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實(shí)驗(yàn)基本組織觀察第1頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹繉W(xué)習(xí)顯微鏡使用,了解人體基本組織結(jié)構(gòu)特征、分布【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】四大基本組織切片:運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元切片橫紋肌縱橫切片上皮組織切片(復(fù)層鱗狀上皮)疏松結(jié)締組織馬蛔蟲卵有絲分裂切片人血涂片第2頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)原理】光學(xué)顯微鏡的成像原理【實(shí)驗(yàn)方法與步驟】1、取出顯微鏡從顯微鏡鏡盒,以正確方式(一手托鏡臂一手托鏡底)取出顯微鏡。2、安裝正確安裝目鏡和物鏡(高倍鏡×40和低倍鏡×10),正確放置切片于載物臺(tái)上,使組織位于視野中央,調(diào)整聚光鏡至適當(dāng)亮度。3、觀察先在低倍鏡下觀察,再在高倍鏡下觀察。依次觀察四大基本組織。4、選擇一張切片,畫出基本組成結(jié)構(gòu)的形態(tài),并標(biāo)注名稱。第3頁/共39頁【注意事項(xiàng)】1、用擦鏡紙擦拭鏡頭,勿用手擦拭鏡頭。2、調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦旋鈕和細(xì)準(zhǔn)焦旋鈕時(shí),需小心,勿損傷切片。第4頁/共39頁實(shí)驗(yàn)2生理實(shí)驗(yàn)的常用儀器、器械和一般操作方法第5頁/共39頁隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,先進(jìn)的科學(xué)儀器設(shè)備在動(dòng)物生理學(xué)研究中廣泛地得到應(yīng)用,才使我們對(duì)生命活動(dòng)有了更為本質(zhì)的認(rèn)識(shí)。因此學(xué)習(xí)和掌握動(dòng)物生理常用儀器、設(shè)備的使用方法對(duì)做好動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)也十分重要。進(jìn)行動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)所需的儀器總體上可分為4大系統(tǒng)(圖2-l)。第6頁/共39頁(1)刺激系統(tǒng):是對(duì)欲研究的對(duì)象施加刺激,引起其生理功能變化(即產(chǎn)生興奮)的一套儀器設(shè)備。多種刺激因素,如光、聲、電、溫度、機(jī)械及化學(xué)因素都可興奮組織,使其產(chǎn)生生理活動(dòng)的變化。但生理實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用最多的還是電刺激,因?yàn)殡姶碳ぽ^容易控制、對(duì)組織沒有或損傷很小,引導(dǎo)方便,可重復(fù)使用。電刺激系統(tǒng)包括電子刺激器、刺激隔離器和各種電極。(2)引導(dǎo)、換能系統(tǒng):生理功能變化的信號(hào)只有用一定的議器設(shè)備顯示、記錄下來才有研究的價(jià)值。因此需要有一定的裝置能將其引導(dǎo)到顯示、記錄儀器上。若生理信號(hào)是電信號(hào)引導(dǎo)系統(tǒng)可能是引導(dǎo)電極。包括記錄單細(xì)胞活動(dòng)的玻璃微電極和記錄一群細(xì)胞電活動(dòng)的金屬電極。若生理現(xiàn)象為其他能量形式時(shí),如機(jī)械收縮、壓力、振動(dòng)、溫度和某種化學(xué)成分變化等,都需要將原始生理信號(hào)轉(zhuǎn)換為電的信號(hào)加以引導(dǎo),這就是各種形式的換能器。(3)信號(hào)調(diào)節(jié)放大系統(tǒng):有的生理信號(hào)較為微弱,尚需進(jìn)行適當(dāng)?shù)姆糯?。信?hào)調(diào)節(jié)系統(tǒng)是一種放大器或放大器的組合,對(duì)信號(hào)基線的位置和輸出信號(hào)幅度的高低(增益,信號(hào)的Y軸)進(jìn)行調(diào)節(jié)。最原始的經(jīng)典儀器是各式各樣的杠桿、瑪利式氣鼓、各種檢壓計(jì)等、現(xiàn)代儀器設(shè)備包括示波器、記錄儀中的放大器部分和專用的前置放大器、微電極放大器等。(4)顯示與記錄系統(tǒng)有用紙帶記錄、顯示屏記錄或顯示信號(hào)的儀器。通過調(diào)節(jié)相關(guān)的旋鈕調(diào)節(jié)走紙速度或掃描速度(信號(hào)的X軸)將信號(hào)擴(kuò)展開來。記紋鼓是一種較為原始的經(jīng)典記錄儀。由于計(jì)算機(jī)技術(shù)的發(fā)展。計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)已在生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中廣泛應(yīng)用,有替代刺激器、放大器、示波器和記錄儀的趨勢(shì)。第7頁/共39頁實(shí)驗(yàn)3運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)(一)
