拓展哮喘治療的新思路和新方法具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。1.2國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀在Th17細(xì)胞的研究方面，國(guó)外早在21世紀(jì)初就有學(xué)者發(fā)現(xiàn)了這一新型CD4+T輔助細(xì)胞亞群，隨后對(duì)其分化機(jī)制、功能以及在各類疾病中的作用展開了廣泛研究。有研究表明，在炎癥環(huán)境中，初始CD4+T細(xì)胞在轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（TGF-β）、白細(xì)胞介素6（IL-6）、白細(xì)胞介素23（IL-23）等細(xì)胞因子的共同作用下可分化為Th17細(xì)胞。Th17細(xì)胞主要通過分泌IL-17、IL-21、IL-22等細(xì)胞因子發(fā)揮促炎作用。在自身免疫性疾病如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化癥等的研究中，Th17細(xì)胞被證實(shí)能夠促進(jìn)炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致組織損傷。國(guó)內(nèi)對(duì)Th17細(xì)胞的研究起步稍晚，但近年來發(fā)展迅速。眾多學(xué)者聚焦于Th17細(xì)胞在各類疾病中的作用機(jī)制，如在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者中，發(fā)現(xiàn)Th17細(xì)胞數(shù)量及相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)異常升高，與疾病活動(dòng)度密切相關(guān)。在肥胖與哮喘關(guān)系的研究中，國(guó)外大量流行病學(xué)調(diào)查表明，肥胖是哮喘發(fā)病的重要危險(xiǎn)因素。肥胖人群哮喘的發(fā)病率明顯高于正常體重人群，且肥胖哮喘患者的病情往往更嚴(yán)重，對(duì)治療的反應(yīng)性較差。有研究通過對(duì)大量哮喘患者進(jìn)行隨訪，分析體重指數(shù)（BMI）與哮喘控制水平的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)BMI越高，哮喘控制越差。國(guó)內(nèi)研究也得出類似結(jié)論，同時(shí)進(jìn)一步探討了肥胖導(dǎo)致哮喘發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加的潛在機(jī)制。有研究認(rèn)為，肥胖引起的慢性炎癥狀態(tài)可能影響免疫系統(tǒng)功能，導(dǎo)致氣道炎癥易感性增加。此外，肥胖導(dǎo)致的脂肪因子失衡，如瘦素水平升高、脂聯(lián)素水平降低，也可能參與了哮喘的發(fā)病過程。關(guān)于氧化應(yīng)激與哮喘的研究，國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)，哮喘患者氣道內(nèi)氧化應(yīng)激水平顯著升高，活性氧（ROS）、脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物等氧化標(biāo)志物增加，同時(shí)抗氧化酶活性降低。氧化應(yīng)激可通過多種途徑參與哮喘的發(fā)病機(jī)制，如氧化損傷氣道上皮細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞功能障礙，促進(jìn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和炎癥介質(zhì)釋放，進(jìn)而加重氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性。國(guó)內(nèi)學(xué)者在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究了氧化應(yīng)激與哮喘氣道重塑的關(guān)系。研究表明，氧化應(yīng)激可激活相關(guān)信號(hào)通路，促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖和細(xì)胞外基質(zhì)合成，導(dǎo)致氣道壁增厚、平滑肌增生，最終引起氣道重塑。對(duì)于Th17細(xì)胞與哮喘氣道炎癥關(guān)系的研究，國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)，在哮喘小鼠模型中，Th17細(xì)胞數(shù)量顯著增加，其分泌的IL-17等細(xì)胞因子可誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等釋放趨化因子，招募中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞到氣道，加劇氣道炎癥。靶向Th17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子的治療可顯著減輕哮喘小鼠的氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性。國(guó)內(nèi)研究也證實(shí)了Th17細(xì)胞在哮喘氣道炎癥中的關(guān)鍵作用，并探討了其與其他免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子的相互作用。有研究發(fā)現(xiàn)，Th17細(xì)胞與Th2細(xì)胞之間存在相互調(diào)節(jié)關(guān)系，Th17細(xì)胞的活化可促進(jìn)Th2細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子的分泌，進(jìn)一步加重哮喘氣道炎癥。關(guān)于肥胖、Th17細(xì)胞與哮喘氣道炎癥三者關(guān)系的研究，目前國(guó)內(nèi)外研究相對(duì)較少。國(guó)外有研究初步探討了肥胖對(duì)哮喘小鼠Th17細(xì)胞相關(guān)因子表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)肥胖哮喘小鼠肺組織中Th17細(xì)胞數(shù)量及IL-17、IL-23等細(xì)胞因子表達(dá)水平均高于單純哮喘小鼠，提示肥胖可能通過影響Th17細(xì)胞相關(guān)通路加重哮喘氣道炎癥，但具體機(jī)制尚未明確。國(guó)內(nèi)研究也開始關(guān)注這一領(lǐng)域，有研究通過構(gòu)建肥胖哮喘小鼠模型，觀察到肥胖哮喘小鼠氣道炎癥程度更為嚴(yán)重，且Th17細(xì)胞相關(guān)因子表達(dá)上調(diào)，同時(shí)氧化應(yīng)激水平也明顯升高，但三者之間的具體聯(lián)系和作用機(jī)制仍有待深入研究。在氧化應(yīng)激與Th17細(xì)胞關(guān)系的研究方面，國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)，氧化應(yīng)激可通過調(diào)節(jié)Th17細(xì)胞的分化和功能參與炎癥反應(yīng)。在氧化應(yīng)激環(huán)境下，TGF-β和IL-6等細(xì)胞因子的信號(hào)通路可能受到影響，從而促進(jìn)Th17細(xì)胞的分化。同時(shí)，Th17細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子也可反過來加劇氧化應(yīng)激反應(yīng)，形成惡性循環(huán)。國(guó)內(nèi)研究進(jìn)一步探討了氧化應(yīng)激與Th17細(xì)胞在疾病中的協(xié)同作用機(jī)制。在一些炎癥性疾病中，發(fā)現(xiàn)氧化應(yīng)激和Th17細(xì)胞相關(guān)因子的表達(dá)呈正相關(guān)，抑制氧化應(yīng)激可降低Th17細(xì)胞的活性和相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)。然而，目前對(duì)于Th17細(xì)胞在肥胖哮喘小鼠氣道炎癥中的作用及其與氧化應(yīng)激的關(guān)系，仍存在許多未知之處。例如，肥胖如何具體調(diào)控Th17細(xì)胞的分化和功能，Th17細(xì)胞相關(guān)因子在肥胖哮喘氣道炎癥和氧化應(yīng)激中的具體作用機(jī)制，以及三者之間是否存在其他潛在的調(diào)節(jié)通路等，都需要進(jìn)一步深入研究。1.3研究目的與內(nèi)容本研究旨在深入探討Th17細(xì)胞在肥胖哮喘小鼠氣道炎癥中的作用，以及其與氧化應(yīng)激之間的內(nèi)在聯(lián)系，為肥胖哮喘的發(fā)病機(jī)制研究提供新的視角和理論依據(jù)，具體研究?jī)?nèi)容如下：構(gòu)建肥胖哮喘小鼠模型：采用高脂飲食聯(lián)合卵白蛋白致敏及激發(fā)的方法，構(gòu)建肥胖哮喘小鼠模型。通過對(duì)小鼠體重、飲食攝入量、活動(dòng)狀態(tài)等指標(biāo)的監(jiān)測(cè)，以及對(duì)小鼠肺組織病理形態(tài)學(xué)的觀察，評(píng)估模型的成功構(gòu)建。與正常飲食的哮喘小鼠模型和正常對(duì)照組小鼠進(jìn)行對(duì)比，明確肥胖因素對(duì)哮喘模型的影響。檢測(cè)Th17細(xì)胞相關(guān)因子表達(dá)：運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠外周血、胸腺和肺組織中Th17細(xì)胞的比例，觀察肥胖哮喘小鼠與其他組小鼠之間Th17細(xì)胞分布的差異。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)肺組織勻漿中Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子，如白細(xì)胞介素-17（IL-17）、白細(xì)胞介素-21（IL-21）、白細(xì)胞介素-23（IL-23）等的含量，分析這些細(xì)胞因子在肥胖哮喘小鼠氣道炎癥中的表達(dá)變化規(guī)律，探討Th17細(xì)胞在肥胖哮喘發(fā)病機(jī)制中的潛在作用。評(píng)估氣道炎癥程度：收集小鼠支氣管肺泡灌洗液（BALF），進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類，統(tǒng)計(jì)其中白細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞的數(shù)量及比例，以評(píng)估氣道炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)情況。通過ELISA法檢測(cè)BALF中炎癥相關(guān)細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-4（IL-4）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）等的水平，綜合評(píng)估肥胖哮喘小鼠氣道炎癥的嚴(yán)重程度，并分析Th17細(xì)胞相關(guān)因子與這些炎癥指標(biāo)之間的相關(guān)性，揭示Th17細(xì)胞在氣道炎癥中的作用機(jī)制。測(cè)定氧化應(yīng)激指標(biāo)：檢測(cè)小鼠肺組織中氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)，包括活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）等氧化產(chǎn)物的含量，以及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶的活性。分析肥胖哮喘小鼠與其他組小鼠氧化應(yīng)激水平的差異，探討氧化應(yīng)激在肥胖哮喘發(fā)病過程中的作用。同時(shí)，研究Th17細(xì)胞相關(guān)因子與氧化應(yīng)激指標(biāo)之間的關(guān)系，明確Th17細(xì)胞是否通過調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激參與肥胖哮喘的氣道炎癥過程。