關(guān)于實(shí)驗(yàn)一用生長(zhǎng)譜法測(cè)定微生物的營(yíng)養(yǎng)需求第1頁(yè)，共7頁(yè)，2023年，2月20日，星期三一、目的要求

學(xué)習(xí)用生長(zhǎng)譜法測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需要（碳源）的基本原理和方法。第2頁(yè)，共7頁(yè)，2023年，2月20日，星期三二、基本原理

為了使微生物生長(zhǎng)、繁殖，必須供給所需要的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等，如果缺少其中一種，微生物便不能生長(zhǎng)。培養(yǎng)基的六大營(yíng)養(yǎng)因素：碳源氮源能源無(wú)機(jī)鹽生長(zhǎng)因子水第3頁(yè)，共7頁(yè)，2023年，2月20日，星期三根據(jù)這一特性，可將微生物接種在一種只缺少某種營(yíng)養(yǎng)物的完全合適的瓊脂培養(yǎng)基中，倒成平板，再將所缺的營(yíng)養(yǎng)物（例如各種碳源）點(diǎn)植于平板上，經(jīng)適溫培養(yǎng)，該營(yíng)養(yǎng)物便逐漸擴(kuò)散于植點(diǎn)周?chē)?。該微生物若需要此種營(yíng)養(yǎng)物，便在這種營(yíng)養(yǎng)物擴(kuò)散處生長(zhǎng)繁殖，微生物繁殖之處便出現(xiàn)圓形落圈，即生長(zhǎng)圖形，故稱(chēng)此法為生長(zhǎng)譜法。這種方法可以定性的測(cè)定微生物對(duì)各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。在微生物育種和營(yíng)養(yǎng)缺陷型的鑒定中也常用此法。

第4頁(yè)，共7頁(yè)，2023年，2月20日，星期三三、實(shí)驗(yàn)材料1．培養(yǎng)基：基礎(chǔ)鹽合成培養(yǎng)基（無(wú)碳培養(yǎng)基），固體

NaCl1gKH2PO40.5gK2HPO40.5gNH4SO42gMgSO4?7H2O

0.2g

瓊脂20gpH7.0

/1L2.糖類(lèi)（10%,v/v，115oC，30min高壓滅菌）木糖，葡萄糖，甘露醇，麥芽糖，蔗糖，乳糖

3.實(shí)驗(yàn)材料：無(wú)菌平板，無(wú)菌濾紙片，打孔器等4.實(shí)驗(yàn)菌種：大腸桿菌（E.coli）

第5頁(yè)，共7頁(yè)，2023年，2月20日，星期三四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、將無(wú)碳培養(yǎng)基溶化后冷卻至到50℃左右。2、用無(wú)菌吸管吸取0.5mlE.coli

懸液于直徑為12㎝的無(wú)菌培養(yǎng)皿中，將上述冷卻的培養(yǎng)基傾倒于培養(yǎng)皿中，輕輕在桌面混勻。3、待培養(yǎng)基凝固后，在平板背面用記號(hào)筆劃分為六個(gè)區(qū)，在平板背面邊緣處標(biāo)記要點(diǎn)植的各種糖類(lèi)。4、在桌面酒精燈火焰處用鑷子分別加入蘸有不同糖類(lèi)的濾紙片。5、待平板吸收干燥后，倒置于37℃溫室培養(yǎng)18～24小時(shí)，觀察各種糖周?chē)袩o(wú)