基因工程測試題與答案（附解析）一、單選題（共70題，每題1分，共70分）1.PCR變性溫度一般是：A、95℃B、85℃C、72℃D、65℃E、55℃正確答案：A答案解析：PCR變性溫度一般要大于95℃，這樣才能使雙鏈DNA充分解鏈為單鏈，以便后續(xù)引物與模板結合進行擴增反應。2.對照密碼表，當用UUGUGUGGU一段共聚核苷酸為模板時，所合成的多肽鏈是：A、Phe-Leu-ValB、Val-Cys-GlyC、Leu-Val-CysD、Leu-Cys-Gly正確答案：D3.Klenow酶與DNA聚合酶相比，前者喪失了下面哪種酶的活性？A、5′→3′合成酶B、3′→5′外切酶C、5′→3′外切酶D、轉移酶正確答案：C答案解析：Klenow酶是DNA聚合酶I大片段，DNA聚合酶I具有5′→3′聚合酶活性、3′→5′外切酶活性和5′→3′外切酶活性，Klenow酶是DNA聚合酶I經(jīng)枯草桿菌蛋白酶切割后產(chǎn)生的大片段，它保留了5′→3′聚合酶活性和3′→5′外切酶活性，但喪失了5′→3′外切酶活性。4.不是所有松弛型質粒都需要進行擴增，如pUC載體系統(tǒng)就不必進行氯霉素擴增，這是因為該質粒的拷貝數(shù)很高，可以達到：A、30～50B、100～200C、300～400D、500～700正確答案：D5.DNA被某種酶切割后，電泳得到電泳帶有些擴散，下列原因那一項不太可能？A、酶失活B、蛋白質（如BSA）同DNA結合C、酶切條件不合適D、酶切反應時酶濃度過低正確答案：A6.基因工程菌中重組質粒的丟失機制是：A、重組質粒滲透至細胞外B、重組質粒被細胞內核酸酶降解C、重組質粒在細胞分裂時不均勻分配D、重組質粒殺死受體細胞正確答案：C答案解析：重組質粒在細胞分裂時不均勻分配會導致部分子代細胞中不含有重組質粒，從而造成重組質粒的丟失。選項A中重組質粒一般不會輕易滲透至細胞外；選項B中如果被細胞內核酸酶降解那就不是丟失而是被破壞了；選項D重組質粒通常不會殺死受體細胞，所以ABD均不符合。7.為了使人類有經(jīng)濟價值的基因在大腸桿菌中高效表達，有時可以采用同步克隆表達受體菌tRNA基因的方法，其機理是：A、增強基因的轉錄B、糾正受體菌密碼子的偏愛性C、啟動mRNA的翻譯D、穩(wěn)定mRNA在核糖體上的定位正確答案：B答案解析：在大腸桿菌中，其對密碼子存在偏愛性，這可能導致某些人類基因在其中表達時出現(xiàn)問題。同步克隆表達受體菌tRNA基因，可以補充受體菌中某些稀有tRNA，糾正受體菌密碼子的偏愛性，從而使人類有經(jīng)濟價值的基因在大腸桿菌中高效表達。A選項增強基因轉錄不是該方法的主要機理；C選項啟動mRNA翻譯不是其目的；D選項穩(wěn)定mRNA在核糖體上的定位也不是采用該方法的原因。8.PCR的循環(huán)次數(shù)一般為：A、5～10次B、10～15次C、15～20次D、18～20次E、25～30次正確答案：E答案解析：PCR循環(huán)次數(shù)一般在25～30次左右。太少則擴增產(chǎn)物量不足，太多會導致非特異性產(chǎn)物增加等問題，所以通常循環(huán)次數(shù)在25～30次。9.下列哪種克隆載體對外源DNA的容載量最大?A、質粒B、黏粒C、酵母人工染色體(YAC)D、λ噬菌體正確答案：C答案解析：酵母人工染色體（YAC）是一種能夠克隆長達幾百kb的外源DNA片段的克隆載體，其對外源DNA的容載量在這些選項中是最大的。質粒一般容載量較??；黏粒的容載量比YAC小；λ噬菌體的容載量也相對有限。10.cDNA是指：A、在體外經(jīng)反轉錄合成的與RNA互補的DNAB、在體外經(jīng)反轉錄合成的與DNA互補的DNAC、在體外經(jīng)轉錄合成的與DNA互補的RNAD、在體外經(jīng)反轉錄合成的與RNA互補的RNAE、在體外經(jīng)反轉錄合成的與DNA互補的RNA正確答案：A答案解析：反轉錄是以RNA為模板合成DNA的過程，cDNA就是在體外經(jīng)反轉錄合成的與RNA互補的DNA。