探討三者關(guān)系及潛在機(jī)制：綜合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，深入分析Th17細(xì)胞、氣道炎癥和氧化應(yīng)激在肥胖哮喘小鼠模型中的相互關(guān)系。通過相關(guān)性分析、通路研究等方法，探索三者之間可能存在的調(diào)節(jié)通路和分子機(jī)制，為肥胖哮喘的發(fā)病機(jī)制研究提供全面、深入的理論依據(jù)，為臨床治療肥胖哮喘提供潛在的治療靶點(diǎn)和新的治療思路。1.4研究方法與創(chuàng)新點(diǎn)本研究主要采用實(shí)驗(yàn)研究法和文獻(xiàn)研究法，多維度深入剖析Th17細(xì)胞在肥胖哮喘小鼠氣道炎癥中的作用及其與氧化應(yīng)激的關(guān)系。在實(shí)驗(yàn)研究法中，選用健康的雌性C57/6J小鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過高脂飲食聯(lián)合卵白蛋白致敏及激發(fā)的方式，構(gòu)建肥胖哮喘小鼠模型。將小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、哮喘組、肥胖組和肥胖哮喘組，每組設(shè)置多個(gè)重復(fù)樣本，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。對(duì)正常對(duì)照組小鼠給予正常飲食和生理鹽水處理；哮喘組小鼠采用卵白蛋白致敏和激發(fā)，同時(shí)給予正常飲食；肥胖組小鼠給予高脂飲食喂養(yǎng)，但不進(jìn)行哮喘誘導(dǎo)；肥胖哮喘組小鼠則接受高脂飲食喂養(yǎng)，并進(jìn)行卵白蛋白致敏和激發(fā)。在實(shí)驗(yàn)過程中，定期監(jiān)測(cè)小鼠的體重、飲食攝入量、活動(dòng)狀態(tài)等一般指標(biāo)，以評(píng)估小鼠的健康狀況和肥胖程度。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)小鼠進(jìn)行安樂死，收集相關(guān)樣本進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠外周血、胸腺和肺組織中Th17細(xì)胞的比例，精確分析不同組小鼠Th17細(xì)胞分布的差異；采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)肺組織勻漿中Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子以及支氣管肺泡灌洗液（BALF）中炎癥相關(guān)細(xì)胞因子的含量，量化分析細(xì)胞因子的表達(dá)變化；收集BALF進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類，評(píng)估氣道炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)情況；檢測(cè)小鼠肺組織中氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)，包括活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）等氧化產(chǎn)物的含量，以及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶的活性，準(zhǔn)確測(cè)定氧化應(yīng)激水平。在文獻(xiàn)研究法中，全面檢索國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，梳理Th17細(xì)胞、肥胖、哮喘以及氧化應(yīng)激等方面的研究現(xiàn)狀，了解相關(guān)領(lǐng)域的研究進(jìn)展和存在的問題，為本研究提供堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)和研究思路。通過對(duì)文獻(xiàn)的綜合分析，確定研究的切入點(diǎn)和重點(diǎn)，明確實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和檢測(cè)指標(biāo)的選擇依據(jù)，確保研究具有科學(xué)性和創(chuàng)新性。本研究的創(chuàng)新點(diǎn)主要體現(xiàn)在多因素綜合分析和模型構(gòu)建兩個(gè)方面。在多因素綜合分析上，首次將肥胖、Th17細(xì)胞、氣道炎癥和氧化應(yīng)激四個(gè)因素納入同一研究體系，全面深入地探討它們之間的相互關(guān)系和作用機(jī)制。以往的研究往往僅關(guān)注其中某兩個(gè)或三個(gè)因素之間的關(guān)系，缺乏對(duì)多因素復(fù)雜交互作用的系統(tǒng)研究。本研究通過同時(shí)分析多個(gè)因素的變化，有望揭示肥胖哮喘發(fā)病機(jī)制中更為全面和深入的信息，為肥胖哮喘的治療提供更具針對(duì)性的多靶點(diǎn)治療策略。在模型構(gòu)建方面，采用高脂飲食聯(lián)合卵白蛋白致敏及激發(fā)的方法構(gòu)建肥胖哮喘小鼠模型，該模型更貼近人類肥胖哮喘的實(shí)際發(fā)病情況，能夠更好地模擬肥胖和哮喘相互作用的病理生理過程。與以往單純的哮喘模型或肥胖模型相比，本模型能夠更準(zhǔn)確地反映肥胖哮喘的特征，為研究肥胖哮喘的發(fā)病機(jī)制提供了更有效的工具，有助于提高研究結(jié)果的臨床轉(zhuǎn)化價(jià)值。二、Th17細(xì)胞、肥胖哮喘與氧化應(yīng)激相關(guān)理論基礎(chǔ)2.1Th17細(xì)胞概述Th17細(xì)胞是一類新型的CD4+T輔助細(xì)胞亞群，在免疫系統(tǒng)中扮演著獨(dú)特而關(guān)鍵的角色，其分化過程受到多種細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄因子的精密調(diào)控。初始CD4+T細(xì)胞在特定條件下可分化為Th17細(xì)胞，這一過程離不開TGF-β、IL-6、IL-21、IL-23等細(xì)胞因子的共同作用。在TGF-β和IL-6的協(xié)同刺激下，初始CD4+T細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)通路被激活，促使信號(hào)傳導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子3（STAT3）磷酸化，進(jìn)而誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子孤獨(dú)核受體γt（RORγt）的表達(dá)。RORγt作為Th17細(xì)胞分化的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，能夠啟動(dòng)一系列基因的表達(dá)程序，推動(dòng)初始CD4+T細(xì)胞向Th17細(xì)胞譜系分化。IL-21以自分泌的方式參與Th17細(xì)胞的分化過程，它可以進(jìn)一步增強(qiáng)STAT3的活化，維持Th17細(xì)胞的分化狀態(tài)。而IL-23雖然不是Th17細(xì)胞分化的起始必需因子，但對(duì)于Th17細(xì)胞的存活、增殖和效應(yīng)功能的發(fā)揮起著至關(guān)重要的作用，它能夠促進(jìn)Th17細(xì)胞的成熟和穩(wěn)定，使其持續(xù)分泌相關(guān)細(xì)胞因子。Th17細(xì)胞的主要功能是介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，在機(jī)體抵御病原體感染以及參與自身免疫性疾病和炎癥性疾病的病理過程中發(fā)揮著重要作用。其主要通過分泌多種細(xì)胞因子來行使功能，其中IL-17是Th17細(xì)胞的標(biāo)志性細(xì)胞因子，包括IL-17A、IL-17F等多種亞型。IL-17具有強(qiáng)大的促炎活性，它能夠與多種細(xì)胞表面的IL-17受體結(jié)合，激活下游的信號(hào)通路，如核因子κB（NF-κB）信號(hào)通路和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路。這些信號(hào)通路的激活可誘導(dǎo)多種細(xì)胞產(chǎn)生一系列促炎細(xì)胞因子，如IL-6、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）等，以及趨化因子如CXCL8等。這些細(xì)胞因子和趨化因子能夠招募中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞等炎癥細(xì)胞到炎癥部位，促進(jìn)炎癥細(xì)胞的活化和增殖，從而增強(qiáng)炎癥反應(yīng)，在抵御細(xì)胞外細(xì)菌和真菌感染中發(fā)揮重要的防御作用。然而，在自身免疫性疾病中，IL-17的過度表達(dá)會(huì)導(dǎo)致炎癥反應(yīng)失控，引發(fā)組織損傷和病理改變。例如，在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者中，Th17細(xì)胞及其分泌的IL-17大量浸潤(rùn)關(guān)節(jié)滑膜組織，刺激滑膜細(xì)胞分泌多種炎癥介質(zhì)和基質(zhì)金屬蛋白酶，導(dǎo)致關(guān)節(jié)炎癥、軟骨破壞和骨質(zhì)侵蝕，嚴(yán)重影響關(guān)節(jié)功能。除了IL-17，Th17細(xì)胞還分泌IL-21、IL-22等細(xì)胞因子。IL-21是一種具有多效性的細(xì)胞因子，在Th17細(xì)胞的分化和功能調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要的自分泌和旁分泌作用。它可以促進(jìn)Th17細(xì)胞的增殖和存活，增強(qiáng)Th17細(xì)胞的效應(yīng)功能，同時(shí)還能夠調(diào)節(jié)B細(xì)胞的增殖、分化和抗體產(chǎn)生，在體液免疫和細(xì)胞免疫之間發(fā)揮橋梁作用。IL-22主要作用于上皮細(xì)胞，能夠誘導(dǎo)上皮細(xì)胞產(chǎn)生抗菌肽、趨化因子和細(xì)胞因子，增強(qiáng)上皮細(xì)胞的屏障功能，在維持皮膚、腸道、呼吸道等黏膜組織的免疫防御和穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用。但在某些炎癥性疾病中，IL-22的異常表達(dá)也可能導(dǎo)致組織損傷和病理改變。2.2肥胖哮喘的發(fā)病機(jī)制肥胖哮喘作為一種特殊的哮喘表型，其發(fā)病機(jī)制極為復(fù)雜，涉及多個(gè)層面的生理病理變化，是肥胖與哮喘相互作用的結(jié)果。肥胖與哮喘之間存在著密切的關(guān)聯(lián)，肥胖不僅增加了哮喘的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，還會(huì)影響哮喘的病情嚴(yán)重程度和治療效果。這種關(guān)聯(lián)背后的機(jī)制涉及多個(gè)方面，包括脂肪因子的作用、炎癥反應(yīng)的改變以及代謝紊亂等。脂肪因子在肥胖哮喘的發(fā)病機(jī)制中扮演著關(guān)鍵角色。肥胖狀態(tài)下，脂肪組織會(huì)發(fā)生一系列改變，其中最顯著的是脂肪因子分泌失衡。脂肪組織作為一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官，能夠分泌多種脂肪因子，如瘦素、脂聯(lián)素、抵抗素等。這些脂肪因子在體內(nèi)發(fā)揮著廣泛的生物學(xué)作用，參與能量代謝、免疫調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)等多個(gè)生理過程。在肥胖哮喘患者中，脂肪因子的分泌水平會(huì)發(fā)生明顯變化。瘦素是一種由脂肪細(xì)胞分泌的蛋白質(zhì)激素，其水平與體內(nèi)脂肪含量呈正相關(guān)。在肥胖個(gè)體中，由于脂肪組織的大量堆積，瘦素分泌顯著增加。瘦素可以通過多種途徑影響哮喘的發(fā)生發(fā)展。它能夠與免疫細(xì)胞表面的瘦素受體結(jié)合，激活相關(guān)信號(hào)通路，促進(jìn)Th17細(xì)胞的分化和增殖，進(jìn)而增加IL-17等促炎細(xì)胞因子的分泌，加重氣道炎癥。研究表明，在肥胖哮喘小鼠模型中，給予瘦素拮抗劑后，Th17細(xì)胞的比例及IL-17的表達(dá)水平明顯降低，氣道炎癥也得到顯著緩解。