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文檔簡介
書--谷研生物公司銷售本試劑 研究使用檢測范圍5U/L-120使用目的
本試劑盒用于測定人、血漿及相關(guān)液體樣本中過氧化物酶(POD)含量。本試劑盒應(yīng)抗體夾心法測定標本中人過氧化物酶(POD)水平。用純化的人過氧(POD),再與HRP標記的過氧化物酶(POD)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的過氧化物酶(POD)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人過氧化物酶(POD)濃度。試劑盒組130倍濃縮洗滌20ml×17終止6ml×12酶標試6ml×18標準品(2400.5ml×13酶標包被12孔×89標準品稀釋1.5ml×146ml×1說明1顯色劑A顯色劑B液
6ml×16ml×1/
封板 2密封 1標本后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性操作步 釋5號標準150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋4號標準150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋
3號標準2號標準1號標準
150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔50μl然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備洗滌:揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如重復(fù)5次,拍干加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外溫育:操作同3洗滌:操作同5A50μlB50μl,輕輕震蕩混勻,3715分鐘終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié)計以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計封板膜只限使用,以避免交叉污染底物請避光保存嚴格
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