1、PAGE PAGE 34火焰光度法火焰光度法是 HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床檢驗(yàn)技士考試復(fù)習(xí)需了解的知識(shí)，環(huán)球 HYPERLINK /yiyao/ t _blank 醫(yī)學(xué)網(wǎng)搜集整理了相關(guān)內(nèi)容與考生分享，希望給予大家?guī)椭?火焰光度法：Na+、K+測(cè)定可采用火焰光度法。Na+、K+測(cè)定可采用火焰光度法。原理：火焰光度法是一種發(fā)射光譜分析法，利用火焰中激發(fā)態(tài)原子回降至基態(tài)時(shí)發(fā)射的光譜強(qiáng)度進(jìn)行含量分析。該法可檢測(cè)血清、尿液、腦脊液及胸腹水的Na+和K+，該方法屬于經(jīng)典的標(biāo)準(zhǔn)參考法，優(yōu)點(diǎn)是結(jié)果準(zhǔn)確可靠，廣為 HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床采用。通常采

2、用的定量方法有標(biāo)準(zhǔn)曲線法、標(biāo)準(zhǔn)加入法和內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)法。內(nèi)標(biāo)法是標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)液采用加進(jìn)相同濃度的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)元素進(jìn)行測(cè)定，一般是加入鋰內(nèi)標(biāo)，測(cè)定的是鋰/鈉或鋰/鉀電流的比值，而不是單獨(dú)的鈉或鉀的電流，這樣，可減小燃?xì)夂突鹧鏈囟炔▌?dòng)等因素引起的誤差，因而有較好的準(zhǔn)確性。腎前性蛋白尿腎前性蛋白尿是 HYPERLINK /yiyao/ t _blank 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技士考試需要了解的知識(shí)點(diǎn)，環(huán)球醫(yī)學(xué)網(wǎng)搜集整理了相關(guān)內(nèi)容，希望對(duì)廣大復(fù)習(xí)備考的考生有所幫助。腎前性蛋白尿見于漿細(xì)胞?。喝缍喟l(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、漿細(xì)胞白血病等。血管內(nèi)溶血性疾?。喝珀嚢l(fā)性睡眠性血紅蛋白尿等。大面積肌肉損傷：如擠壓傷綜合征、電灼傷、多發(fā)性肌

3、炎，進(jìn)行性肌肉萎縮等。酶類增高：如急性單核細(xì)胞白血病尿溶菌酶增高，胰腺炎嚴(yán)重時(shí)尿淀粉酶增高等。補(bǔ)體的代謝平衡補(bǔ)體的代謝平衡是 HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床檢驗(yàn)技士考試復(fù)習(xí)需了解的知識(shí)，環(huán)球 HYPERLINK /yiyao/ t _blank 醫(yī)學(xué)網(wǎng)搜集整理了相關(guān)內(nèi)容與考生分享，希望給予大家?guī)椭?和其他血蛋白一樣，補(bǔ)體在機(jī)體內(nèi)受各種因素的調(diào)節(jié)，維持其含量的相對(duì)平衡。補(bǔ)體成分可被血中的蛋白酶直接降解，在病理情況下補(bǔ)體的代謝速率反映補(bǔ)體的激活程度。補(bǔ)體活化后的酶解片段迅速在體液中失活，并很快地從循環(huán)中清除，沉著于細(xì)胞表面及組織中會(huì)被消耗或分解，例如C3在C3轉(zhuǎn)化酶的作用

4、下，生成有活性的C3a和C3b，C3b降解為無活性的iC3b，再裂解為C3c和C3dg，最后降解為C3d和C3g.血中的其他補(bǔ)體成分也有相似的代謝方式。在不同疾病的進(jìn)展過程中，補(bǔ)體的代謝速度變化非常大。 HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床觀察補(bǔ)體含量時(shí)應(yīng)取不同時(shí)期的標(biāo)本進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察，才能了解補(bǔ)體的動(dòng)態(tài)變化。另外，補(bǔ)體的正常水平存在很大的個(gè)體差異，補(bǔ)體成分的更新也較快，故單憑測(cè)定補(bǔ)體成分含量，有時(shí)很難反映補(bǔ)體系統(tǒng)的激活情況，現(xiàn)主張應(yīng)用測(cè)定補(bǔ)體單個(gè)成分及其相應(yīng)裂解產(chǎn)物的方式，例如測(cè)定血清C3a、C5c、C3d等。補(bǔ)體碎片的連續(xù)測(cè)定，對(duì)預(yù)報(bào)有關(guān)疾病活動(dòng)情況是很有價(jià)值的。補(bǔ)體血清

5、水平的變化對(duì)有關(guān)疾病的診斷具有重要意義，例如系統(tǒng)性紅斑狼瘡和腎小球腎炎時(shí)，由于補(bǔ)體系統(tǒng)被 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫復(fù)合物過度激活，導(dǎo)致C3接近耗竭，其他補(bǔ)體成分也減少;臨床癥狀改善后，其含量又回升。遺傳性血管神經(jīng)性水腫時(shí)由于C1INH缺陷導(dǎo)致C4過度消耗，造成補(bǔ)體含量下降;肝病患者由于肝功能障礙導(dǎo)致蛋白合成能力下降，出現(xiàn)低補(bǔ)體血癥。這些患者均有不同程度的對(duì)傳染病和化膿性細(xì)菌的易感性增高;另一方面在發(fā)生感染時(shí)，常出現(xiàn)代償性的血液補(bǔ)體含量升高，以抵抗外來微生物的侵入。淀粉酶的 HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床意義淀粉酶的 HYPERL

6、INK /lcys/ t _blank 臨床意義是 HYPERLINK /yiyao/ t _blank 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技士考試中需要了解的內(nèi)容，環(huán)球醫(yī)學(xué)網(wǎng)小編整理了相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，以便大家方便復(fù)習(xí)。淀粉酶的臨床意義：1)血清淀粉酶升高：(1)急性胰腺炎：最常見于急性胰腺炎，發(fā)病后2-12h活性開始升高，12-72h達(dá)峰值，3-4天恢復(fù)正常。雖然淀粉酶活性升高程度并不一定和胰腺損傷程度相關(guān)，但升高程度愈大，患急性胰腺炎的可能性愈大。懷疑急性胰腺炎時(shí)應(yīng)連續(xù)監(jiān)測(cè)淀粉酶，并結(jié)合其他檢查，如胰脂肪酶、胰蛋白酶等。(2)急腹癥：其他急腹癥也可引起淀粉酶活性升高。(3)慢性胰腺炎：慢性胰腺炎時(shí)淀粉酶活性可輕度升高或

7、降低，但沒有很大診斷意義。(4)胰腺癌：胰腺癌早期淀粉酶活性也可升高。2)尿淀粉酶升高：血液中淀粉酶能被腎小球?yàn)V過，血清淀粉酶升高時(shí)，都會(huì)使尿中淀粉酶排出量增加，其升高可早于血淀粉酶，下降晚于血淀粉酶。3)淀粉酶同工酶：血清淀粉酶來源于胰腺，及唾液腺和許多其他組織，所以淀粉酶活性升高時(shí)，同工酶測(cè)定有助于疾病鑒別診斷。P-同工酶升高或降低時(shí)，可能有胰腺疾患;S-同工酶變化可能是源于唾液腺或其他組織。淀粉酶的測(cè)定結(jié)果受方法的影響較大，不同方法參考值不同，必須了解所用測(cè)定方法和參考值，才能做出正確的診斷。成分輸血的特點(diǎn)成分輸血的特點(diǎn)是 HYPERLINK /yiyao/ t _blank 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技

8、士考試中需要了解的內(nèi)容，環(huán)球醫(yī)學(xué)網(wǎng)小編整理了相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，以便大家方便復(fù)習(xí)。輸全血有時(shí)可能既達(dá)不到治療的目的，又全引起某些副作用，而對(duì)血液也是一種浪費(fèi)。例如患血小板減少的或粒細(xì)胞減少癥，輸全血很難達(dá)到提高血小板及白細(xì)胞數(shù)量的目的。如大量輸血，又會(huì)因血容量的增加而增加心臟的負(fù)擔(dān)。所經(jīng)，從本世紀(jì)70年代開始采用成分輸血，并取得了顯著的效果。成分輸血的優(yōu)點(diǎn)：提高療效，患者需要什么成分，就補(bǔ)充什么，特別是將血液成分提純，濃縮而得到高將近價(jià)的制品;減少反應(yīng)，血液成分復(fù)雜，有多種抗原系統(tǒng)，再加上血漿中的各種特異抗體，輸血更容易引起各種不良反應(yīng);合理使用，將全血分離制成不同的細(xì)胞(紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板)及血