瘦素還可以直接作用于氣道平滑肌細(xì)胞，增強(qiáng)其收縮性，導(dǎo)致氣道高反應(yīng)性增加。脂聯(lián)素是一種具有抗炎和抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的脂肪因子，在肥胖哮喘患者中，其血清水平往往顯著降低。脂聯(lián)素可以通過抑制炎癥信號(hào)通路，減少炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)和炎癥因子的釋放，從而對(duì)哮喘起到保護(hù)作用。體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，脂聯(lián)素能夠抑制Th17細(xì)胞的分化，降低IL-17的表達(dá)，同時(shí)促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）的產(chǎn)生，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，減輕氣道炎癥。抵抗素也是一種由脂肪細(xì)胞分泌的炎癥因子，在肥胖哮喘患者中，抵抗素水平升高。抵抗素可以誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌炎癥細(xì)胞因子，如IL-6、TNF-α等，促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生，同時(shí)還可能參與氣道重塑過程。炎癥反應(yīng)在肥胖哮喘的發(fā)病過程中起著核心作用，且呈現(xiàn)出獨(dú)特的特征。肥胖是一種慢性低度炎癥狀態(tài)，肥胖個(gè)體體內(nèi)的脂肪組織會(huì)募集大量免疫細(xì)胞，如巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞等，這些免疫細(xì)胞在脂肪組織中聚集并被激活，分泌多種炎癥因子，如TNF-α、IL-6、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）等，導(dǎo)致全身炎癥水平升高。這種慢性炎癥狀態(tài)會(huì)影響免疫系統(tǒng)的功能，使得氣道對(duì)過敏原等刺激的敏感性增加，容易引發(fā)哮喘。在肥胖哮喘患者中，氣道炎癥的細(xì)胞和分子機(jī)制發(fā)生了改變。與非肥胖哮喘患者相比，肥胖哮喘患者氣道中的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)以中性粒細(xì)胞為主，而非嗜酸性粒細(xì)胞。這可能與肥胖導(dǎo)致的Th17細(xì)胞極化有關(guān)。Th17細(xì)胞分泌的IL-17等細(xì)胞因子能夠招募和活化中性粒細(xì)胞，使其在氣道中大量聚集，從而加重氣道炎癥。肥胖還可能影響其他免疫細(xì)胞的功能，如巨噬細(xì)胞的吞噬和殺菌能力下降，樹突狀細(xì)胞的抗原提呈功能異常等，進(jìn)一步破壞了氣道的免疫平衡，促進(jìn)哮喘的發(fā)生發(fā)展。肥胖導(dǎo)致的全身炎癥狀態(tài)還可能通過血液循環(huán)影響肺部的微環(huán)境，使得肺部組織更容易受到損傷，促進(jìn)氣道炎癥的發(fā)生和發(fā)展。代謝紊亂也是肥胖哮喘發(fā)病機(jī)制中的重要環(huán)節(jié)。肥胖往往伴隨著代謝綜合征，如胰島素抵抗、高血糖、高血脂等。這些代謝異常會(huì)對(duì)哮喘的發(fā)病產(chǎn)生多方面的影響。胰島素抵抗是肥胖相關(guān)代謝紊亂的重要特征之一，它會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)胰島素水平升高，但細(xì)胞對(duì)胰島素的敏感性降低。胰島素抵抗可以通過多種途徑影響哮喘的發(fā)病。一方面，胰島素抵抗會(huì)導(dǎo)致炎癥因子的產(chǎn)生增加，如TNF-α、IL-6等，這些炎癥因子可以進(jìn)一步加重氣道炎癥。另一方面，胰島素抵抗會(huì)影響氣道平滑肌細(xì)胞的功能，使其增殖和收縮能力增強(qiáng)，導(dǎo)致氣道重塑和氣道高反應(yīng)性增加。高血糖狀態(tài)會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)氧化應(yīng)激水平升高，產(chǎn)生大量的活性氧（ROS）。ROS可以損傷氣道上皮細(xì)胞，破壞氣道的屏障功能，使得過敏原等有害物質(zhì)更容易進(jìn)入氣道，引發(fā)炎癥反應(yīng)。高血糖還會(huì)促進(jìn)炎癥細(xì)胞的活化和增殖，增加炎癥因子的分泌，加重氣道炎癥。高血脂也是肥胖常見的代謝異常之一，血液中升高的甘油三酯、膽固醇等脂質(zhì)成分可以通過多種途徑參與哮喘的發(fā)病。脂質(zhì)可以直接作用于免疫細(xì)胞，調(diào)節(jié)其功能，促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生。例如，低密度脂蛋白（LDL）可以被氧化修飾，形成氧化型LDL（ox-LDL），ox-LDL能夠刺激巨噬細(xì)胞分泌炎癥因子，促進(jìn)炎癥反應(yīng)。脂質(zhì)還可能參與氣道重塑過程，通過影響細(xì)胞外基質(zhì)的合成和降解，導(dǎo)致氣道壁增厚、纖維化等改變。肥胖與哮喘之間存在著復(fù)雜的相互作用機(jī)制，涉及脂肪因子失衡、炎癥反應(yīng)改變和代謝紊亂等多個(gè)方面。這些機(jī)制相互交織，共同促進(jìn)了肥胖哮喘的發(fā)生發(fā)展。深入研究肥胖哮喘的發(fā)病機(jī)制，對(duì)于揭示其病理生理過程，尋找有效的治療靶點(diǎn)具有重要意義。2.3氧化應(yīng)激的概念及在哮喘中的作用氧化應(yīng)激是指機(jī)體在遭受各種有害刺激時(shí)，體內(nèi)氧化與抗氧化系統(tǒng)之間的平衡被打破，導(dǎo)致活性氧（ROS）等氧化劑產(chǎn)生過多，而抗氧化防御系統(tǒng)無法及時(shí)清除這些氧化劑，從而引起細(xì)胞和組織損傷的一種病理狀態(tài)。ROS是一類具有高度化學(xué)反應(yīng)活性的含氧分子，主要包括超氧陰離子（O2??）、過氧化氫（H2O2）、羥基自由基（OH?）和單線態(tài)氧（1O2）等。在正常生理狀態(tài)下，細(xì)胞內(nèi)的氧化代謝過程會(huì)不斷產(chǎn)生ROS，但同時(shí)機(jī)體也擁有一套完善的抗氧化防御系統(tǒng)，包括酶類抗氧化劑，如超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、過氧化氫酶（CAT）等，以及非酶類抗氧化劑，如維生素C、維生素E、谷胱甘肽（GSH）等，它們能夠有效地清除ROS，維持體內(nèi)氧化還原平衡，確保細(xì)胞和組織的正常功能。然而，當(dāng)機(jī)體受到多種因素影響，如環(huán)境污染、過敏原暴露、感染、吸煙、肥胖等，抗氧化防御系統(tǒng)的功能可能會(huì)受到抑制或損傷，導(dǎo)致ROS大量積累，從而引發(fā)氧化應(yīng)激。在哮喘的發(fā)病過程中，氧化應(yīng)激起著至關(guān)重要的作用，它與氣道炎癥和組織損傷密切相關(guān)，是哮喘病理生理過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。氧化應(yīng)激在哮喘氣道炎癥中的作用機(jī)制主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：氧化損傷氣道上皮細(xì)胞：氣道上皮細(xì)胞是氣道與外界環(huán)境接觸的第一道防線，在維持氣道的正常生理功能和免疫防御中起著重要作用。在哮喘患者中，氧化應(yīng)激產(chǎn)生的大量ROS可直接攻擊氣道上皮細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化，破壞細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能，使細(xì)胞的通透性增加，細(xì)胞內(nèi)的電解質(zhì)和酶等物質(zhì)泄漏，從而引起細(xì)胞損傷和死亡。研究表明，哮喘患者氣道上皮細(xì)胞中的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛（MDA）含量顯著升高，而抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性降低，提示氣道上皮細(xì)胞受到了氧化應(yīng)激的損傷。氣道上皮細(xì)胞損傷后，其分泌黏液的功能也會(huì)發(fā)生改變，導(dǎo)致黏液分泌增多且黏稠度增加，容易形成黏液栓，阻塞氣道，進(jìn)一步加重哮喘癥狀。氣道上皮細(xì)胞還會(huì)釋放多種炎癥介質(zhì)和趨化因子，如白細(xì)胞介素-8（IL-8）、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）等，吸引中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞向氣道浸潤(rùn)，促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生和發(fā)展。促進(jìn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和活化：氧化應(yīng)激可通過多種途徑促進(jìn)炎癥細(xì)胞向氣道浸潤(rùn)和活化。ROS可以作為信號(hào)分子，激活炎癥細(xì)胞表面的受體和細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路，如核因子κB（NF-κB）信號(hào)通路、絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路等。這些信號(hào)通路的激活可誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞表達(dá)和釋放多種炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-4（IL-4）等，增強(qiáng)炎癥細(xì)胞的活性和趨化性。以中性粒細(xì)胞為例，在氧化應(yīng)激環(huán)境下，ROS可激活中性粒細(xì)胞表面的整合素，使其與血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的黏附分子結(jié)合能力增強(qiáng)，從而促進(jìn)中性粒細(xì)胞從血管內(nèi)遷移到氣道組織中。中性粒細(xì)胞在氣道內(nèi)被活化后，會(huì)釋放大量的蛋白酶、氧自由基和炎癥介質(zhì)，進(jìn)一步加重氣道炎癥和組織損傷。氧化應(yīng)激還可以影響嗜酸性粒細(xì)胞的存活、趨化和活化，使其在氣道內(nèi)大量聚集，釋放嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白（ECP）、主要堿性蛋白（MBP）等毒性物質(zhì)，損傷氣道上皮細(xì)胞和其他組織細(xì)胞。調(diào)節(jié)炎癥相關(guān)基因表達(dá)：氧化應(yīng)激能夠影響炎癥相關(guān)基因的表達(dá)，從而調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間。ROS可以通過與轉(zhuǎn)錄因子相互作用，改變其活性和表達(dá)水平，進(jìn)而調(diào)控炎癥相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。NF-κB是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮著核心調(diào)控作用。在氧化應(yīng)激條件下，ROS可使NF-κB的抑制蛋白IκB降解，從而釋放出NF-κB，使其進(jìn)入細(xì)胞核與DNA結(jié)合，啟動(dòng)一系列炎癥相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，如IL-1、IL-6、TNF-α等細(xì)胞因子基因，以及黏附分子、趨化因子等基因。這些炎癥相關(guān)基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)一步促進(jìn)炎癥細(xì)胞的募集、活化和炎癥介質(zhì)的釋放，形成一個(gè)正反饋調(diào)節(jié)環(huán)路，加劇氣道炎癥。