B選項與DNA互補合成的DNA錯誤；C選項轉錄合成的是RNA且與DNA互補錯誤；D選項合成的是DNA不是RNA錯誤；E選項與DNA互補錯誤。11.PCR的特點不包括：A、時間短，只需數(shù)小時B、擴增產(chǎn)物量大C、只需微量模板D、用途非常廣泛E、底物必須標記正確答案：E答案解析：PCR技術具有時間短（只需數(shù)小時）、擴增產(chǎn)物量大、只需微量模板、用途非常廣泛等特點。而底物標記并不是PCR技術的特點。12.cDNA文庫包括該種生物的：A、某些蛋白質的結構基因B、所有基因組C、結構基因與不表達的調控區(qū)D、內含子和調節(jié)區(qū)E、內含子和外顯子正確答案：A答案解析：cDNA文庫是由mRNA反轉錄形成的DNA文庫，其中只包含該種生物的某些蛋白質的結構基因，不包含基因組中的所有基因，也不包含不表達的調控區(qū)、內含子等?；蚪M文庫包含該種生物的所有基因，包括結構基因與不表達的調控區(qū)、內含子和外顯子等。13.PCR反應過程中，引物延伸所需溫度一般是：A、95℃B、82℃C、72℃D、62℃E、55℃正確答案：C答案解析：引物延伸溫度一般為72℃左右，在該溫度下，DNA聚合酶具有較高的活性，能夠以引物為起始點，沿著模板鏈合成新的DNA鏈。14.PCR退火溫度一般是：A、95℃B、85℃C、72℃D、65℃E、55℃正確答案：E答案解析：PCR退火溫度一般在55℃-65℃之間，所以大于55℃符合要求，其他選項溫度過高不符合退火溫度范圍。15.轉化常指：A、噬菌體感染B、基因轉位C、攝取外來DNA，引起細胞生物學類型的改變D、產(chǎn)生點突變E、產(chǎn)生移碼突變正確答案：C答案解析：轉化是指受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段并整合到自己的基因組中，從而獲得供體菌部分遺傳性狀的過程，可引起細胞生物學類型的改變，符合選項C的描述。選項A噬菌體感染不是轉化；選項B基因轉位與轉化概念不同；選項D產(chǎn)生點突變和選項E產(chǎn)生移碼突變與轉化的定義不符。16.用于基因治療較為理想的載體是：A、質粒B、噬菌體C、經(jīng)改造的逆轉錄病毒D、人類DNAE、酵母質粒正確答案：C答案解析：用于基因治療較為理想的載體需要滿足一些條件，如能夠高效地將目的基因導入細胞、相對安全、能夠穩(wěn)定整合到宿主基因組等。經(jīng)改造的逆轉錄病毒可以將外源基因整合到宿主細胞基因組中，實現(xiàn)長期穩(wěn)定的表達，并且具有較高的轉導效率，所以是較為理想的基因治療載體。質粒相對簡單，攜帶基因容量有限；噬菌體有一定局限性；人類DNA不符合載體要求；酵母質粒在基因治療中的應用不如經(jīng)改造的逆轉錄病毒廣泛。17.多克隆位點：A、含有許多拷貝的克隆化基因B、使得對克隆所用的限制酶的選擇具有靈活性C、含有許多拷貝的同一種限制酶位點D、使得對克隆所用的生物種類的選擇具有靈活性正確答案：B答案解析：多克隆位點是指載體上人工合成的含有多種限制酶識別序列的一段DNA序列，它可以被多種限制酶識別和切割，從而使得對克隆所用的限制酶的選擇具有靈活性。多克隆位點并不含有許多拷貝的克隆化基因，也不是含有許多拷貝的同一種限制酶位點，它主要是關于限制酶切割位點的設置以方便不同基因的克隆，而不是對克隆所用生物種類的選擇具有靈活性。18.用免疫化學法篩選重組體的原理是：A、根據(jù)外源基因的表達B、根據(jù)載體基因的表達C、根據(jù)mRNA同DNA的雜交D、根據(jù)DNA同DNA的雜交正確答案：A19.1996年，英國科學家克隆的Dolly羊所采用的技術是：A、轉基因技術B、核轉移技術C、基因剔除技術D、肽核酸技術E、反義核酸技術正確答案：B答案解析：克隆Dolly羊所采用的技術是核轉移技術。