趙春杰沈陽藥科大學(xué)藥分教研室第十三章生化藥物分析概論主要內(nèi)容概述質(zhì)量檢驗(yàn)的基本程序與方法常用定量分析方法及其應(yīng)用生化藥物:系指從動(dòng)物、植物及微生物提取的，也可用生物-化學(xué)半合成或用現(xiàn)代生物技術(shù)制得的生命基本物質(zhì)及其衍生物、降解物及大分子的結(jié)構(gòu)修飾物等，如氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、酶、多糖、脂質(zhì)、核苷酸類等。一、概述種類:1．氨基酸、多肽與蛋白質(zhì)類藥物（1）氨基酸及其衍生物：單氨基酸、氨基酸衍生物和復(fù)合氨基酸類。（2）藥用活性多肽：消化道多肽、下丘腦多肽、腦多肽、激肽和其他肽類等。一、概述（3）藥用蛋白：豬或牛的纖維蛋白原、纖維蛋白、水蛭素等；屬蛋白質(zhì)類的激素有生長素、甲狀旁腺素、催乳素；屬植物來源的蛋白類藥物有植物凝集素、天花粉蛋白等。2.酶類與輔酶類藥物按其功能可分為：助消化酶類、蛋白水解酶類、凝血酶及抗栓酶、抗腫瘤酶類和其他酶類等；還包括部分輔酶類（輔酶Q10）等。另外，一部分輔酶也屬于核酸類。一、概述3.多糖類藥物包括肝素、硫酸軟骨素A和C、硫酸角質(zhì)素、透明質(zhì)酸等。類肝素（酸性粘多糖）、殼聚多糖、靈芝多糖、黃芪多糖、人參多糖、海藻多糖、螺旋藻粘多糖等。4.脂質(zhì)類藥物包括多價(jià)不飽和脂肪酸（PUFA）、磷脂類、固醇類、膽酸類和卟啉類等。一、概述5.核酸及其降解物和衍生物類藥物如RNA（包括iRNA-免疫核糖核酸）、DNA（脫氧核糖核酸）、多聚胞苷酸、巰基聚胞苷酸、ATP和cAMP等。此外，有核酪制劑，6-巰基嘌呤核苷、6-巰基嘌呤、5-氟尿嘧啶、呋喃氟尿嘧啶、阿糖腺苷、環(huán)胞苷、5-氟環(huán)胞苷、5-碘苷和無環(huán)鳥苷等。一、概述特點(diǎn):共同特點(diǎn)分子量大結(jié)構(gòu)確證難全過程的質(zhì)量控制生物活性檢查安全性檢查效價(jià)（含量）測定生化藥物和基因工程藥物生物活性質(zhì)量控制特點(diǎn)一、概述一．鑒別實(shí)驗(yàn)（一）理化鑒別法

1．化學(xué)鑒別法

2．紫外分光光度法

3．高效液相色譜法（二）生化鑒別法

1．酶法

2．電泳法

3．樣品脫鹽后用等電點(diǎn)聚焦法測定（三）生物鑒別法二、質(zhì)量檢驗(yàn)的基本程序與方法二.雜質(zhì)檢查（一）一般雜質(zhì)檢查（二）特殊雜質(zhì)檢查

1．原料藥的純度分析（1）多糖類（2）酶類藥物

2．生產(chǎn)過程中雜質(zhì)的檢查二、質(zhì)量檢驗(yàn)的基本程序與方法三.安全性檢查（一）熱源檢查法和細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法（二）異常毒性試驗(yàn)（三）過敏試驗(yàn)（四）降壓物質(zhì)試驗(yàn)（五）無菌試驗(yàn)（六）基因工程藥物中可能雜質(zhì)與污染物檢查（七）致突變試驗(yàn)（八）生殖毒性試驗(yàn)二、質(zhì)量檢驗(yàn)的基本程序與方法四.含量(效價(jià))測定（一）含量測定

1．HPLC法

2．十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDS法）（二）效價(jià)測定二、質(zhì)量檢驗(yàn)的基本程序與方法一．理化分析法（一）化學(xué)分析法

1．重量法（1）

提取法（2）

揮發(fā)法（3）

沉淀法

2．滴定分析法（二）電化學(xué)分析法（三）光譜分析法

1．比色法

2．紫外分光光度法

3．熒光分光光度法三、常用定量分析方法及其應(yīng)用（四）色譜分析法

1．高效液相色譜法（HPLC）（1）反相高效液相色譜法(RP-HPLC)

（2）高效離子交換色譜法(HPIEC)

（3）高效凝膠過濾色譜法（4）應(yīng)用

2．灌注色譜法

3.高效毛細(xì)管電泳法(HPCE)三、常用定量分析方法及其應(yīng)用二、酶法（一）酶活力測定法1．基本概念2．酶促反應(yīng)的條件及影響因素（1）

底物濃度的影響（2）

PH的影響（3）

溫度的影響（4）

輔助因子的影響（5）

空白和對(duì)照試驗(yàn)三、常用定量分析方法及其應(yīng)用3．測定方法（1）取樣測定法（2）連續(xù)測定法（3）檢測方法4．討論（二）酶分析法

1．動(dòng)力學(xué)分析法

2．總變量分析法（三）酶法應(yīng)用示例

1．胰蛋白酶效價(jià)測定

2.胃蛋白酶的活力測定三、常用定量分析方法及其應(yīng)用三、電泳法（一）電泳法的基本原理和分類（二）常用電泳法的類型及其應(yīng)用

1．紙電泳法

2．醋酸纖維素薄膜電泳法

3．PAGE法

4．SDS