——骨骼第8頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】
1、觀察、辨識(shí)、記憶人體骨骼的分布。2、觀察、辨識(shí)、記憶人體206塊骨骼的形態(tài)、名稱、位置。3、觀察、辨識(shí)、記憶人體主要骨連結(jié)的形態(tài)、名稱、位置。4、觀察、辨識(shí)、記憶骨骼重要組成結(jié)構(gòu)的名稱、組成及意義:胸廓、脊柱、骨盆、足弓。第9頁/共39頁實(shí)驗(yàn)4運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)(二)
——肌肉第10頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】
1、觀察、辨識(shí)、記憶人體骨骼肌的形態(tài)和分類、起止和作用2、觀察、辨識(shí)、記憶人體全身骨骼肌名稱、位置:頭頸肌、軀干肌、四肢肌,見教材《人體解剖生理學(xué)》p.43表2-1第11頁/共39頁實(shí)驗(yàn)5.1神經(jīng)肌肉標(biāo)本制備(蛙坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本制備)第12頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/p>
學(xué)習(xí)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)基本的組織分離技術(shù);學(xué)習(xí)和掌握制備蛙類坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的方法;了解刺激的種類?!緦?shí)驗(yàn)原理】
蛙類的一些基本生命活動(dòng)和生理功能與恒溫動(dòng)物相似,若將蛙的神經(jīng)一肌肉標(biāo)本放在任氏液中,其興奮性在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)可保持不變。若給神經(jīng)或肌肉一次適宜刺激,可在神經(jīng)和肌肉上產(chǎn)生一個(gè)動(dòng)作電位,肉眼可看到肌肉收縮和舒張一次,表明神經(jīng)和肌肉產(chǎn)生了一次興奮。在生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中常利用蛙的坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本研究神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性。刺激與反應(yīng)的關(guān)系和肌肉收縮的特征等。制備坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本是生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本操作技術(shù)。第13頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】
蟾蜍或蛙【實(shí)驗(yàn)藥品】
任氏液、食鹽、l%H2SO4【儀器與器械】
普通剪刀、手術(shù)剪、眼科鑷(或尖頭無齒鑷)、金屬探針(解剖針)破璃分針、蛙板(或玻璃板)、蛙釘、細(xì)線、培養(yǎng)皿、滴管、鋅銅弓(或電子刺激器)、酒精燈第14頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)方法與步驟】
1.破壞腦、脊髓取蟾蜍,用自來水沖洗干凈(勿用手搓)、左手握住蟾蜍.使其背部向上,用拇指或示指使頭前俯(以頭顱后緣稍稍拱起為宜)。右手持探針由頭顱后緣的枕骨大孔處垂直刺入椎管(圖5.l-l)。然后將探針改向前刺人顱腔內(nèi),左右攪動(dòng)探針2~3次,搗毀腦組織。如果探針在顱腔內(nèi)。應(yīng)有碰及顱底骨的感覺。再將探針退回至枕骨大孔,使針尖轉(zhuǎn)向尾端,捻動(dòng)探針使其刺人椎管,搗毀脊髓。此時(shí)應(yīng)注意將脊柱保持平直。針進(jìn)入椎管的感覺是,進(jìn)針時(shí)有一定的阻力,而且隨著進(jìn)什賭賒出現(xiàn)下波僵直或尿失禁現(xiàn)象.若腦和脊髓破壞完全.蟾蜍下頜呼吸運(yùn)動(dòng)消失,四肢完全松軟,失去一切反射活動(dòng).此時(shí)可將探針反向捻動(dòng),退出椎管。如蟾蜍仍有反射活動(dòng)。表示腦和脊隨破壞不徹底,應(yīng)重新破壞。
