臨床化學檢驗臨床化學檢驗臨床化學一、肝功能項目檢測二、腎功能項目檢測三、血脂項目檢測四、糖類項目檢測五、影響生化結果的因素臨床化學檢驗一、肝功能檢測1.1血清總蛋白測定1.2血清白蛋白測定1.3血清ALT測定1.4血清AST測定1.5血清GGT測定1.6血清Tbil測定1.7血清Dbil測定1.8血清ALP測定臨床化學檢驗1.1血清總蛋白測定雙縮脲常規(guī)法（全自動生化儀）原理：所有蛋白質分子都含有肽鏈。在堿性溶液中，肽鏈與銅離子結合，生成藍紫色的化合物。藍紫色化合物在540nm的吸光度與肽鏈的數(shù)量呈正比關系，可以基計算蛋白質含量。這一反應稱雙縮脲反應，這種試劑稱雙縮脲試劑。雙縮脲比吸光度法原理：按照Doumas方法所規(guī)定的配方配置雙縮脲試劑、控制反應條件和校準分光光度計的情況下，雙縮脲反應的呈色強度時穩(wěn)定的，可以根據蛋白質雙縮脲復合物的比吸光度，直接計算血清總蛋白質濃度。

臨床化學檢驗計算公式：血清總蛋白（g/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×蛋白標準液濃度參考區(qū)間：健康成人走動后，血清總蛋白濃度為64~83g/L健康成人靜臥時，血清總蛋白濃度為60~78g/L臨床化學檢驗

臨床意義血清總蛋白濃度升高：①血清中水分減少，使總蛋白濃度相對增高。凡體內水分的排除大于水分的攝入時，均可引起血漿濃縮，尤其是急性失水時（入嘔吐、腹瀉、高熱等）變化更為顯著，血清總蛋白濃度有時可達100~150g/L。又如休克時，由于毛細血管通透性的變化，血漿也可發(fā)生濃縮。慢性腎上腺皮質功能減退患者，由于鈉的丟失而致繼發(fā)性水分丟失，血漿也可出現(xiàn)濃縮現(xiàn)象。②血清蛋白質合成增加。大多發(fā)生在多發(fā)性骨髓瘤患者，此時主要是球蛋白的增加，其量可超過50g/L，總蛋白則可超過100g/L。臨床化學檢驗血清總蛋白濃度降低：①血漿中水分增加，血漿被稀釋。如因各種原因引起的水鈉潴留。②營養(yǎng)不良和消耗增加。長期食物中蛋白含量不足或慢性腸道疾病所引起的吸收不良，使體內缺乏合成蛋白質的原料，或因長期患者消耗性疾病，如嚴重結核病、甲狀腺功能亢進和惡性腫瘤等，均可造成血清總蛋白濃度降低。③合成障礙，主要是肝功能障礙。肝臟功能嚴重損害時，蛋白質的合成減少，以白蛋白的下降最為顯著。④蛋白質丟失。嚴重燙傷時，大量血漿滲出，或大出血時，大量血液的丟失；腎病綜合征時，尿液中長期丟失蛋白質；潰瘍性結腸炎可從糞便中長期丟失一定量的蛋白質，這些均可使血清總蛋白濃度降低。臨床化學檢驗1.2血清白蛋白測定方法：溴甲酚綠法，溴甲酚紫法原理：在PH4.2的緩沖液中，白蛋白分子帶正電荷，與帶負電荷的溴甲酚綠（BCG）生成藍綠色復合物，在波長628nm處有吸收峰。復合物的吸光度與白蛋白濃度成正比，與同樣處理的白蛋白標準物質比較，可求得血清中白蛋白的濃度。計算：血清白蛋白（g/L）=測定管吸光度/標準管吸光度×白蛋白標準液的濃度（g/L）目前，生化自動分析儀同時測定血清總蛋白（雙縮脲法）和白蛋白（BCG法），并自動計算出球蛋白濃度和白/球蛋白比值。參考區(qū)間：4~14歲兒童，血清白蛋白濃度為38~54g/L

