（九）：生物技術(shù)實(shí)踐

1.下列有關(guān)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用，敘述錯誤的是（）

A.家庭制作果酒與工廠化制作果酒區(qū)別之一是原料是否滅菌

B.制作果醋時需要連續(xù)通入氧氣，否則醋酸菌會缺氧死亡

C.腐乳制作時鹵湯中酒的含量應(yīng)控制在21%左右，含量過高，腐乳成熟的時間會延長

D.制作泡菜時，在壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內(nèi)的無氧環(huán)境

2.關(guān)于測定亞硝酸鹽含量實(shí)驗(yàn)操作的有關(guān)敘述，正確的是（）

A.泡菜制作需要配制鹽水，其中鹽與水的質(zhì)量比為4:1

B.在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)形成玫瑰紅色染料

C.制備樣品處理液,加入氫氧化鋁乳液的目的是除去色素等雜質(zhì)，得到澄清溶液

D.泡菜腌制時間長短會影響亞硝酸鹽含量，但溫度和食鹽的用量不影響其含量

3.下列有關(guān)培養(yǎng)基配制的描述，正確的是（）

A.液體培養(yǎng)基常用于菌種的分離、計數(shù)、鑒定

B.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等成分

C.依據(jù)微生物的需求，配制出的供微生物生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)

D.微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外，還受到pH、滲透壓等的影響

4.研究人員從土壤中分離出A、B、C、D四種菌株，并用選擇培養(yǎng)基對其進(jìn)行鑒別和篩選,

結(jié)果如表所示。下列敘述正確的是（）

以維生素為唯以酪蛋白為唯

^養(yǎng)基以淀粉為唯一以尿素為唯一

一碳源的培養(yǎng)一氮源的培養(yǎng)

菌株碳源的培養(yǎng)基氮源的培養(yǎng)基

基基

菌株A+++---

菌株B-+++--

菌株C++++--

菌株D--+++-

注:+代表產(chǎn)生透明圈，+數(shù)量越多表示透明圈越大，-代表無透明圈。

A.四種菌株均可以尿素作為唯一氮源

B.菌株B主要以纖維素作為碳源

C.以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基可鑒別出菌株A和菌株C

D.菌株C在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上不能生長

5.乙草胺（Ci4H20C1NO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，其分解產(chǎn)物和尿素相同，但分解過程

卻比尿素更復(fù)雜。我國科學(xué)工作者從土壤中分離獲得能有效降解乙草胺的菌株，為利用乙草

胺進(jìn)行生物修復(fù)提供了微生物資源。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.從使用乙草胺的土壤取樣，使用稀釋涂布平板法或平板劃線法進(jìn)行分離

B.配制以乙草胺為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，可提高降解菌的濃度

C.在分離純化菌種后，需要借助生物化學(xué)的方法對分離的菌種做進(jìn)一步的鑒定

D.提供適宜的溫度，將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，有利于降解菌的生長繁殖

6.以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物。下列相關(guān)

敘述不正確的是（）

A.以綠色葉片和白色花瓣作為外植體，進(jìn)行組織培養(yǎng)均能獲得試管苗

B.外植體脫分化培養(yǎng)成愈傷組織的過程，需要植物生長調(diào)節(jié)劑的處理

C.若用某一細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，該細(xì)胞必須有完整的細(xì)胞核和葉綠體

D.選用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)，不能獲得與原植株基因型相同的植物體

7.選擇合適的花粉發(fā)育時期是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素之一，下列說法正確的是（）

A.任何時期的花粉都可以經(jīng)過培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織或胚狀體

B.對所有植物來說，雙核期時花藥培養(yǎng)成功率最高

C.對一般植物而言，在單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高

D.為了挑選到單核期的花藥，通常選擇略微開放的花朵

8.下面是研究人員以復(fù)合酶制劑為材料進(jìn)行研究的結(jié)果，相關(guān)敘述錯誤的是（）

溫度/℃203040455060

不加酶去污力/%1518202121.522

加酶去污力/%304048504837

A.本研究的主要目的是探究溫度對復(fù)合酶制劑去污力的影響

B.實(shí)驗(yàn)所用污布上污染物種類、污染程度等均會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果

C.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，加復(fù)合酶制劑后的洗滌溫度以40~50℃為宜

D.當(dāng)溫度高于60℃時，加入的復(fù)合酶制劑會失去催化活性

9.甲、乙兩個實(shí)驗(yàn)小組分別進(jìn)行了“酵母細(xì)胞固定化技術(shù)”的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下圖所示。出現(xiàn)乙組

實(shí)驗(yàn)結(jié)果的原因可能為（）

甲組實(shí)驗(yàn)結(jié)果乙組實(shí)驗(yàn)結(jié)果

A.CaCb溶液濃度過高B.海藻酸鈉溶液濃度過高

C.注射器滴加速度過慢D.滴加時注射器出口浸入到CaCl2溶液中

10.下列關(guān)于凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的敘述，不正確的是（）

A.在裝填凝膠色譜柱時，一旦發(fā)現(xiàn)柱內(nèi)有氣泡存在，就需要重裝

B.凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時，大分子蛋白質(zhì)因阻力大而移動慢，所以最后洗脫出來