2.剪除軀干上部、皮膚及內(nèi)臟用左手捏住蟾蜍的脊柱。右手持粗剪刀在前肢腋窩處連同皮膚,腹肌、脊柱一并剪斷,然后左手握住蟾蜍的后肢,緊靠脊柱兩側(cè)將腹壁及內(nèi)臟剪去,注意避開坐骨神經(jīng),并剪去肛門周圍的皮膚,圖下脊柱和后肢。
3.剝皮一只手捏住脊柱的斷端(注意不要捏住脊柱兩側(cè)的神經(jīng)),另一只手捏住其皮膚的邊緣,向下剝?nèi)ト亢笾钠つw(圖5.l-2)。將標(biāo)本放在干凈的任氏液中.將手及使用過的探針、剪刀全部沖洗干凈。第15頁/共39頁4.分離兩腿用鑷子取出標(biāo)本,左手捏住脊柱斷端。使標(biāo)本背面朝上,右手用粗剪刀剪去突出的骶骨(也可不進(jìn)行此步)。然后將脊柱腹側(cè)向上,左手的兩個(gè)手指捏往脊柱斷端的橫突,另一手指將兩后肢擔(dān)起,形成一個(gè)平面。此時(shí)用粗剪刀沿正中線將脊柱盆骨分為兩半(注意,勿傷坐骨神經(jīng))。將一半后肢標(biāo)本置于盛有任氏液的盤中備用,另一半放在蛙板上進(jìn)行下列操作.
5.辨認(rèn)蛙后肢的主要肌肉蛙類的坐骨神經(jīng)是由第7、8、9對(duì)脊神經(jīng)從相對(duì)應(yīng)的椎間孔穿出匯合而成,行走于脊柱的兩側(cè),到尾端(肛門處)繞過坐骨聯(lián)合,到達(dá)后肢背側(cè),行走于梨狀肌下的股二頭肌和半膜肌之間的坐骨神經(jīng)溝內(nèi),到達(dá)膝關(guān)節(jié)腘窩處有分支進(jìn)入腓腸?。▓D5.1-3)。
6.游離坐骨神經(jīng)和腓腸肌用蛙釘或左手的兩個(gè)手指將標(biāo)本繃直、固定。先在腹腔面用玻璃分針沿脊柱游離坐骨神經(jīng),然后在標(biāo)本的背側(cè)于股二頭肌與半膜肌的肌肉縫內(nèi)將坐骨神經(jīng)與周邊的結(jié)締組織分離直到腘窩。但不要傷及神經(jīng),其分支待以后用手術(shù)剪剪斷。同樣用玻璃分針將腓腸肌與其下的結(jié)締組織分離井在其跟健處穿線、結(jié)扎。
第16頁/共39頁7.剪去其他不用的組織操作從脊柱向小腿方向進(jìn)行.(1)剪去多余的脊柱和肌肉將后肢標(biāo)本腹面向上,將坐骨神經(jīng)連同2~3節(jié)脊椎用粗剪刀從脊柱上剪下來。再將標(biāo)本背面向上,用鑷子輕輕提起脊椎,自上而下剪去支配腓腸肌以外的神經(jīng)分支,直至腘窩(圖5.l-4A),并搭放在腓腸肌上。沿膝關(guān)節(jié)剪去股骨周圍的肌肉,并將股骨刮凈,用粗剪刀剪去股骨上端的1/3(保留2/3),制成坐骨神經(jīng)——小腿的標(biāo)本。(2)完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本將脊椎和坐骨神經(jīng)從腓腸肌上取下,提起腓腸肌的結(jié)扎線剪斷跟腱。用粗剪刀剪去膝關(guān)節(jié)以下部位,便制成了坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本(圖5.1-4B)。
8.檢驗(yàn)標(biāo)本用沾有任氏液的鋅銅弓觸及一下(或電刺激刺激)坐骨神經(jīng)或用鑷子夾持坐骨神經(jīng)中樞端,如腓腸肌發(fā)生迅速而明顯的收縮,說明標(biāo)本的興奮性良好。標(biāo)本浸人盛有任氏液的培養(yǎng)皿中備用。然后再依次用熱玻璃棒、食鹽(或1%H2SO4濾紙)刺激坐骨神經(jīng)中樞端(或肌肉),觀察肌肉收縮有何變化?如果放上食鹽肌肉無動(dòng)靜,用任氏液將鹽沖洗掉,再觀察沖洗過程中肌肉收縮有何變化?第17頁/共39頁【注意事項(xiàng)】1.避免蟾蜍體表毒液和血液污染標(biāo)本,壓擠、損傷和用力牽拉標(biāo)本,不可用金屬器械觸碰神經(jīng)干。
2.在操作過程中,應(yīng)給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液,防止表面干燥,以免影響標(biāo)本的興奮性。
3.標(biāo)本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘,使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定,再開始實(shí)驗(yàn)效果會(huì)較好。
4.熱玻璃棒的溫度防止過高,以免燙傷標(biāo)本。第18頁/共39頁【思考題】
1.用各種刺激檢驗(yàn)標(biāo)本興奮性時(shí),為什么要從中樞端開始?
