標準解讀
《GB/T 18637-2002 牛病毒性腹瀉/粘膜病診斷技術(shù)》這一國家標準,發(fā)布于2002年,旨在為牛病毒性腹瀉和粘膜病的診斷提供一套統(tǒng)一的技術(shù)規(guī)范和方法。該標準詳細闡述了如何通過實驗室檢測手段來準確識別和確認這兩種疾病,確保獸醫(yī)診斷的準確性和一致性,對于控制疾病傳播、保護畜牧業(yè)健康具有重要意義。以下是該標準的主要內(nèi)容概覽:
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范圍:標準明確了其適用范圍,即規(guī)定了牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)感染及由此引發(fā)的牛病毒性腹瀉/粘膜病的實驗室診斷方法和技術(shù)要求。
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術(shù)語和定義:對牛病毒性腹瀉、粘膜病以及相關(guān)專業(yè)術(shù)語進行了明確界定,為標準的正確理解和應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
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診斷原則:概述了診斷應(yīng)遵循的基本原則,包括臨床觀察、流行病學(xué)調(diào)查與實驗室檢測相結(jié)合的方法,確保診斷的全面性和準確性。
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樣品采集與保存:詳細說明了應(yīng)采集哪些類型的樣本(如血液、組織、分泌物等),以及樣本的采集方法、保存條件和運輸要求,以保證樣本的有效性和檢測的可靠性。
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實驗室檢測方法:
- 病毒分離:描述了如何在特定細胞系中分離和培養(yǎng)BVDV,這是診斷的金標準。
- 抗原檢測:介紹了直接檢測樣本中病毒抗原的方法,如免疫熒光試驗(IFT)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)等。
- 抗體檢測:闡述了血清學(xué)方法,如病毒中和試驗、ELISA等,用于檢測動物體內(nèi)對BVDV的免疫反應(yīng)。
- 分子生物學(xué)方法:包括聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)及其衍生技術(shù),如實時熒光定量PCR(qPCR),用于病毒核酸的快速、靈敏檢測。
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結(jié)果判定與報告:規(guī)定了如何根據(jù)實驗結(jié)果進行診斷判定,包括陽性、陰性及可疑結(jié)果的定義,以及診斷報告的格式和內(nèi)容要求。
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質(zhì)量控制:強調(diào)了實驗室檢測過程中質(zhì)量控制的重要性,包括內(nèi)部質(zhì)控、外部質(zhì)控及實驗室間比對,以確保檢測結(jié)果的準確性和可比性。
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安全防護:提供了在操作BVDV樣本時應(yīng)采取的安全措施和生物安全等級要求,以防止病毒的擴散和人員感染。
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文檔簡介
ICS.11.220B41中華人民共和國國家標準GB/T18637—2002牛病毒性腹瀉/粘膜病診斷技術(shù)DiagnostictechniquesforbovineViraldiarrhea/mucosaldisease2002-02-19發(fā)布2002-05-01實施中華:人民共和國發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局
GB/T18637-2002前牛病毒性腹瀉/粘膜?。╞ovineviraldiarrhea/mucosaldisease,BVD/MD)是由牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)引起的牛的一種以粘膜發(fā)炎、摩爛、壞死和腹瀉為特征的疾病。應(yīng)用微量血清中和試驗檢查BVD/MD抗體,具有其特殊意義,它不僅可以定性,而且還可以定量并從抗體量的動態(tài)變化中,可以判定病牛是以前感染過本病.還是現(xiàn)在正在感染過程中.從而為防治本病提供科學(xué)依據(jù)。本標準的附錄A、附錄B、附錄C都是標準的附錄本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。本標準由全國動物檢疫標準化技術(shù)委員會歸口。本標準起草單位:中國獸藥監(jiān)察所、農(nóng)業(yè)部動物檢疫所本標準主要起草人:邵振華、鄭志剛
中華人民共和國國家標準GB/T18637-2002牛病毒性腹瀉/粘膜病診斷技術(shù)Diagnostictechniquesforbovineviraldiarrhea/mucosaldisease1范圍本標準規(guī)定了牛病毒性腹瀉/粘膜病(BVD/MD)的診斷技術(shù)要求本標準適用于BVD/MD的流行病學(xué)調(diào)查和檢疫2定義本標準采用下列定義。細胞玻片放置在萊頓氏(Leighton's)管或其他用作培養(yǎng)細胞的小瓶中,長有單層細胞的蓋玻片3BVD/MD病毒分離與鑒定3.1材料準備3.1.1陽性參照毒林為牛粘膜病病毒俄勒岡毒株(OregonC.V)3.1.2BVD/MD熒光抗體(BVD/MD-FA)、陽性血清。3.1.3熒光顯微鏡:采用藍紫光為激發(fā)光的透射式或落射式熒光顯微鏡3.1.4牛(或胎牛)血清:無BVD/MD抗體和無污染3.1.5細胞培養(yǎng)瓶扁瓶、Leighton's管、0.17mm厚度的盞玻片(1.0cmX3.8cm或0.8cmX2.4cm),0.8mm~1.0mm厚的普通玻璃載片,帶蓋濕盒。3.1.6溶液配制:pH7.0~7.20.01mol/L磷酸鹽緩沖液·pH9.0~9.50.5mol/L碳酸緩沖甘油C見附錄A(標準的附錄)。3.1.7細胞培養(yǎng)液:見附錄B(標準的附錄)。3.1.8原代細胞培養(yǎng)物:見附錄C(標準的附錄)3.2病毒分離3.2.1樣品的采集3.2.1.1對于牛群、種公牛的檢疫.無菌采血液或精液3.2.1.2對懷疑為急性感染期或持續(xù)感染的?!げ裳虮欠置谖铩?.2.1.3對流產(chǎn)、死胎,采胎兒的組織。3.2.1.4對懷疑為死于粘膜病的牛,可采集血塊和各組織,尤其是腸道集合淋巴組織。如果腸道樣品已發(fā)生自溶,可采扁桃體或淋巴結(jié),3.2.2樣品處理3.2.2.1血液用常規(guī)方法分離血清3.2.2.22凝血塊:凍融數(shù)次后·取析出的上清液(加入適量的雙抗即青鏈霉素)3.2.2.3組織樣品用含1000IU/mL
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