健康成人血清白蛋白濃度為34~48g/L臨床化學檢驗臨床意義：血清白蛋白在肝臟合成，血清白蛋白濃度增高常由于嚴重失水、血漿濃縮所致，并非蛋白質絕對量的增加。臨床上，尚未發(fā)現(xiàn)單純白蛋白濃度增加的疾病。白蛋白濃度降低的原因與總蛋白濃度降低的原因相同。但有時總蛋白的濃度降低，同時伴有球蛋白濃度的增高。急性白蛋白濃度降低，主要由于急性大量出血或嚴重燙傷時的血漿大量丟失。慢性白蛋白濃度降低主要由于肝臟合成白蛋白功能障礙。腹水形成時白蛋白的丟失和腎病是白蛋白從尿液中的丟失。嚴重時，白蛋白濃度可低于10g/L。白蛋白濃度低于20g/L時，由于膠性滲透壓的下降，?？梢姷剿[等現(xiàn)象。妊娠時，尤其是妊娠晚期，由于體內對蛋白質的需要量增加，同時又伴有血漿容量增高，血清白蛋白可明顯下降，但分娩后可迅速恢復正常。極少數(shù)先天性白蛋白缺乏癥患者，由于白蛋白合成障礙，血清中幾乎沒有白蛋白，但患者不出現(xiàn)水腫。臨床化學檢驗球蛋白濃度增高臨床上常以γ-球蛋白增高為主。球蛋白增高的原因，除水分丟失的間接原因外，主要有下列因素：①感染性疾病，如結核病、瘧疾、黑熱病、血吸蟲病、麻風病等；②自身免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、風濕熱類風濕性關節(jié)炎、肝硬化等；③多發(fā)性骨髓瘤，此時γ-球蛋白可增至20~50g/L臨床化學檢驗球蛋白濃度降低球蛋白濃度降低主要是合成減少。正常嬰兒出生后至3歲內，由于肝臟和免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完全，球蛋白濃度較低，屬于生理性低球蛋白血癥。腎上腺皮質激素和其他免疫抑制劑有抑制免疫機能的作用，會導致球蛋白的合成減少。低γ-球蛋白血癥或無γ-球蛋白血癥，患者血清中γ-球蛋白極度低下或缺如。先天性者，僅見于男性嬰兒。而后天獲得性者，可見于男、女兩性。此類患者缺乏體液免疫功能，極易發(fā)生難以控制的感染。臨床化學檢驗

1.3血清ALT測定1.3.1方法：①速率法（全自動生化儀）；L-丙氨酸+α-酮戊二酸-（ALT）→丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+氫離子-（LDH）→L-乳酸+NAD離子上述偶聯(lián)反應中，NADH的氧化速率與標本中酶活性呈正比，可在340nm波長監(jiān)測吸光度下降速率（-ΔA/min），計算出ALT的活力單位。②雙試劑法1.3.2參考區(qū)間：男性：5～10U/L；女性5～35U/L臨床化學檢驗1.3.3臨床意義1.3.3.1ALT活性增高①肝膽疾病傳染性肝炎、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝和膽管炎等；②心血管疾病心肌梗死、心肌炎、心力衰竭時肝瘀血和腦出血等；③藥物和毒物氯丙嗪、異煙肼、奎寧、水楊酸制劑及乙醇、鉛、汞、四氯化碳或有機磷等引起ALT活性增高。1.3.3.2ALT活性降低磷酸吡多醛缺乏癥臨床化學檢驗1.4血清AST測定1.4.1方法①速率法（全自動生化儀）L-天門冬氨酸+α=酮戊二酸-（AST）→草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+NADH+氫離子-（MDH）→L-蘋果酸+NAD離子分光光度計波長340nm，監(jiān)測NADH被氧化引起的吸光度下降速率（-ΔA/min），該下降速率與AST活性呈正比。②賴氏法1.4.2參考區(qū)間男性：13～40U/L;女性：10～28U/L臨床化學檢驗1.4.3臨床意義

