ICS67.050X04中華人民共和國國家標準GB/T18979--2003食品中黃曲霉毒素的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法DeterminationaflatoxinscontentinfoodCleanupbyimmunoaffinitychromatogaphyyanddeterminationbyhigh-performanceliquidchromatigraphyyandfluorometer2003-02-21發(fā)布2003-08-01實施華中民共和發(fā)布國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局

GB/T18979-2003前本標準由北京市質量技術監(jiān)督局提出。本標準由全國食品工業(yè)標準化技術委員會歸口本標準起草單位:北京市產品質量監(jiān)督檢驗所、青島出入境檢驗檢疫局、國家標準物質研究中心本標準主要起草人：王品、張鵬、張藝兵、邵明武。本標準為首次發(fā)布

GB/T18979-2003食品中黃曲霉毒素的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法范圍本標準規(guī)定了免疫親和層析凈化一高效液相色譜法和免疫親和層析凈化一熒光光度法測定食品中黃曲霉毒素的條件和詳細分析步驥本標準適用于玉米、花生及其制品(花生醬、花生仁、花生米)、大米、小麥、植物油脂、醬油、食醋等食品中黃曲霉毒素的測定。樣品中黃曲霉毒素的檢出限：免疫親和層析凈化一高效液相色譜法測定黃曲霉毒素B，以及黃曲霉毒素B,B.、G,、G?？偭繖z出限為1Pg/kg。免疫親和層析凈化一熒光光度法測定黃曲霉毒素B、B.、Gi、G?？偭繖z出限為1Pg/kg.醬油樣品中檢出限為2.5Pg/kg。免疫親和層析凈化高效液相色譜法2.1方法提要試樣經過甲醇-水提取，提取液經過濾、稀釋后，濾液經過含有黃曲霉毒素特異抗體的免疫親和層析凈化·此抗體對黃曲霉毒素B、B.、G,、G。具有專一性.黃曲霉毒素交聯(lián)在層析介質中的抗體上。用水或吐溫-20/PBS將免疫親和柱上雜質除去，以甲醇通過免疫親和層析柱洗脫.洗脫液通過帶熒光檢測器的高效液相色譜儀柱后碘溶液衍生測定黃曲霉毒素的含量。2.2試劑和溶液除非另有規(guī)定·僅使用分析純試劑、重蒸雷水2.2.1甲醇(CH.OH):色譜純。2.2.2甲醇-水(7+3):取70mL甲醇加30mL水.2.2.3甲醇-水(8+2):取80mL甲醇加20mL水。2.2.4甲醇-水(45+55):取45mL甲醇加55mL水2.2.5苯：色譜純2.2.6乙清：色譜純、2.2.7苯-乙膀(98+2):取2mL乙腈加98mL苯2.2.8氯化鈉(NaCl)。2.2.9磷酸氫二鈉(NaaHPO,)。2.2.10磷酸二氫鉀(KH.PO,)2.2.11氯化鉀（KCI)。2.2.12PBS緩沖溶液：稱取8.0g氯化鈉.1.2g磷酸氫二鈉.0.2g磷酸二氫鉀,0.2g氯化鉀,用990mL純水溶解，然后用濃鹽酸調節(jié)pH值至7.0.最后用純水稀釋至1000mL.2.2.13吐溫-20/PBS溶液(0.1%):取1mL吐溫-20,加入PBS緩沖溶液并定容至1000mL2.2.14pH7.