具體過程是將乳腺細胞的細胞核移植到去核的卵細胞中，再經(jīng)過一系列培養(yǎng)和發(fā)育過程，最終成功克隆出Dolly羊。20.用于標記核酸探針的放射性同位素沒有：A、32PB、125IC、3HD、35S正確答案：D答案解析：放射性同位素標記核酸探針常用的有32P、12?I、3H等，3?S一般用于蛋白質的標記，而非核酸探針的放射性同位素標記。21.Southern印跡的DNA探針雜交：A、只與序列完全相同的RNA片段B、可與任何含有相同序列的DNA片段C、可與任何含有互補序列的DNA片段D、可與用某些限制性核酸內切酶切DNA片段E、只與含有互補序列RNA片段正確答案：C答案解析：Southern印跡的DNA探針雜交原理是利用核酸分子堿基互補配對原則，探針可與任何含有互補序列的DNA片段進行雜交。22.不經(jīng)電泳分離直接將樣品點在硝酸纖維素膜上的技術是：A、Eastern雜交B、Northern雜交C、Western雜交D、斑點雜交正確答案：D答案解析：斑點雜交是將樣品直接點在硝酸纖維素膜上，而不是先進行電泳分離，然后再進行雜交檢測等后續(xù)操作，符合不經(jīng)電泳分離直接點樣的特點。Eastern雜交主要用于檢測蛋白質與蛋白質相互作用等；Northern雜交是用于檢測RNA；Western雜交是用于檢測蛋白質，這幾種雜交技術通常都需要先進行電泳分離等操作。23.天然PstI限制性內切酶的來源是：A、BacillusamyloliquefaciensB、EscherichiacoliC、HaemophilusInfluenzaeD、Provisenciastuartii正確答案：D答案解析：天然PstI限制性內切酶來源于普羅威登斯菌（Provisenciastuartii）。選項A中Bacillusamyloliquefaciens是嗜淀粉芽孢桿菌；選項B中Escherichiacoli是大腸桿菌；選項C中HaemophilusInfluenzae是流感嗜血桿菌，均不符合。24.用于自動化PCR儀的DNA聚合酶必須：A、耐熱B、耐高壓C、耐酸D、耐堿E、耐低溫正確答案：A答案解析：DNA聚合酶用于自動化PCR儀，需要在高溫環(huán)境下工作，所以必須耐熱，以保證在PCR循環(huán)過程中能持續(xù)發(fā)揮作用而不被高溫破壞。25.基因組代表一個細胞或生物的：A、非轉錄基因B、可轉錄基因C、整套遺傳信息D、部分遺傳信息E、可表達基因正確答案：C答案解析：基因組是指細胞或生物體中一套完整的遺傳信息，包含了該生物的全部基因，涵蓋了可轉錄基因和非轉錄基因等，代表的是整套遺傳信息，而不是部分遺傳信息、僅僅可轉錄基因、非轉錄基因或可表達基因。26.哪一個載體適用于150kbDNA片段的克隆？A、質粒B、λ載體C、BACD、YAC正確答案：C27.正常出現(xiàn)肽鏈終止是因為：A、一個與鏈終止三聯(lián)體相應tRNA不能帶氨基酸B、不具有與鏈終止三聯(lián)體相應的反tRNAC、mRNA在鏈終止三聯(lián)體處停止合成D、以上均不正確正確答案：B答案解析：終止密碼子沒有相應的tRNA能夠攜帶氨基酸與之對應，當mRNA上出現(xiàn)終止密碼子時，就會導致肽鏈合成終止，所以正常出現(xiàn)肽鏈終止是因為不具有與鏈終止三聯(lián)體相應的反tRNA。28.下列關于建立cDNA文庫的敘述中，哪一項是錯誤的?A、從組織或細胞中提取DNA或RNAB、用反轉錄酶合成mRNA的對應單鏈DNAC、以新合成單鏈DNA為模板合成雙鏈DNAD、新合成的雙鏈DNA可以甲基化正確答案：A答案解析：提取DNA或RNA是構建基因組文庫的步驟，構建cDNA文庫應先提取mRNA，而不是DNA或RNA，所以該選項錯誤。構建cDNA文庫的正確步驟是：先從組織或細胞中提取mRNA，然后用反轉錄酶合成mRNA的對應單鏈DNA，接著以新合成單鏈DNA為模板合成雙鏈DNA，新合成的雙鏈DNA可以甲基化等后續(xù)操作。29.