9、漿蛋白(白蛋白、 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫球蛋白、凝血因子等)成分，供不同的目的就應(yīng)用;經(jīng)濟(jì)，既可節(jié)省寶貴的血液，又可減少的經(jīng)注意到負(fù)擔(dān)。開展成分輸血首先在解決成分問題，分離各種細(xì)胞成分可以用塑料袋離心沉降的方法，也可用細(xì)胞單采儀器。細(xì)胞單采機(jī)可以從一個(gè)供血者采取多量的折細(xì)胞或血小板，這種方法可以減少由多個(gè)血源而引起的輸血免疫反應(yīng)的機(jī)會(huì)。目前我國(guó)已普通開民兵成分血液的制備，但由于條件及儀器的不同，制備方法也有差異。交叉配合試驗(yàn)方法及意義傳統(tǒng)的交叉配合(crossmatching)試驗(yàn)是檢測(cè)受者體內(nèi)是否存在抗供者的特異性抗體，現(xiàn)在可同時(shí)檢測(cè)受者對(duì)供者LD抗

10、原的相容程度。不管是否已經(jīng)進(jìn)行過各種HLA分型試驗(yàn)，交叉配合試驗(yàn)對(duì)選擇移植物都有一定的參考價(jià)值。1.微量細(xì)胞毒試驗(yàn)：用供者的淋巴細(xì)胞作靶細(xì)胞，與受者的血清進(jìn)行CDC;出現(xiàn)陽性反應(yīng)說明受者體內(nèi)含有抗供者的特異性抗體，移植后很有可能發(fā)生超急排斥反應(yīng)。若要明確受者的抗體是抗類抗原還是抗類抗原，可以將供者的淋巴細(xì)胞進(jìn)一步分離出較純的T細(xì)胞和B細(xì)胞分別進(jìn)行檢測(cè);若要排除患者自身抗體的影響，可以用患者自己的細(xì)胞與自已的血清進(jìn)行試驗(yàn)作為對(duì)照。交叉配合是移值前必須做的一個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目;對(duì)一些曾經(jīng)接觸過移植抗原的受者，例如多次接受輸血者、經(jīng)產(chǎn)婦、有不成功移植史或接受過血清透析治療者，尤其要進(jìn)行審慎的檢驗(yàn)。2.流式細(xì)

11、胞儀檢測(cè)：將供者淋巴細(xì)胞與受者血清共育后，用熒光標(biāo)記的抗人Ig對(duì)結(jié)合有抗體的細(xì)胞染色，在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行熒光標(biāo)記測(cè)定。該法比微量細(xì)胞毒法的靈敏度高100倍，有條件的單位可以優(yōu)先考慮使用。3.混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)：將供者與受者的淋巴細(xì)胞做雙向混合培養(yǎng)，或者滅活供者的淋巴細(xì)胞做向混合培養(yǎng)，細(xì)胞反應(yīng)的程度與供-受者相容的程度呈負(fù)相關(guān)。4.細(xì)胞介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞毒試驗(yàn)：檢測(cè)受者對(duì)移植物可能發(fā)生的細(xì)胞介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞毒作用(cell-mediatedlymphocytotoxicity，CML)。將受者淋巴細(xì)胞與滅活的供者淋巴細(xì)胞做常規(guī)單向MLC，收獲致敏的受者淋巴細(xì)胞后，再與51Cr標(biāo)記的、PHA刺激的供者淋巴

12、細(xì)胞做CML試驗(yàn);51Cr釋放的程度與供-受者相容程度呈負(fù)相關(guān)積液的 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫學(xué)檢查意義1.C-反應(yīng)蛋白(CRP)感染性和惡性積液CRP含量明顯增高。因此，CRP對(duì)診斷感染性、惡性積液及鑒別滲出液和漏出液有重要價(jià)值。漏出液CRP10mg/L，其靈敏度和特異性均為80%左右。2.腫瘤標(biāo)志物(1)癌胚抗原：癌胚抗原(CEA)常采用ELISA、放射免疫或化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)。惡性積液CEA明顯增高。動(dòng)態(tài)檢測(cè)CEA，并與血清CEA相對(duì)照，對(duì)惡性腫瘤診斷的符合率可達(dá)80%.當(dāng)積液中CEA20g/L，積液CEA/血清CEA比值1.0時(shí)，應(yīng)高度懷疑為惡性積液

13、，且CEA對(duì)腺癌所致的積液診斷價(jià)值最高。(2)甲胎蛋白(AFP)：常用ELISA、放射免疫或化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)AFP.血清AFP對(duì)原發(fā)性肝癌和胚胎性腫瘤的診斷價(jià)值較大。積液中AFP含量與血清濃度呈正相關(guān)，當(dāng)腹腔積液AFP25g/L時(shí)，對(duì)診斷原發(fā)性肝癌所致的腹水有重要價(jià)值。淋巴細(xì)胞時(shí)人體主要的 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫細(xì)胞之一。(1)生理性增多：外周血淋巴細(xì)胞絕對(duì)值成人410 9/L、兒童7.210 9/L、4歲以下9109/L。見于兒童期淋巴細(xì)胞生理性增多。(2)病理性增多：見于急性傳染病(如風(fēng)疹、流行性腮腺炎、傳染性淋巴細(xì)胞增多癥、傳染性單核細(xì)胞增多癥、百

14、日咳等)、某些慢性感染(如結(jié)核病等)、腎移植術(shù)后(如發(fā)生排異反應(yīng))、白血病(如淋巴細(xì)胞性白血病、白血性淋巴肉瘤)、再生障礙性貧血、粒細(xì)胞缺乏癥。1)傳染性單核細(xì)胞增多癥：由EB病毒引起的急性或亞急性良性淋巴細(xì)胞增多性傳染病，WBC正?；蜉p度增高，早期以中性粒細(xì)胞增多為主，隨后淋巴細(xì)胞增多(50%97%)，異型淋巴細(xì)胞在發(fā)病45d出現(xiàn)，710d達(dá)高峰，多數(shù)10%20%，12個(gè)月后消退。2)百日咳：淋巴細(xì)胞達(dá)3010 9/L，范圍為(870)10 9/L，以CD4陽性細(xì)胞為主。3)腎移植術(shù)后：發(fā)生排異反應(yīng)前，淋巴細(xì)胞絕對(duì)值增高。4)白血?。郝粤馨图?xì)胞性白血病，以白血病性成熟淋巴細(xì)胞為主。急性淋巴

15、細(xì)胞性白血病和白血性淋巴肉瘤，以原、幼淋巴細(xì)胞為主。(3)減低：見于接觸放射線、應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素、促腎上腺皮質(zhì)激素、嚴(yán)重化膿性感染、艾滋病、傳染性非典型肺炎等。單核細(xì)胞增多在 HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床上常見于感染、血液病等。(1)生理性增多：外周血單核細(xì)胞絕對(duì)值計(jì)數(shù)超過0.810 9/L。兒童外周血單核細(xì)胞較成人稍多，平均為9%，出生后2周嬰兒可呈生理性單核細(xì)胞增多，可達(dá)15%或更多，妊娠時(shí)生理性增高與中性粒細(xì)胞變化相平行。(2)病理性增多：見于某些感染(如亞急性感染性心內(nèi)膜炎、瘧疾、黑熱病等)、急性感染恢復(fù)期、活動(dòng)性肺結(jié)核(如嚴(yán)重的浸潤(rùn)性和粟粒性結(jié)核)、某些

