標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 28062-2025 柑橘黃龍病菌實時熒光定量PCR檢測技術(shù)規(guī)程》與《GB/T 28062-2011 柑桔黃龍病菌實時熒光PCR檢測方法》相比，在多個方面進(jìn)行了更新和改進(jìn)，以適應(yīng)最新的科研成果和技術(shù)發(fā)展。具體變更內(nèi)容包括但不限于：

  1. 術(shù)語定義的更新：新標(biāo)準(zhǔn)可能對部分專業(yè)術(shù)語或定義進(jìn)行了修訂，以確保其更加準(zhǔn)確地反映當(dāng)前科學(xué)研究中的共識。

  2. 樣品處理流程優(yōu)化：在樣品采集、保存以及DNA提取等環(huán)節(jié)上，根據(jù)近年來實驗操作經(jīng)驗積累及技術(shù)進(jìn)步，2025版標(biāo)準(zhǔn)可能會提出更為高效簡便的方法或建議使用特定類型的試劑盒來提高DNA純度和產(chǎn)量。

  3. 引物探針設(shè)計調(diào)整：隨著基因組學(xué)研究深入，對于柑橘黃龍病菌特異性序列的認(rèn)識也更加清晰，因此新版本中所推薦使用的引物探針組合可能有所變化，旨在增強檢測靈敏度和特異性。

  4. 反應(yīng)條件細(xì)化：針對不同品牌型號的PCR儀器，2025版標(biāo)準(zhǔn)或許會提供更詳細(xì)的溫度循環(huán)參數(shù)設(shè)置指南，幫助實驗室更好地控制實驗條件，保證結(jié)果的一致性和可重復(fù)性。

  5. 數(shù)據(jù)分析方法改進(jìn)：除了傳統(tǒng)的Ct值分析外，新版標(biāo)準(zhǔn)還可能引入了更多先進(jìn)的數(shù)據(jù)處理軟件工具，并給出相應(yīng)的指導(dǎo)原則，以便于研究人員能夠更準(zhǔn)確地解讀實驗結(jié)果。

  6. 質(zhì)量控制要求加強：為了進(jìn)一步提升檢測工作的可靠性，新標(biāo)準(zhǔn)增加了關(guān)于內(nèi)部對照、陽性對照、陰性對照等方面的嚴(yán)格規(guī)定，同時強調(diào)了定期進(jìn)行性能驗證的重要性。

  7. 安全防護(hù)措施完善：考慮到生物安全問題日益受到重視，2025版標(biāo)準(zhǔn)中很可能加入了更多關(guān)于個人防護(hù)裝備佩戴、廢棄物處置等方面的具體要求。


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....

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  • 即將實施
  • 暫未開始實施
  • 2025-05-30 頒布
  • 2025-12-01 實施
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文檔簡介

ICS6502001

CCSB.16.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T28062—2025

代替GB/T28062—2011

柑橘黃龍病菌實時熒光定量PCR檢測

技術(shù)規(guī)程

CodeofpracticefordetectionofCandidatusLiberibacterasiaticus

byquantitativereal-timePCR

2025-05-30發(fā)布2025-12-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T28062—2025

前言

本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件代替柑桔黃龍病菌實時熒光檢測方法與

GB/T28062—2011《PCR》,GB/T28062—2011

相比除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動外主要技術(shù)變化如下

,,:

更改了黃龍病樣本的取樣方法見年版的

———(9.1,20118.2);

更改了陽性對照的值規(guī)定見年版的

———Ct(11.3.2,201110.2.2);

將韌皮部桿菌亞洲種的熒光染料法檢測引物更改成特異性更高的

———CQULasF04/CQULasR04

CLas-4G/HLBr(5'-AGTCGAGCGCGTATGCGAAT-3'/5'-GCGTTATCCCGTAGAAAAA

并增加了熒光標(biāo)記探針序列為

GGTAG-3'),HLBp(5'-AGACGGGTGAGTAACGCG-3')

見年版的

(10.1,2011F.1.1);

增加了靶標(biāo)韌皮部桿菌亞洲種核苷酸還原酶基因nrdB基因的實時熒光檢測

———β()PCR

見

(11.3.3)。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任

。。

本文件由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本文件起草單位全國農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心華南農(nóng)業(yè)大學(xué)西南大學(xué)柑桔研究所

:、、。

本文件主要起草人馮曉東陳冉冉鄧曉玲鄭正王雪峰周常勇

:、、、、、。

本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為

:

年首次發(fā)布為

———2011GB/T28062—2011;

本次為第一次修訂

———。

Ⅰ

GB/T28062—2025

柑橘黃龍病菌實時熒光定量PCR檢測

技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件確立了柑橘黃龍病病原韌皮部桿菌亞洲種Candidatus實時熒光定

(Liberibacterasiaticus)

量檢測程序規(guī)定了實驗室設(shè)置樣品采集與處理檢測操作方法和結(jié)果判定描述了證實方法

PCR,、、,。

本文件適用于對黃龍病寄主植物和傳病媒介柑橘木虱中韌皮部桿菌亞洲種的實時熒光定量

PCR

檢測和病害鑒定

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

柑桔苗木產(chǎn)地檢疫規(guī)程

GB5040

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

柑橘黃龍病CitrusHuanglongbing

由韌皮部桿菌Candidatus引起的植物檢疫性病害對柑橘生產(chǎn)造成巨大損失

Liberibacterspp.,。

注韌皮部桿菌屬原核生物α變形菌綱根瘤菌目根瘤菌科韌皮部桿菌屬

:、-、(Rhizobiales)、(Rhizobiaceae),

是一種難培養(yǎng)革蘭氏陰性細(xì)菌分為個種分布于亞洲非洲及美洲的韌皮部桿菌亞洲種Candi-

Liberibacter,,3:、

datus分布于非洲的韌皮部桿菌非洲種Candidatus以及分布于南

Liberibacterasiaticus;Liberibacterafricanus

美洲的韌皮部桿菌美洲種Candidatus

Liberibacteramericanus。

32

.

實時熒光定量PCRquantitativereal-timePCR

在體外擴(kuò)增微量片段的方法在擴(kuò)增過程中由于熒光物質(zhì)的釋放或熒光物質(zhì)與擴(kuò)增產(chǎn)物結(jié)

DNA,

合而釋放熒光信號通過對熒光信號積累的實時監(jiān)測來實現(xiàn)對起始模板中的靶標(biāo)的定量分析

,DNA。

33

.

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