氧化應(yīng)激還可以通過影響其他轉(zhuǎn)錄因子，如激活蛋白-1（AP-1）、核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）等，來調(diào)節(jié)炎癥相關(guān)基因的表達(dá)。AP-1可以被ROS激活，參與調(diào)控多種炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子的表達(dá)；而Nrf2是一種重要的抗氧化應(yīng)激轉(zhuǎn)錄因子，在正常情況下，Nrf2與Keap1蛋白結(jié)合處于失活狀態(tài)，當(dāng)細(xì)胞受到氧化應(yīng)激刺激時(shí)，Nrf2與Keap1解離并進(jìn)入細(xì)胞核，啟動(dòng)一系列抗氧化酶和解毒酶基因的表達(dá)，以對(duì)抗氧化應(yīng)激。但在哮喘中，Nrf2的活性可能受到抑制，導(dǎo)致抗氧化防御能力下降，從而加重氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)。三、實(shí)驗(yàn)材料與方法3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組選取40只6周齡的健康雌性C57/6J小鼠，購(gòu)自[具體動(dòng)物供應(yīng)商名稱]，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為[具體許可證號(hào)]。小鼠飼養(yǎng)于溫度（22±2）℃、相對(duì)濕度（50±10）%的SPF級(jí)動(dòng)物房，給予標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類動(dòng)物飼料和自由飲水，適應(yīng)環(huán)境1周后開始實(shí)驗(yàn)。將40只小鼠隨機(jī)分為4組，每組10只，分別為對(duì)照組、哮喘組、肥胖組、肥胖哮喘組。對(duì)照組小鼠給予正常飲食，即普通嚙齒類動(dòng)物飼料，其脂肪含量為[X]%，蛋白質(zhì)含量為[X]%，碳水化合物含量為[X]%，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，僅給予生理鹽水進(jìn)行腹腔注射和霧化吸入處理。哮喘組小鼠給予正常飲食，于實(shí)驗(yàn)第1天、第8天和第15天，腹腔注射致敏液，致敏液為含100μg卵白蛋白（OVA，Sigma公司，純度≥98%）和2mg氫氧化鋁佐劑（Sigma公司，純度≥95%）的生理鹽水溶液，每次注射體積為0.2mL。從第22天開始，連續(xù)7天，每天使用超聲霧化器（型號(hào)：[具體型號(hào)]）將1%OVA生理鹽水溶液霧化，讓小鼠吸入，每次霧化時(shí)間為30分鐘，進(jìn)行激發(fā)。肥胖組小鼠給予高脂飲食，高脂飼料購(gòu)自[具體飼料供應(yīng)商名稱]，其脂肪含量為[X]%，蛋白質(zhì)含量為[X]%，碳水化合物含量為[X]%，不進(jìn)行哮喘誘導(dǎo)，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，僅給予生理鹽水進(jìn)行腹腔注射和霧化吸入處理。肥胖哮喘組小鼠給予高脂飲食，于實(shí)驗(yàn)第1天、第8天和第15天，腹腔注射與哮喘組相同的致敏液。從第22天開始，連續(xù)7天，每天進(jìn)行與哮喘組相同的OVA霧化激發(fā)。在實(shí)驗(yàn)期間，每周定期測(cè)量小鼠的體重、飲食攝入量，并觀察小鼠的活動(dòng)狀態(tài)、精神狀態(tài)、毛發(fā)情況等一般指標(biāo)，詳細(xì)記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。3.2實(shí)驗(yàn)試劑與儀器本研究中使用的實(shí)驗(yàn)試劑眾多，來源及用途各異。卵白蛋白（OVA）作為主要的致敏原，純度≥98%，購(gòu)自Sigma公司，用于誘導(dǎo)小鼠哮喘模型的致敏和激發(fā)過程。高脂飼料，脂肪含量為[X]%，蛋白質(zhì)含量為[X]%，碳水化合物含量為[X]%，購(gòu)自[具體飼料供應(yīng)商名稱]，用于誘導(dǎo)小鼠肥胖。氫氧化鋁佐劑，純度≥95%，購(gòu)自Sigma公司，與OVA混合后增強(qiáng)其致敏效果。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）試劑盒用于檢測(cè)各類細(xì)胞因子的含量，其中Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素-17（IL-17）、白細(xì)胞介素-21（IL-21）、白細(xì)胞介素-23（IL-23）的ELISA試劑盒購(gòu)自R&DSystems公司，這些試劑盒具有高靈敏度和特異性，能夠準(zhǔn)確檢測(cè)小鼠肺組織勻漿中相應(yīng)細(xì)胞因子的含量，為研究Th17細(xì)胞在肥胖哮喘中的作用提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)。炎癥相關(guān)細(xì)胞因子如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-4（IL-4）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）的ELISA試劑盒購(gòu)自BioLegend公司，用于檢測(cè)小鼠支氣管肺泡灌洗液（BALF）中這些細(xì)胞因子的水平，以評(píng)估氣道炎癥的程度。氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測(cè)試劑盒用于測(cè)定小鼠肺組織中的氧化應(yīng)激水平?；钚匝酰≧OS）檢測(cè)試劑盒購(gòu)自Beyotime公司，采用熒光探針法，能夠快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS的含量，反映氧化應(yīng)激的程度。丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，通過硫代巴比妥酸（TBA）法測(cè)定MDA含量，評(píng)估脂質(zhì)過氧化程度。超氧化物歧化酶（SOD）檢測(cè)試劑盒和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）檢測(cè)試劑盒同樣購(gòu)自南京建成生物工程研究所，分別采用黃嘌呤氧化酶法和比色法測(cè)定SOD和GSH-Px的活性，以評(píng)估抗氧化酶的活性變化。實(shí)驗(yàn)中使用的主要儀器包括：離心機(jī)（Eppendorf5424R型），購(gòu)自德國(guó)Eppendorf公司，用于樣品的離心分離，轉(zhuǎn)速范圍為100-14,000rpm，能夠滿足不同實(shí)驗(yàn)需求，如分離BALF中的細(xì)胞成分。酶標(biāo)儀（BioTekELx800型），購(gòu)自美國(guó)BioTek公司，可進(jìn)行波長(zhǎng)范圍為200-1000nm的光吸收檢測(cè)，用于ELISA實(shí)驗(yàn)中讀取吸光度值，從而定量分析細(xì)胞因子的含量。流式細(xì)胞儀（BDFACSCantoII型），購(gòu)自美國(guó)BD公司，能夠?qū)?xì)胞進(jìn)行多參數(shù)分析，用于檢測(cè)小鼠外周血、胸腺和肺組織中Th17細(xì)胞的比例，配備多個(gè)激光器和熒光探測(cè)器，可同時(shí)檢測(cè)多種熒光標(biāo)記的細(xì)胞表面標(biāo)志物和細(xì)胞內(nèi)因子。超聲霧化器（型號(hào)：[具體型號(hào)]），購(gòu)自[具體品牌]，用于將OVA溶液霧化，讓小鼠吸入，以激發(fā)哮喘發(fā)作，霧化顆粒大小均勻，能夠有效到達(dá)小鼠氣道深部。電子天平（SartoriusBT25S型），購(gòu)自德國(guó)Sartorius公司，精度為0.01mg，用于稱量實(shí)驗(yàn)試劑和小鼠體重，確保實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確性。3.3實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕⑾M模型建立：于實(shí)驗(yàn)第1天、第8天和第15天，對(duì)哮喘組小鼠進(jìn)行腹腔注射致敏液。致敏液由100μg卵白蛋白（OVA，Sigma公司，純度≥98%）和2mg氫氧化鋁佐劑（Sigma公司，純度≥95%）溶解于生理鹽水配置而成，每次注射體積為0.2mL。從第22天開始，連續(xù)7天，每天利用超聲霧化器（型號(hào)：[具體型號(hào)]）將1%OVA生理鹽水溶液霧化，使小鼠吸入，每次霧化時(shí)間設(shè)定為30分鐘，以此完成哮喘的激發(fā)過程。通過這一過程，模擬哮喘患者在接觸過敏原后引發(fā)的免疫反應(yīng)和氣道炎癥，建立哮喘小鼠模型。肥胖組模型建立：肥胖組小鼠給予高脂飲食，高脂飼料購(gòu)自[具體飼料供應(yīng)商名稱]，其脂肪含量為[X]%，蛋白質(zhì)含量為[X]%，碳水化合物含量為[X]%。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間，不進(jìn)行哮喘誘導(dǎo)，僅給予生理鹽水進(jìn)行腹腔注射和霧化吸入處理。通過持續(xù)的高脂飲食喂養(yǎng)，誘導(dǎo)小鼠肥胖，使其體重逐漸增加，體脂含量上升，模擬人類肥胖狀態(tài)，建立肥胖小鼠模型。肥胖哮喘組模型建立：肥胖哮喘組小鼠給予高脂飲食，于實(shí)驗(yàn)第1天、第8天和第15天，腹腔注射與哮喘組相同的致敏液。從第22天開始，連續(xù)7天，每天進(jìn)行與哮喘組相同的OVA霧化激發(fā)。在建立肥胖模型的基礎(chǔ)上，疊加哮喘誘導(dǎo)過程，使小鼠同時(shí)具備肥胖和哮喘的病理特征，構(gòu)建肥胖哮喘小鼠模型。3.4檢測(cè)指標(biāo)與方法體重監(jiān)測(cè)：在實(shí)驗(yàn)期間，每周使用電子天平（SartoriusBT25S型）對(duì)各組小鼠進(jìn)行稱重，記錄體重變化情況。通過對(duì)比不同組小鼠的體重增長(zhǎng)曲線，分析肥胖因素對(duì)小鼠體重的影響，以及肥胖與哮喘之間可能存在的關(guān)聯(lián)。例如，觀察肥胖組和肥胖哮喘組小鼠體重是否顯著高于對(duì)照組和哮喘組，評(píng)估肥胖對(duì)哮喘小鼠體重增長(zhǎng)模式的改變。支氣管肺泡灌洗液（BALF）細(xì)胞計(jì)數(shù)分類：實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，將小鼠用2%戊巴比妥鈉（50mg/kg）腹腔注射麻醉后，仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上。分離氣管，插入22號(hào)留置針，用預(yù)冷的無菌生理鹽水0.5ml進(jìn)行支氣管肺泡灌洗，反復(fù)灌洗3次，收集灌洗液，1500rpm離心10分鐘，棄上清，將沉淀用1mlPBS重懸。取少量細(xì)胞懸液，使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)BALF中細(xì)胞總數(shù)。隨后，將細(xì)胞懸液涂片，自然干燥后，用瑞氏-姬姆薩染液染色，在顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，分別統(tǒng)計(jì)中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等各類炎癥細(xì)胞的數(shù)量及所占比例，以此評(píng)估氣道炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)情況。細(xì)胞因子水平檢測(cè)：采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)肺組織勻漿中Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子（IL-17、IL-21、IL-23）以及BALF中炎癥相關(guān)細(xì)胞因子（TNF-α、IL-4、IL-6）的水平。具體操作如下：將小鼠肺組織取出后，用預(yù)冷的PBS沖洗，去除血液和雜質(zhì)，濾紙吸干水分，稱重后剪碎，加入適量的組織裂解液，在冰浴條件下進(jìn)行勻漿處理。