ICS11220

B41.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T18637—2018

代替

GB/T18637—2002

牛病毒性腹瀉/粘膜病診斷技術(shù)規(guī)范

Technicalspecificationsfordiagnosisofbovineviraldiarrhea/mucosaldisease

2018-09-17發(fā)布2019-04-01實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T18637—2018

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)代替牛病毒性腹瀉粘膜病診斷技術(shù)除編輯性修改外主要技術(shù)變

GB/T18637—2002《/》,,

化如下

:

增加了臨床診斷方法見第章

———“”(4);

增加了實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)見

———“RT-PCR”(5.4)。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所中華人民共和國(guó)北京出入境檢驗(yàn)檢疫局揚(yáng)州大學(xué)中華人

:、、、

民共和國(guó)寧夏出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國(guó)天津出入境檢驗(yàn)檢疫局中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)

、、

中心

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人李俊平劉環(huán)印春生陶潔郝俊虎蒲靜范學(xué)政吳華偉孫淼王建華

:、、、、、、、、、、

宋建德朱國(guó)強(qiáng)

、。

本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為

:

———GB/T18637—2002。

Ⅰ

GB/T18637—2018

引言

牛病毒性腹瀉粘膜病簡(jiǎn)稱是由牛病

/(BovineViralDiarrhea/MucosalDisease,BVD/MD,BVD),

毒性腹瀉粘膜病病毒簡(jiǎn)稱感染

/(BovineViralDiarrhea/MucosalDiseaseVirus,BVD/MDV,BVDV)

牛引起的以發(fā)熱粘膜糜爛潰瘍白細(xì)胞減少腹瀉咳嗽及懷孕母牛流產(chǎn)或產(chǎn)出畸形胎兒為主要特征的

、、、、

一種傳染病在分類學(xué)上屬黃病毒科Flaviviridae瘟病毒屬Pestivirus是瘟病毒屬的代

。BVDV(),(),

表種目前國(guó)際病毒分類委員會(huì)確定的有二個(gè)基因型或種分別是和它

,BVDV(),BVDV-1BVDV-2。

們與同屬的豬瘟病毒及羊邊界病病毒

(ClassicalSwineFeverVirus,CSFV)(BorderDiseaseVirus,

之間存在著結(jié)構(gòu)與抗原相關(guān)性在血清學(xué)上有部分交叉反應(yīng)引起的疫病呈全球分布

BDV),。BVDV-1,

較為常見而引發(fā)的疫病不多見二個(gè)基因型的病毒均可根據(jù)其在培養(yǎng)細(xì)胞上能否產(chǎn)生細(xì)胞

,BVDV-2。

病變而被分為二個(gè)生物型即致細(xì)胞病變型和非致細(xì)胞病變型

,(Cytopathictype,CP)(Non-cytopathic

毒株是引起所有感染和發(fā)病類型的生物型而毒株主要出現(xiàn)在粘膜病病例

type,NCP)。NCP,CP。

目前該病在世界范圍內(nèi)廣泛流行我國(guó)于年首次分離到了近年來病原學(xué)調(diào)查表明

,,1983BVDV。,

我國(guó)牛羊鹿豬等均不同程度的感染該病已嚴(yán)重影響著我國(guó)畜牧業(yè)的健康發(fā)展

、、、BVDV,。

本標(biāo)準(zhǔn)中所描述的方法均為近幾年我國(guó)在診斷過程中常用的方法包括臨床診斷病原學(xué)診

BVD,、

斷及血清學(xué)診斷技術(shù)血清學(xué)診斷技術(shù)為病毒中和試驗(yàn)病原學(xué)診斷技術(shù)包括病毒分離鑒定和實(shí)時(shí)熒

。。

光檢測(cè)方法本標(biāo)準(zhǔn)中的檢測(cè)方法具有特異

RT-PCR(Real-timeRT-PCR),Real-timeRT-PCRBVDV

性能夠同時(shí)檢測(cè)和且能特異區(qū)分與

,BVDV-1BVDV-2,BVDVCSFV。

結(jié)合我國(guó)動(dòng)物防疫相關(guān)法律法規(guī)和政策本標(biāo)準(zhǔn)能夠有效地診斷和監(jiān)測(cè)我國(guó)的發(fā)生和

、,BVD/MD

流行

。

Ⅱ

GB/T18637—2018

牛病毒性腹瀉/粘膜病診斷技術(shù)規(guī)范

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了牛病毒性腹瀉粘膜病的流行病學(xué)臨床癥狀病理變化等臨床診斷及樣品采集與處

/、、,

理病毒分離與鑒定檢測(cè)及病毒中和試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)室診斷的技術(shù)要求和操作規(guī)范

、、Real-timeRT-PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于檢測(cè)不同樣品中的型和型牛病毒性腹瀉粘膜病病毒核酸及抗體水平

12/、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

禽流感病毒通用熒光檢測(cè)方法

GB/T19438.1—2004RT-PCR

實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求

GB19489

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范動(dòng)物檢疫

GB/T27401

3縮略語(yǔ)

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

牛鼻甲骨細(xì)胞

BT:(BovineTurbinatecell)

牛病毒性腹瀉粘膜病

BVD/MD:/(BovineViralDiarrhea/MucosalDisease)

牛病毒性腹瀉粘膜病病毒

BVD/MDV:/(BovineViralDiarrhea/MucosalDiseaseVirus)

致細(xì)胞病變效應(yīng)

CPE:(CytopathicEffect)

致細(xì)胞病變型

CP:(Cytopathictype)

互補(bǔ)

cRNA:RNA(ComplementRNA)

每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)量達(dá)到設(shè)定的閾值所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)

Ct(Cp):(CycleThreshold,or

CrossingPoint)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(DiethylPyrocarbonate)

羧基熒光素

FAM:(Carboxyfluore