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文檔簡介

病理檢驗技術(shù)

特殊染色

脂質(zhì)中性脂和酸性脂脂質(zhì)

中性脂和酸性脂

組織內(nèi)的中性脂可在某些疾病過程中被水解而游離出脂肪酸。在組織切片內(nèi)檢出脂肪酸,有助于對某些病變的了解,常用的有硫酸耐爾藍法。

(一)試劑配制1.硫酸耐爾藍液：耐爾藍0.5g蒸餾水100ml濃硫酸0.5ml按次序溶解混合于潔凈三角燒瓶,慢火煮沸約1小時,冷后過濾。煮后的溶液因蒸發(fā)約50-60ml，即相當(dāng)于1%的耐爾藍,用回流器煮沸,耐爾藍可加至1g,因在回流器煮沸時,染液的量不會蒸發(fā)減少。2.1%的冰醋酸中性脂和酸性脂（硫酸耐爾藍法（根據(jù)Cain））（二）染色步驟1.組織固定于10%中性甲醛鈣中。2.半導(dǎo)體制冷切片機切片,或用低溫恒冷切片機切片,厚8μm3.切片用蒸餾水洗后,襪貼于載玻片。4.切片浸入預(yù)熱至60℃的硫酸耐爾藍液內(nèi)作用10分鐘。5.取出切片,置入預(yù)熱至60℃1%的冰醋酸分化,至無余色脫下。6.蒸餾水稍洗。7.甘油明膠封蓋。中性脂和酸性脂（硫酸耐爾藍法（根據(jù)Cain））(三）結(jié)果中性酯呈紅色或淡紅色,脂肪酸呈藍色,復(fù)合脂類可染為紫色,或深或淡,胞核呈藍色，細胞質(zhì)及其他組織成分呈淡藍色。(四)注意事項1.硫酸耐爾藍液不可放在冰箱內(nèi)保存,否則很容易被破壞而不能使用。2.硫酸耐爾藍的染色與1%的冰醋酸水溶液的分化應(yīng)掌握在同樣的溫度。此方法在文獻上曾引起爭論,有人對它的特異性有所懷疑,然而當(dāng)用于證明不明確的脂類時,這種方法仍是有價值的。中性脂和酸性脂（硫酸耐爾藍法（根據(jù)Cain））(五)應(yīng)用常用于鑒別組織內(nèi)的中性脂和酸性脂(脂肪酸或磷脂等),如用于動脈粥樣硬化灶、急性出血性胰腺炎的脂肪壞死時,此法可區(qū)分出兩種脂類。脂肪組織內(nèi)出現(xiàn)酸

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