AST在心肌細胞內含量最多，當心肌梗死時，血清中AST活力增高，在發(fā)病后6~12h之內顯著增高，在48h達到高峰，約在3～5天后恢復正常。血清中AST也可來源于肝細胞，各種肝病可引起血清AST的升高，有時可達1200U，中毒性肝炎還可更高。肌炎、胸膜炎、腎炎及肺炎等也可引起血清AST的輕度增高。臨床化學檢驗

1.5血清GGT測定1.5.1方法①L-γ-谷氨酰-3羧基-對硝基苯胺為底物的速率法②重氮反應比色法以L-γ-谷氨酰-α-萘胺為底物，在GGT催化下，γ-谷氨?；D移到雙甘肽分子上，同時釋放出游離的α-萘胺，后者與重氮試劑反應，產生紅色化合物。③酶比色法(全自動生化儀)：

L-γ-谷氨酰-3羧基-4-硝基苯胺+甘氨酰甘氨酸-（GGT）→

L-γ-谷氨酰-甘氨酰甘氨酸+氨基-2-硝基苯甲酸鹽1.5.2參考區(qū)間成人：9～64U/L臨床化學檢驗1.5.3臨床意義人體各器官中GGT含量按腎、前列腺、胰、肝、盲腸和腦的順序排列。在腎臟、胰腺和肝臟中，GGT的含量之比為100：8：4。腎臟中GGT含量最高，但腎臟疾病時，血液中該酶活性增高卻不明顯。有人認為，腎單位病變時，GGT經尿排出，測定尿中酶活力可能有助于診斷腎臟疾患。GGT主要用于診斷肝膽疾病。原發(fā)性肝癌、胰腺癌和乏特壺腹痛時，血清GGT活力顯著增高，特別在診斷惡性腫瘤患者有無肝轉移和肝癌術后有無復發(fā)時，陽性率可達90%。嗜酒或長期接受某些藥物如苯巴比妥、苯妥因鈉、安替比林者，血清GGT活性常常升高?？诜茉兴帟笹GT增高20%。但是，GGT作為肝癌標志物的特異性較差，急性肝炎，慢性肝炎活動期、阻塞性黃疸、膽道感染、膽石癥、急性胰腺炎時都可以升高。臨床化學檢驗

1.6血清Tbil與Dbil測定1.6.1方法：①改良J-G法（全自動生化儀）在沒有加速試劑存在時，血清與重氮試劑反應所生成的紅色偶氮膽紅素為直接膽紅素。在同樣的反應條件下，有加速試劑存在時，血清與重氮試劑反應，所生成的紅色重氮膽紅素為總膽紅素。最后，加入堿性酒石酸溶液，使紅色偶氮膽紅素（530nm）轉變成藍綠色偶氮膽紅素（600nm），進行比色測定。②膽紅素氧化酶法③釩酸鹽氧化法臨床化學檢驗1.6.2參考區(qū)間健康成年人血清總膽紅素濃度：

3.4～17.1μmol/L(0.2～1.0mg/dl)健康成年人血清結合膽紅素濃度：

0～3.4μmol/L(0～0.2mg/dl)臨床化學檢驗1.6.3臨床意義①血清總膽紅素增高病毒性肝炎、中毒性肝炎或肝癌、肝內或肝外膽道阻塞、溶血性疾病、新生兒生理性黃疸、Crigler-Najjar綜合征、Gilbert病和Dubin-Johnson綜合征等。②血清結合膽紅素增高肝內或肝外膽道阻塞、肝細胞損害（特別是疾病后期）、Dubin-Johnson綜合征和Rotor綜合征等。臨床化學檢驗