C.進(jìn)行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳時，凝膠中加入的SDS可使蛋白質(zhì)遷移率完全取決于分子

大小

D.因SDS帶負(fù)電，故電泳時應(yīng)在負(fù)極一側(cè)點(diǎn)樣

11.利用PCR既可以快速擴(kuò)增特定基因，也可以檢測基因的表達(dá)。下列有關(guān)PCR的敘述，錯

誤的是（）

A.PCR用的DNA聚合酶是一種耐高溫酶

B.變性過程中，雙鏈DNA的解開不需要解旋酶

C.復(fù)性過程中，引物與模板鏈的結(jié)合遵循堿基互補(bǔ)配對原則

D.延伸過程中，需要DNA聚合酶、ATP和4種核糖核甘酸

12.下列說法不正確的是（）

A.利用PCR擴(kuò)增DNA時，需要加入兩種引物，引物的基本組成單位是脫氧核甘酸或核糖核昔

酸

B.在SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳方法中加入SDS的作用是使電泳遷速移率完全取決于分子

間的電荷差別

C.在提取血紅蛋白的樣品處理階段，洗滌紅細(xì)胞十分重要，其目的是洗去雜蛋白

D.凝膠色譜柱的裝填不緊密，會導(dǎo)致血紅蛋白分離過程中紅色帶區(qū)歪曲、散亂、變寬

13.為了篩選獲得高產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌，為新型飼料添加劑的開發(fā)提供材料基礎(chǔ)。研究人員以

玉米地土壤為樣品，使用剛果紅平板法篩選獲得菌株X。相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.剛果紅平板以剛果紅作為唯一碳源，并添加適量瓊脂

B.分離菌株前應(yīng)對土壤溶液進(jìn)行搖床培養(yǎng)，以擴(kuò)大目標(biāo)菌株數(shù)量

C.可以先用稀釋涂布平板法初篩菌種，再用平板劃線法純化菌種

D.需對菌株X所產(chǎn)生的纖維素酶進(jìn)行酶活力的測定

14.下列關(guān)于探究果膠酶在果汁生產(chǎn)中作用的操作，錯誤的是（）

A.可以用體積分?jǐn)?shù)為0.1%的NaOH溶液和鹽酸進(jìn)行pH調(diào)節(jié)

B.為了使果膠酶充分發(fā)揮作用，應(yīng)用玻璃棒不時地攪拌反應(yīng)混合物

C.制作蘋果泥時，可先將蘋果切成小塊放入榨汁機(jī)中

D.用橙子做本課題實(shí)驗(yàn)，應(yīng)去掉橙皮

15.腐乳制作的流程圖如下，下列說法不正確的是（）

豆腐上長出毛司T加鹽腌制卜一|加鹵湯裝瓶H密封腌制

A.先將豆腐切成塊放在消過毒的籠屜中，保持溫度在15~18℃,并保持一定濕度

B.毛霉為好氧型真菌，為避免其無氧呼吸，放置豆腐塊時要留出一定縫隙

C.將長滿毛霉的豆腐分層裝瓶腌制時，底層和接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些

D.用膠條密封瓶口時，最好將瓶口通過酒精燈的火焰，以防止瓶口被污染

16.下列關(guān)于“泡菜腌制和亞硝酸鹽測定”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯誤的是（）

A.亞硝酸鹽的測定過程需使用顯色劑硫酸鋅

B.亞硝酸鹽的存在是泡菜能較長時間儲存的原因之一

C.發(fā)酵過程中，亞硝酸鹽含量變化趨勢為先增加后減少

D.樣品亞硝酸鹽含量測定結(jié)果偏大，原因可能是測定樣品時選用了光程更大的比色杯

17.圖甲是果酒和果醋發(fā)酵的裝置圖，圖乙是果酒和果醋制作過程中發(fā)生的物質(zhì)變化。下列

有關(guān)敘述中，正確的是（）

氣￡處jl■氣|H2O+CO21|醋酸+HQ|

□J―~

三日.葡萄汁I葡萄糖曰丙或酸產(chǎn)■「方］+ICO2|

甲乙

A.甲裝置可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作

B.用甲裝置制作果酒時，要加入適量的酵母菌，且一直關(guān)緊閥b

C.酵母菌是嗜溫菌，所以果酒發(fā)酵所需的最適溫度高于果醋發(fā)酵

D.過程③和④都需要氧氣的參與，且反應(yīng)場所相同

18.泡菜起源于中國，是我國的傳統(tǒng)食品之一。賈思勰《齊民要術(shù)》中已有制作泡菜的專述:

“作鹽水，令極咸，于鹽水中洗菜。若先用淡水洗者，殖爛。洗菜鹽水，澄取清者，瀉者甕

中，令沒菜把即止，不復(fù)調(diào)和?！痹摫硎稣f明食鹽的用量非常關(guān)鍵。研究小組探究泡菜制作

過程中不同濃度的食鹽對亞硝酸鹽產(chǎn)生的影響，結(jié)果如圖。下列相關(guān)敘述正確的是()