為了使人類有經(jīng)濟價值的基因在大腸桿菌中高效表達，有時可以采用同步克隆表達受體菌tRNA基因的方法，其機理是：A、增強基因的轉錄B、糾正受體菌密碼子的偏愛性C、啟動mRNA的翻譯D、穩(wěn)定mRNA在核糖體上的定位正確答案：B答案解析：在大腸桿菌中，不同生物對密碼子的使用存在偏愛性。同步克隆表達受體菌tRNA基因，可以使受體菌的tRNA種類更豐富，能更好地與不同密碼子匹配，從而糾正受體菌密碼子的偏愛性，有利于人類有經(jīng)濟價值的基因在大腸桿菌中高效表達。30.第一個用于構建重組體的限制性核酸內切酶是：A、EcoRIB、EcoBC、EcoRIID、EcoRV正確答案：A答案解析：限制性核酸內切酶EcoRI是第一個被發(fā)現(xiàn)并用于構建重組體的，它能夠識別特定的DNA序列并進行切割，為基因工程的發(fā)展奠定了基礎。31.下列哪一種酶作用時需要引物？A、限制酶B、末端轉移酶C、反轉錄酶D、DNA連接酶正確答案：C答案解析：反轉錄酶以RNA為模板合成DNA時需要引物，此引物通常是一段RNA序列。限制酶識別特定序列并切割DNA，不需要引物；末端轉移酶是在DNA末端添加核苷酸，不需要引物；DNA連接酶連接DNA片段，不需要引物。32.在基因工程中通常所用的質粒存在于：A、細菌染色體B、酵母染色體C、細菌染色體外D、酵母染色體外E、病毒DNA外正確答案：C答案解析：質粒是細菌染色體外能夠自主復制的小型環(huán)狀雙鏈DNA分子，存在于細菌染色體外。A選項細菌染色體錯誤；B選項酵母染色體外一般是酵母人工染色體等，不是質粒；D選項同理酵母染色體外不是質粒；E選項病毒DNA外也不正確，質粒存在于細菌中而非病毒相關。33.下列描述最能確切表達質粒DNA作為克隆載體特性的是：A、在細胞分裂時恒定地傳給DNAB、攜帶有某些抗生素抗性基因C、小型環(huán)狀雙鏈DNAD、具有自我復制功能E、獲得目的基因正確答案：D答案解析：質粒DNA作為克隆載體必須具有自我復制功能，這樣才能在宿主細胞中穩(wěn)定存在并大量擴增，以攜帶目的基因進行后續(xù)操作。選項A，能在細胞分裂時恒定傳給子代細胞不是質粒作為克隆載體最關鍵特性；選項B，攜帶有某些抗生素抗性基因可用于篩選，但不是最核心特性；選項C，小型環(huán)狀雙鏈DNA是質粒的結構特點，不是作為克隆載體的關鍵特性；選項E，獲得目的基因不是質粒作為克隆載體本身的特性，而是克隆載體的用途。34.第一個作為重組DNA載體的質粒是：A、pBR322B、pSC101C、pUC19D、pET-28a正確答案：B答案解析：1973年，Cohen等人將編碼四環(huán)素抗性和鏈霉素抗性的兩個質粒通過DNA連接酶連接在一起，構建成了第一個重組DNA分子。1977年，Boyer等人構建了pSC101質粒，它是第一個作為重組DNA載體的質粒。pBR322是較常用的質粒載體；pUC19是在pBR322基礎上改造的；pET-28a是用于原核表達的載體。35.以質粒為載體，將外源基因導入受體菌的過程稱：A、轉化B、轉染C、感染D、轉導E、轉位正確答案：A答案解析：轉化是指將質粒等外源DNA導入受體菌的過程，通過轉化可使受體菌獲得新的遺傳性狀。轉染一般指將病毒核酸導入細胞等。感染通常用于描述病毒等病原體侵入細胞等情況。轉導是利用噬菌體等載體將供體菌的基因轉移到受體菌。轉位一般指基因在基因組中的位置移動等。36.經(jīng)電泳分離后將蛋白質轉移到尼龍膜上的技術是：A、菌落原位雜交B、斑點雜交C、Eastern雜交D、Northern雜交正確答案：C37.雙脫氧鏈末端終止法測序不需要：A、Klenow小片段B、引物C、dNTPD、標記dNTPE、ddNTP正確答案：A答案解析：雙脫氧鏈末端終止法測序需要引物、dNTP、標記dNTP、ddNTP，不需要Klenow小片段，Klenow小片段是DNA聚合酶I經(jīng)枯草桿菌蛋白酶裂解后產(chǎn)生的大片段，具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性，而雙脫氧鏈末端終止法測序一般用的是測序酶等，不是Klenow小片段。