1.7血清ALP測定1.7.1方法①速率法（全自動生化儀）以磷酸對硝基苯（4-NPP）為底物，2-氨基-2-甲基-1-丙醇（AMP）或二乙醇胺（DEA）為磷酸?；氖荏w物質，增進酶促反應速率。4-NPP在堿性溶液中為無色，在ALP催化下，4-NPP分裂出磷酸?；捎坞x的對硝基苯酚（4-NP）。后者在堿性溶液中轉變成醌式結構，呈現(xiàn)較深的黃色。在波長405nm處監(jiān)測吸光度增高速率，計算出活性單位。②比色法1.7.2參考區(qū)間女性：1～12歲：＜500U/L；15歲以上40～150U/L

男性：1～12歲：＜500U/L；12～15歲：＜750U/L；

25歲以上40～150U/L.臨床化學檢驗1.7.3臨床意義堿性磷酸酶活力測定常作為肝膽疾病和骨骼疾病的臨床輔助診斷指標。血清堿性磷酸酶活力型增高可見于下列疾?。孩俑文懠膊∽枞渣S疸、急性或慢性黃疸型肝炎、肝癌等。②骨骼疾病由于骨的損傷或疾病使成骨細胞內所含高濃度的堿性磷酸酶釋放入血液中，引起血清堿性磷酸酶活力增高。如纖維性骨炎、成骨不全癥、佝僂病、骨軟化病、骨轉移癌和骨折修復愈合期等。臨床化學檢驗

二、腎功能項目檢測檢測意義:用于排除和發(fā)現(xiàn)腎臟和泌尿道疾病腎前，腎臟和腎后功能檢查臨床化學檢驗Urea尿素（Urea）含量的檢測見于：腎功能低下、腎前氮質血癥（如充血性心力衰竭、休克）、腎后氮血癥、胃腸道出血、高蛋白飲食、藥物影響（如皮質類固醇類、四環(huán)素等）、妊娠后期、重癥肝臟功能不全、營養(yǎng)不良、脂性腎病變。臨床化學檢驗Crea肌酐含量的檢測見于：（1）增高：腎病初期肌酐值常不高，直至腎實質性損害，血肌酐值才升高。其值升高３－5倍提示有尿毒癥的可能，升高10倍，常見于尿毒癥。如果肌酐和尿素氮同時升高，提示腎嚴重損害，如果尿素氮升高而肌酐不高常為腎外因素所致。（2）降低：腎衰晚期、肌萎縮、貧血、白血病、尿崩癥等。臨床化學檢驗UA樣品中尿酸含量的檢測見于：（1）增高：血尿酸測定對痛風診斷最有幫助，痛風患者血清中尿酸常增高。核酸代謝增加：如白血病、多發(fā)性骨髓瘤、真性紅細胞增多癥。腎臟疾病：急性或慢性腎炎時，血中尿酸顯著增高，其增高程度較非蛋白氮、尿素氮、肌酐更顯著，出現(xiàn)更早。由于腎外因素對尿酸的影響較大，故血尿酸升高程度往往與腎功能損害程度不平行。其他：氯仿中毒、四氯化碳中毒、鉛中毒、子癇、妊娠反應、飲食中脂肪過多、肥胖、糖尿病等。（2）減少：遺傳性黃嘌呤尿癥等。臨床化學檢驗

