試驗(yàn)步驟1.預(yù)備試驗(yàn)?zāi)康?(1)確定正式試驗(yàn)的濃度范圍；（2）初步觀察魚的中毒表現(xiàn)和選擇觀察指標(biāo)；（3）檢驗(yàn)規(guī)定的試驗(yàn)條件是否合適。5尾/濃度找出最高的全存活濃度和最低的全死亡濃度濃度范圍要大些，如1000、100、10、1、0.lmg/L

2.試驗(yàn)濃度的選擇根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)選擇出的濃度范圍，中間按等比級(jí)數(shù)或等對(duì)數(shù)間距插入3～5個(gè)中間濃度。濃度的單位：mg/L、百分比每個(gè)濃度做3個(gè)平行CKCK死亡率小于10%時(shí)，實(shí)驗(yàn)才被承認(rèn)。3.試驗(yàn)液的配制方法母液丙酮、吐溫溶劑CK:助溶劑含量應(yīng)為試驗(yàn)組使用助溶劑的最高濃度，且不得超過

100mg/L或0.1mL/L

濃度間隔系數(shù)≦2.24.正式試驗(yàn)1.07.510.05.63.2CK

低高試驗(yàn)開始后的3h、6h觀察記錄中毒癥狀在24h、48h、72h和96h記錄死亡魚數(shù)5.極限試驗(yàn)

可以進(jìn)行濃度為100mg/L的極限試驗(yàn)。如極限試驗(yàn)結(jié)果表明LC50>100mg/L，可直接給出試驗(yàn)結(jié)果及評(píng)價(jià)：LC50>100mg/L，屬于低毒。

試驗(yàn)方法試驗(yàn)魚選擇、收集和馴養(yǎng)試驗(yàn)條件一、試驗(yàn)方法（1）靜水式試驗(yàn)（2）更新式靜水試驗(yàn)（換水試驗(yàn)）（3）流水式試驗(yàn)（4）現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)項(xiàng)目八魚類急性毒性試驗(yàn)項(xiàng)目八

魚類急性毒性試驗(yàn)二、試驗(yàn)魚選擇、收集和馴養(yǎng)（1）當(dāng)?shù)厮w中生活的種類；（2）對(duì)污染物比較敏感；（3）能在實(shí)驗(yàn)條件下飼養(yǎng)，來源豐富，個(gè)體健康。常用的魚：青魚、草魚、鰱魚、鳙魚，金魚1.試驗(yàn)魚的選擇

2.實(shí)驗(yàn)魚的大小和數(shù)目要求：同批、同種、同齡大小一致，在7厘米以下（金魚3厘米）數(shù)目：每濃度組7-10尾1升水/g魚3.實(shí)驗(yàn)魚的馴養(yǎng)馴養(yǎng)7天魚的死亡率<10%2～3升水/g魚暫養(yǎng)12天三、試驗(yàn)條件1.試驗(yàn)容器和容積容器：玻璃或陶瓷大小按2～3升水/g魚容器高度：30～35cm試驗(yàn)液的深度應(yīng)盡可能保持一致，且不能小于15cm例如：直徑25～35cm，高30～50cm的圓玻璃缸長31cm，寬24cm，高35cm的標(biāo)本缸容積30升以上的大白瓷桶2.DO：不能低于4mg/L3.水溫：21～25℃

4.光照:12～16h5.試驗(yàn)用水:未污染的自然的河水或湖水，需過濾去懸浮物，或用標(biāo)準(zhǔn)稀釋水。如用自來水，要暴氣。水的硬度:19～250mg/L(以CaCO3計(jì))；pH：6.0～8.5魚類急性毒性試驗(yàn)結(jié)果的應(yīng)用(一)安全濃度的推導(dǎo)

安全濃度:就是在污染物的持續(xù)作用下，魚類可以正常存活、生長、繁殖的最高毒物濃度

在全生活周期的慢性毒性試驗(yàn)中對(duì)生物不產(chǎn)生影響的濃度。

安全濃度=

安全濃度=

安全濃度=96LC50×（0.1～0.01）

(二)實(shí)際應(yīng)用

推算出廢水的允許排放量和排放速率

作為廢水處理效果的鑒定指標(biāo)

可以利用魚類毒性試驗(yàn)作為指標(biāo)，檢查地面水源是否已受污染

作為判定水質(zhì)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的一項(xiàng)指標(biāo)

找出水體污染的主要污染源和主要污染物

測(cè)定和評(píng)價(jià)化學(xué)物質(zhì)和工業(yè)廢水的毒性

測(cè)定不同種類的水生生物對(duì)某一化學(xué)物質(zhì)的相對(duì)敏感性

測(cè)定幾種化學(xué)物質(zhì)對(duì)某一種所試生物的相對(duì)毒性

確定環(huán)境因子（如DO、pH、水溫、硬度等）對(duì)水生生物是否適宜，以及他們對(duì)化學(xué)物質(zhì)毒性的影響為制定水質(zhì)基準(zhǔn)提供科學(xué)依據(jù)

數(shù)據(jù)處理與報(bào)告1.LC50計(jì)算對(duì)數(shù)濃度（1）直線內(nèi)插法（1）直線內(nèi)插法1020304050607080901001065432廢水百分率濃度（對(duì)數(shù)尺度）24h死亡率LC50＝5.2%96h死亡率LC50＝4.4%試驗(yàn)魚死亡百分?jǐn)?shù)（2）概率單位目測(cè)法a.將濃度換算成對(duì)數(shù)濃度，死亡率換算成概率單位，死亡率為100%和0時(shí)不列入計(jì)算b.依據(jù)上述資料繪制點(diǎn)圖，縱軸為概率單位，橫軸為濃度對(duì)數(shù)c.順著各點(diǎn)的分布趨勢(shì)用直尺作出一條最接近各點(diǎn)的直線d.從縱軸概率單位為“5”處引一條水平線與直線相交，再從交點(diǎn)做垂線與橫軸相交，即可LC50的對(duì)數(shù)值，此值的反對(duì)數(shù)就是LC50(3)直線回歸法

y＝a+bx

x--濃度的對(duì)數(shù);y--死亡率轉(zhuǎn)換成的概率單位

K--濃度的組數(shù)（死亡率為0和100%的濃度不計(jì)在內(nèi)）

y=－1.6901+10.5607x50%死亡率的概率單位y=5,代入上式得：x＝0.6335

LC50＝4.30LC50的95%可信限=1g-1（x±×1.96）S=N--供試的動(dòng)物總數(shù)（死亡率為0和100%的組不計(jì)在內(nèi)）

2.結(jié)果評(píng)價(jià)

96hLC50（mg/