38.下面哪一種不是產(chǎn)生星號活性的主要原因?A、甘油含量過高B、反應體系中含有有機溶劑C、含有非Mg2＋的二價陽離子D、酶切反應時酶濃度過低正確答案：D答案解析：星號活性是指在非理想的反應條件下，限制酶切割產(chǎn)生的非特異性條帶。甘油含量過高、反應體系中含有有機溶劑、含有非Mg2＋的二價陽離子等都可能導致星號活性，而酶切反應時酶濃度過低主要影響酶切效率，一般不會直接導致星號活性。39.關于PCR的描述下列哪項不正確？A、是一種酶促反應B、引物決定了擴增的特異性C、擴增產(chǎn)物量大D、擴增的對象是DNA序列E、擴增的對象是RNA序列正確答案：E答案解析：PCR是一種酶促反應，以DNA為模板，在引物引導下由DNA聚合酶催化進行擴增反應，引物決定了擴增的特異性，可使特定的DNA片段得到大量擴增，其擴增對象是DNA序列，而非RNA序列。40.基因工程的操作程序可簡單地概括為：A、載體和目的基因的分離、提純與鑒定B、分、切、連、轉、篩，C、將重組體導入宿主細胞，篩選出含目的基因的菌株D、將載體和目的基因接合成重組體E、限制性核酸內切酶的應用正確答案：B答案解析：基因工程的操作程序一般包括目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定等步驟。“分、切、連、轉、篩”簡潔地概括了這些主要環(huán)節(jié)，“分”即獲取目的基因和載體；“切”是用限制性核酸內切酶切割目的基因和載體；“連”是將目的基因和載體連接形成重組體；“轉”是將重組體導入宿主細胞；“篩”是篩選出含目的基因的細胞或個體。A選項只是其中部分操作；C選項缺少目的基因獲取、表達載體構建等前期操作；D選項只是其中一個環(huán)節(jié)；E選項只是工具，不全面。所以答案是B。41.DNA被某種酶切割后，電泳時電泳帶有些擴散，下列原因那一項不太可能？A、酶失活B、蛋白質（如BSA）同DNA結合C、酶切條件不合適D、酶切反應時酶濃度過低正確答案：A42.在簡并引物的3′端盡量使用具有簡并密碼的氨基酸，這是因為：A、TAq酶具有一定的不精確性B、便于排除錯誤堿基的摻入C、易于退火D、易于重組連接正確答案：A43.哪一個載體適用于150kbDNA片段的克隆？A、質粒B、λ噬菌體載體C、BACD、YAC正確答案：C44.一般的限制性核酸內切酶II作用的特點不包括：A、在對稱序列處切開DNAB、DNA兩鏈的切點常不在同一位點C、酶切后產(chǎn)生的DNA片段多半具有粘性末端D、DNA兩鏈的切點常在同一位點E、酶辨認的堿基一般為4-6個正確答案：D45.促紅細胞生長素（EPO）基因能在大腸桿菌中表達，但卻不能用大腸桿菌的基因工程菌生產(chǎn)人的促紅細胞生長素，這是因為：A、人的促紅細胞生長素對大腸桿菌有毒性作用B、人的促紅細胞生長素基因在大腸桿菌中極不穩(wěn)定C、大腸桿菌不能使人的促紅細胞生長素糖基化D、人的促紅細胞生長素對大腸桿菌蛋白水解酶極為敏感正確答案：C答案解析：促紅細胞生長素是一種糖蛋白，而大腸桿菌屬于原核生物，細胞中沒有內質網(wǎng)和高爾基體等細胞器，不能對蛋白質進行糖基化修飾，所以不能用大腸桿菌的基因工程菌生產(chǎn)人的促紅細胞生長素。選項A中促紅細胞生長素對大腸桿菌無毒性作用；選項B中基因在大腸桿菌中可以穩(wěn)定存在；選項D與不能生產(chǎn)促紅細胞生長素的原因無關。46.同一種質粒DNA，以三種不同的形式存在，電泳時，它們的遷移速率是：A、OCDNA>SCDNA>LDNAB、SCDNA>LDNA>OCDNAC、LDNA>OCDNA>SCDNAD、SCDNA>OCDNA>LDNA正確答案：B答案解析：超螺旋DNA（SCDNA）由于其緊密的結構，在電場中移動速度最快；線性DNA（LDNA）次之；開環(huán)DNA（OCDNA）結構較為松散，遷移速率最慢。