標(biāo)準(zhǔn)解讀

《NY/T 675-2003 轎基因植物及其產(chǎn)品檢測 大豆定性PCR方法》是一項由中國農(nóng)業(yè)部發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)，該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction, PCR）技術(shù)對大豆樣品中是否存在轉(zhuǎn)基因成分進行定性檢測的方法。適用于大豆種子、大豆粉以及其他含有大豆成分的產(chǎn)品。

根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)，檢測過程主要包括以下幾個步驟：

  1. 樣品處理：首先需要對采集到的大豆或其他含大豆成分的樣本進行預(yù)處理，包括但不限于研磨成粉末等形式，以便后續(xù)提取DNA。
  2. DNA提取：從處理過的樣品中提取總DNA作為模板，用于后續(xù)的PCR擴增反應(yīng)。這里提到的方法可能涉及到使用商業(yè)化試劑盒或?qū)嶒炇易灾频奶崛》桨浮?/li>
  3. 引物設(shè)計與選擇：基于已知的轉(zhuǎn)基因序列信息，設(shè)計特異性引物。這些引物能夠特異性地識別并結(jié)合到目標(biāo)轉(zhuǎn)基因序列上，是實現(xiàn)準(zhǔn)確擴增的關(guān)鍵。
  4. PCR擴增：利用上述準(zhǔn)備好的DNA模板和引物，在特定條件下進行PCR循環(huán)擴增。這一步驟旨在大量復(fù)制目標(biāo)DNA片段，使其達到可以被檢測出來的水平。
  5. 結(jié)果分析：通過凝膠電泳等手段分離并觀察PCR產(chǎn)物，根據(jù)是否有預(yù)期大小的條帶出現(xiàn)來判斷樣品中是否含有指定的轉(zhuǎn)基因成分。


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  • 廢止
  • 已被廢除、停止使用，并不再更新
  • 2003-04-01 頒布
  • 2003-05-15 實施
?正版授權(quán)
NY/T 675-2003轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品檢測大豆定性PCR方法_第1頁
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文檔簡介

犐犆犛６５．０２０．９９

犅２０

中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

犖犢／犜６７５—２００３

轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品檢測

大豆定性犘犆犚方法

犇犲狋犲犮狋犻狅狀狅犳犵犲狀犲狋犻犮犪犾犾狔犿狅犱犻犳犻犲犱狆犾犪狀狋狅狉犵犪狀犻狊犿狊犪狀犱犱犲狉犻狏犲犱

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２００３０４０１發(fā)布２００３０５１５實施

中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布

書

中華人民共和國農(nóng)業(yè)

行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品檢測

大豆定性犘犆犚方法

ＮＹ／Ｔ６７５—２００３

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版

北京復(fù)興門外三里河北街１６號

郵政編碼：１０００４５

電話：６８５２３９４６６８５１７５４８

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社秦皇島印刷廠印刷

新華書店北京發(fā)行所發(fā)行各地新華書店經(jīng)售

開本８８０×１２３０１／１６印張１／２字數(shù)１０千字

２００３年５月第一版２００３年５月第一次印刷

印數(shù)１－１０００

書號：１５５０６６·２１５１２３

網(wǎng)址ｗｗｗ．ｂｚｃｂｓ．ｃｏｍ

版權(quán)專有侵權(quán)必究

舉報電話：（０１０）６８５３３５３３

書

犖犢／犜６７５—２００３

前言

本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部科技教育司提出。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)、上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)所、農(nóng)業(yè)部科技發(fā)展

中心。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：羅云波、黃昆侖、張大兵、賈士榮、彭于發(fā)、金蕪軍、李寧、汪其懷。

本標(biāo)準(zhǔn)首次發(fā)布。

Ⅰ

書

犖犢／犜６７５—２００３

轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品檢測大豆定性犘犆犚方法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了轉(zhuǎn)基因大豆及其產(chǎn)品的定性ＰＣＲ檢測方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆及其產(chǎn)品、轉(zhuǎn)基因抗草丁膦大豆及其產(chǎn)品、轉(zhuǎn)基因高油酸大豆及

其產(chǎn)品，包括大豆種子、大豆、豆粕、大豆粉、大豆油及其他大豆制品中轉(zhuǎn)基因成分的定性ＰＣＲ檢測。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適合于本標(biāo)準(zhǔn)。

ＮＹ／Ｔ６７２轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品檢測通用要求

ＮＹ／Ｔ６７４轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品檢測ＤＮＡ提取和純化

３原理

針對轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆（ＧＴＳ４０３２）含有的犆犪犕犞３５犛啟動子、狀狅狊終止子、矮牽?；ǖ臓脿誀校?、

犆狆４犲狆狊狆狊基因以及大豆內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因犾犲犮狋犻狀，設(shè)計特異性引物進行ＰＣＲ擴增，以檢測試樣中是否含有轉(zhuǎn)

基因抗草甘膦大豆的成分。轉(zhuǎn)基因抗草丁膦大豆和轉(zhuǎn)基因高油酸大豆含有共同的元件犆犪犕犞３５犛啟動

子基因以及內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因犾犲犮狋犻狀，用上述的引物進行ＰＣＲ擴增以檢測試樣中是否含有轉(zhuǎn)基因抗草丁膦大

豆和轉(zhuǎn)基因高油酸大豆的成分。

４試劑與材料

除非另有說明，在分析中僅使用分析純試劑；配制好的溶液經(jīng)高溫滅菌后使用。

４．１各１０ｍｍｏｌ／Ｌ的四種脫氧核糖核苷酸（ｄＡＴＰ，ｄＣＴＰ，ｄＧＴＰ，ｄＴＴＰ）混合溶液。

４．２１０ｍｏｌ／Ｌ氫氧化鈉溶液：稱取氫氧化鈉８０ｇ，先用１６０ｍＬ水溶解后，再加水定容到２００ｍＬ。

４．３５００ｍｍｏｌ／Ｌ乙二胺四乙酸二鈉鹽（ＥＤＴＡ）溶液：稱取乙二胺四乙酸二鈉１８．６ｇ，加入７０ｍＬ水

中，再加入１０ｍｏｌ／Ｌ氫氧化鈉溶液，加熱溶解后，冷卻至室溫，再用１０ｍｏｌ／Ｌ氫氧化鈉溶液調(diào)ｐＨ至

８．０，用水定容到１００ｍＬ，在１０３．４ｋＰａ滅菌２０ｍｉｎ。

４．４５０×ＴＡＥ緩沖液：稱?。裕颍椋螅玻矗玻玻纾扔茫常埃埃恚趟訜釘嚢枞芙夂?，加１００ｍＬ５００

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