16、血液病(如粒細(xì)胞缺乏癥恢復(fù)期、惡性組織細(xì)胞病、淋巴瘤、單核細(xì)胞白血病、骨髓增生異常綜合征)。1)某些感染：WBC達(dá)2010 9/L以上，外周血單核細(xì)胞明顯增多，達(dá)30%以上，以成熟單核細(xì)胞為主。2)某些血液?。毫＜?xì)胞缺乏癥恢復(fù)期可見單核細(xì)胞一過性增多。3)惡性組織細(xì)胞病、淋巴瘤、單核細(xì)胞性白血病：可見幼單核細(xì)胞增多。中性粒細(xì)胞減低：當(dāng)中性粒細(xì)胞絕對(duì)值低于1.5109/L，稱為粒細(xì)胞減低癥，低于0.5109/L時(shí)，稱為粒細(xì)胞缺乏癥。1)某些感染：如傷寒、副傷寒、流感等。如無并發(fā)癥，WBC減低(2109/L)，與細(xì)菌內(nèi)毒素、病毒作用使邊緣池粒細(xì)胞增多，循環(huán)池粒細(xì)胞減低，或抑制骨髓釋放粒細(xì)胞等有關(guān)。

17、2)血液病：如典型的再生障礙性貧血、少數(shù)急性白血病。如典型再生障礙性貧血，呈“三少”(紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板均減低)，WBC低于1109/L，以淋巴細(xì)胞為主。當(dāng)中性粒細(xì)胞絕對(duì)值0.5109/L時(shí)，感染危險(xiǎn)性極高，0.2109/L時(shí)，預(yù)后很差。3)慢性理化損傷：如電離輻射(X線等)、長(zhǎng)期服用氯霉素后，可抑制骨髓細(xì)胞有絲分裂使WBC減低。 HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床上，藥物性中性粒細(xì)胞減低癥很常見，與 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫、細(xì)胞毒性、過敏體質(zhì)有關(guān)，兒童和年輕人約占10%，老年人約占50%，有藥物過敏史者更易受累，女性比男性易

18、發(fā)病，在用藥早期中性粒細(xì)胞就減低，停藥47d后，中性粒細(xì)胞恢復(fù)正常。4)自身 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫性疾?。喝缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)，約60%患者WBC為(25)109/L，中性粒細(xì)胞絕對(duì)值減低。5)脾功能亢進(jìn)：如門脈性肝硬化、班替綜合征。機(jī)制為脾臟單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)破壞白細(xì)胞，或腫大脾臟能分泌過多脾素，滅活促粒細(xì)胞生成因子。造血干細(xì)胞的特性包括：造血干細(xì)胞的起源，造血干細(xì)胞的形態(tài)，造血干細(xì)胞的表面標(biāo)志。一、造血干細(xì)胞的起源造血干細(xì)胞(hemopoietic stem cell ，hsc )是存在于造血組織中的一群原始造血細(xì)胞，它不是組織固定細(xì)胞，可

19、存在于造血組織及血液中。造血干細(xì)胞在人胚胎2周時(shí)可出現(xiàn)于卵黃囊，第4 周開始轉(zhuǎn)移至胚肝，妊娠5 個(gè)月后，骨髓開始造血，出生后骨髓成為干細(xì)胞的主要來源。在造血組織中，所占比例甚少，如在小鼠骨髓中105 核細(xì)胞中的有10個(gè)，在脾中105 有核細(xì)胞中只有0.2 個(gè)。二、造血干細(xì)胞的形態(tài)干細(xì)胞是一種嗜堿性獨(dú)核細(xì)胞，其大小約為8 m ，呈圓形，胞核為圓形或腎形，胞核較大，具有2 個(gè)核仁，染色質(zhì)細(xì)質(zhì)而分散，胞漿呈淺藍(lán)色不帶顆粒，在形態(tài)上與小淋巴細(xì)胞極其相似，但淋巴細(xì)胞體積較小，染色質(zhì)濃染，核仁不明顯且有細(xì)胞器。因此很難用形態(tài)學(xué)識(shí)別干細(xì)胞，并與其它獨(dú)核細(xì)胞相區(qū)別。造血干細(xì)胞可包括三級(jí)分化水平，即多能干(pl

20、euripotentstem cell)，定向干細(xì)胞(committed stem cell)及其成熟的子代細(xì)胞。關(guān)于對(duì)造血干細(xì)胞的功能分析，長(zhǎng)期以來僅限于對(duì)小鼠干細(xì)胞的研究，而對(duì)人干細(xì)胞的存在只是來自間接證據(jù)，因?yàn)椴荒茉谌梭w內(nèi)進(jìn)行如鼠體內(nèi)的功能分析法。70年代以來，由于建立了新的體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，大大促進(jìn)了對(duì)人干細(xì)胞的直接研究。三、造血干細(xì)胞的表面標(biāo)志由于造血組織中造血干細(xì)胞在形態(tài)學(xué)方面無法與其它單核細(xì)胞區(qū)別，而且數(shù)量極少，這為造血干細(xì)胞的分離純化并對(duì)其功能分析和分化的研究造成極大困難。近年來由于單克隆抗體技術(shù)的進(jìn)步，流式細(xì)胞儀(facs)的應(yīng)用，以及對(duì)小鼠和人造血干細(xì)胞表面標(biāo)志的研究，取得

21、了很大進(jìn)展，為造血細(xì)胞的分離純化及鑒定創(chuàng)造了條件。1.thy-1 與絲裂原(wheat germ agglutinin ，wga ) visseer等發(fā)現(xiàn)小鼠骨髓中造血干細(xì)胞對(duì)wga 有高親和性。利用這一特性，應(yīng)用facs自骨髓中分離造血干細(xì)胞應(yīng)及核系mac-1 等譜系抗原與wga 反應(yīng)性相結(jié)合，即可自骨髓中l(wèi)in-/wga+細(xì)胞群中分離造血干細(xì)胞，也獲得良好結(jié)果。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)正常小鼠骨髓細(xì)胞中，也能表達(dá)低密度thy-1 抗原(thy-11. )。如與上述標(biāo)志組合，即自骨髓thy-11.lin- ，wga+細(xì)胞群中，分離造血干細(xì)胞，可用于對(duì)造血細(xì)胞的功能分析。2.干細(xì)胞抗原(stem cell

22、antigen-1，sca-1 )有學(xué)者制備一種抗原前t 細(xì)胞雜交瘤的單克隆抗體，用這種單抗檢出的抗原分子稱為干細(xì)胞抗原-1(sca-1 )。其后有人自骨髓中thy-1io 、lin-、sca-1+細(xì)胞群中，可分離純?nèi)嗽煅杉?xì)胞。3.原癌基因(c-kit )最近證明造血干細(xì)胞與c-kit 基因密切相關(guān)。c-kit可編碼一種穿膜酪氨酸激酶受體分子。應(yīng)用單克隆抗體證明此分子可存在于造血干細(xì)胞膜上，其后證明它的配體分子是造血干細(xì)胞因子(stem cell factor，scf)。它是信號(hào)傳導(dǎo)分子，對(duì)造血干細(xì)胞的分化具有重要作用。目前，小鼠多能干細(xì)胞表面分子標(biāo)志可視為thy-1io 、wga+、c-k

23、it+、lin-. c-kit 分子可高頻率表達(dá)于多能干細(xì)胞表面，但骨髓中c-kit+細(xì)胞可分化為各種血細(xì)胞，而胸腺中c-kit 細(xì)胞可分化為淋巴細(xì)胞，不能分化為髓系細(xì)胞，所以胸腺內(nèi)c-kit+細(xì)胞，可能是淋巴樣干細(xì)胞。4.cd34對(duì)人體造血干細(xì)胞表面標(biāo)志的研究，是用單克隆抗體cd34證明的。cd34單克隆抗體檢測(cè)的抗原即為cd34分子。自人骨髓細(xì)胞中應(yīng)用facs可分離純化cd34+細(xì)胞群，如與造血因子共同體外培養(yǎng)可獲得含有各種血細(xì)胞的混合集落，所以cd34+細(xì)胞為骨髓中造血干細(xì)胞，cd34抗原可視為骨髓造血細(xì)胞標(biāo)志之一。造血干細(xì)胞是體內(nèi)各種血細(xì)胞的唯一來源，它主要存在于骨髓、外周血、臍帶血中