A.腌制過程中，壇中出現(xiàn)溶液量增多現(xiàn)象的主要原因是細(xì)胞呼吸產(chǎn)生水

B.微生物無氧環(huán)境的創(chuàng)設(shè)主要依靠鹽水的浸沒，因此蔬菜不能露出水面

C.食鹽的濃度越低，亞硝酸鹽含量的峰值越高，這與雜菌繁殖數(shù)量有關(guān)

D.達(dá)到峰值后，亞硝酸鹽含量下降的原因是亞硝酸鹽被微生物轉(zhuǎn)變成亞硝胺

19.如圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細(xì)菌的過程示意圖，有關(guān)敘述錯誤的是

()

浸出液基中培養(yǎng)分解尿素細(xì)菌力的鑒定和比較

A.在配制步驟②③的培養(yǎng)基時，應(yīng)先調(diào)pH后高壓蒸汽滅菌

B.步驟③純化分解尿素的原理是將聚集的細(xì)菌分散，可以獲得單細(xì)胞菌落

C.步驟③采用涂布平板法接種，并需向牛肉膏蛋白腺培養(yǎng)基中加入尿素

D.步驟④挑?、壑胁煌N的菌落分別接種，比較細(xì)菌分解尿素的能力

20.大腸桿菌pUC118質(zhì)粒具有氨葦青霉素抗性基因，某限制酶唯一切點(diǎn)位于該質(zhì)粒的lacZ

基

因中。在特定的選擇培養(yǎng)基中，若lacZ基因沒有被破壞，則大腸桿菌菌落呈藍(lán)色；若lacZ

基因被破壞，則菌落呈白色。圖表示轉(zhuǎn)基因操作過程。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.應(yīng)選擇白色菌落的大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)

B.若大腸桿菌的菌落為藍(lán)色，則導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒

C.作為受體的大腸桿菌應(yīng)含氨葦青霉素抗性基因，以便于篩選

D.選擇培養(yǎng)基中除必需的營養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入適量氨葦青霉素

21.三抱布拉霉菌能用來生產(chǎn)胡蘿卜素，但該菌株的高產(chǎn)性狀容易退化，需要定期篩選出高

產(chǎn)菌株，研究表明菌體細(xì)胞內(nèi)含有可將無色的TTC還原為紅色復(fù)合物的物質(zhì)，且菌體細(xì)胞

內(nèi)該物質(zhì)的含量越高，還原能力越強(qiáng)，胡蘿卜素合成能力也越強(qiáng)。結(jié)合下列篩選菌株及提取

胡蘿卜素的流程圖回答問題：

三胞布拉霉菌-*梯度稀釋涂布到含TTC的培養(yǎng)基上f挑取

單菌落擴(kuò)大培養(yǎng)f收集菌絲并處理f萃取f鑒定_________

（1）圖中提取到胡蘿卜素后進(jìn)行鑒定一般要用法。胡蘿卜素能夠治療夜盲癥和干皮

癥等疾病，是因?yàn)?分子的性胡蘿卜素可被氧化分解成2分子o

（2）圖中收集菌絲后進(jìn)行的處理是粉碎和,其中萃取的效率主要取決于萃取劑的

（3）圖中將菌液涂布到含TTC的培養(yǎng)基上，目的是篩選出合成胡蘿卜素較強(qiáng)的菌體，含TTC

的培養(yǎng)基屬于（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基。對照組需將涂布等量________的培養(yǎng)基放入相同

環(huán)境中培養(yǎng)，以判斷培養(yǎng)基是否被污染。挑取單菌落時，若菌落周圍________,則菌株合

成胡蘿卜素的能力較強(qiáng)。

22.腐乳是我國傳統(tǒng)的發(fā)酵豆制品，已有近千年的歷史。腐乳的生產(chǎn)過程一般分為前酵期（培

菌）和后酵期（裝瓶后常溫條件下放置，自然發(fā)酵3個月），采集各時段腐乳坯樣品，測定相關(guān)

物質(zhì)含量如圖所示?；卮鹣铝袉栴}。

腐乳前酵期游離氨基酸總量的變化

(1)豆腐為毛霉的生長提供的基本營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、o毛霉產(chǎn)生的酶能將酪蛋白分解