47.PCR反應體系與雙脫氧末端終止法測序體系不同的是缺少：A、模板B、引物C、DNA聚合酶D、ddNTPE、緩沖液正確答案：D答案解析：PCR反應體系中需要模板、引物、DNA聚合酶、緩沖液等成分來擴增特定DNA片段。而雙脫氧末端終止法測序體系是利用ddNTP（雙脫氧核苷酸）隨機終止DNA鏈的延伸來進行測序，在PCR反應體系中不需要ddNTP，所以PCR反應體系與雙脫氧末端終止法測序體系不同的是缺少ddNTP。48.AUG是唯一識別甲硫氨酸的密碼子，它具有下列哪種重要作用？A、作終止密碼子B、作起始密碼子C、作肽鏈釋放因子D、識別tRNA部位正確答案：B答案解析：起始密碼子是指信使RNA上開始編碼蛋白質的第一個密碼子，AUG是常見的起始密碼子，它編碼甲硫氨酸，在翻譯起始時，核糖體小亞基會識別mRNA上的起始密碼子AUG，然后與mRNA結合并開始翻譯過程。而終止密碼子是UAA、UAG、UGA，它們不編碼氨基酸，而是使翻譯過程終止；肽鏈釋放因子是幫助識別終止密碼子并促使肽鏈從核糖體上釋放的蛋白質；識別tRNA部位的是核糖體的特定結構域，而不是密碼子AUG本身。49.反義核酸作用主要是：A、封閉DNAB、封閉RNAC、降解DNAD、降解DNAE、封閉核糖體的功能正確答案：B答案解析：反義核酸是一類能與特定核酸序列互補結合，從而封閉RNA的核酸分子。它可以通過與靶RNA結合，阻止其發(fā)揮正常功能，如阻斷mRNA的翻譯、影響RNA的剪接等，達到調控基因表達的目的。而不是封閉DNA、降解DNA或封閉核糖體功能等其他選項所描述的作用。50.如果沒有得到PCR產(chǎn)物，下面哪個不是導致擴增失敗的原因?A、可能沒有加入酶B、DNA解鏈不充分C、人工合成的引物錯誤D、減少循環(huán)周期次數(shù)正確答案：D答案解析：如果沒有得到PCR產(chǎn)物，擴增失敗的原因可能有多種。選項A中沒有加入酶會導致無法進行擴增反應；選項B中DNA解鏈不充分會影響引物與模板的結合，進而影響擴增；選項C中人工合成的引物錯誤也無法正確引導擴增。而選項D減少循環(huán)周期次數(shù)一般不會直接導致擴增失敗，只是可能會使擴增產(chǎn)物量減少，不是導致完全沒有PCR產(chǎn)物的原因。51.催化聚合酶鏈反應需要下列酶：A、RNA聚合酶B、DNA聚合酶C、TaqDNA聚合酶D、逆轉錄酶E、限制性核酸內切酶正確答案：C答案解析：聚合酶鏈反應（PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，需要耐高溫的DNA聚合酶，TaqDNA聚合酶是常用的催化PCR反應的酶。RNA聚合酶用于轉錄過程；DNA聚合酶一般不是催化PCR的那種耐高溫的；逆轉錄酶用于逆轉錄過程；限制性核酸內切酶用于切割DNA。52.下列哪一種不是產(chǎn)生星號活性的主要原因？A、含有非鎂離子的二價陽離子B、酶切反應時酶濃度過低C、甘油含量過高D、反應體系中含有有機溶劑正確答案：B答案解析：星號活性是指在非理想的反應條件下，限制酶可能會切割一些與識別序列相似但不完全相同的序列，從而產(chǎn)生非特異性的切割條帶。甘油含量過高、反應體系中含有有機溶劑、含有非鎂離子的二價陽離子等都可能導致星號活性的產(chǎn)生。而酶切反應時酶濃度過低通常不會直接導致星號活性，反而可能影響酶切效率，使酶切不完全。53.PCR主要的酶是：A、DNA連接酶B、反轉錄酶C、末端轉移酶D、堿性磷酸酶E、TaqDNA聚合酶正確答案：E答案解析：PCR技術中主要使用的酶是TaqDNA聚合酶，它具有耐高溫的特性，能在較高溫度下進行DNA的擴增反應，而其他幾種酶在PCR過程中一般不發(fā)揮主要作用。54.Maxam-Gilbert法與Sanger法測序的共同點是均需：A、引物B、Klenow酶C、dNTPD、電泳后放射自顯影讀圖E、化學裂解試劑正確答案：D55.DNA的結構對轉化的影響很大，一般說來，轉化效率最高的是：A、完整的線性雙鏈DNAB、單鏈線性DNAC、完整的環(huán)狀雙鏈DNAD、開口的雙鏈環(huán)狀DNA正確答案：A56.