三、血脂項目檢測檢測項目:TC總膽固醇TG甘油三酯HDL-C高密度脂蛋白-膽固醇LDL-C低密度脂蛋白-膽固醇ApoA1載脂蛋白A1ApoB載脂蛋白BLp（a）脂蛋白a檢測意義:用于心血管疾病的臨床觀察、干預研究、實驗室和流行病學調查。臨床化學檢驗TC影響TC水平的因素有：①年齡與性別：TC水平往往隨年齡上升，但到70歲后有所下降。中青年期女性低于男性，50歲以后女性高于男性。②長期的高膽固醇、高飽和脂肪和高熱量飲食，可使TC增高。③遺傳因素。④其它：如缺少運動、腦力勞動、精神緊張等可能使TC升高。增高：高總膽固醇是冠心病的主要危險因素之一，有原發(fā)和繼發(fā)兩種，原發(fā)常由遺傳因素引起如家族性高膽固醇血癥（低密度脂蛋白受體缺陷）、家族性apoB缺陷癥、多源性高TC、混和性高脂蛋白血癥等。繼發(fā)的見于腎病綜合征、甲狀腺功能減退、糖尿病、膽總管阻塞、粘液性水腫、妊娠等。減少：低總膽固醇也有原發(fā)和繼發(fā)兩種，前者常由遺傳因素引起如家族性的無或低β脂蛋白血癥，后者如甲狀腺功能亢進、營養(yǎng)不良、慢性消耗性疾病、惡性貧血、溶血性貧血等。臨床化學檢驗TG樣品甘油三酯（TG）含量的檢測見于：動脈粥樣硬化、冠心病、腎病綜合癥、糖尿病、甲狀腺功能減退、糖原累積癥、皮質醇增多癥、某些肝膽疾?。ㄈ缰?、肝臟膽汁郁積等）、胰腺炎及家族性高甘油三酯血癥等。長期禁食、高脂飲食以及大量飲酒、甲狀腺功能亢進、腎上腺皮質功能減退、嚴重肝功能障礙等。臨床化學檢驗HDL－CHDL－C降低是臨床冠心病的先兆，并能促進動脈樣硬化的發(fā)展。血清中HDL－C水平與冠心病發(fā)病率呈負相關HDL－C降低是臨床冠心病的先兆，并能促進動脈樣硬化的發(fā)展。血清中HDL－C水平與冠心病發(fā)病率呈負相關。HDL-C下降也多見于腦血管病糖尿病、肝炎、肝硬化等。高TG血癥往往伴以低HDL-C。肥胖者HDL-C也多偏低。吸煙可使其下降，飲酒及長期體力活動會使其升高。臨床化學檢驗LDL-C樣品低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量的檢測見于：動脈硬化的危險因素、協(xié)助診斷高脂蛋白血癥、家族性低β－脂蛋白血癥、無β脂蛋白血癥等。增高：見于高脂蛋白血癥、冠心病、腎病綜合征、慢性腎功能衰竭、肝病和糖尿病等，也可見于神經性厭食及懷孕婦女。減低：見于營養(yǎng)不良、慢性貧血、骨髓瘤、急性心肌梗死、創(chuàng)傷和嚴重肝病等。臨床化學檢驗ApoAlApoB載脂蛋白A1(ApoAl)作為人體血漿高密度脂蛋白分子中載脂蛋白的主要成分,在人體生理和病理過程中發(fā)揮著重要的作用.它具有膽固醇逆向轉運功能,從而對動脈粥樣硬化有抵抗與治療作用.最近研究表明,它還具有其他生化作用,包括抗氧化作用、抗炎、抗內毒素作用等.這些功能的發(fā)現(xiàn)將促使ApoA1成為臨床上防治動脈粥樣硬化、炎癥及內毒素血癥等的新方法。載脂蛋白B存在于低密度脂蛋白的表面，細胞識別和攝取LDL主要通過識別載脂蛋白B實現(xiàn)。所以，載脂蛋白B增多時，即使LDL水平正常，也可使冠心病發(fā)病率增高。臨床化學檢驗LP（a）LP（a)水平主要決定于遺傳，家族性高LP（a)與冠心病發(fā)病傾向相關。男女之間不同年齡組間環(huán)境飲食與藥物對LP（a)水平的影響不明顯。吸煙也無影響，但嚴重肝病可使它下降，急性時相反應可使它上升?，F(xiàn)在將高LP（a)水平看作動脈粥樣硬化性疾病的獨立危險因素，LDL-C較高時，高LP（a)的危險性就更高臨床化學檢驗