而產(chǎn)生透明圈，將三種純化的毛霉菌種接種在酪蛋白培養(yǎng)基中得到三種單菌落甲、乙、丙,

其菌落直徑平均值分別為3.2cm、2.8cm、2.9cm,菌落與透明圈一起的直徑平均值分別為

3.7cm、3.5cm、3.3cm。應(yīng)選擇菌落(填“甲”、“乙”或"丙”)作為產(chǎn)蛋白酶活力高的毛

霉候選菌。

(2)裝瓶腌制腐乳時，在接近瓶口的表面要將鹽鋪厚一點(diǎn)，原因是o鹵水中的香辛

料和料酒(食用酒)的作用是=

(3)據(jù)圖分析從“白塊”到“晾曬2d”，腐乳坯中游離氨基酸含量變化的最主要原因是；

加鹽腌制(腌坯)之后，腐乳坯中的游離氨基酸含量下降的原因________(答出兩點(diǎn))。請預(yù)測

后酵期發(fā)酵瓶中的游離氨基酸的變化是。

23.腸道疾病九成以上都是自身菌群失調(diào)引起的，酸奶被很多人看成是補(bǔ)充乳酸菌等益生菌

的食品。某興趣小組擬用下圖所示方法探究某品牌酸奶對小鼠腸道菌群的影響，請補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)

內(nèi)容。

(1)實(shí)驗(yàn)步驟:

①選取狀況良好、年齡和體重近似的小鼠20只，平均分為甲、乙兩組。

②用含有某品牌酸奶的食物連續(xù)飼喂甲組小鼠12周；用含有等量的經(jīng)過處理的該

品牌酸奶的相同食物連續(xù)飼喂乙組小鼠12周作為對照，其他情況相同。

③收集兩組小鼠糞便，制成懸浮液，用稀釋涂布平板法接種在_______(填“全營養(yǎng)”或“以該

品牌酸奶為唯一碳源")的(填“液體”或“固體”)培養(yǎng)基上。

④接種后置于(填“有氧”或“無氧”)條件下培養(yǎng)，通過觀察以初步鑒定小鼠

腸道中的微生物種類。⑤統(tǒng)計并比較兩組中微生物的種類和數(shù)量，分析得出結(jié)論。如果在

104稀釋倍數(shù)下各取0.1mL稀釋液涂布于3個平板上，經(jīng)培養(yǎng)獲得的菌落數(shù)分別為165、160、

170個，貝U1mL菌液中的微生物數(shù)為個。

(2)若要驗(yàn)證菌群中含有大腸桿菌，配制培養(yǎng)基時添加,培養(yǎng)基中出現(xiàn)黑色菌落則

有大腸桿菌。該培養(yǎng)基在功能上屬于培養(yǎng)基。

24.某小組為探究洗衣粉加酶后的洗滌效果，將一種無酶洗衣粉分成3等份進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。甲、

乙兩組在洗衣粉中加入蛋白酶和脂肪酶中的1種或2種酶，丙組不加酶，在不同溫度下清洗

同種化纖布上的2種污漬，其他實(shí)驗(yàn)條件均相同，下表為實(shí)驗(yàn)記錄。請分析回答：

水溫

/℃1020304050

組別甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙

清除血676688525183363477131268121167

漬時間

/min

清除油93789587639182468575277769868

漬時間

/min

(1)提高去污能力的方法有(至少答兩點(diǎn))，乙組在洗衣粉中

加入了酶。

(2)甲、乙兩組洗滌效果的差異，說明酶具有o實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，加入了蛋白酶的洗

衣粉適宜的洗滌溫度為o

(3)如果甲、乙和丙3組均在水溫為lOO。。時洗滌同一種污漬，請比較這3組洗滌效果并說

明理由：

(4)加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化學(xué)

物質(zhì)包裹的，遇水后包裹層很快溶解，釋放出來的酶迅速發(fā)揮催化作用。請判斷這是否運(yùn)用

了酶的同定化技術(shù)并說明理由。

(5)右圖為某種堿性蛋白酶去污力的實(shí)驗(yàn)結(jié)果曲線，該實(shí)驗(yàn)的目的是050℃時加酶

洗衣粉中堿性蛋白酶的最適含量約是%=

25.如圖1表示研究人員為篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)流程,其中透明圈是微生物

在固體培養(yǎng)基上消耗特定營養(yǎng)物質(zhì)形成的。請回答下列問題：

浸泡蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)獲得懸浮液

|稀釋

將樣品涂布到鑒別纖維素

分解菌的培養(yǎng)基上

「8*C培養(yǎng)3d

測量產(chǎn)生的透明圈

直徑(D)及菌落直徑(d)

I

選擇D/d較大的菌株，并測定

所產(chǎn)纖維素酶活性大小

|篩選

纖維素陶高產(chǎn)菌株

圖1

L3r5

q3

w0F

m2

s5F

20!

I5r

f毒e

I0F

5F

30”40455U55ftO

—

圖2惻3

(1)本實(shí)驗(yàn)中,選擇蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)作為纖維素酶高產(chǎn)菌株的來源，這是因?yàn)椤?/p>