多克隆位點：A、含有許多拷貝的克隆化基因B、使得對克隆所用限制酶的選擇具有靈活性C、含有許多拷貝的同一種限制酶位點D、使得對克隆所用的生物種類的選擇具有靈活性正確答案：B答案解析：多克隆位點是指載體上人工合成的含有多種限制酶識別序列的DNA片段，它可以插入外源DNA片段，使得對克隆所用限制酶的選擇具有靈活性。選項A中說含有許多拷貝的克隆化基因錯誤；選項C中含有許多拷貝的同一種限制酶位點不準確；選項D中說對克隆所用生物種類的選擇具有靈活性也不正確。57.多克隆位點：A、含有許多拷貝的克隆化基因B、使得對克隆所用的限制酶的選擇具有靈活性C、含有許多拷貝的同一種限制酶位點D、使得對克隆所用的生物種類的選擇具有靈活性正確答案：B答案解析：多克隆位點是指載體上人工合成的含有多種限制酶識別序列的一段DNA序列，它使得對克隆所用的限制酶的選擇具有靈活性。選項A中含有許多拷貝的克隆化基因不符合多克隆位點的定義；選項C中含有許多拷貝的同一種限制酶位點錯誤，多克隆位點是多種限制酶位點；選項D中使得對克隆所用的生物種類的選擇具有靈活性也不正確，多克隆位點主要是關于限制酶選擇的靈活性。58.蛋白質合成過程中，將發(fā)生：A、氨基酸隨機結合在tRNA上B、合成是從C端開始C、肽鏈的延長有轉肽酶的參與D、以上無正確答案正確答案：C答案解析：在蛋白質合成過程中，氨基酸是特異性結合在tRNA上，而非隨機結合，A選項錯誤；合成是從N端開始，B選項錯誤；肽鏈延長過程中，轉肽酶催化肽鍵的形成，參與肽鏈的延長，C選項正確。59.經(jīng)電泳分離后將RNA轉移到硝酸纖維素膜上的技術是：A、SouthernBlottingB、NorthernBlottingC、WesternBlottingD、DotBlottingE、insituhybridization正確答案：B答案解析：NorthernBlotting是將經(jīng)電泳分離后的RNA轉移到硝酸纖維素膜或尼龍膜上的技術，用于檢測特定RNA分子的表達情況等。SouthernBlotting是用于DNA的相關技術；WesternBlotting是用于蛋白質的技術；DotBlotting是一種簡單的將核酸或蛋白質直接點在膜上進行檢測的方法；insituhybridization是原位雜交技術，用于在細胞或組織水平檢測核酸。60.S1核酸酶的功能是：A、切割雙鏈的DNAB、切割單鏈的RNAC、切割發(fā)夾環(huán)D、以上均正確正確答案：D答案解析：S1核酸酶是一種從米曲霉中分離出來的核酸酶，它可以特異性地降解單鏈DNA或RNA，對雙鏈DNA或RNA不起作用。它能切割雙鏈DNA中的單鏈區(qū)、發(fā)夾環(huán)等單鏈結構。所以它能切割雙鏈的DNA、單鏈的RNA、發(fā)夾環(huán)等，以上均正確。61.促紅細胞生長素（EPO）基因能在大腸桿菌中表達，但卻不能用大腸桿菌的基因工程菌生產(chǎn)人的促紅細胞生長素，這是因為：A、人的促紅細胞生長素對大腸桿菌蛋白水解酶極為敏感B、大腸桿菌不能使人的促紅細胞生長素糖基化C、人的促紅細胞生長素基因在大腸桿菌中極不穩(wěn)定D、人的促紅細胞生長素對大腸桿菌有毒性作用正確答案：B答案解析：促紅細胞生成素是一種糖蛋白，其合成過程需要在內質網(wǎng)和高爾基體等細胞器中進行糖基化修飾。大腸桿菌是原核生物，沒有內質網(wǎng)和高爾基體等細胞器，無法對人的促紅細胞生成素進行糖基化修飾，導致生產(chǎn)出的促紅細胞生成素不具有生物活性，所以不能用大腸桿菌的基因工程菌生產(chǎn)人的促紅細胞生成素。62.DNA被某種酶切割后，電泳得到的電泳帶有些擴散，下列原因中那一項不太可能？A、酶失活B、蛋白質（如BSA）同DNA結合C、酶切條件不合適D、酶切反應時酶濃度過低正確答案：A63.