2.刺激有幾種形式?如何解釋對(duì)食鹽的不同處理后對(duì)肌肉收縮的影響?第19頁/共39頁實(shí)驗(yàn)5.2骨骼肌收縮(刺激強(qiáng)度對(duì)肌肉收縮的影響)第20頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/p>
學(xué)習(xí)神經(jīng)-肌肉實(shí)驗(yàn)的電刺激方法和記錄肌肉收縮的方法;觀察刺激強(qiáng)度與肌肉收縮之間的關(guān)系掌握閾刺激、閾下刺激、閾上刺激、最大(最適)刺激等概念?!緦?shí)驗(yàn)原理】
對(duì)于單根神經(jīng)纖維或肌纖維來說,對(duì)刺激的反應(yīng)具有“全或無”的特性。神經(jīng)-肌肉標(biāo)本是由許多興奮性不同的神經(jīng)纖維肌纖維組成,在保持足夠的刺激時(shí)間(脈沖波寬)不變時(shí),刺激強(qiáng)度過小,不能引起任何反應(yīng);隨著刺激強(qiáng)度增加到某一定值,可引起起少數(shù)興奮性較高的運(yùn)動(dòng)單位興奮,引起少數(shù)肌纖維收縮,表現(xiàn)出較小的張力變化。該刺激強(qiáng)度為閾強(qiáng)度,具有閾強(qiáng)度的刺激稱閾刺激。此后隨著刺激強(qiáng)度的繼續(xù)增加,會(huì)有較多的運(yùn)動(dòng)單位興奮。肌肉收縮幅度、產(chǎn)生的張力也不斷增加,此時(shí)的刺激均稱為閾上刺激。但當(dāng)刺激強(qiáng)度增大到某一臨界值時(shí),所有的運(yùn)動(dòng)單位都被興奮,引起肌肉最大強(qiáng)度的收縮,產(chǎn)生的張力也最大,此后再增加刺激強(qiáng)度,也不會(huì)再引起反應(yīng)的繼續(xù)增加??梢鹕窠?jīng)、肌肉最大反應(yīng)的最小低級(jí)強(qiáng)度為最適刺激強(qiáng)度。該刺激叫最大刺激或最適刺激。第21頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】
蟾蜍或蛙【實(shí)驗(yàn)藥品】
任氏液【儀器與器材】
肌槽、張力換能器(50~100g)、LMB-2B二道生理紀(jì)錄儀、刺激器或計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng);普通剪刀、手術(shù)剪、眼科鑷{或尖頭無齒鑷)、金屬探針(解剖針)、玻璃分針、蛙板(或玻璃板)、蛙釘、細(xì)線、培養(yǎng)皿、滴管、雙凹夾第22頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)方法與步驟】
1.坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備
方法有兩種,其一制作成離體的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本,見實(shí)驗(yàn)5.1(標(biāo)本的制備)。其二制作成在體的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本,步驟如下:(1)另取一只蟾蜍,洗凈,按操作程序破壞腦和脊髓。(2)剝離一側(cè)下肢自大腿根部起的全部皮膚,然后將蟾蜍腹位固定于蛙板上。(3)于股二頭肌與半膜肌的肌肉縫內(nèi)將坐骨神經(jīng)游離,并在神經(jīng)下穿線備用。然后分離腓腸肌的跟腱穿線結(jié)扎。連同結(jié)扎線將跟腱剪下,一直將腓腸肌分離到膝關(guān)節(jié)。(4)在膝關(guān)節(jié)旁釘蛙釘,以固定住膝關(guān)節(jié)。至此在體標(biāo)本制備完畢。第23頁/共39頁