24、。造血干細(xì)胞是體內(nèi)各種血細(xì)胞的唯一來源，它主要存在于骨髓、外周血、臍帶血中。今年年初，協(xié)和醫(yī)大血液學(xué)研究所的龐文新又在肌肉組織中發(fā)現(xiàn)了具有造血潛能的干細(xì)胞。造血干細(xì)胞的移植是治療血液系統(tǒng)疾病、先天性遺傳疾病以及多發(fā)性和轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤疾病的最有效方法。在 HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床治療中，造血干細(xì)胞應(yīng)用較早，在20世紀(jì)五十年代， HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床上就開始應(yīng)用骨髓移植(BMT)方法來治療血液系統(tǒng)疾病。到八十年代末，外周血干細(xì)胞移植(PBSCT)技術(shù)逐漸推廣開來，絕大多數(shù)為自體外周血干細(xì)胞移植(APBSCT)，在提高治療有效率和縮

25、短療程方面優(yōu)于常規(guī)治療，且效果令人滿意。與兩者相比，臍血干細(xì)胞移植的長(zhǎng)處在于無來源的限制，對(duì)HLA配型要求不高，不易受病毒或腫瘤的污染。在今年初，東北地區(qū)首例臍血干細(xì)胞移植成功，又為中國(guó)造血干細(xì)胞移植技術(shù)注入新的活力。隨著臍血干細(xì)胞移植技術(shù)的不斷完善，它可能會(huì)代替目前APBSCT的地位，為全世界更多的血液病及惡性腫瘤的患者帶來福音。嗜堿性粒細(xì)胞：嗜堿性粒細(xì)胞(basoophilic granulocyte，basophil)數(shù)量最少，占白細(xì)胞總數(shù)的015.細(xì)胞呈球形，直徑10-12m.胞核分葉或呈S形或不規(guī)則形，著色較淺。胞質(zhì)內(nèi)含有嗜堿性顆粒，大小不等，分布不均，染成藍(lán)紫色，可覆蓋在核上。顆粒

26、具有異染性，甲苯胺藍(lán)染色呈紫紅色。電鏡下，嗜堿性顆粒內(nèi)充滿細(xì)小微粒，呈均勻狀或螺紋狀分布。顆粒內(nèi)含有肝素和組胺，可被快速釋放;而白三烯則存在于細(xì)胞基質(zhì)內(nèi)，它的釋放較前者緩慢。肝素具有抗凝血作用，組胺和白三烯參與過敏反應(yīng)。嗜堿性粒細(xì)胞在組織中可存活12-15天。單核細(xì)胞：?jiǎn)魏思?xì)胞(monocyte)占白細(xì)胞總數(shù)的3%8%.它是白細(xì)胞中體積最大的細(xì)胞。直徑1420m，呈圓形或橢圓形。胞核形態(tài)多樣，呈卵圓形、腎形、馬蹄形或不規(guī)則形等。核常偏位，染色質(zhì)顆粒細(xì)而松散，故著色較淺。胞質(zhì)較多，呈弱嗜堿性，含有許多細(xì)小的嗜天青顆粒，使胞質(zhì)染成深淺不勻的灰藍(lán)色。顆粒內(nèi)含有過氧化物酶、酸性磷酸酶、非特異性酯酶和溶

27、菌酶，這些酶不僅與單核細(xì)胞的功能有關(guān)，而且可作為與淋巴細(xì)胞的鑒別點(diǎn)。電鏡下，細(xì)胞表面有皺褶和微絨毛，胞質(zhì)內(nèi)有許多吞噬泡、線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，顆粒具溶酶體樣結(jié)構(gòu)。單核細(xì)胞具有活躍的變形運(yùn)動(dòng)、明顯的趨化性和一定的吞噬功能。單核細(xì)胞是巨噬細(xì)胞的前身，它在血流中停留1-5天后，穿出血管進(jìn)入組織和體腔，分化為巨噬細(xì)胞。單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞都能消滅侵入機(jī)體的細(xì)菌，吞噬異物顆粒，消除體內(nèi)衰老損傷的細(xì)胞，并參與 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫，但其功能不及巨噬細(xì)胞強(qiáng)。血小板的介紹血小板(blood platelet)或稱血栓細(xì)胞(thrombocyte)， 正常數(shù)值為10萬30

28、萬/1.它是骨髓中巨核細(xì)胞胞質(zhì)脫落下來的小塊，故無細(xì)胞核，表面有完整的細(xì)胞膜。血小板體積甚小，直徑24m，呈雙凸扁盤狀;當(dāng)受到機(jī)械或化學(xué)刺激時(shí)，則伸出突起，呈不規(guī)則形。在血涂片中，血小板常呈多角形，聚集成群。血小板中央部分有著藍(lán)紫色的顆粒，稱顆粒區(qū)(granulomere);周邊部呈均質(zhì)淺藍(lán)色，稱透明區(qū)(hyalomere)。電鏡下，血小板的膜表面有糖衣，細(xì)胞內(nèi)無核，但有小管系、線粒體、微絲和微管等細(xì)胞器，以及血小板顆粒和糖原顆粒等。血小板在止血和凝血過程中起重要作用。血小板的表面糖衣能吸附血漿蛋白和凝血因子，血小板顆粒內(nèi)含有與凝血有關(guān)的物質(zhì)。當(dāng)血管受損害或破裂時(shí)，血小板受刺激，由靜止相變?yōu)闄C(jī)

29、能相，迅即發(fā)生變形，表面粘度增大，凝聚成團(tuán);同時(shí)在表面第因子的作用下，使血漿內(nèi)的凝血酶原變?yōu)槟?，后者又催化纖維蛋白原變成絲狀的纖維蛋白，與血細(xì)胞共同形成凝血塊止血。血小板顆粒物質(zhì)的釋放，則進(jìn)一步促進(jìn)止血和凝血。血小板還有保護(hù)血管內(nèi)皮、參與內(nèi)皮修復(fù)、防止動(dòng)脈粥樣硬化的作用。血小板壽命約714天。血液中的血小板數(shù)低于10萬/1為血小板減少，低于5萬/1則有出血危險(xiǎn)。血小板顆粒有兩種：特殊顆粒和致密顆粒。特殊顆粒又稱顆粒，體積較大，圓形，電子密度中等，內(nèi)含凝血因子、酸性水解酶等。致密顆粒較小，電子密度大，內(nèi)含5-羥色胺、ADP、ATP、鈣離子、腎上腺素等。兩種顆粒內(nèi)容物的釋放均與血不板功能有關(guān)。

30、血小板小管系也有兩種：開放小管系和致密小管系。開放小管系散在分布，管腔明亮，開口于血小板表面，借此攝取血漿物質(zhì)和釋放顆粒內(nèi)容物。致密小管系是封閉的小管，多分布在血小板周邊，管腔電子密度中等，能收集鈣離子和合成前列腺素等。血小板周邊有環(huán)行排列的微絲和微管，與血小板的形態(tài)變化有關(guān)。血液抗凝劑選擇抗凝是用物理或化學(xué)方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固。能夠阻止血液凝固的物質(zhì)，稱為抗凝劑或抗凝物質(zhì)。常用抗凝劑和使用方法如下。1.乙二胺四乙酸(EDTA)鹽常用有鈉鹽或鉀鹽，能與血液中鈣離子結(jié)合成螯合物，使ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。根據(jù)國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(ICSH)建議，

31、CBC抗凝劑用量為EDTA-K.2H2O 1.52.2mg/ml血液。不適于凝血檢查、血小板功能試驗(yàn)。2.草酸鹽常用有草酸鈉、草酸鉀、草酸銨，溶解后解離的草酸根離子能與樣本中鈣離子形成草酸鈣沉淀，使Ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。2mg草酸鹽可抗凝lml血液。但不適于凝血檢查。而且，草酸鹽濃度過高還會(huì)導(dǎo)致溶血、改變血液pH，干擾血漿鉀、鈉、氯和某些酶活性的測(cè)定。雙草酸鹽抗凝劑：適用于血細(xì)胞比容、CBC、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等檢查，不適于血小板計(jì)數(shù)、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。3.肝素是加強(qiáng)抗凝血酶(AT-)滅活絲氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，從而阻止血液凝固。肝素是紅細(xì)胞透滲脆性

