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磷酸鹽緩沖液〔PBS 配制方法2023-04-2022:25:489350訂閱0.01MPBSPBS(135mMNaCI,2.7mMKCI,1.5mMKH2PO4,and8mMK2HPO4,pH7.2)PBS緩沖液(pH7.2 7.4):NaCl137mmol/L,KCl2.7mmol/L,Na2HPO44.3mmol/L,KH2PO41.4mmol/L稱7.9gNaCl,0.2gKCl,0.24gKH2PO4(or1.44gNa2HPO4)禾口1.8gK2HPO4,溶于800ml蒸餾水中,用HCl調(diào)整溶液的pH值至7.4,最終加蒸餾水定容至1L。保存于4C 冰箱中即可。需要留意的是,通常所說的濃度0.01M指的是緩沖溶液中全部的磷酸根濃度,而非Na離子或K離子的濃度,Na離子和K離子只是用來調(diào)整滲透壓的。母液的配制:0.2MNa2HPO4:稱取71.6gNa2HPO4-12H2O,溶于1000ml水0.2MNaH2PO4:稱取31.2gNaH2PO4-2H2O,溶于1000ml水各種濃度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2MPB(pH=7.4,100ml):取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。0.2MPB(pH=7.4)按相應(yīng)比例適當(dāng)稀釋即可,如:0.1MPB(PH=7.4500ml0.2MPB1000ml即可。MPB(PH=7.4):取50ml0.2MPB1000ml即可。另pH5.75.85.96.0其它各種另PH值的0.2MNaH2PO493.5929087.70.2MPB(100ml)配方:(ml)0.2MNa2HPO4(ml另pH5.75.85.96.0其它各種另PH值的0.2MNaH2PO493.5929087.70.2MPB(100ml)配方:(ml)0.2MNa2HPO4(ml)6.581012.36.16.16.28581.51518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.613877.710.590.57.88.591.57.97938.05.394.77.17.27.37.47.533287.17.27.37.47.533282319ml1667727781ml84稱取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸餾水中,用HCl調(diào)整溶液的pH值至7.4,最終加蒸餾水定容至1L即可。在15lbf/in2〔1034105Pa〕高壓下蒸氣滅菌〔至少20分鐘〕,保存存于室溫或4C 中。PH7.67.47.27.00.01MNaKNaK組化的話,則需要在配置的時(shí)候分別參加100u/ml青霉素和鏈霉素之后再調(diào)PH7.67.47.27.0H2O1000100010001000NaCl8.58.58.58.5Na2HPO42.22.22.22.2NaH2PO40.10.20.30.4依據(jù)閱歷來看,穎配置的PBS攪勻后其PH值約在7.2-7.4之間,可是在溫度的影響PH〔我親自測(cè)過偏酸〕PH至可能導(dǎo)致陰性。所以務(wù)必記得這個(gè)時(shí)候和天氣,要加強(qiáng)試驗(yàn)條件掌握問題。每次使用前PBSPBS緩沖液稱取NaCl8g,KCl0.2g,Na2HPO4?12H2O3.63g,KH2PO40.24g,溶于900ml雙pH7.41L,常溫保存?zhèn)溆?。PBST緩沖液300lTween-20參加PBS100mlPH在6.5法。PH~PH8.0PBS配方具體NaCl137mmol/L,KCl2.7mmol/L,Na2HPO44.3mmol/L,KH2PO41.4mmol/L800ml的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻H8.01L。高溫高壓滅菌后,室溫保存。PBSBuffer1mMCaCl20.5mMMgCl2。0.05mol/LPBS〔PhosphateBufferSolutionPBS〕的配制:甲液:0.05mol/LNa2HPO4溶液:稱取磷酸氫二鈉9.465g7.099g,加蒸餾水至1000ml;乙液:0.05mol/LKH2P04溶液:稱取磷酸二氫鉀,9.07g6.803g,加蒸餾水至1000m1。將甲乙液分裝在棕色瓶?jī)?nèi),于4C 用時(shí)甲、乙兩液各按不同比例混合,即可得所需pH的緩沖液,見下表:6.2420.080.06.4730.070.06.6440.060.06.8150.050.06.9860.040.07.1770.030.07.3880.020.
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