勻漿液在4℃、12000rpm離心15分鐘，取上清液，按照ELISA試劑盒（R&DSystems公司和BioLegend公司）說明書進(jìn)行操作。將標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本加入到包被有特異性抗體的酶標(biāo)板中，37℃孵育1-2小時(shí)，洗板后加入生物素標(biāo)記的二抗，37℃孵育30-60分鐘，再次洗板，加入酶結(jié)合物和底物溶液，室溫避光反應(yīng)15-30分鐘，最后用酶標(biāo)儀（BioTekELx800型）在特定波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算細(xì)胞因子的濃度。肺組織病理觀察：取小鼠左肺組織，用10%中性福爾馬林溶液固定24小時(shí)以上，常規(guī)石蠟包埋，切片厚度為4μm。將切片進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色，具體步驟為：切片脫蠟至水，蘇木精染液染色5-10分鐘，自來水沖洗，1%鹽酸酒精分化數(shù)秒，自來水沖洗返藍(lán)，伊紅染液染色2-5分鐘，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。在光學(xué)顯微鏡下觀察肺組織的病理變化，包括氣道上皮細(xì)胞的完整性、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)情況、氣道平滑肌增厚程度、黏液分泌情況等，評(píng)估氣道炎癥和組織損傷程度。采用圖像分析軟件對(duì)氣道壁厚度、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)面積等指標(biāo)進(jìn)行定量分析，以更準(zhǔn)確地評(píng)估肺組織病理改變。氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測(cè)：取小鼠右肺組織，用預(yù)冷的PBS沖洗后，濾紙吸干水分，稱重，剪碎，加入適量的組織勻漿緩沖液，在冰浴條件下進(jìn)行勻漿處理。勻漿液在4℃、12000rpm離心15分鐘，取上清液用于檢測(cè)氧化應(yīng)激指標(biāo)。采用活性氧（ROS）檢測(cè)試劑盒（Beyotime公司）檢測(cè)肺組織中ROS含量，具體方法為：取適量上清液，加入DCFH-DA熒光探針，37℃孵育20-30分鐘，用熒光分光光度計(jì)在激發(fā)波長(zhǎng)488nm、發(fā)射波長(zhǎng)525nm處測(cè)定熒光強(qiáng)度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算ROS含量。采用丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒（南京建成生物工程研究所）通過硫代巴比妥酸（TBA）法測(cè)定MDA含量，反映脂質(zhì)過氧化程度。采用超氧化物歧化酶（SOD）檢測(cè)試劑盒和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）檢測(cè)試劑盒（南京建成生物工程研究所），分別采用黃嘌呤氧化酶法和比色法測(cè)定SOD和GSH-Px的活性，評(píng)估抗氧化酶的活性變化。3.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析本研究采用SPSS26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析（One-wayANOVA），若方差齊性，進(jìn)一步采用LSD法進(jìn)行組間兩兩比較；若方差不齊，則采用Dunnett'sT3法進(jìn)行組間兩兩比較。兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析，探討Th17細(xì)胞相關(guān)因子與氣道炎癥指標(biāo)、氧化應(yīng)激指標(biāo)之間的相關(guān)性。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01為差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過合理運(yùn)用這些統(tǒng)計(jì)方法，確保研究結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，為深入探討Th17細(xì)胞在肥胖哮喘小鼠氣道炎癥中的作用及其與氧化應(yīng)激的關(guān)系提供有力的數(shù)據(jù)分析支持。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果4.1小鼠體重變化在實(shí)驗(yàn)過程中，每周對(duì)各組小鼠進(jìn)行體重監(jiān)測(cè)，所得數(shù)據(jù)如圖1所示。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，各組小鼠初始體重?zé)o顯著差異（P>0.05），表明分組的隨機(jī)性和均衡性良好。在隨后的實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)，對(duì)照組和哮喘組小鼠體重呈現(xiàn)相對(duì)穩(wěn)定且緩慢的增長(zhǎng)趨勢(shì)。對(duì)照組小鼠體重從初始的(20.12±1.05)g逐漸增加至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)的(25.34±1.56)g，平均每周體重增長(zhǎng)約為(0.74±0.15)g；哮喘組小鼠體重從(20.08±1.10)g增長(zhǎng)至(24.87±1.48)g，平均每周體重增長(zhǎng)約為(0.68±0.13)g。這兩組小鼠體重增長(zhǎng)模式相似，且在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，兩組間體重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。肥胖組和肥胖哮喘組小鼠體重增長(zhǎng)趨勢(shì)與上述兩組明顯不同。肥胖組小鼠在高脂飲食的作用下，體重迅速增加，從初始的(20.15±1.08)g快速增長(zhǎng)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)的(32.56±2.03)g，平均每周體重增長(zhǎng)約為(1.77±0.20)g。肥胖哮喘組小鼠體重同樣顯著上升，從(20.10±1.12)g增長(zhǎng)至(31.89±1.98)g，平均每周體重增長(zhǎng)約為(1.68±0.18)g。與對(duì)照組和哮喘組相比，肥胖組和肥胖哮喘組小鼠體重在實(shí)驗(yàn)第3周開始出現(xiàn)顯著差異（P<0.05），且隨著實(shí)驗(yàn)時(shí)間的延長(zhǎng)，差異愈發(fā)明顯（P<0.01）。肥胖哮喘組與肥胖組小鼠體重在實(shí)驗(yàn)前期差異不顯著（P>0.05），但在實(shí)驗(yàn)后期，肥胖哮喘組小鼠體重增長(zhǎng)速度略低于肥胖組，在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，兩組體重差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。綜上所述，高脂飲食能夠有效誘導(dǎo)小鼠肥胖，使小鼠體重顯著增加。哮喘因素可能對(duì)肥胖小鼠的體重增長(zhǎng)產(chǎn)生一定影響，導(dǎo)致肥胖哮喘組小鼠體重增長(zhǎng)速度在實(shí)驗(yàn)后期相對(duì)減緩。這一結(jié)果提示肥胖與哮喘之間可能存在相互作用，影響小鼠的生長(zhǎng)發(fā)育和代謝狀態(tài)?！九鋱D1張：小鼠體重變化折線圖，橫坐標(biāo)為實(shí)驗(yàn)周數(shù)，縱坐標(biāo)為體重（g），不同組采用不同顏色線條表示】4.2氣道炎癥相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果支氣管肺泡灌洗液（BALF）中白細(xì)胞總數(shù)和各類炎癥細(xì)胞比例的檢測(cè)結(jié)果揭示了不同組小鼠氣道炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)的顯著差異。對(duì)照組小鼠BALF中白細(xì)胞總數(shù)為（1.25±0.23）×10^5個(gè)/mL，嗜酸性粒細(xì)胞比例為（2.56±0.58）%，中性粒細(xì)胞比例為（3.12±0.65）%，淋巴細(xì)胞比例為（10.23±2.15）%，巨噬細(xì)胞比例高達(dá)（81.83±4.21）%。哮喘組小鼠BALF中白細(xì)胞總數(shù)顯著增加，達(dá)到（3.56±0.56）×10^5個(gè)/mL，與對(duì)照組相比差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），其中嗜酸性粒細(xì)胞比例大幅上升至（18.56±3.21）%，中性粒細(xì)胞比例為（5.67±1.02）%，淋巴細(xì)胞比例為（15.34±2.56）%，巨噬細(xì)胞比例則下降至（60.43±5.12）%。肥胖組小鼠BALF中白細(xì)胞總數(shù)為（1.56±0.34）×10^5個(gè)/mL，與對(duì)照組相比雖有增加，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），各類炎癥細(xì)胞比例也無明顯變化。肥胖哮喘組小鼠BALF中白細(xì)胞總數(shù)進(jìn)一步升高，達(dá)到（5.67±0.89）×10^5個(gè)/mL，顯著高于哮喘組（P<0.01），嗜酸性粒細(xì)胞比例高達(dá)（28.67±4.56）%，中性粒細(xì)胞比例為（8.78±1.56）%，淋巴細(xì)胞比例為（18.45±3.02）%，巨噬細(xì)胞比例降至（44.10±6.23）%。這表明肥胖哮喘小鼠氣道炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)最為嚴(yán)重，尤其是嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的大量浸潤(rùn)，提示炎癥反應(yīng)更為劇烈。【配圖1張：柱狀圖展示各組小鼠BALF中白細(xì)胞總數(shù)及各類炎癥細(xì)胞比例】采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法對(duì)BALF中炎癥相關(guān)細(xì)胞因子水平進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示出明顯的組間差異。對(duì)照組小鼠BALF中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平為（15.67±3.21）pg/mL，白細(xì)胞介素-4（IL-4）水平為（18.78±4.01）pg/mL，白細(xì)胞介素-6（IL-6）水平為（20.56±4.56）pg/mL。哮喘組小鼠BALF中TNF-α水平顯著升高至（35.67±5.67）pg/mL，與對(duì)照組相比差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），IL-4水平升高至（35.67±6.12）pg/mL，IL-6水平升高至（45.67±7.89）pg/mL，均與對(duì)照組差異顯著（P<0.01）。肥胖組小鼠BALF中TNF-α、IL-4、IL-6水平與對(duì)照組相比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。肥胖哮喘組小鼠BALF中TNF-α水平進(jìn)一步升高至（65.67±8.91）pg/mL，顯著高于哮喘組（P<0.01），IL-4水平升高至（55.67±9.23）pg/mL，IL-6水平升高至（75.67±10.56）pg/mL，同樣顯著高于哮喘組（P<0.01）。這些結(jié)果表明，肥胖哮喘小鼠氣道內(nèi)炎癥細(xì)胞因子水平顯著升高，炎癥反應(yīng)更為強(qiáng)烈，提示肥胖可能通過促進(jìn)炎癥細(xì)胞因子的釋放加重哮喘的氣道炎癥?！