1T/SINCEXXXXX—XXXX氘化鋁鋰同位素豐度的測(cè)定警告：實(shí)驗(yàn)中使用的氘化鋁鋰為強(qiáng)還原劑，遇水放出可自然的易燃?xì)怏w，應(yīng)存放于陰涼干燥通風(fēng)處，容器保持緊閉，遠(yuǎn)離火種、熱源；使用時(shí)，戴好橡膠手套、防護(hù)眼鏡、口罩等，并在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。本文件第一法規(guī)定了氘化鋁鋰同位素豐度測(cè)定的核磁共振波譜法；第二法規(guī)定了氘化鋁鋰同位素豐度測(cè)定的液相色譜-高分辨質(zhì)譜法。本文件適用于氘化鋁鋰同位素豐度的測(cè)定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T37750-2019穩(wěn)定同位素應(yīng)用術(shù)語(yǔ)及產(chǎn)品命名規(guī)則3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1同位素豐度isotopeabundance一種元素的同位素混合物中，某特定同位素的原子數(shù)占該元素的總原子數(shù)百分比，以atom%A表示，其中A為特定同位素的元素符號(hào)的代碼。[來(lái)源：GB/T37750，3.1.13]4試劑或材料4.1250mL三口燒瓶。4.2250mL恒壓滴液漏斗。4.3125mL分液漏斗。4.4二苯甲酮，≥99%。4.5無(wú)水乙醚，AR。4.61mol/L硫酸溶液。2T/SINCEXXXXX—XXXX4.7氯化鈉，AR。4.8硫酸鎂，AR。5除非另有說(shuō)明，均使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的分析純?cè)噭?，?shí)驗(yàn)用水為純水設(shè)備制備的超純水。6氘代二苯甲醇的制備取0.15g氘化鋁鋰樣品于250mL三口燒瓶中，加入10mL無(wú)水乙醚，攪拌，取1.3g二苯甲酮溶于10mL無(wú)水乙醚，通過(guò)250mL恒壓滴液漏斗緩慢滴加，室溫下反應(yīng)1h，加1mL水淬滅，6mL1mol/L硫酸溶液中和，加入15mL無(wú)水乙醚提取，利用125mL分液漏斗分離上層乙醚溶液，向乙醚溶液中加入15mL飽和氯化鈉溶液洗滌，分離出上層乙醚溶液，加入無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾，濃縮，真空干燥后得氘代二苯甲醇，每個(gè)樣品制備2平行。氘化鋁鋰與二苯甲酮反應(yīng)制備氘代二苯甲醇其反應(yīng)方程式如下：第一法：核磁共振波譜法7原理核磁氫譜（1HNMR）的峰面積與樣品中所對(duì)應(yīng)的自旋核的數(shù)目成正比，核磁氫譜僅能檢測(cè)未被氘原子取代的氫原子，當(dāng)化合物中氫原子被氘原子取代形成氘標(biāo)記位點(diǎn)，其相應(yīng)的氫譜峰面積減小，減少的部分即為氘同位素豐度。氘代二苯甲醇通過(guò)苯環(huán)位點(diǎn)作為參照，獲取氘標(biāo)記位點(diǎn)同位素豐度，氘代二苯甲醇的氘源均來(lái)至于氘化鋁鋰，因此氘代二苯甲醇同位素豐度即為氘化鋁鋰同位素豐度。8試劑或材料8.15mm核磁管。8.22mL螺紋玻璃瓶。8.3甲醇-D4，同位素豐度≥99atom%D。9儀器設(shè)備9.1核磁共振波譜儀，具有400MHz或更高頻率的傅立葉變換核磁共振儀（FT-NMR）。9.2渦旋振蕩器。9.3分析天平：感量0.01mg。3T/SINCEXXXXX—XXXX9.4鼓風(fēng)干燥箱。10試驗(yàn)步驟10.1氘代二苯甲醇的配制依次取20mg氘代二苯甲醇（6）和650μL甲醇-D4于2mL螺紋玻璃瓶（8.2）中，渦旋振蕩器（9.2）混合均勻后轉(zhuǎn)移到5mm核磁管（8.1）中，密封備用，配制2平行。10.2核磁共振氫譜推薦參考條件a)試驗(yàn)溫度：297K；b)脈沖角：90°;c)馳豫延遲時(shí)間：50s；d)掃描次數(shù)：32次；e)采樣點(diǎn)數(shù)：32K；f)化學(xué)位移掃描范圍：(-2.5～12.5)ppm；10.3核磁共振波譜儀檢測(cè)將配制好的樣品放入核磁共振波譜儀內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。相位校正調(diào)諧、選擇甲醇-D4鎖場(chǎng)，勻場(chǎng)，選擇儀器測(cè)試條件（10.2）。10.4核磁共振波譜儀數(shù)據(jù)處理對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行傅里葉變換、相位校正和基線校正，氘代二苯甲醇的1HNMR譜圖（見(jiàn)附錄A）和積分區(qū)域（見(jiàn)附錄B），各積分7次，去掉最大值和最小值，中間5次取平均值。