四、糖類項目檢測檢測項目:GLU葡萄糖1,5-AG1,5-脫水-D-山梨醇HBA1C糖化血紅蛋白FMN果糖胺/糖化血清蛋白NAGN-乙酰氨基葡萄糖苷酶檢測意義:

用于診斷糖尿病、監(jiān)測治療過程。臨床化學檢驗Glu樣品葡萄糖（Glu）含量的檢測見于：糖尿病、動脈粥樣硬化、冠心病、腎病綜合癥、甲狀腺功能減退、膽道梗阻、飲酒過量、急性失血以及家族性高膽固醇血癥、甲狀腺功能亢進、嚴重肝功能衰竭、溶血性貧血、感染和營養(yǎng)不良等。臨床化學檢驗HbA1c糖化血紅蛋白（HbA1c）與血中葡萄糖的含量成正比關系，可以間接反映血糖濃度的改變，同時也反映機體糖代謝的狀態(tài)。作為糖尿病的病情和治療監(jiān)測指標，能反映過去2-3月血糖控制的平均水平。對預防糖尿病孕婦的巨大胎兒、畸形胎、死胎以及急、慢性并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的監(jiān)督具有重要意義。臨床化學檢驗

五、影響生化結果的因素5.1檢驗儀器及試劑對生化結果的影響5.2生理因素對生化檢驗結果的影響5.3飲食對生化檢驗結果的影響5.4標本對生化檢驗結果的影響臨床化學檢驗5.1檢驗儀器及試劑對生化結果的影響5.1.1檢驗儀器不管設備儀器怎樣更新，但維護和使用這些設備是我們的一項日常工作。首先要熟讀使用手冊，了解各個部件的工作原理。臨床化學檢驗5.1檢驗儀器及試劑對生化結果的影響5.1.2生化試劑生化檢驗的方法一旦確定，我們就得關注廠家的試劑質量和有效期。我們按法規(guī)選擇有三證的大廠家的試劑產品，但仍需注意一下問題。（1）有效期指未污染且儲存在2～8℃的環(huán)境。（2）開蓋使用后就不能說無污染，酶活力和抗體效價可因使用時間下降，可使靈敏度或工作曲線發(fā)生改變。（3）堿性試劑可吸收空氣中的二氧化碳可改變試劑的酸堿度。綜上所述，環(huán)境、試劑使用時間等諸多因素使我們使用的試劑靈敏度發(fā)生改變，我們的工作曲線需經常校準。臨床化學檢驗5.2生理因素對生化檢驗結果的影響5.2.1年齡新生兒肝臟缺乏葡萄糖酸轉移酶，不能將為結合膽紅素轉化為結合膽紅素，因此血清總膽紅素和間接膽紅素水平比正常成人搞；正常生長期兒童由于骨骼生長，使得成骨母細胞分泌堿性磷酸酶增加，因此生長期兒童的堿性磷酸酶活性比成人要高3倍左右。因此在臨床工作中應針對這些項目在不同的年齡段制定相應的參考范圍。臨床化學檢驗5.2.2性別不同性別其體內的性素水平不同，并且生育期女性的性激素水平還隨其處在月經期的不同階段而有明顯變化；此外和肌肉代謝有關的項目，如肌酐和肌酸激酶，其血清水平男性明顯高于女性，所以我們需針對性別制定相應的參考范圍。5.2.3情緒情緒緊張、激動可影響神經-內分泌功能，使血清游離脂肪酸、乳酸、血糖等升高。故采血前患者情緒應保持穩(wěn)定，同時護理人員應向患者做適當解釋，以消除患者不必要的疑慮和恐慌。臨床化學檢驗5.2.4妊娠當女性處于妊娠階段時，由于血容量增加導致血液