32、試驗(yàn)的理想抗凝劑。但不適于CBC、細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查。每毫升血液肝素用量為(152.5)U，多為肝素鈉鹽或鉀鹽。4.枸櫞酸鹽常用有枸櫞酸鈉，能與血液中鈣離子結(jié)合形成螯合物，阻止血液凝固。枸櫞酸鹽抗凝劑的抗凝力不如上述抗凝劑。枸櫞酸鈉與血液的抗凝比例為l：9或1：4.適用于紅細(xì)胞沉降率、凝血檢查，是輸血保養(yǎng)液的成分。血細(xì)胞阻抗法的價(jià)值根據(jù)庫(kù)爾特原理，將不良導(dǎo)體血液按一定比例稀釋于等滲的電解液中，在小孔電極的兩側(cè)加一恒流源。在負(fù)壓作用下，使稀釋的血細(xì)胞通過小孔。當(dāng)細(xì)胞通過截面時(shí)會(huì)由于電阻增大產(chǎn)生相應(yīng)的脈沖，其脈沖的幅度與細(xì)胞的體積成正比，脈沖的頻度與細(xì)胞的數(shù)量成正比。這便是著名的庫(kù)爾特原理或稱變阻脈沖

33、原理。利用庫(kù)爾特原理可以有效地區(qū)分淋巴及單核細(xì)胞。-微球蛋白的定量檢查方法及意義正常腦脊液中含有2-MG，其水平在1.510.72mg/L.許多研究表明，CSF中2-MG可用于預(yù)報(bào)中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病和淋巴瘤的復(fù)發(fā)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病和淋巴瘤復(fù)發(fā)者CSF的2-MG的改變較細(xì)胞學(xué)診斷早48周，其2-MG水平升高顯著;白血病和淋巴瘤累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)時(shí)，CSF的2-MG明顯高于未受累者，經(jīng)化療后，2-MG水平隨癥狀體癥消失而恢復(fù)正常，故2-MG可作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)是否受累的診斷依據(jù)和療效監(jiān)測(cè)指標(biāo)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染時(shí)，CSF的2-MG增高，細(xì)菌性較病毒性升高明顯，結(jié)核性較化膿性升高更加明顯，故在病原體檢出

34、困難，CSF常規(guī)檢查不典型時(shí)，CSF的2-MG檢查對(duì)診斷有參考價(jià)值。急性腦梗塞患者腦脊液的2-MG明顯增高，有嚴(yán)重偏癱的大面積梗塞患者升高更顯著，經(jīng)治療后2-MG下降;故2-MG測(cè)定對(duì)本病的病情判斷和療效觀察有參考價(jià)值。 HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床實(shí)驗(yàn)室常用的方法有酶免法和放免法。腦脊液蛋白電泳原理/試劑1、原理與血清蛋白電泳相同，利用各種蛋白質(zhì)在電場(chǎng)作用下遷移率不同來進(jìn)行檢測(cè)。由于CSF蛋白質(zhì)含量較低，電泳前須進(jìn)行濃縮處理。一般采用透析法濃縮，將CSF加入透析袋內(nèi)，置于吸水的透析液中，CSF中的水分移至透析液內(nèi)，CSF的蛋白質(zhì)濃度增加后，再進(jìn)行電泳分析。2、試劑

35、與器材(1)器材透析膜可商品化購(gòu)買，亦可用玻璃紙袋;電泳設(shè)備同血清蛋白電泳。(2)試劑透析液為聚乙二醇20000氯化鈉溶液：稱取聚乙二醇2000030.0g，氯化鈉0.9g，加90ml蒸餾水溶解，再加巴比妥緩沖液(pH8.6，0.05mol/L)10ml，混勻，溶液pH為7.4.透析液亦可用500g/L的右旋糖酐溶液。3.方法先將CSF加入透析袋內(nèi)，放入聚乙二醇20000氯化鈉溶液中，室溫透析67小時(shí)(如用500g/L的右旋糖酐溶液，透析24時(shí)需15小時(shí))，濃縮至0.050.1ml即可。濃縮的腦脊液按血清蛋白電泳的方法進(jìn)行電泳分析。正常腦脊液蛋白電泳帶與血清蛋白電泳帶有不同之處：腦脊液出現(xiàn)較多

36、的前白蛋白而血清中較少;CSF的-球蛋白略高于血清;-球蛋白僅為血清的一半?？偟鞍锥繙y(cè)定/原理/方法1、原理磺基水楊酸為生物堿試劑，能沉淀蛋白質(zhì)，但對(duì)白蛋白的沉淀能力比球蛋白強(qiáng)，加適量硫酸鈉后，沉淀白、球蛋白的能力趨于一致，與標(biāo)準(zhǔn)蛋白濁度對(duì)比進(jìn)行定量測(cè)定。2、試劑磺基水楊酸-硫酸鈉試劑(SS-S)磺基水楊酸3.0g無水硫酸鈉7.0g蒸餾水加至100ml過濾后，儲(chǔ)存于棕色瓶中，如顯色或混濁則不能用。3、方法(1)制備標(biāo)準(zhǔn)曲線含蛋白200、400、800、1200、1600mg/L的稀釋混合人血清標(biāo)準(zhǔn)系列各0.5ml，加SS-S試劑4.5ml，充分混勻，715分鐘后，用420nm波長(zhǎng)比濁，以吸光

37、度為縱坐標(biāo)，蛋白質(zhì)濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(2)樣品檢測(cè)取待測(cè)腦脊液標(biāo)本各0.5ml于兩只試管中，其中一只試管加SS-S試劑4.5ml，另一試管加154mmol/L的NaCl溶液4.5ml作為標(biāo)本空白管。在與標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的條件下比濁，所得得吸光度可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得蛋白質(zhì)濃度。4、注意事項(xiàng)(1)腦脊液如有多量細(xì)胞或混濁，應(yīng)先離心以除去。如蛋白質(zhì)濃度過高，應(yīng)先行用生理鹽水稀釋后重新測(cè)定。(2)加入SS-S試劑的操作手法和速度、室溫及比濁前的放置時(shí)間都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。故操作時(shí)應(yīng)注意控制加入試劑的方式和比濁時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)管一致。應(yīng)隨氣溫改變，勤作標(biāo)準(zhǔn)曲線。5、正常參考值腰穿CSF蛋白含量：0.20.4

38、g/L池穿CSF蛋白含量：0.10.25g/L側(cè)腦室穿刺CSF蛋白含量：0.050.15g/L腦脊液蛋白質(zhì)含量與年齡成正比，兒童含量較低，成人稍高，老年人又比成年人高。6、 HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床意義腦脊液蛋白質(zhì)含量增高，為血腦屏障被破壞的標(biāo)志。頗受 HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床工作者的重視。蛋白質(zhì)含量增高常見于下列情況：(1)中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥。腦部感染時(shí)，腦膜和脈絡(luò)叢毛細(xì)血管通透性增加，蛋白質(zhì)分子容易透過，首先是白蛋白增高，隨后是球蛋白和纖維蛋白增高。(2)神經(jīng)根病變。如急性感染性多發(fā)性神經(jīng)炎(Guillain-Barre綜合征)

39、，多數(shù)病例有蛋白質(zhì)增高，而細(xì)胞數(shù)正?；蚪咏?，即蛋白-細(xì)胞分離現(xiàn)象。(3)椎管內(nèi)梗阻。腦與蛛網(wǎng)膜下腔互不相通，血漿蛋白由脊髓中的靜脈滲出，CSF蛋白質(zhì)含量顯著增高，有時(shí)高達(dá)3050g/L，這時(shí)CSF變黃，可自行凝固。如脊髓腫瘤、轉(zhuǎn)移癌、粘連性蛛網(wǎng)膜炎等。此外，早產(chǎn)兒CSF蛋白含量可達(dá)2g/L，新生兒為0.81.0g/L，出生兩個(gè)月后逐漸降至正常水平。含血的CSF蛋白質(zhì)含量增高。為了鑒別原來有無蛋白質(zhì)增高，可用每升紅細(xì)胞700106個(gè)約相當(dāng)增加蛋白質(zhì)量0.01g/L來推算，用含血CSF的蛋白質(zhì)含量減去含紅細(xì)胞數(shù)折算成的蛋白質(zhì)含量，即為原來CSF的蛋白質(zhì)含量。網(wǎng)織紅細(xì)胞生成指數(shù)的 HYPERLI