(2)篩選用的培養(yǎng)基應(yīng)以作為唯一碳源，并在配制培養(yǎng)基時加入作為凝

固劑。篩選時應(yīng)選擇D/d較大的菌株，因?yàn)檫@一指標(biāo)值越大說明0

(3)圖2、圖3是研究纖維素酶的最適溫度和熱穩(wěn)定性的結(jié)果。

①研究纖維素酶的熱穩(wěn)定性時，首先將纖維素酶液置于35-65℃的不同溫度條件下保溫2h,

再取上述不同溫度處理的纖維素酶液和，并在__________℃下測定纖維素酶的催

化速率，計算酶活性殘留率。

②生產(chǎn)中使用該纖維素酶時，最好將溫度控制在40℃左右,依據(jù)是o

26.如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，簡捷地分析出己知序列兩側(cè)的序列,

具體流程如下圖(以EcoRI酶切為例)：

染色體DNA

混合的DNA片段

'r未知序列

已知序列未知序列

H連接|DNA連接酶

已知序列、

PCR引物環(huán)狀DNA

￡coRI

in擴(kuò)坤|丁卯DNA聚合解(耐高溫的DNA聚合陶)

PCR產(chǎn)物

IV測序、分析

5，片段F的

’-......3v完整序列

請據(jù)圖回答問題：

(1)步驟I用的EcoRI是一種酶，它通過識別特定的切割特定位點(diǎn)。

⑵步驟II用的DNA連接酶催化相鄰核甘酸之間的3。羥基與51磷酸間形成

；PCR循環(huán)中，升溫到95℃是為了獲得；TagDNA聚

合酶的作用是催化O

（3）若下表所列為已知的DNA序列和設(shè)計的一些PCR引物，步驟III選用的PCR引物必須是

（從引物①②③④中選擇，填編號）。

DNA序列（虛線處省略了部分核甘酸序列）

S^AACTATGCGCTCATGA-……GCAATGCGTAGCCTCT-3,

已知序列,IIIIIIIIIIIIIIII1IIII1111II11|||

3'-TTGATACGCGAGTACT..........CGTTACGCATCGGAGA-5'

@5,-AACTATGCGCTCATGA-3,

(2)5,-GCAATGCGTAGCCTCT-3,

PCR引物

③5AGAGGCTACGCATTGC-3'

@5,-TCATGAGCGCATAGTT-3,

（4）對PCR產(chǎn)物測序，經(jīng)分析得到了片段F的完整序列。下列DNA單鏈序列中（虛線處省略

了部分核甘酸序列），結(jié)果正確的是o

A.5'-AACTATGCG......AGCCCTT-3'B.5'-AATTCCATG.......CTGAATT-3'

C.5'-GCAATGCGT......TCGGGAA-3'D.5'-TTGATACGC.......CGAGTAC-3'

答案以及解析

1.答案：C

解析：家庭制作果酒的菌種來源于原料或自然環(huán)境，原料不需要滅菌，而工廠化制作果酒，

為了達(dá)到最佳效果，必須先將原料進(jìn)行滅菌，然后再接種菌種進(jìn)行發(fā)酵，A正確；醋酸菌是

需氧型生物，對氧氣含量非常敏感，缺氧會導(dǎo)致醋酸菌死亡，B正確；腐乳制作時鹵湯中酒

的含量應(yīng)該控制在12%左右，C錯誤；泡菜的制作主要依靠的是乳酸菌的無氧呼吸，在壇蓋

邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內(nèi)的無氧環(huán)境，D正確。

2.答案：C

解析：泡菜制作需要配制鹽水，其中鹽與水的質(zhì)量比為1:4,,A錯誤；在鹽酸酸化條件下，

亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，產(chǎn)物與N-1-蔡基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰

紅色染料，B錯誤；制備樣品處理液，加入氫氧化鋁乳液的目的是吸附泡菜液中的色素等雜

質(zhì)，使泡菜液變澄清，C正確；泡菜腌制時間的長短會影響亞硝酸鹽含量，溫度和食鹽的用

量也會影響其含量，D錯誤。

3.答案：D

解析：固體培養(yǎng)基常用于菌種的分離、計數(shù)、鑒定，A錯誤；培養(yǎng)基不一定含有碳源、氮源,

如培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基不需加碳源，分離自生固氮菌的培養(yǎng)基不需加氮源，B錯誤；

人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)叫培養(yǎng)基，C錯

誤；微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外，還受到pH、氧氣、滲透壓等的影響，D正確。

4.答案：B

解析：A.由題意可知，選擇培養(yǎng)基上的透明圈越大，說明分解相應(yīng)物質(zhì)的能力越強(qiáng)。由表格

內(nèi)容可知，四種菌株在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上均不能產(chǎn)生透明圈，說明四種菌株均不

能分解尿素，即不能以尿素作為唯一氮源，錯誤。

B對比菌株B在四種選擇培養(yǎng)基上產(chǎn)生透明圈的情況可知，菌株B主要以纖維素作為碳源,

正確。

C.菌株A和菌株C均可以淀粉為唯一碳源，因此不能用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基鑒別出

菌株A和菌株C,錯誤。

D.菌株C在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上可以生長，錯誤。

5.答案：D

解析：本題主要考查微生物的培養(yǎng)與分離，考查學(xué)生的實(shí)驗(yàn)與探究能力。培養(yǎng)霉菌時需要將

培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或微堿性，D項(xiàng)錯誤。

6.答案：C

解析：本題考查的是植物組織培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容。植物的綠色葉片和白色花瓣均具有