2.儀器及標(biāo)本的連接,有以下兩種方式(1)對(duì)于離體標(biāo)本,將肌槽、張力換能器均用雙凹夾固定于支架上;標(biāo)本的股骨殘端插入肌槽的小孔內(nèi)并固定之;腓腸肌跟腱上的連線連于張力換能器的應(yīng)變片上(暫不要將線拉緊)、夾住脊椎骨碎片將坐骨神經(jīng)輕輕平搭在肌槽的刺激電極上。(2)對(duì)于在體標(biāo)本,可將腓腸肌跟腱上的連線連于張力換能器的應(yīng)變片上(暫不要將線拉緊,將穿有線的坐骨神經(jīng)輕輕提起,放在保護(hù)電極上;井保證神經(jīng)與電極接觸良好。調(diào)整換能器的高低,使肌肉處于自然拉長的狀態(tài)(不宜過緊,但也不要太松)。然后可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。若是使用二道生理記錄儀進(jìn)行記錄,則將張力換能器的輸出插頭插入二道生理記錄儀的FD-2的輸入插孔;刺激器的輸出導(dǎo)線與〔肌槽的〕電極相連。若是使用計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),則將張力換能器的輸出插頭插人該系統(tǒng)的一個(gè)信號(hào)輸入通道插座(如CHI);電極的插頭插人該系統(tǒng)的刺激輸出插孔。打開計(jì)算機(jī)。啟動(dòng)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng),進(jìn)入“刺激強(qiáng)度對(duì)骨骼肌收縮的影響”實(shí)驗(yàn)菜單。
2.儀器及標(biāo)本的連接,有以下兩種方式
第24頁/共39頁3.使用單脈沖刺激方式,波寬調(diào)至并固定在1ms,刺激強(qiáng)度從零開始逐浙增大;首先找到能引起肌肉收縮的最小強(qiáng)度,該強(qiáng)度即閾強(qiáng)度。描記速度要求每刺激一次神經(jīng),都應(yīng)在記錄紙或屏幕上記錄(或顯示)一次收縮曲線(應(yīng)為一短線)。
4.將刺激強(qiáng)度逐漸增大,觀察肌肉收縮幅度是否隨著增加,記下的收縮曲線幅度是否也隨之升高。
5.繼續(xù)增大刺激強(qiáng)度,直至連續(xù)3~4個(gè)肌肉收縮曲線的幅度不再隨刺激增高為止,讀出剛剛引起最大收縮的刺激強(qiáng)度,即為最適刺激強(qiáng)度。第25頁/共39頁【注意事項(xiàng)】
l.刺激之后必須讓標(biāo)本休息一段時(shí)間,約0.5~1min。實(shí)驗(yàn)過程中標(biāo)本的興奮性會(huì)發(fā)生改變,因此還要抓緊時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
2.整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中要不斷給標(biāo)本滴加任氏液。防上標(biāo)本干燥,保持其興奮性。【可能出現(xiàn)的問題與解釋】
(1)未能找出最大刺激雖已調(diào)至刺激器的最大刺激強(qiáng)度,但經(jīng)液體介質(zhì)短路后輸出,強(qiáng)度有所降低.對(duì)刺激的神經(jīng)仍不能達(dá)到最大刺激強(qiáng)度。此時(shí)可增大刺激波寬。(2)單收縮曲線忽高忽低標(biāo)本在任氏液中浸泡的時(shí)間不夠。興奮性不穩(wěn)定;肌槽上液體堆積過多,造成短路使刺激強(qiáng)度不穩(wěn)。(3)標(biāo)本發(fā)生不規(guī)則收縮或痙攣肌槽不干凈.留有刺激物(如鹽漬);周圍環(huán)境有干擾;儀器接地不良或人體感應(yīng)帶電,接觸潮濕臺(tái)面或支架等。第26頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】l.標(biāo)記“刺激強(qiáng)度與肌肉收縮張力之間的關(guān)系”曲線,剪輯、粘貼(或打?。?/p>
2.骨骼肌收縮包括收縮和舒張兩個(gè)時(shí)期??蓽y量的值有:峰值(最大值)、張力增量(發(fā)展張力)、收縮期和舒張1/2間期(5.2-3)。本實(shí)驗(yàn)要求統(tǒng)計(jì)全班各組的結(jié)果以平均值之標(biāo)準(zhǔn)差表示,并繪制不同刺激強(qiáng)度與腓腸肌收縮張力增量的關(guān)系曲線。第27頁/共39頁【思考題】