40、NK /lcys/ t _blank 臨床意義網(wǎng)織紅細(xì)胞的生成指數(shù)(RPI)是網(wǎng)織紅細(xì)胞生成相當(dāng)于正常人的倍數(shù)。不同生理、病理情況下，Ret從骨髓釋放人外周血所需時(shí)間不同，故Ret計(jì)數(shù)值不能確切反映骨髓紅細(xì)胞系統(tǒng)造血功能，還應(yīng)考慮Ret生存期限。通常Ret生存期限約為2d，若未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞提前釋放人血，Ret生存期限將延長(zhǎng)，為了糾正網(wǎng)織紅細(xì)胞提前釋放引起的偏差，用網(wǎng)織RPI來反映Ret生成速率。計(jì)算公式為：RPI=被測(cè)Hct/正常人Hct1/2被測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比。在估計(jì)紅細(xì)胞生成有效性方面，使用RPI較準(zhǔn)確。關(guān)節(jié)積液【正常參考值】淡黃色或草黃色。【 HYPERLINK /lcys/ t _

41、blank 臨床意義】1.紅色：見于穿刺損傷或血友病的病理出血，如血友病色素性絨毛結(jié)節(jié)性滑膜炎等。2.乳白色：見于結(jié)核性關(guān)節(jié)炎、急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎或紅斑狼瘡病。3.綠色：見于化膿性關(guān)節(jié)炎、慢性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)。HLA1.器官移植：HLA配型的作用為：在腎移植中，供受雙方共有的DR抗原越多，或已檢出的DR錯(cuò)配抗原數(shù)越少，移植存活率就越高。在移植前輸血的患者中，DR配型能提高存活率。骨髓移植前不宜輸血，以防受體被 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫。心、肝、肺等器官的移植，多用于生命垂危的患者，主要要求AB0血型相同。2.輸血：成分輸血療法時(shí)，如HLA同型血液，則能

42、提高療效。 HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床輸血的發(fā)熱反應(yīng)中，有些是由HLA抗體引起，尤其是多次輸血的患者，HLA抗體可以破壞白細(xì)胞，為避免HLA引起輸血反應(yīng)，可在輸血前做交叉淋巴細(xì)胞毒試驗(yàn)。在70%的非溶血性輸血反應(yīng)是發(fā)熱反應(yīng)，一般認(rèn)為是白細(xì)胞被HLA抗體破壞后釋放致熱原物質(zhì)所致?？上葘准?xì)胞過濾后再輸血病毒的細(xì)胞 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫1.CTL通過細(xì)胞裂解和細(xì)胞凋亡兩種機(jī)制，直接殺傷靶細(xì)胞。在多數(shù)病毒感染中，因CTL可殺傷靶細(xì)胞達(dá)到清除或釋放在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的病毒體，從而在抗體的配合下清除病毒，因此被認(rèn)為是終止病毒感染的主要機(jī)

43、制。CTL還可通過分泌多種細(xì)胞因子，如IFN-、TNF等而發(fā)揮抗病毒作用。2.活化的細(xì)胞釋放IFN-，TNF等多種細(xì)胞因子，發(fā)揮抗病毒作用。真菌檢驗(yàn)的生物學(xué)技術(shù)(一)、用PCR等技術(shù)字標(biāo)本中擴(kuò)增真菌DNA.國(guó)內(nèi)應(yīng)用PCR與反向斑點(diǎn)雜交快速檢測(cè)及鑒定念珠菌主要種別。國(guó)外可以用PCR-DEIA技術(shù)從血清中擴(kuò)增出白色念珠菌的DNA來診斷念珠菌病。針對(duì)真菌的共同序列而設(shè)計(jì)的全能引物(pan-primer)而擴(kuò)增580bp的產(chǎn)物，為真菌所共有。檢測(cè)血液標(biāo)本即可明確體內(nèi)有無真菌感染。(二)、用于真菌的型別分析。國(guó)內(nèi)應(yīng)用隨機(jī)引物PCR擴(kuò)增后進(jìn)行真菌分型，結(jié)果可靠。應(yīng)用隨機(jī)引物擴(kuò)增物多態(tài)性分析(RAPD)可以

44、將5種曲霉菌鑒別開(煙、黃、黑、土、構(gòu)巢曲霉)。國(guó)外結(jié)合PCR與酶標(biāo)記探針在紙條上進(jìn)行檢測(cè)(LiPA，lineprobeassay)可鑒別出主要的致病性真菌。(三)、檢出念珠菌的基因變異快速確定念珠菌對(duì)酮康唑的耐藥性。此種耐藥性由基因的1554T突變?yōu)镃而致，應(yīng)用Lightcycler儀器，以熒光共振能量轉(zhuǎn)移和基因片段溶解溫度曲線技術(shù)測(cè)定。單核細(xì)胞計(jì)數(shù)的定義單核細(xì)胞(moncyte)占白細(xì)胞總數(shù)的3-8%，骨髓多能造血干細(xì)胞分化為髓系干細(xì)胞和粒-單系祖細(xì)胞之后進(jìn)而發(fā)育為原單核細(xì)胞、幼單核細(xì)胞及單核細(xì)胞，后者逐遂可釋放至外周血中。循環(huán)血內(nèi)的單核細(xì)胞并非終末細(xì)胞，它在血中的停留只是暫的，3-6天后

45、進(jìn)入組織或體腔內(nèi)，可轉(zhuǎn)變?yōu)橛资杉?xì)胞，再成熟為巨細(xì)胞。因此單核細(xì)胞與組織中的巨噬細(xì)胞構(gòu)成單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)，而發(fā)揮防御功能。流行性感冒病毒的結(jié)構(gòu)流行性感冒病毒(簡(jiǎn)稱流感病毒)呈球形或絲狀。結(jié)構(gòu)由內(nèi)至外分為3部分：1.核心是單負(fù)股RNA(78個(gè)片段)，與核蛋白組成核糖蛋白(RNP)，并含有RNA多聚酶。核糖蛋白即核衣殼，呈螺旋對(duì)稱。核蛋白抗原很少發(fā)生變異，具有型特異性;2.基質(zhì)蛋白(M蛋白)位于包膜與核心之間，抗原性穩(wěn)定，亦具有型特異性;3.包膜包膜表面有兩種病毒編碼的糖蛋白刺突，一種稱血凝素(HA)，另一種稱神經(jīng)氨酸酶(NA)，是劃分流感病毒亞型的依據(jù)，其抗原性易發(fā)生變異。HA能與雞、豚鼠、人等的

46、紅細(xì)胞表面受體結(jié)合引起紅細(xì)胞凝集，簡(jiǎn)稱血凝。HA具有 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫原性，其相應(yīng)抗體能抑制血凝現(xiàn)象和中和病毒，是主要保護(hù)性抗體。溶細(xì)胞型感染溶細(xì)胞型感染多見于無包膜病毒。如脊髓灰質(zhì)炎病毒、腺病毒等。其機(jī)制主要有：阻斷細(xì)胞大分子物質(zhì)合成，病毒蛋白的毒性作用，影響細(xì)胞溶酶體和細(xì)胞器的改變等。溶細(xì)胞型感染是病毒感染中較嚴(yán)重的類型。靶器官的細(xì)胞破壞死亡到一定程度，機(jī)體就會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的病理生理變化基侵犯重要器官則危及生命或留下嚴(yán)重的后遺癥?？袢〔《局虏⌒圆《镜膭?dòng)物感染范圍較廣。在易感動(dòng)物或人的中樞神經(jīng)細(xì)胞中增殖時(shí)，在胞質(zhì)內(nèi)形成嗜酸性包涵體，稱內(nèi)基小體，在

47、診斷上很有價(jià)值。在動(dòng)物發(fā)病前5天，唾液中可含有病毒。人被犬咬傷后，病毒通過傷口進(jìn)入體內(nèi)。潛伏期一般為13個(gè)月，人發(fā)病時(shí)的典型 HYPERLINK /lcys/ t _blank 臨床表現(xiàn)是神經(jīng)興奮性增高，吞咽或飲水時(shí)喉頭肌肉發(fā)生痙攣，故又稱恐水癥。經(jīng)35天后，病人轉(zhuǎn)入麻痹期，最后因昏迷、呼吸、循環(huán)衰竭而死亡。死亡率幾乎達(dá)100%.人被犬等動(dòng)物咬傷后，應(yīng)將動(dòng)物捕獲隔離觀察。若經(jīng)57天不發(fā)病，一般可認(rèn)為該動(dòng)物不是狂犬病或咬人時(shí)唾液中尚無狂犬病病毒。真菌檢驗(yàn)的生物學(xué)技術(shù)(一)、用PCR等技術(shù)字標(biāo)本中擴(kuò)增真菌DNA.國(guó)內(nèi)應(yīng)用PCR與反向斑點(diǎn)雜交快速檢測(cè)及鑒定念珠菌主要種別。國(guó)外可以用PCR-DEIA技