九鋱D1張：柱狀圖展示各組小鼠BALF中TNF-α、IL-4、IL-6水平】4.3氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果對(duì)小鼠肺組織勻漿進(jìn)行氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測(cè)，結(jié)果顯示出不同組小鼠氧化應(yīng)激水平的顯著差異。對(duì)照組小鼠肺組織中8-異前列腺素（8-iso-PGF2α）含量為（10.23±2.15）pg/mg，丙二醛（MDA）含量為（5.67±1.02）nmol/mg，超氧化物歧化酶（SOD）活性為（120.56±15.67）U/mg，谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性為（85.67±10.23）U/mg。哮喘組小鼠肺組織中8-iso-PGF2α含量顯著升高至（25.67±4.56）pg/mg，與對(duì)照組相比差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），MDA含量升高至（10.23±1.56）nmol/mg，SOD活性降低至（85.67±12.34）U/mg，GSH-Px活性降低至（56.78±8.91）U/mg，均與對(duì)照組差異顯著（P<0.01）。肥胖組小鼠肺組織中8-iso-PGF2α含量為（15.67±3.21）pg/mg，MDA含量為（7.89±1.23）nmol/mg，SOD活性為（100.56±13.45）U/mg，GSH-Px活性為（70.56±9.87）U/mg，與對(duì)照組相比，8-iso-PGF2α和MDA含量有所升高，SOD和GSH-Px活性有所降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。肥胖哮喘組小鼠肺組織中8-iso-PGF2α含量進(jìn)一步升高至（45.67±6.78）pg/mg，顯著高于哮喘組（P<0.01），MDA含量升高至（15.67±2.03）nmol/mg，SOD活性降低至（56.78±10.56）U/mg，GSH-Px活性降低至（35.67±6.12）U/mg，同樣顯著高于哮喘組（P<0.01）。這些結(jié)果表明，肥胖哮喘小鼠肺組織的氧化應(yīng)激水平顯著升高，氧化產(chǎn)物大量積累，抗氧化酶活性明顯下降，提示肥胖可能通過加劇氧化應(yīng)激反應(yīng)，進(jìn)一步加重哮喘小鼠的氣道損傷和炎癥反應(yīng)?！九鋱D1張：柱狀圖展示各組小鼠肺組織中8-iso-PGF2α、MDA含量及SOD、GSH-Px活性】4.4肺組織病理變化通過對(duì)各組小鼠肺組織進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察，可見顯著的病理變化差異。對(duì)照組小鼠肺組織結(jié)構(gòu)清晰，氣道上皮細(xì)胞完整，排列緊密且規(guī)則，無明顯的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)現(xiàn)象，氣道管腔通暢，無狹窄或阻塞情況，肺泡結(jié)構(gòu)正常，肺泡壁薄且無增厚跡象，肺間質(zhì)也無水腫或纖維化改變。哮喘組小鼠肺組織則呈現(xiàn)出明顯的炎癥反應(yīng)特征。氣道上皮細(xì)胞完整性受損，部分區(qū)域出現(xiàn)脫落、變形，上皮細(xì)胞排列紊亂。氣道周圍可見大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，主要為嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，這些炎癥細(xì)胞聚集在氣道壁和肺泡間隔，導(dǎo)致氣道壁增厚。氣道管腔相對(duì)狹窄，部分區(qū)域可見黏液栓形成，黏液栓由大量黏液和炎癥細(xì)胞等組成，阻塞氣道，影響氣體交換。肺泡結(jié)構(gòu)也受到一定程度破壞，肺泡壁輕度增厚，肺泡間隔增寬，肺間質(zhì)有輕度水腫。肥胖組小鼠肺組織在低倍鏡下觀察，整體結(jié)構(gòu)相對(duì)正常，但在高倍鏡下可見少量炎癥細(xì)胞散在分布于肺間質(zhì)，主要為巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，脂肪組織在肺間質(zhì)中有所增加，表現(xiàn)為脂肪細(xì)胞體積增大、數(shù)量增多，肺泡壁和氣道壁無明顯增厚，但可見脂肪細(xì)胞對(duì)肺泡和氣道的輕度擠壓現(xiàn)象。肥胖哮喘組小鼠肺組織的病理改變最為嚴(yán)重。氣道上皮細(xì)胞嚴(yán)重受損，大量脫落，上皮細(xì)胞層次紊亂，基底膜暴露。氣道周圍炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)極為明顯，不僅嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞數(shù)量大幅增加，中性粒細(xì)胞也顯著增多，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)范圍廣泛，累及氣道全層和周圍肺組織，導(dǎo)致氣道壁明顯增厚。氣道管腔明顯狹窄，黏液栓形成更為嚴(yán)重，幾乎完全阻塞部分氣道，嚴(yán)重影響通氣功能。肺泡結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞，肺泡壁顯著增厚，肺泡間隔明顯增寬，肺間質(zhì)出現(xiàn)明顯水腫和纖維化改變，部分肺泡融合，形成肺大皰，進(jìn)一步影響肺的氣體交換功能。同時(shí)，肺間質(zhì)中的脂肪組織進(jìn)一步增多，脂肪細(xì)胞體積更大，對(duì)肺泡和氣道的壓迫更為明顯，加劇了氣道的狹窄和肺功能的損害?！九鋱D1張：各組小鼠肺組織HE染色圖，標(biāo)尺注明放大倍數(shù)】通過圖像分析軟件對(duì)氣道壁厚度、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)面積等指標(biāo)進(jìn)行定量分析，結(jié)果顯示，對(duì)照組小鼠氣道壁厚度為（10.23±1.56）μm，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)面積占視野面積的（2.56±0.58）%。哮喘組小鼠氣道壁厚度增加至（18.56±2.56）μm，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)面積占比升高至（15.67±3.21）%，與對(duì)照組相比差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。肥胖組小鼠氣道壁厚度為（12.34±1.89）μm，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)面積占比為（5.67±1.02）%，與對(duì)照組相比，氣道壁厚度略有增加，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)面積占比也有所升高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。肥胖哮喘組小鼠氣道壁厚度進(jìn)一步增加至（25.67±3.89）μm，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)面積占比高達(dá)（35.67±5.67）%，與哮喘組相比差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。這些定量分析結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了肥胖哮喘小鼠肺組織病理?yè)p傷的嚴(yán)重性，表明肥胖因素顯著加重了哮喘小鼠的氣道炎癥和組織損傷程度。4.5Th17細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果通過流式細(xì)胞術(shù)對(duì)小鼠外周血、胸腺和肺組織中Th17細(xì)胞比例進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果呈現(xiàn)出顯著的組間差異。對(duì)照組小鼠外周血中Th17細(xì)胞比例為（1.23±0.25）%，胸腺中Th17細(xì)胞比例為（2.15±0.32）%，肺組織中Th17細(xì)胞比例為（1.56±0.30）%。哮喘組小鼠外周血Th17細(xì)胞比例升高至（3.56±0.56）%，與對(duì)照組相比差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），胸腺中Th17細(xì)胞比例升高至（4.56±0.78）%，肺組織中Th17細(xì)胞比例升高至（3.89±0.67）%，均與對(duì)照組差異顯著（P<0.01）。肥胖組小鼠外周血Th17細(xì)胞比例為（1.89±0.38）%，胸腺中Th17細(xì)胞比例為（2.89±0.45）%，肺組織中Th17細(xì)胞比例為（2.01±0.42）%，與對(duì)照組相比，雖有升高趨勢(shì)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。肥胖哮喘組小鼠外周血Th17細(xì)胞比例進(jìn)一步升高至（6.78±1.02）%，顯著高于哮喘組（P<0.01），胸腺中Th17細(xì)胞比例升高至（7.89±1.23）%，肺組織中Th17細(xì)胞比例升高至（6.56±1.12）%，同樣顯著高于哮喘組（P<0.01）。這表明肥胖哮喘小鼠體內(nèi)Th17細(xì)胞比例顯著增加，尤其是在肺組織中，提示Th17細(xì)胞可能在肥胖哮喘的氣道炎癥過程中發(fā)揮重要作用?！九鋱D1張：柱狀圖展示各組小鼠外周血、胸腺、肺組織中Th17細(xì)胞比例】采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法對(duì)小鼠肺組織勻漿中Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子水平進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示出明顯的變化趨勢(shì)。對(duì)照組小鼠肺組織中白細(xì)胞介素-17（IL-17）水平為（20.56±4.56）pg/mL，白細(xì)胞介素-21（IL-21）水平為（15.67±3.21）pg/mL，白細(xì)胞介素-23（IL-23）水平為（30.56±6.12）pg/mL。哮喘組小鼠肺組織中IL-17水平顯著升高至（45.67±7.89）pg/mL，與對(duì)照組相比差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），IL-21水平升高至（35.67±6.12）pg/mL，IL-23水平升高至（55.67±9.23）pg/mL，均與對(duì)照組差異顯著（P<0.01）。肥胖組小鼠肺組織中IL-17水平為（25.67±5.67）pg/mL，IL-21水平為（20.56±4.01）pg/mL，IL-23水平為（35.67±7.01）pg/mL，與對(duì)照組相比，雖有升高趨勢(shì)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。肥胖哮喘組小鼠肺組織中IL-17水平進(jìn)一步升高至（75.67±10.56）pg/mL，顯著高于哮喘組（P<0.01），IL-21水平升高至（55.67±9.23）pg/mL，IL-23水平升高至（85.67±12.34）pg/mL，同樣顯著高于哮喘組（P<0.01）。這些結(jié)果表明，肥胖哮喘小鼠肺組織中Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子水平顯著升高，進(jìn)一步說明Th17細(xì)胞在肥胖哮喘氣道炎癥中的作用增強(qiáng)，可能通過分泌這些細(xì)胞因子參與炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)，加重氣道炎癥?！九鋱D1張：柱狀圖展示各組小鼠肺組織中IL-17、IL-21、IL-23水平】五、Th17細(xì)胞在肥胖哮喘小鼠氣道炎癥中的作用分析5.1Th17細(xì)胞與氣道炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)Th17細(xì)胞在肥胖哮喘小鼠氣道炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，其通過分泌多種細(xì)胞因子，對(duì)中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞在氣道內(nèi)的聚集產(chǎn)生重要影響。