在質粒提取的步驟里，異戊醇的作用是：A、使蛋白質脫水B、使DNA脫水C、減少氣泡，有助于相的穩(wěn)定D、幫助DNA進入水相正確答案：C答案解析：異戊醇的作用主要是減少氣泡，有助于相的穩(wěn)定。在質粒提取過程中，加入異戊醇可以降低表面張力，使離心過程中產(chǎn)生的氣泡減少，從而使有機相和水相之間的界面更加清晰、穩(wěn)定，有利于后續(xù)的分層等操作，便于更好地分離出質粒DNA等物質。64.質粒DNA和外源DNA各用兩種限制性內切酶切開，經(jīng)連接轉化后獲得重組子，下列各組重組子中有可能含有兩種相反基因極性的是：A、ApaI/ClaIB、BamHI/BglIIC、BclI/SmaID、HindIII/KpnI正確答案：B65.多數(shù)限制性核酸內切酶切割后的DNA末端為：A、平行末端B、3’-突出末端C、5’-突出末端D、粘性末端E、缺口末端正確答案：D答案解析：多數(shù)限制性核酸內切酶切割后的DNA末端為粘性末端，即雙鏈DNA被酶切后，產(chǎn)生的兩個末端的堿基序列互補，能夠通過堿基配對重新結合，形成類似粘性的結構。66.用下列方法進行重組體的篩選，哪種方法說明外源基因進行了表達?A、Southem雜交B、Northern雜交C、Western雜交D、菌落原位雜交正確答案：C答案解析：Southern雜交用于檢測重組體中是否含有外源基因，不能說明外源基因是否表達；Northern雜交用于檢測RNA，可判斷外源基因轉錄情況，但不能直接說明表達；Western雜交用于檢測蛋白質，若能檢測到相應蛋白質，說明外源基因進行了表達；菌落原位雜交用于篩選含有特定DNA序列的菌落，不能說明外源基因表達。所以答案選C。67.用于轉染哺乳類細胞的常用載體是：A、質粒B、噬菌體C、逆轉錄病毒RNAD、結構基因E、乳糖操縱子正確答案：C答案解析：逆轉錄病毒RNA作為載體可高效地將外源基因導入哺乳類細胞，是用于轉染哺乳類細胞的常用載體之一。質粒也可用于轉染，但不是最常用的；噬菌體主要用于細菌等微生物的基因操作；結構基因是編碼蛋白質或RNA的基因，不是載體；乳糖操縱子是原核生物基因表達調控的一種機制，并非轉染載體。68.由mRNA合成cDNA需要：A、Klenow小片段B、DNA連接酶C、Klenow大片段D、反轉錄酶E、堿性磷酸酶正確答案：D答案解析：反轉錄酶是以mRNA為模板合成cDNA的關鍵酶，它能催化以mRNA為模板合成互補DNA鏈的反應。Klenow小片段、Klenow大片段主要用于DNA的合成等其他相關反應，DNA連接酶用于連接DNA片段，堿性磷酸酶用于去除核酸末端的磷酸基團等，均不是由mRNA合成cDNA直接需要的酶。69.下列哪一種不是產(chǎn)生星號活性的主要原因？A、甘油含量過高B、反應體系含有機溶劑C、含有非鎂離子的二價陽離子D、酶切反應時酶濃度過低正確答案：D答案解析：星號活性是指在非標準反應條件下，限制酶切割與識別序列相似但不完全相同的DNA序列的現(xiàn)象。甘油含量過高、反應體系含有機溶劑、含有非鎂離子的二價陽離子等都可能導致星號活性。而酶切反應時酶濃度過低一般不會直接導致星號活性的產(chǎn)生，主要影響酶切效率和完全程度。70.與mRNAACG相對應的tRNA的反密碼子是：A、UGCB、TGCC、GCAD、CGU正確答案：D二、判斷題（共30題，每題1分，共30分）1.基因工程菌中重組質粒丟失機制主要是重組質粒在細胞分裂時不均勻分配。A、正確B、錯誤正確答案：A2.基因工程中使用的限制性內切核酸酶不僅有內切核酸酶活性，而且有甲基化酶活性。A、正確B、錯誤正確答案：B3.任何一種質粒都可以用氯霉素擴增的方法，增加它的拷貝數(shù)。A、正確B、錯誤正確答案：B4.大量制備克隆基因編碼蛋白產(chǎn)物的常用方法是進行體外轉錄和表達。A、正確B、錯誤正確答案：B5.通過用化學標記法取代放射性標記法，并采用一種抗體來特異性地識別這種化學修飾，使得原位雜交的分辨率大大提高。A、正確B、錯誤正確答案：A6.氯霉素擴增DNA時，加氯霉素的時間是重要的，因為