本物種的全套遺傳物質(zhì)，利用它們作為外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗；外

植體脫分化培養(yǎng)成愈傷組織的過程，需要生長素和細(xì)胞分裂素或其他植物生長調(diào)節(jié)

劑的處理；選用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得的是單倍體植株，其體細(xì)胞核中DNA是原

植株體細(xì)胞的一半，因此選用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)，不能獲得與原植株基因型相同

的植物體。

7.答案：C

解析：不同時期的花粉誘導(dǎo)成功率是不同的，在花粉發(fā)育的過程中，只有某一時期對離體刺

激敏感，并不是任何時期的花粉都可以產(chǎn)生愈傷組織或胚狀體，A錯誤；對一般植物而言，

在單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高，B錯誤，C正確；為

了挑選到單核期的花藥，通常選擇完全未開放的花蕾，對于盛開或略微開放的花，花瓣已經(jīng)

松動，給材料消毒帶來困難，D錯誤。

8.答案：D

解析：據(jù)表格內(nèi)容可知，本題的自變量是不同的溫度，因變量是加酶去污力與不加酶去污力

的大小，因此本研究的主要目的是探究溫度對復(fù)合酶制劑去污力的影響，A正確;實(shí)驗(yàn)中的

無關(guān)變包括污布上污染物種類、污染程度等，這些無關(guān)變量均會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，B正確;據(jù)

表格實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，40~50℃時，加復(fù)合酶制劑的去污力最強(qiáng)，洗滌衣物時應(yīng)控制溫度在該

范圍最適宜，C正確;據(jù)表格數(shù)據(jù)只能看出在40~50℃范圍內(nèi)，加入的復(fù)合酶制劑的活性先

增加后減少，且40~50℃時復(fù)合酶制劑的活性最高，60℃復(fù)合酶制劑的活性下降，無法看

出溫度高于60℃時，復(fù)合酶制劑會失去催化活性，D錯誤。

9.答案：B

解析：題圖所示的凝膠珠不是圓形或橢圓形，而呈蝌蚪狀，原因可能是海藻酸鈉溶液濃度偏

高或注射器中的混合液推進(jìn)速度過快，故選B。

10.答案：B

解析：在裝填凝膠色譜柱時，凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要均勻，不能有氣泡存在，因?yàn)闅馀輹?/p>

響蛋白質(zhì)洗脫的次序，因此一旦發(fā)現(xiàn)柱內(nèi)有氣泡存在，就需要重裝，A正確；凝膠色譜法分

離蛋白質(zhì)時，大分子蛋白質(zhì)因不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程短，移

動速度快，所以最先洗脫出來，B錯誤；進(jìn)行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳時，凝膠中加入的

SDS可使蛋白質(zhì)遷移率完全取決于分子大小，C正確；因SDS帶負(fù)電，故電泳時應(yīng)在負(fù)極

一側(cè)點(diǎn)樣，D正確。

11.答案：D

解析：A、PCR用的DNA聚合酶是一種耐高溫酶，A正確；

B、變性過程中，雙鏈DNA的解開不需要解旋酶，該過程通過高溫使DNA雙鏈間的氫鍵斷

裂，B正確；

C、復(fù)性過程中，引物與模板鏈的結(jié)合遵循堿基互補(bǔ)配對原則，C正確；

D、延伸過程中，需要DNA聚合酶、ATP和4種脫氧核糖核甘酸，D錯誤。

故選：D。

12.答案：B

解析：利用PCR擴(kuò)增DNA時，需要加入兩種引物，引物是一小段DNA或RNA,其基本單位是

脫氧核甘酸或核糖核甘酸,A正確;在SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳方法中加入SDS的作用是掩

蓋不同蛋白質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移速率完全取決于分子的大小,B錯誤；在提取血紅蛋

白的樣品處理階段，洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，以利于后續(xù)步驟的分離純化,C正確;在

血紅蛋白分離過程中，如果紅色帶區(qū)歪曲、散亂、變寬，說明凝膠色譜柱的裝填不緊密,需重新

裝填,D正確。

13.答案：A

解析：剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，是一種鑒定試劑，不能作為高產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌

的碳源，A錯誤；分離菌株前應(yīng)對土壤溶液進(jìn)行搖床培養(yǎng)，可增加培養(yǎng)液中的溶氧量以及菌

體與培養(yǎng)液的接觸，以擴(kuò)大目標(biāo)菌株數(shù)量，B正確；篩選高產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌時，可先用稀釋