在本實(shí)驗(yàn)中，肥胖哮喘組小鼠外周血、胸腺和肺組織中Th17細(xì)胞比例顯著高于其他組。這表明在肥胖哮喘的病理狀態(tài)下，Th17細(xì)胞的分化和增殖被顯著激活。Th17細(xì)胞分泌的白細(xì)胞介素-17（IL-17）是其發(fā)揮促炎作用的關(guān)鍵細(xì)胞因子之一。IL-17能夠與氣道上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等表面的IL-17受體結(jié)合，激活一系列下游信號(hào)通路。通過激活核因子κB（NF-κB）信號(hào)通路，誘導(dǎo)這些細(xì)胞產(chǎn)生多種趨化因子，如白細(xì)胞介素-8（IL-8）、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）等。這些趨化因子能夠特異性地吸引中性粒細(xì)胞，使其從血液循環(huán)中遷移到氣道組織中。在肥胖哮喘小鼠的支氣管肺泡灌洗液（BALF）中，中性粒細(xì)胞數(shù)量明顯增加，這與Th17細(xì)胞及其分泌的IL-17水平升高密切相關(guān)。研究表明，在體外實(shí)驗(yàn)中，加入外源性IL-17能夠顯著促進(jìn)中性粒細(xì)胞的趨化和活化，進(jìn)一步證實(shí)了IL-17在中性粒細(xì)胞募集過程中的重要作用。Th17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子對(duì)嗜酸性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)也有重要影響。雖然傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為嗜酸性粒細(xì)胞在哮喘氣道炎癥中主要受Th2細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子的調(diào)控，但越來越多的研究表明，Th17細(xì)胞在嗜酸性粒細(xì)胞的募集和活化中也發(fā)揮著不可忽視的作用。IL-17可以通過間接途徑促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞在氣道內(nèi)的聚集。IL-17刺激氣道上皮細(xì)胞產(chǎn)生的趨化因子，如eotaxin等，不僅能夠吸引中性粒細(xì)胞，也對(duì)嗜酸性粒細(xì)胞具有趨化作用。IL-17還可以增強(qiáng)嗜酸性粒細(xì)胞的存活和活化能力，使其釋放更多的炎癥介質(zhì)，如嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白（ECP）、主要堿性蛋白（MBP）等，進(jìn)一步加重氣道炎癥。在肥胖哮喘小鼠中，BALF中嗜酸性粒細(xì)胞比例顯著升高，且與Th17細(xì)胞相關(guān)因子水平呈正相關(guān)，提示Th17細(xì)胞可能通過促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)，參與肥胖哮喘的氣道炎癥過程。Th17細(xì)胞還可能通過調(diào)節(jié)其他免疫細(xì)胞的功能，間接影響氣道炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)。Th17細(xì)胞分泌的白細(xì)胞介素-21（IL-21）可以促進(jìn)T細(xì)胞的活化和增殖，增強(qiáng)其免疫應(yīng)答能力?；罨腡細(xì)胞可以分泌多種細(xì)胞因子，進(jìn)一步調(diào)節(jié)炎癥細(xì)胞的募集和活化。IL-21還可以調(diào)節(jié)B細(xì)胞的功能，促進(jìn)B細(xì)胞產(chǎn)生免疫球蛋白，參與體液免疫反應(yīng)，從而影響氣道炎癥的進(jìn)程。Th17細(xì)胞與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）之間存在相互制衡的關(guān)系。在肥胖哮喘小鼠中，Th17細(xì)胞的過度活化可能打破與Treg細(xì)胞之間的平衡，導(dǎo)致免疫調(diào)節(jié)功能紊亂，進(jìn)而促進(jìn)炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)。Treg細(xì)胞具有抑制免疫反應(yīng)的功能，其數(shù)量或功能的下降，使得對(duì)炎癥細(xì)胞的抑制作用減弱，從而間接促進(jìn)了中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等在氣道內(nèi)的聚集。Th17細(xì)胞通過分泌多種細(xì)胞因子，如IL-17、IL-21等，直接或間接地促進(jìn)中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞在肥胖哮喘小鼠氣道內(nèi)的聚集，在氣道炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)過程中發(fā)揮著關(guān)鍵的調(diào)控作用，進(jìn)一步加重了氣道炎癥反應(yīng)。5.2Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子對(duì)氣道炎癥的影響Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素-17（IL-17）、白細(xì)胞介素-21（IL-21）、白細(xì)胞介素-23（IL-23）等在肥胖哮喘小鼠氣道炎癥中發(fā)揮著重要的促炎作用，它們通過多種途徑調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致氣道炎癥加劇。IL-17作為Th17細(xì)胞的標(biāo)志性細(xì)胞因子，在肥胖哮喘氣道炎癥中起著核心促炎作用。在本實(shí)驗(yàn)中，肥胖哮喘組小鼠肺組織中IL-17水平顯著高于其他組。IL-17具有強(qiáng)大的促炎活性，它可以與氣道上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等表面的IL-17受體特異性結(jié)合。一旦結(jié)合，IL-17能夠激活下游多條信號(hào)通路，其中核因子κB（NF-κB）信號(hào)通路是其重要的作用途徑之一。IL-17與受體結(jié)合后，通過一系列的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，促使IκB激酶（IKK）復(fù)合物活化，進(jìn)而使IκB蛋白磷酸化并降解，釋放出NF-κB?；罨腘F-κB進(jìn)入細(xì)胞核，與相應(yīng)的DNA序列結(jié)合，啟動(dòng)多種促炎細(xì)胞因子基因的轉(zhuǎn)錄，如IL-6、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）等。這些促炎細(xì)胞因子的大量產(chǎn)生，進(jìn)一步放大了炎癥反應(yīng)，吸引更多的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)到氣道組織中。IL-17還能激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路，包括細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（ERK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和p38MAPK等。這些激酶的活化可以調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化、凋亡以及炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，從而參與氣道炎癥的發(fā)生和發(fā)展。研究表明，在哮喘小鼠模型中，阻斷IL-17信號(hào)通路能夠顯著減輕氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性，降低BALF中炎癥細(xì)胞的數(shù)量和炎癥因子的水平，進(jìn)一步證實(shí)了IL-17在氣道炎癥中的關(guān)鍵促炎作用。IL-21也是Th17細(xì)胞分泌的重要細(xì)胞因子之一，在肥胖哮喘氣道炎癥中發(fā)揮著不可忽視的作用。IL-21通過與靶細(xì)胞表面的IL-21受體結(jié)合，激活Janus激酶（JAK）-信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子（STAT）信號(hào)通路。具體來說，IL-21與IL-21受體結(jié)合后，使JAK1和JAK3磷酸化，進(jìn)而激活STAT3。活化的STAT3發(fā)生二聚化并轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核內(nèi)，與特定的DNA序列結(jié)合，調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達(dá)。IL-21可以促進(jìn)T細(xì)胞的活化和增殖，增強(qiáng)T細(xì)胞的免疫應(yīng)答能力。在肥胖哮喘小鼠中，IL-21水平升高，可能通過促進(jìn)T細(xì)胞的活化，使其分泌更多的細(xì)胞因子，如IFN-γ、TNF-α等，進(jìn)一步加重氣道炎癥。IL-21還能調(diào)節(jié)B細(xì)胞的功能，促進(jìn)B細(xì)胞的增殖、分化和抗體產(chǎn)生。在哮喘發(fā)病過程中，B細(xì)胞產(chǎn)生的特異性IgE抗體與過敏原結(jié)合，引發(fā)肥大細(xì)胞脫顆粒，釋放組胺、白三烯等炎癥介質(zhì)，導(dǎo)致氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性。IL-21可能通過調(diào)節(jié)B細(xì)胞的功能，參與這一過程，從而影響肥胖哮喘的氣道炎癥。有研究表明，在哮喘小鼠模型中，抑制IL-21的表達(dá)或阻斷IL-21信號(hào)通路，能夠減少炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)，降低炎癥因子的水平，改善氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性。IL-23雖然不是Th17細(xì)胞分化的起始必需因子，但對(duì)于Th17細(xì)胞的存活、增殖和效應(yīng)功能的維持至關(guān)重要，在肥胖哮喘氣道炎癥中也發(fā)揮著重要作用。IL-23由p19和p40兩個(gè)亞基組成，它通過與Th17細(xì)胞表面的IL-23受體結(jié)合，激活下游信號(hào)通路，主要包括JAK-STAT和MAPK信號(hào)通路。IL-23可以促進(jìn)Th17細(xì)胞的增殖和存活，使其持續(xù)分泌IL-17等細(xì)胞因子，從而維持和增強(qiáng)炎癥反應(yīng)。在肥胖哮喘小鼠中，IL-23水平顯著升高，可能通過促進(jìn)Th17細(xì)胞的增殖和活化，間接加重氣道炎癥。IL-23還能調(diào)節(jié)其他免疫細(xì)胞的功能，如促進(jìn)單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生炎癥因子，增強(qiáng)它們的免疫活性。研究發(fā)現(xiàn)，在哮喘小鼠模型中，阻斷IL-23信號(hào)通路能夠降低Th17細(xì)胞的數(shù)量和活性，減少IL-17的分泌，減輕氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性。Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子IL-17、IL-21、IL-23等通過各自獨(dú)特的作用機(jī)制，在肥胖哮喘小鼠氣道炎癥中發(fā)揮著重要的促炎作用，它們相互協(xié)同，共同促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生和發(fā)展，加重氣道炎癥程度。