1.組織興奮的刺激必須具備哪些條件?2.何謂閾下刺激、閾刺激、閾上刺激和最適刺激?在閾刺激和最適刺激之間為什么肌肉的收縮隨刺激強(qiáng)度增加而增加?3.實(shí)驗(yàn)過程中標(biāo)本的閾值是否會(huì)改變?為什么?第28頁/共39頁實(shí)驗(yàn)5.3骨骼肌收縮(刺激頻率對(duì)肌肉收縮的影響)第29頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/p>
觀察用不同頻率的最適刺激刺激坐骨神經(jīng)對(duì)腓腸肌收縮形式的影響及其特征。了解和掌握單收縮、復(fù)合收縮、強(qiáng)直收縮特征和形成的基本原理。第30頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)原理】
蛙的坐骨神經(jīng)肌肉標(biāo)本單收縮的總時(shí)程約為0.11s,其中潛伏期、縮短期共占0.05s,舒張期占0.06(圖5.3-1〕。若給予標(biāo)本相繼兩個(gè)最適刺激,使兩次刺激的間隔小于該肌肉收縮的總時(shí)程時(shí),則會(huì)出現(xiàn)一連續(xù)的收縮,稱復(fù)合收縮(或收縮總和)。若兩個(gè)刺激的時(shí)間間隔短于肌肉收縮總時(shí)程,而長于肌肉收縮的潛伏期和縮短期時(shí)程。使后一刺激落在前一刺激引起肌肉收縮的舒張期內(nèi),則出現(xiàn)一次收縮尚未完全舒張又引起一次收縮;若兩次刺激的間隔短于肌肉收縮的縮短期,使后一刺激落在前一次刺激引起收縮的縮短期內(nèi),則出現(xiàn)一次收縮正在進(jìn)行接著又產(chǎn)生一次收縮,收縮的幅度高于單收縮的幅度(5.3-2)。根據(jù)這個(gè)原理,若給予標(biāo)本一連串的最適刺激。則因刺激頻率不同會(huì)得到一連串的單收縮、不完全強(qiáng)直收縮或完全強(qiáng)直收縮的復(fù)合收縮(圖5.3-3)。第31頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】
蟾蜍或蛙【實(shí)驗(yàn)藥品】
任氏液【儀器與器材】
見實(shí)驗(yàn)5.2第32頁/共39頁【實(shí)驗(yàn)方法與步驟】
1.坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制備見實(shí)驗(yàn)5.1或5.2。2.儀器及標(biāo)本的連接見實(shí)驗(yàn)5.2,當(dāng)用計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),則打開計(jì)算機(jī),啟動(dòng)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng);進(jìn)入“刺激頻率對(duì)骨骼肌收縮的影響”模擬實(shí)驗(yàn)菜單。3.以波寬為lms,從最小刺激強(qiáng)度開始逐漸增加刺激強(qiáng)度對(duì)肌肉進(jìn)行刺激,找到剛剛引起肌肉最大收縮的刺激強(qiáng)度。即為該標(biāo)本的最適刺激強(qiáng)度,整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中均固定在此刺激強(qiáng)度上(一股為5~7.5V)。
4.用單刺激作用于坐骨神經(jīng),可記錄到肌肉的單收縮曲線。
5.用雙刺激作用于坐骨神經(jīng),使兩次刺激間隔時(shí)間為0.06~0.08s,記錄復(fù)合收縮曲線(紙速25~50mm/s)。
6.將刺激方式置于“連續(xù)”,其余參數(shù)固定不變,用頻率為1、6、10、15、20、30Hz的連續(xù)刺激作用于坐骨神經(jīng),可記錄到單收縮、不完全強(qiáng)直收縮和完全強(qiáng)直收縮曲線(紙速2~10mm/s)。第33頁/共39頁【注意事項(xiàng)】l.經(jīng)常給標(biāo)本滴加任氏液.保持標(biāo)本良好的興奮性。
2.連續(xù)刺激時(shí),每次刺激持續(xù)時(shí)間要保持一致,不得超過3~4(為什么?),每次刺激后要休息3
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