11試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理氘同位素豐度計(jì)算方式見(jiàn)公式（1）：式中：E——樣品的同位素豐度，單位為氘同位素豐度（atom%DNx——氘標(biāo)記位點(diǎn)的氘原子個(gè)數(shù)，1；Ny——參照位點(diǎn)苯環(huán)的氫原子個(gè)數(shù)，10；Ix——氘標(biāo)記位點(diǎn)氫譜峰面積；Iy——參照位點(diǎn)苯環(huán)氫譜峰面積。計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留至小數(shù)點(diǎn)后一位。12精密度在重復(fù)條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不超過(guò)算術(shù)平均值的0.5%。4T/SINCEXXXXX—XXXX第二法：液相色譜-高分辨質(zhì)譜法13原理在高分辨質(zhì)譜負(fù)離子模式下，二苯甲醇質(zhì)荷比m/z為183.0815，氘代二苯甲醇質(zhì)荷比m/z為184.0878，通過(guò)分子量的差異，獲取氘同位素豐度，氘代二苯甲醇的氘源均來(lái)至于氘化鋁鋰，因此氘代二苯甲醇同位素豐度即為氘化鋁鋰同位素豐度。14試劑或材料14.1乙腈，MS級(jí)。14.20.22μm微孔濾膜。15儀器設(shè)備15.1液相色譜-高分辨質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源（ESI源）。15.2渦旋振蕩器。15.3超純水儀。16試驗(yàn)步驟16.1氘代二苯甲醇的配制氘代二苯甲醇（6）用乙腈（14.1）配制成濃度為10mg/mL，渦旋振蕩器（15.2）混合均勻后，0.22μm微孔濾膜（14.2）過(guò)濾，配制2平行。16.2液相色譜-高分辨質(zhì)譜儀推薦參考條件a）色譜柱：C18色譜柱，或相當(dāng)者；b）流動(dòng)相：A為超純水，B為乙腈，90%B等度洗脫10min；c）流速：0.3mL/min；d）柱溫：30℃;e）進(jìn)樣量：1μL；f）離子源：電噴霧離子源（ESI源）；g）掃描方式：負(fù)離子模式；h）檢測(cè)方式：全掃描模式（FullScan）；i）掃描范圍：182-185Da；j）電離電壓：3600V；k）毛細(xì)管溫度：320℃;l）蒸汽溫度：350℃。16.3液相色譜-高分辨質(zhì)譜儀數(shù)據(jù)處理5T/SINCEXXXXX—XXXX基于質(zhì)荷比的差異，通過(guò)高分辨質(zhì)譜提取原始數(shù)據(jù)中氘代二苯甲醇和而二苯甲醇的提取離子流峰，利用峰面積計(jì)算氘同位素豐度。17試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理氘同位素豐度計(jì)算方式見(jiàn)公式（2）：2）式中：E——樣品的同位素豐度，單位為氘同位素豐度（atom%DI184.0878——質(zhì)荷比m/z為184.0878的質(zhì)譜峰面積；I183.0815——質(zhì)荷比m/z為183.0815的質(zhì)譜峰面積。計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留至小數(shù)點(diǎn)后一位。18精密度在重復(fù)條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不超過(guò)算術(shù)平均值的0.5%。6T/SINCEXXXXX—XXXX氘代二苯甲醇1HNMR譜圖abundance 100k 7562754675627546743274077405739073597288727272577194719271787163710957949.06.08.07.09.06.0X:partsperMillion:Proton4856485628805.04.03.0202920252029202520201270012700859084500圖A氘代二苯甲醇1HNMR譜圖7T/SINCEXXXXX—XXXX（資料性）表B氘代二苯甲醇的Nx和Ny相關(guān)信息的參考示例名稱結(jié)構(gòu)式化學(xué)式氫原子個(gè)數(shù)積分區(qū)域/ppm氘代二苯甲醇C14H11DONx：16.00-5.50Ny：107.60-6.808T/SINCEXXXXX—XXXX（資料性）氘代二苯甲醇高分辨質(zhì)譜圖D1#245-280RT:1.07-1.22AV:36SB:2304.00-5.00NL:2.92E5T:FTMS-pESIFullms[40.0000-500.0000]T:184.087771009590858075706560555045403530252015183.9863310183.98633183.10265183.10265183.004515184.98443183.84640183.24379182.59055184.98443183.84640183.243790182.0