48、術(shù)從血清中擴(kuò)增出白色念珠菌的DNA來診斷念珠菌病。針對(duì)真菌的共同序列而設(shè)計(jì)的全能引物(pan-primer)而擴(kuò)增580bp的產(chǎn)物，為真菌所共有。檢測(cè)血液標(biāo)本即可明確體內(nèi)有無真菌感染。(二)、用于真菌的型別分析。國(guó)內(nèi)應(yīng)用隨機(jī)引物PCR擴(kuò)增后進(jìn)行真菌分型，結(jié)果可靠。應(yīng)用隨機(jī)引物擴(kuò)增物多態(tài)性分析(RAPD)可以將5種曲霉菌鑒別開(煙、黃、黑、土、構(gòu)巢曲霉)。國(guó)外結(jié)合PCR與酶標(biāo)記探針在紙條上進(jìn)行檢測(cè)(LiPA，lineprobeassay)可鑒別出主要的致病性真菌。(三)、檢出念珠菌的基因變異快速確定念珠菌對(duì)酮康唑的耐藥性。此種耐藥性由基因的1554T突變?yōu)镃而致，應(yīng)用Lightcycler儀器，

49、以熒光共振能量轉(zhuǎn)移和基因片段溶解溫度曲線技術(shù)測(cè)定。分析范圍評(píng)價(jià)（線性試驗(yàn)）這種參數(shù)指的是“方法應(yīng)用未經(jīng)修改樣本的濃度范圍或其他量”。通過線性試驗(yàn)，即候選方法檢測(cè)含較寬范圍的特定分析物量的參考溶液。理想情況下，校準(zhǔn)曲線（響應(yīng)對(duì)分析物濃度之間關(guān)系圖）應(yīng)該是線性并通過原點(diǎn)。如果曲線是線性，檢測(cè)范圍被稱為方法的線性范圍。如果無法獲得線性響應(yīng)，校準(zhǔn)程序應(yīng)使用較高校準(zhǔn)溶液數(shù)量來足夠地確定響應(yīng)曲線醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理，以及校準(zhǔn)溶液應(yīng)包括未知濃度。方法的分析范圍應(yīng)足夠的寬包括沒有預(yù)稀釋期望樣本的95%至99%。正如美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正案1988最終規(guī)則（CLIA88）所規(guī)定，一旦已確認(rèn)了方法的分析范圍，它就是

50、方法的可報(bào)告范圍。在檢測(cè)過程中，反映測(cè)定結(jié)果的數(shù)據(jù)分布有兩個(gè)規(guī)律：1.波動(dòng)即重復(fù)某一檢測(cè)，測(cè)定結(jié)果總是上下波動(dòng)的，即是說測(cè)定的數(shù)據(jù)是在平均值上、下波動(dòng)的，這是由于測(cè)定過程中一些條件的變化引起的，而這些變化又難以予先知道的。波動(dòng)的大小取決于檢測(cè)條件完善程度和對(duì)影響因素影響量的認(rèn)識(shí)程度；2.分布即測(cè)定的數(shù)據(jù)都是按一定規(guī)律分布的，例如定量測(cè)定中，常呈正態(tài)分布，數(shù)據(jù)常在均值上、下分布，其離散的程度常用標(biāo)準(zhǔn)差來表示，因此均值及標(biāo)準(zhǔn)差就成為這一分布的兩個(gè)特征值，也成為繪制質(zhì)控圖時(shí)兩個(gè)基本依據(jù)。造成這種波動(dòng)的原因有兩大類：1.偶然因素所引起。這一因素在正常情況下也存在，故又稱正常因素，其影響比較輕微且難以去

51、除，其分布在定量測(cè)定中常呈正態(tài)分布；2.系統(tǒng)因素（又稱異常因素）所引起的。這一因素不是經(jīng)常存在的，對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果影響較大，其原因可以找到并去除，其分布不呈正態(tài)分布。由于偶然因素引起的波動(dòng)呈正態(tài)分布，而異常因素引起的波動(dòng)不呈正態(tài)分布。Shewhart就是根據(jù)這一特點(diǎn)將統(tǒng)計(jì)學(xué)原理引進(jìn)質(zhì)量管理中，通過測(cè)定數(shù)據(jù)的分布可從偶然因素引起的波動(dòng)中發(fā)現(xiàn)異常因素引起的波動(dòng)，達(dá)到過程控制的目的。所以質(zhì)控圖實(shí)際上就是形狀和位置改變了的正態(tài)分布圖。對(duì)檢驗(yàn)質(zhì)量產(chǎn)生影響的有兩類誤差：1.測(cè)定均值偏離了“真值”或理想值稱為系統(tǒng)誤差：2.檢測(cè)精度變差，也就是標(biāo)準(zhǔn)差變大，重復(fù)測(cè)定中重復(fù)性變差。造成的原因也是存在異常因素的緣故，但數(shù)

52、據(jù)分布常呈正態(tài)分布，故常稱為隨機(jī)誤差。在統(tǒng)計(jì)學(xué)及誤差理論中，隨機(jī)誤差與偶然誤差是同義詞，但在此處要注意其區(qū)別。這里隨機(jī)誤差是指變大了的偶然誤差。常見的數(shù)據(jù)分布有三個(gè)類型：正態(tài)分布、二項(xiàng)分布、普哇松（Poisson）分布。在臨床檢驗(yàn)工作中定量分析屬正態(tài)分布，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理白細(xì)胞分類屬二項(xiàng)分布，細(xì)胞計(jì)數(shù)及細(xì)菌計(jì)數(shù)屬普哇松分布。相應(yīng)三種分布，質(zhì)控圖也有三個(gè)類型：用于正態(tài)分布時(shí)有xS控制圖、xR控制圖、xR控制圖等；用于二項(xiàng)分布的有p控制圖、pn控制圖等；用于普哇松分布的有c控制圖、u控制圖等。Shewhart質(zhì)控圖對(duì)影響要素是全部控制的，即只要其中某一質(zhì)量要素發(fā)生變化影響到質(zhì)量時(shí)，它都能反映，故

53、又稱全控圖；但影響質(zhì)量的某一要素非檢測(cè)人員所能控制，檢測(cè)人員只能控制其所能控制的質(zhì)量要素，這種非全控的控制圖稱選控圖，選控圖是我國(guó)學(xué)者張公緒教授提出的，己廣泛應(yīng)用于工業(yè)、郵電、醫(yī)療衛(wèi)生部門，在臨床檢驗(yàn)工作中也有著廣泛用途。Shewhart質(zhì)控圖及選控圖都是建立在統(tǒng)計(jì)學(xué)基礎(chǔ)上的，此外還有一種不用統(tǒng)計(jì)方法設(shè)計(jì)和繪制質(zhì)控圖，它是根據(jù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)合格與否繪制的質(zhì)控圖叫予控圖?？傊|(zhì)控圖的類型和種類是比較多的，我們常用的LeveyJennings質(zhì)控圖只是其中一種。Shewhart質(zhì)控圖主要用于工業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域，工業(yè)生產(chǎn)和臨床實(shí)驗(yàn)室相比，有許多不同。上面已提及一些，同時(shí)相對(duì)于工業(yè)生產(chǎn)產(chǎn)品的數(shù)量而言，每天檢測(cè)標(biāo)本

54、只是“小批量”的，因此臨床檢驗(yàn)工作中通常用“小批量”產(chǎn)品的單值質(zhì)控圖，即xS質(zhì)控圖，且是通過質(zhì)控品的測(cè)定來進(jìn)行質(zhì)控的?，F(xiàn)在在臨床檢驗(yàn)中有一種情況，即不論數(shù)據(jù)呈何種分布，都采用正態(tài)分布的質(zhì)控圖，這是不正確的；另外定性分析并無必要一定要采取質(zhì)控圖法進(jìn)行質(zhì)控。實(shí)驗(yàn)室管理是整合和協(xié)調(diào)實(shí)驗(yàn)室資源以達(dá)到既定目標(biāo)的過程。管理過程通常由計(jì)劃、組織、領(lǐng)導(dǎo)和控制四個(gè)階段組成。計(jì)劃階段主要指確定實(shí)驗(yàn)室工作目標(biāo)，實(shí)行目標(biāo)管理；組織階段則是指對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的人、財(cái)、物等各種資源進(jìn)行有效整合和分配；領(lǐng)導(dǎo)階段是指實(shí)驗(yàn)室管理者應(yīng)建立一系列規(guī)章醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理、制度和標(biāo)準(zhǔn)，并依據(jù)有關(guān)規(guī)定領(lǐng)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室人員的具體工作；以建立的文件對(duì)