涂布平板法初篩菌種，挑選透明圈較大的菌落，再用平板劃線法純化菌種，C正確；為了保

證菌株X產(chǎn)生的纖維素酶具有較高活性，能將纖維素高效分解，還需對菌株X所產(chǎn)生的纖

維素酶進(jìn)行酶活力的測定，D正確。

14.答案：D

解析：可以用體積分?jǐn)?shù)為0.1%的NaOH溶液和鹽酸進(jìn)行pH調(diào)節(jié)，A正確;用玻璃棒不時地

攪拌反應(yīng)混合物，有利于底物與果膠酶充分接觸，B正確;蘋果切成小塊，有利于果膠酶與

底物的接觸，C正確;橙子不需要去皮，D錯誤。

15.答案：C

解析：先將豆腐切成塊放在消過毒的籠屜中，保持溫度在15~18℃,并保持一定的濕度，A

正確;參與腐乳制作的微生有多種，其中起主要作用的是毛霉，而毛霉為好氧型真菌，所以

為避免其無氧呼吸，放置豆腐塊時要留出一定縫隙，B正確;將長滿毛霉的豆腐放入瓶中，

并逐層加鹽，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些，避免雜菌污染，C錯誤;用膠條密封瓶口時，

最好將瓶口通過酒精燈的火焰，以防止瓶口被污染，D正確。

16.答案:A

解析：A、對氨基苯磺酸溶液與N-1-蔡基乙二胺溶液等體積混合作為亞硝酸鹽的測定的顯色

劑，A錯誤；B、亞硝酸鹽濃度較高，微生物因失水而不能生存，B正確；C、在泡菜腌制

過程中，亞硝酸鹽含量先增加，一般腌制10d后，亞硝酸鹽含量開始下降，C正確；D、如

果樣液的比色杯光程大于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時的比色杯光程，測得的樣液中亞硝酸鹽含量偏大，

D正確。故選A。

17.答案：A

解析：本題考查果酒和果醋的制作。甲裝置中，閥a控制進(jìn)氣，閥b控制排氣，所以可先用

于果酒的制作，后閥a保持開放，用于果醋的制作，A正確；甲裝置中，閥a控制進(jìn)氣，閥

b控制排氣，制作果酒時應(yīng)關(guān)閉閥a以創(chuàng)造缺氧環(huán)境，適時打開閥b幾秒鐘以排出產(chǎn)生的

CO2,B錯誤；果酒發(fā)酵的最適溫度是18~25℃,果醋發(fā)酵的最適溫度是30~35℃,所以果

醋發(fā)酵所需的最適溫度高于果酒發(fā)酵，C錯誤；過程③表示酵母菌有氧呼吸的第二和第三階

段，該過程的反應(yīng)場所是線粒體，過程④表示果醋發(fā)酵，醋酸菌屬于原核生物，所以該過程

的反應(yīng)場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，D錯誤。

18.答案：C

解析：腌制過程中，壇中出現(xiàn)溶液量增多現(xiàn)象的主要原因是蔬菜在高于細(xì)胞液濃度的鹽水中

失水，A錯誤；為了保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境：①選擇的泡菜壇要封閉性好；②

加入蔬菜后要注入煮沸冷卻的鹽水，使鹽水沒過全部蔬菜；③蓋上壇蓋后要在壇邊沿的水槽

中注滿清水，主要依賴①③，B錯誤；由于食鹽用量過低，造成微生物大量繁殖，將蔬菜中

的硝酸鹽還原成亞硝酸鹽，所以制作泡菜時食鹽的濃度越低，亞硝酸鹽含量的峰值出現(xiàn)得越

早，且峰值較高，C正確；據(jù)圖分析可知，食鹽用量和腌制時間都會影響亞硝酸鹽含量；亞

硝酸鹽含量達(dá)到峰值后下降，是因?yàn)槿毖鹾退嵝原h(huán)境抑制雜菌生長，使亞硝酸鹽的產(chǎn)生量降

低；同時乳酸菌產(chǎn)生亞硝酸還原酶會將亞硝酸鹽分解，D錯誤。

19.答案：C

解析：培養(yǎng)和分離微生物時，需要配制培養(yǎng)基，將配方中的試劑溶化以后要先調(diào)pH,再用

高壓蒸汽滅菌法滅菌，這樣可以減少被雜菌污染的機(jī)會，A正確；純化微生物時，不管使用

哪種接種方法，目的都是將聚集在一起的細(xì)菌分散成單個細(xì)胞，從而獲得單菌落，B正確；

根據(jù)圖示可知，接種方法是稀釋涂布平板法，但是要篩選出能高效分解尿素的細(xì)菌，所使用

的培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，而牛肉膏和蛋白陳中都含有氮源，所以步驟③不能用牛肉膏

蛋白陳培養(yǎng)基，C錯誤；步驟④是要對細(xì)菌分解尿素的能力進(jìn)行鑒定和比較，所以需要從③

中挑取不同的菌落，分別接種，彼此形成相互對照，根據(jù)結(jié)果比較分析，D正確。

20.答案:C

解析：A、白色菌落的大腸桿菌是轉(zhuǎn)入了目的基因的，所以應(yīng)選擇白色菌落的大腸桿菌進(jìn)行

擴(kuò)大培養(yǎng)，A正確；

B、若大腸桿菌的菌落為藍(lán)色，說明lacZ基因沒有被破壞，因此證明導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒，B

正確；

C、PUC118質(zhì)粒攜帶了氨革青霉素抗性基因，為了便于篩選，受體大腸桿菌應(yīng)不含氨不青

霉素抗性基因，這樣才能在含有氨茉青霉素的培養(yǎng)基上篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿

菌，C錯誤；

D、圖中可以看出，質(zhì)粒中還存在氨葦青霉素抗性基因，因此培養(yǎng)基中加入適量氨葦青霉素,

這樣可以將沒有導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌淘汰，D正確。

故選：Co

21.答案：(1)紙層析；維生素A

(2)干燥；性質(zhì)和使用量

(3)鑒別；無菌水；紅色圈較深(或紅色圈較大)

解析：(1)對胡蘿卜素進(jìn)行分離鑒定的方法是紙層析法；1分子B-胡蘿卜素在人體內(nèi)可被

氧化成2分子的維生素A,因此，隹胡蘿卜素可以用來治療夜盲癥等疾病。

(2)圖中收集菌絲后進(jìn)行的處理是粉碎和干燥，使原料與有機(jī)溶劑充分接觸，增大溶解度;

胡蘿卜素萃取的效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量。

(3)篩選出合成胡蘿卜素較強(qiáng)的菌體使用鑒別培養(yǎng)基；對照組培養(yǎng)基涂布等量無菌水，放

入相同環(huán)境中培養(yǎng)，觀察是否產(chǎn)生菌落，判斷培養(yǎng)基是否被污染；依據(jù)“研究表明菌體細(xì)胞

內(nèi)含有可將無色的TTC還原為紅色復(fù)合物的物質(zhì)，且菌體細(xì)胞內(nèi)該物質(zhì)含量越高，還原能

力越強(qiáng)，胡蘿卜素合成能力也越強(qiáng)”，推測挑取單菌落時，菌落周圍紅色圈越大，顏色越深,

該菌株合成胡蘿卜素能力越強(qiáng)。

22.答案：(1)水、無機(jī)鹽、氮源；乙

(2)瓶口處被雜菌污染的可能性較大，加多點(diǎn)鹽可以有效抑制微生物的生長；抑菌、防腐和

調(diào)味

(3)毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將蛋白質(zhì)分解成氨基酸，使氨基酸含量增加；食鹽使毛霉的

酶活性降低；加鹽使豆腐中的水分析出，部分氨基酸隨之析出；增加

解析：判斷產(chǎn)蛋白酶活力高低的指標(biāo)是菌落直徑和菌落與透明圈一起的直徑的比值，比值越

大，說明該菌產(chǎn)蛋白酶活力越低，所以產(chǎn)蛋白酶活力最高的是乙組的毛霉?！鞍讐K”到“晾曬

2d”發(fā)生的變化依賴毛霉進(jìn)行的發(fā)酵，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將蛋白質(zhì)分解成氨基酸，

使氨基酸含量增加。加鹽腌制后，由于食鹽使毛霉的酶活性降低，同時加鹽使豆腐中的水分

析出，部分氨基酸隨之析出，所以，腐乳坯中的游離氨基酸含量下降。后酵期由于有蛋白酶

繼續(xù)進(jìn)行發(fā)酵，所以發(fā)酵瓶中的游離氨基酸會增加。

23.答案：(1)②滅菌；③全營養(yǎng)；固體；④無氧；菌落的特征；⑤1.65義1。7

(2)伊紅美藍(lán)；鑒別

解析：（1）②探究實(shí)驗(yàn)需要遵循對照原則和單一變量原則。該實(shí)驗(yàn)的目的是探究某品牌酸奶

對小鼠腸道菌群的影響，因此可用含有某品牌酸奶的食物連續(xù)飼喂甲組小鼠12周（實(shí)驗(yàn)組）,

用含有等量的經(jīng)過滅菌的該品牌酸奶的相同食物連續(xù)飼喂乙組小鼠12周（對照組）。

③該實(shí)驗(yàn)的目的是探究某品牌酸奶對小鼠腸道菌群的影響，而不是篩選出某種微生物，因此

應(yīng)收集甲組和乙組（實(shí)驗(yàn)組和對照組）小鼠糞便制成懸浮液涂布于全營養(yǎng)的固體培養(yǎng)基上。

④腸道菌群生活在缺氧的環(huán)境中，因此接種后應(yīng)該置于無氧條件下培養(yǎng)，通過觀察菌落的特

征以初步鑒定小鼠腸道中的微生物種類。

⑤在104稀釋倍數(shù)下各取0.1mL稀釋液涂布于3個平板上,經(jīng)培養(yǎng)獲得的菌落數(shù)分別為165、

160、170個，平均值為165個，則1mL菌液中微生物數(shù)為券=個。

（2）伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌，含有伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。

24.答案：增加洗衣粉的用量、加酶、延長浸泡時間和適當(dāng)提高溫度等（答兩點(diǎn)即給分）蛋白

酶和脂肪

⑵專一性50℃左右（答“大于40℃”也可）

（3）沒有差異，因?yàn)楦邷厥姑甘Щ睿毚鹑?/p>

（4）未運(yùn)用酶的固定化技術(shù)，因?yàn)槊肝垂潭ㄔ诓蝗苡谒妮d體上，也不能重復(fù)利用（須答