實驗細菌的人工培養(yǎng)第一頁，共二十四頁，2022年，8月28日實驗目的了解人工培養(yǎng)基的制作。了解細菌的接種方法分離培養(yǎng)方法——平板劃線法（混合菌液）了解細菌的生長現(xiàn)象與代謝產物液體、固體、半固體培養(yǎng)基乳糖發(fā)酵實驗硫化氫實驗第二頁，共二十四頁，2022年，8月28日實驗內容瓊脂平板的制作

紫外線殺菌實驗咽拭實驗分組實驗皮膚消毒實驗空氣中細菌計數(shù)實驗藥敏實驗

常用消毒器械的介紹

第三頁，共二十四頁，2022年，8月28日

一、人工培養(yǎng)基的制備和種類1.制備原則2.制備程序3.常用培養(yǎng)基的分類

第四頁，共二十四頁，2022年，8月28日1.制備原則（1）適當?shù)臓I養(yǎng)成分；（2）合適的酸堿度；（3）配制后經(jīng)滅菌使之無菌，方可應用。第五頁，共二十四頁，2022年，8月28日2.制備程序配料→熔化→測定及矯正PH→濾過→分裝→滅菌→備用第六頁，共二十四頁，2022年，8月28日3.常用培養(yǎng)基的分類（一）按物理性狀分：液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基:1.5～2.5%瓊脂

半固體培養(yǎng)基:0.3～0.5%瓊脂（二）按用途不同可分：基礎培養(yǎng)基；營養(yǎng)培養(yǎng)基；選擇培養(yǎng)基；鑒別培養(yǎng)基；厭氧培養(yǎng)基。第七頁，共二十四頁，2022年，8月28日二.細菌接種法1.平板培養(yǎng)基接種法（操作）

2.斜面培養(yǎng)基接種法（示教）

3.液體培養(yǎng)基接種法（示教）

4.半固體培養(yǎng)基接種法（示教）

第八頁，共二十四頁，2022年，8月28日

1.平板培養(yǎng)基接種法（操作）密集劃線法分區(qū)劃線法

第九頁，共二十四頁，2022年，8月28日接種大腸桿菌接種枯草桿菌班級、姓名/學號、大腸枯草uv30’培養(yǎng)箱第十頁，共二十四頁，2022年，8月28日第十一頁，共二十四頁，2022年，8月28日培養(yǎng)基的用途菌落

液體：增菌、純培養(yǎng)半固體：動力、保存菌種固體平板：用于分離培養(yǎng)第十二頁，共二十四頁，2022年，8月28日三.細菌生長現(xiàn)象及代謝產物觀察（示教）1.細菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象（1）液體培養(yǎng)基：混濁、菌膜和沉淀。（2）固體培養(yǎng)基：菌落和菌苔。（3）半固體培養(yǎng)基：沿穿刺線生長，穿刺線清晰，周圍培養(yǎng)基仍為透明，動力陰性；穿刺線向周圍擴散生長，穿刺線模糊，整個培養(yǎng)基變成混濁，動力陽性。2.細菌的代謝產物觀察（1）細菌對糖分解產物觀察（2）細菌對氨基酸分解產物觀察第十三頁，共二十四頁，2022年，8月28日（1）液體培養(yǎng)基均勻混濁生長（葡萄球菌）菌膜形成（枯草芽孢桿菌）沉淀生長（鏈球菌）第十四頁，共二十四頁，2022年，8月28日（2）固體培養(yǎng)基形成菌落和菌苔。觀察菌落的大小、形態(tài)、透明度、顏色、表面和邊緣情況及菌落周圍有無溶血環(huán)等。第十五頁，共二十四頁，2022年，8月28日（3）半固體培養(yǎng)基可用于觀察細菌有無動力。痢疾志賀菌沿穿刺線生長，穿刺線清晰，周圍培養(yǎng)基仍為透明，動力陰性；大腸埃希菌沿穿刺線向周圍擴散生長，穿刺線模糊，整個培養(yǎng)基變成混濁，動力陽性。第十六頁，共二十四頁，2022年，8月28日2.細菌的代謝產物觀察（1）細菌對糖分解產物觀察

方法：將大腸埃希菌和傷寒沙門菌分別接種于葡萄糖、乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基中，置37度24小時培養(yǎng)后觀察結果。結果：大腸埃希菌分解葡萄糖、乳糖，產酸產氣；傷寒沙門菌分解葡萄糖產酸不產氣，不分解乳糖。第十七頁，共二十四頁，2022年，8月28日糖發(fā)酵試驗第十八頁，共二十四頁，2022年，8月28日2.細菌的代謝產物觀察（2）細菌對氨基酸分解產物觀察

靛基質試驗：分別接種大腸埃希菌和傷寒沙門菌于蛋白胨水培養(yǎng)基（含色氨酸）內，置37度24小時培養(yǎng)后，然后沿管壁徐徐加入靛基質試劑（對二甲基醛）數(shù)滴，靜置片刻，在兩液界面出現(xiàn)紅色環(huán)者為靛基質試驗陽性（大腸埃希菌），無紅色環(huán)者為陰性（傷寒沙門菌）。第十九頁，共二十四頁，2022年，8月28日Indol實驗生化反應——Indol實驗第二十頁，共二十四頁，2022年，8月28日2.細菌的代謝產物觀察（2）細菌對氨基酸分解產物觀察硫化氫試驗：將細菌接種于含有硫酸亞鐵或醋酸鉛的培養(yǎng)基（如雙糖培養(yǎng)基）中，若細菌分解培養(yǎng)基中含硫的氨基酸產生硫化氫，硫化氫可與硫酸亞鐵或醋酸鉛反應，生成黑色的硫化鐵或硫化鉛沉淀，為硫化氫試驗陽性（乙型副傷寒沙門菌），若細菌不能分解含硫的氨基酸則無黑色沉淀形成，為硫化氫試驗陰（大腸埃希菌）。第二十一