55、已做的工作進(jìn)行對(duì)比檢查，協(xié)調(diào)、控制整個(gè)檢測(cè)過程，并修正已建立的目標(biāo)及相關(guān)程序，此為控制階段。管理過程中計(jì)劃、組織、領(lǐng)導(dǎo)和控制并不是完全獨(dú)立的，實(shí)際工作中管理者常常需要同時(shí)進(jìn)行幾項(xiàng)工作。管理過程的運(yùn)行循環(huán)往復(fù)，可不斷改進(jìn)和完善。床檢驗(yàn)對(duì)測(cè)試標(biāo)本都有專門的要求，或是標(biāo)本類型，或是抗凝劑種類，不一而足，操作者必須明確患者在受檢前要注意或禁忌的事項(xiàng)，這是保證檢驗(yàn)合理性的前提。由于方法學(xué)存在著差異，首先要了解在檢測(cè)原理上對(duì)標(biāo)本有哪些具體要求，如：光學(xué)法檢測(cè)的儀器多數(shù)會(huì)受到標(biāo)本中溶血和乳糜的干擾，化學(xué)顯色法會(huì)受到外源性氧化還原物質(zhì)的影響，這是分析前質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)。采血對(duì)象要處于空腹平靜的狀態(tài)，飽食和油

56、膩食物會(huì)干擾血小板因子和纖溶成分的測(cè)定；情緒緊張、激烈運(yùn)動(dòng)也將導(dǎo)致測(cè)量的偏差；血?dú)夥治鰰r(shí)一定要使用動(dòng)脈血，且應(yīng)密封保存，還要注意送檢過程中是否出現(xiàn)封套脫落等。尿液分析時(shí)必須保證標(biāo)本新鮮，并核實(shí)患者是否服用藥物，利尿劑可導(dǎo)致亞硝酸鹽檢驗(yàn)試驗(yàn)出現(xiàn)假陽性，尿液中污染甲醛等可使白細(xì)胞檢驗(yàn)出現(xiàn)假陽性。血細(xì)胞壓積高低的不同可能導(dǎo)致全血葡萄糖含量測(cè)定的差異，試劑中酶（氧化酶、脫氫酶、己糖激酶）的差異可能在方法學(xué)之間被進(jìn)一步反應(yīng)出來，甚至毛細(xì)管、靜脈和動(dòng)脈血之間的含氧差異也可能影響某些分析儀器的檢測(cè)結(jié)果。若在醫(yī)院做床旁檢驗(yàn)，醫(yī)護(hù)人員必須提醒患者注意相關(guān)事項(xiàng)并監(jiān)測(cè)用藥，以保證正確取樣和處理標(biāo)本醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集|整

57、理。自行檢驗(yàn)的患者也應(yīng)該對(duì)標(biāo)本采集要求有足夠清晰的認(rèn)識(shí)，無論患者是否曾向相關(guān)部門進(jìn)行咨詢，醫(yī)務(wù)人員接觸到這類患者時(shí)都有義務(wù)詳細(xì)地介紹注意事項(xiàng)，盡量防止由于采樣和處理的問題造成誤判在常規(guī)分析過程中，使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對(duì)分析方法進(jìn)行校準(zhǔn)，是保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的基礎(chǔ)。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)又稱參考物質(zhì)，是一類充分均勻，并具有一個(gè)（或多個(gè)）確定的特性值的材料或物質(zhì)。用以校準(zhǔn)儀器、評(píng)價(jià)測(cè)量方法，或給其他物質(zhì)賦值。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值結(jié)果一般表示為：標(biāo)準(zhǔn)值？總不確定度。一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：穩(wěn)定、均一。采用高度準(zhǔn)確、可靠的方法定值，可用于校準(zhǔn)決定性方法及為二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值。在我國(guó)由國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)、頒布并授權(quán)生產(chǎn)。如血清無機(jī)成分分析標(biāo)準(zhǔn)

58、物質(zhì)和血清膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：用一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)，為參考方法定值。如紅細(xì)胞微粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、膽紅素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等。校準(zhǔn)品：用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)，為常規(guī)方法定值。用于對(duì)常規(guī)方法和儀器的校準(zhǔn)。質(zhì)控品：具有與檢測(cè)過程相適應(yīng)的特性，其成分與檢測(cè)標(biāo)本的基質(zhì)相同或相似，主要用于室內(nèi)質(zhì)控。為了保證質(zhì)控方法對(duì)系統(tǒng)性能提供獨(dú)立的評(píng)價(jià)，必須將質(zhì)控品與校準(zhǔn)品分開，不因宜用質(zhì)控品校準(zhǔn)檢測(cè)系統(tǒng)或檢測(cè)方法。1.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定儀器配備管理、使用制度，藥品管理、使用制度，玻璃器皿管理、使用制度，并根據(jù)安全制度和環(huán)境條件的要求，本室工作人員應(yīng)嚴(yán)格掌握，認(rèn)真執(zhí)行。2.進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須穿工作服，進(jìn)入無菌室換無菌衣、帽

59、、鞋，戴好口罩，非實(shí)驗(yàn)室人員不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，嚴(yán)格執(zhí)行安全操作規(guī)程。3.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)物品擺放整齊，試劑定期檢查并有明晰標(biāo)簽，儀器定期檢查、保養(yǎng)、檢修， 嚴(yán)禁在冰箱內(nèi)存放和加工私人食品。4.各種器材應(yīng)建立請(qǐng)領(lǐng)消耗記錄，貴重儀器有使用記錄，破損遺失應(yīng)填寫報(bào)告；藥品、器材、菌種不經(jīng)批準(zhǔn)不得擅自外借和轉(zhuǎn)讓，更不得私自拿出醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。5.禁止在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吸煙、進(jìn)餐、會(huì)客、喧嘩，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得帶入私人物品，離開實(shí)驗(yàn)室前認(rèn)真檢查水電，對(duì)于有毒、有害、易燃、污染、腐蝕的物品和廢棄物品應(yīng)按有關(guān)要求執(zhí)行。6.負(fù)責(zé)人嚴(yán)格執(zhí)行本制度，出現(xiàn)問題立即報(bào)告，造成病原擴(kuò)散等責(zé)任事故者，應(yīng)視情節(jié)直至追究法律責(zé)任。實(shí)驗(yàn)室玻璃器皿管

60、理與使用制度：1.根據(jù)測(cè)試項(xiàng)目的要求，申報(bào)玻璃儀器的采購(gòu)計(jì)劃、詳細(xì)注明規(guī)格、產(chǎn)地、數(shù)量、要求，硬質(zhì)中性玻璃儀器應(yīng)經(jīng)計(jì)量驗(yàn)證合格。2.大型器皿建立賬目，每年清查一次，一般低值易耗器皿損壞后隨時(shí)填寫損耗登記清單醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。3.玻璃器皿使用前應(yīng)除去污垢，并用清潔液或2%稀鹽酸溶液浸泡24 h后，用清水沖洗干凈備用。4.器皿使用后隨時(shí)清洗，染菌后應(yīng)嚴(yán)格高壓滅菌，不得亂棄亂扔實(shí)驗(yàn)室安全制度：1.進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作衣、帽、鞋必須穿戴整齊。2.在進(jìn)行高壓、干燥、消毒等工作時(shí)，工作人員不得擅自離現(xiàn)場(chǎng)，認(rèn)真觀察溫度、時(shí)間，蒸餾易揮發(fā)、易燃液體時(shí)，不準(zhǔn)直接加熱，應(yīng)置水浴鍋上進(jìn)行，試驗(yàn)過程中如產(chǎn)生毒氣時(shí)應(yīng)在避毒