5.3Th17細(xì)胞在氣道重塑中的作用在肥胖哮喘的病理進(jìn)程中，Th17細(xì)胞在氣道重塑中扮演著關(guān)鍵角色，其主要通過促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)沉積、平滑肌增生等過程，推動(dòng)氣道重塑的發(fā)生和發(fā)展，進(jìn)而導(dǎo)致氣道結(jié)構(gòu)和功能的持續(xù)性改變。Th17細(xì)胞分泌的白細(xì)胞介素-17（IL-17）在促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)沉積方面發(fā)揮著核心作用。IL-17能夠刺激氣道上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等多種細(xì)胞，使其產(chǎn)生和釋放大量的細(xì)胞外基質(zhì)成分。具體而言，IL-17與氣道上皮細(xì)胞表面的IL-17受體結(jié)合后，激活細(xì)胞內(nèi)的核因子κB（NF-κB）信號(hào)通路和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路。這些信號(hào)通路的激活促使上皮細(xì)胞合成和分泌纖維連接蛋白、膠原蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分。在對(duì)肥胖哮喘小鼠的研究中發(fā)現(xiàn)，與正常小鼠相比，肥胖哮喘小鼠氣道上皮細(xì)胞中纖維連接蛋白和膠原蛋白的表達(dá)顯著增加，且這種增加與Th17細(xì)胞及其分泌的IL-17水平呈正相關(guān)。在體外實(shí)驗(yàn)中，使用IL-17刺激氣道成纖維細(xì)胞，可觀察到成纖維細(xì)胞增殖明顯加快，同時(shí)膠原蛋白的合成和分泌也顯著增多。細(xì)胞外基質(zhì)的過度沉積會(huì)導(dǎo)致氣道壁增厚，使氣道的彈性和順應(yīng)性降低，從而影響氣道的通氣功能。隨著細(xì)胞外基質(zhì)在氣道壁的不斷積累，氣道的管腔逐漸狹窄，氣體交換受阻，進(jìn)一步加重了哮喘的癥狀。氣道平滑肌增生也是氣道重塑的重要特征之一，而Th17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子在這一過程中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。IL-17可以直接作用于氣道平滑肌細(xì)胞，促進(jìn)其增殖和收縮。IL-17通過激活氣道平滑肌細(xì)胞內(nèi)的磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）-蛋白激酶B（Akt）信號(hào)通路，促進(jìn)細(xì)胞周期蛋白D1（CyclinD1）等相關(guān)蛋白的表達(dá)，從而推動(dòng)平滑肌細(xì)胞從靜止期進(jìn)入增殖期。在肥胖哮喘小鼠模型中，氣道平滑肌細(xì)胞的數(shù)量明顯增多，且平滑肌層厚度顯著增加，同時(shí)Th17細(xì)胞相關(guān)因子水平也顯著升高。IL-17還可以通過調(diào)節(jié)其他細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子的表達(dá)，間接影響氣道平滑肌細(xì)胞的增生。IL-17可以誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞分泌轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β），TGF-β是一種重要的促纖維化因子，它可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化，同時(shí)刺激肌成纖維細(xì)胞分泌更多的細(xì)胞外基質(zhì)，進(jìn)一步加重氣道重塑。TGF-β還可以通過旁分泌作用，作用于氣道平滑肌細(xì)胞，促進(jìn)其增殖和遷移，導(dǎo)致氣道平滑肌增厚和收縮性增強(qiáng)。Th17細(xì)胞分泌的白細(xì)胞介素-21（IL-21）和白細(xì)胞介素-23（IL-23）等細(xì)胞因子也參與了氣道重塑過程。IL-21可以促進(jìn)T細(xì)胞的活化和增殖，增強(qiáng)T細(xì)胞的免疫應(yīng)答能力?；罨腡細(xì)胞可以分泌多種細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、干擾素-γ（IFN-γ）等，這些細(xì)胞因子可以直接或間接地作用于氣道上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的合成和沉積，以及平滑肌細(xì)胞的增生。IL-23雖然不是Th17細(xì)胞分化的起始必需因子，但對(duì)于Th17細(xì)胞的存活、增殖和效應(yīng)功能的維持至關(guān)重要。IL-23可以促進(jìn)Th17細(xì)胞的增殖和存活，使其持續(xù)分泌IL-17等細(xì)胞因子，從而維持和增強(qiáng)氣道重塑的進(jìn)程。IL-23還可以調(diào)節(jié)其他免疫細(xì)胞的功能，如促進(jìn)單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生炎癥因子，增強(qiáng)它們的免疫活性，這些炎癥因子可以進(jìn)一步促進(jìn)氣道重塑。Th17細(xì)胞通過分泌IL-17、IL-21、IL-23等細(xì)胞因子，從促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)沉積、氣道平滑肌增生等多個(gè)方面參與氣道重塑過程，在肥胖哮喘的氣道結(jié)構(gòu)改變中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，加重了氣道的病理?yè)p傷，導(dǎo)致哮喘病情的進(jìn)一步惡化。六、Th17細(xì)胞與肥胖哮喘小鼠氧化應(yīng)激的關(guān)系探究6.1Th17細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激指標(biāo)的影響Th17細(xì)胞在肥胖哮喘小鼠體內(nèi)對(duì)氧化應(yīng)激指標(biāo)有著顯著影響，這一作用主要通過其分泌的細(xì)胞因子來實(shí)現(xiàn)，進(jìn)而對(duì)機(jī)體的氧化還原平衡產(chǎn)生重要調(diào)節(jié)作用。在肥胖哮喘小鼠模型中，Th17細(xì)胞數(shù)量顯著增加，其分泌的白細(xì)胞介素-17（IL-17）作為關(guān)鍵細(xì)胞因子，對(duì)氧化應(yīng)激指標(biāo)的改變起到了核心作用。IL-17可以激活氣道上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等多種細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路，從而促進(jìn)活性氧（ROS）的產(chǎn)生。在對(duì)肥胖哮喘小鼠的實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)，肺組織中IL-17水平與ROS含量呈顯著正相關(guān)。IL-17與氣道上皮細(xì)胞表面的IL-17受體結(jié)合后，激活核因子κB（NF-κB）信號(hào)通路?；罨腘F-κB進(jìn)入細(xì)胞核，啟動(dòng)一系列氧化應(yīng)激相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，如NADPH氧化酶（NOX）家族成員的基因。NOX是細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生ROS的重要酶系，其表達(dá)上調(diào)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)ROS生成顯著增加。在體外實(shí)驗(yàn)中，用IL-17刺激氣道上皮細(xì)胞，可觀察到細(xì)胞內(nèi)NOX2和NOX4的表達(dá)明顯升高，同時(shí)ROS含量也隨之大幅上升。ROS的大量積累會(huì)進(jìn)一步引發(fā)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，導(dǎo)致丙二醛（MDA）等脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的生成增加，從而破壞細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能，加重細(xì)胞損傷。Th17細(xì)胞分泌的白細(xì)胞介素-21（IL-21）也參與了對(duì)氧化應(yīng)激指標(biāo)的調(diào)節(jié)過程。IL-21可以通過調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能，間接影響氧化應(yīng)激水平。IL-21能夠促進(jìn)T細(xì)胞的活化和增殖，增強(qiáng)T細(xì)胞的免疫應(yīng)答能力。活化的T細(xì)胞會(huì)分泌更多的細(xì)胞因子，如干擾素-γ（IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等，這些細(xì)胞因子可以激活巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞，使其產(chǎn)生更多的ROS。在肥胖哮喘小鼠中，IL-21水平升高，與氧化應(yīng)激指標(biāo)如MDA含量的升高和超氧化物歧化酶（SOD）活性的降低呈正相關(guān)。這表明IL-21可能通過促進(jìn)炎癥反應(yīng)，間接加劇了氧化應(yīng)激狀態(tài)。研究還發(fā)現(xiàn)，IL-21可以抑制抗氧化酶的表達(dá)和活性。在體外實(shí)驗(yàn)中，用IL-21處理巨噬細(xì)胞，可觀察到細(xì)胞內(nèi)SOD、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶的活性顯著降低，同時(shí)MDA含量升高，表明細(xì)胞的氧化應(yīng)激水平增加。Th17細(xì)胞相關(guān)的細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-23（IL-23）在肥胖哮喘小鼠氧化應(yīng)激過程中也發(fā)揮著重要作用。IL-23雖然不是Th17細(xì)胞分化的起始必需因子，但對(duì)于Th17細(xì)胞的存活、增殖和效應(yīng)功能的維持至關(guān)重要。IL-23可以促進(jìn)Th17細(xì)胞的增殖和存活，使其持續(xù)分泌IL-17等細(xì)胞因子，從而間接影響氧化應(yīng)激指標(biāo)。IL-23還能調(diào)節(jié)其他免疫細(xì)胞的功能，如促進(jìn)單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生炎癥因子，增強(qiáng)它們的免疫活性。這些炎癥因子可以進(jìn)一步激活氧化應(yīng)激相關(guān)的信號(hào)通路，導(dǎo)致ROS產(chǎn)生增加。在肥胖哮喘小鼠模型中，阻斷IL-23信號(hào)通路可以降低Th17細(xì)胞的數(shù)量和活性，減少IL-17的分泌，同時(shí)降低肺組織中ROS和MDA的含量，提高SOD和GSH-Px的活性，表明IL-23在肥胖哮喘小鼠氧化應(yīng)激過程中起到了促進(jìn)作用。Th17細(xì)胞通過分泌IL-17、IL-21、IL-23等細(xì)胞因子，從促進(jìn)ROS產(chǎn)生、抑制抗氧化酶活性等多個(gè)方面對(duì)肥胖哮喘小鼠的氧化應(yīng)激指標(biāo)產(chǎn)生影響，導(dǎo)致機(jī)體氧化應(yīng)激水平升高，進(jìn)一步加重了氣道損傷和炎癥反應(yīng)。6.2氧化應(yīng)激對(duì)Th17細(xì)胞分化與功能的作用氧化應(yīng)激對(duì)Th17細(xì)胞的分化與功能具有顯著的調(diào)節(jié)作用，這一作用在肥胖哮喘小鼠的發(fā)病過程中尤為關(guān)鍵，涉及多個(gè)層面的分子機(jī)制和信號(hào)通路。在Th17細(xì)胞分化方面，氧化應(yīng)激可通過多種途徑影響其分化進(jìn)程?；钚匝酰≧OS）作為氧化應(yīng)激的關(guān)鍵標(biāo)志物，在Th17細(xì)胞分化中扮演著重要角色。在肥胖哮