紫外光譜鑒別法一

檢查原理

二

測定儀器

三

鑒別方法

四

注意事項(xiàng)

紫外-可見分光光度法是通過被測物質(zhì)在紫外光區(qū)的特定波長或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。被測物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)中如含有共軛體系、芳香環(huán)或發(fā)色基團(tuán)，均可在近紫外區(qū)（200-400nm）或可見光區(qū)（400-760nm）產(chǎn)生吸收。紫外分光光度法主要適用于不飽和共軛體系化合物的鑒定。在藥品檢驗(yàn)中主要用于藥品的性狀鑒別、檢查和含量測定。利用紫外光譜對有機(jī)化合物進(jìn)行定性鑒別的主要依據(jù)是多數(shù)有機(jī)化合物具有特征吸收光譜，比如吸收光譜的形狀、吸收峰的數(shù)目、各吸收峰的波長位置和相應(yīng)的吸收系數(shù)等。定性分析方法常用比較法，結(jié)構(gòu)完全相同的化合物應(yīng)具完全相同的吸收光譜和特征數(shù)據(jù)。但由于紫外吸收光譜比較簡單，僅與分子結(jié)構(gòu)中發(fā)色團(tuán)、助色團(tuán)等可產(chǎn)生吸收的官能團(tuán)有關(guān)，不能表征分子的整體結(jié)構(gòu)，所以具有相同的吸收光譜的化合物不一定是同一個化合物。一、檢查原理1、比較吸收光譜若兩個樣品是同一物質(zhì)，其吸收光譜應(yīng)完全一致，利用這一特性，將試樣與已知對照品用同一溶液配制成相同濃度的溶液，分別測定其吸收光譜，然后比較它們的吸收光譜特征，比較光譜圖是否完全一致，還可以利用文獻(xiàn)所記載的標(biāo)準(zhǔn)圖譜進(jìn)行核對。如果兩個吸收光譜完全一致，則可能是同一化合物，如果兩者有差別，則肯定不是同一種化合物。二、鑒別方法2、比較吸收光譜的特征數(shù)據(jù)特征值：λmaxλminλshε或百分吸收系數(shù)最大吸收波長λmax是最長用于鑒別的光譜特征數(shù)據(jù)。若樣品化合物有多個吸收峰，并存在谷或肩峰，應(yīng)同時作為鑒別依據(jù)。具有相同或不同集團(tuán)的不同化合物，可能有相同的λmax，但由于它們的相對分子質(zhì)量不同，所以吸收系數(shù)存在差別，可用作鑒別依據(jù)。如安宮黃體酮和炔諾酮，兩者最大吸收波長相同，但吸收系數(shù)存在差別。3、比較吸光度（或吸收系數(shù)）比值有些化合物，存在兩個以上的吸收峰，可利用在不同吸收峰（或峰與谷）處測定的吸光度比值A(chǔ)1/A2作為鑒別的依據(jù)。由于測定所用的溶液濃度相同，吸光度比值即為吸收系數(shù)比值。布洛芬【鑒別】取本品，加0.4%氫氧化鈉溶液制成每1ml中約含0.25mg的溶液，照紫外-可見分光光度法（通則0401）測定，在265nm與273nm的波長處有最大吸收，在245nm與271nm的波長處有最小吸收，在259nm的波長處有一肩峰。布洛芬的0.4%氫氧化鈉的紫外吸收光譜圖三、測定儀器1、用具潔凈，吸收池配對；量瓶、移液管校正2、正確使用吸收池3、供試品溶液濃度一般在0.3～0.7之間為宜4、最大吸收波長核