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文檔簡介
1、動物疾病與生化檢測技術(shù) 第1頁,共32頁。2臨床診斷過程診療就診主人的主訴寵物醫(yī)師基礎(chǔ)理論與經(jīng)驗診斷實驗室診斷寵物臨床癥狀與體征化驗診斷影像放射診斷心電圖超聲波腦電圖等血液常規(guī)檢驗血液生化免疫檢驗?zāi)蛞夯灱S便檢驗皮膚化驗客觀主觀第2頁,共32頁。3實驗室常規(guī)項目血液常規(guī)檢查臨床最基本輔助診斷方法,如貧血、炎癥、病毒性感染、寄生蟲感染、過敏等疾病診斷參考;監(jiān)測疾病發(fā)展和預(yù)后血液生化檢查 輔助診斷老年性、慢性內(nèi)科病,如肝病、腎病、糖尿病、電解質(zhì)紊亂等,發(fā)現(xiàn)體內(nèi)潛在病變.糞便檢驗診斷胃腸道出血、寄生蟲蟲卵、腸道炎癥;對拉稀的犬貓(尤其犬)有鑒別診斷意義尿液檢驗輔助診斷泌尿系統(tǒng)、腎臟、肝臟、糖尿病等疾
2、病皮膚化驗:主要通過刮取皮膚表層物質(zhì)作顯微鏡檢查,觀察是否有皮膚疥螨,蠕形螨,真菌,細菌等。第3頁,共32頁。4生化檢測與臨床意義GLU:糖尿病、低血糖癥TG、TC:高血脂癥BUN、CREA、UA:急性腎小球腎炎、慢性腎小球腎炎、腎功能衰竭ALT、AST、GGT、TBIL、DBIL、TP、ALB:急性肝炎、肝臟疾病(ALTASTGGT)、犬低蛋白血癥(TP35-43g/L;ALB10-20g/L)、黃疸(TBIL、DBIL )第4頁,共32頁。5生化檢測與臨床意義AMYL:胰腺炎Ca、IP、Mg:佝僂病、鎂代謝病Na、K、Cl:胃腸炎、多種疾病輸液過程中NH3:肝昏迷第5頁,共32頁。6來自日
3、本的相關(guān)研究(東京大學農(nóng)學部、理化學研究所)方法:應(yīng)用干化學法,對試驗動物大鼠、小鼠的若干生化指標和電泳、濕化學等作對照研究。檢測指標:GOT、GPT、CPK、LDH、ALP、AMY(生理鹽水10倍稀釋)、GLU、TCHO、TG、BUN、UA、ALB、Na、K、CL結(jié)果:干化學法和以往方法的測定值相關(guān)性高、操作更加簡便,可以在短時間內(nèi)得到數(shù)據(jù)。第6頁,共32頁。7干化學分析系統(tǒng)&自動生化分析系統(tǒng) 干化學 濕化學 (dry chemistry) (wet chemistry) 干試劑化學 液體試劑 (dry reagent chemistry) + + 干化學分析儀器 自動生化分析儀器 干化學分
4、析系統(tǒng) 自動生化分析系統(tǒng) 第7頁,共32頁。8干化學的發(fā)展歷史時間試紙條法多層薄膜法1930年1956年1972年1978年1980年1983年1985年1987年P(guān)H試紙條尿糖試紙條(美)尿試紙條自動分析儀REFLOTRON(BM)SPOTCHEM(ARKRAY)VITROS(KODAK)富士DRICHEM(FUJI)DRILAB(KONICA)第8頁,共32頁。9干化學試劑載體的結(jié)構(gòu)二層結(jié)構(gòu)三層結(jié)構(gòu)多層膜基于反射光度法的多層膜基于離子選擇電極法的多層膜基于免疫比濁法的多層膜第9頁,共32頁。10最簡單的二層結(jié)構(gòu) 用于生化分析的試劑載體最簡單的是二層結(jié)構(gòu),在支持層塑料基片上有一試劑層纖維素片
5、,在纖維素片中預(yù)固相了全部試劑。常見的是尿生化分析試劑條: 尿液中的待測成分與預(yù)固相在纖維素片上的試劑直接反應(yīng),通過反射光度計測定其顏色的改變,從而計算待測成份的濃度。這種機構(gòu)只能對待測成分進行定性或半定量測定,這樣就限制了它在其它須準確定量的標本的應(yīng)用。入射光反射光纖維素片試劑層塑料基片支持層第10頁,共32頁。11稍加改進的三層結(jié)構(gòu) 在試劑層上加一多孔膠膜過濾層,其作用是將樣品中的雜質(zhì)過濾掉,并起保護試劑層作用。常見的是微量法測定葡萄糖的試劑條。 三層試劑載體的測定光路是通過透明的塑料基片,而不經(jīng)過最上面的過濾層,這樣消除了樣品中干擾成分的影響,保證了待測成分測定的穩(wěn)定性和準確性。 加樣入
6、射光反射光多孔膠膜過濾層纖維素片試劑層透明塑料基片支持層第11頁,共32頁。12比較完善的多層膜當代臨床檢驗中的干化學法,最具代表性的就是多層膜法,即干化學的多層膜試劑載體。它集現(xiàn)代化學、光學、酶工程學、化學計量學和計算機技術(shù)于一體,已使其作為定量方法達到常規(guī)濕化學法測定的水平,對有些項目的測定,甚至可與參考方法相媲美。 多層膜分為三種類型: 基于反射光度法的多層膜 基于離子選擇電極法的多層膜 基于免疫比濁法的多層膜第12頁,共32頁。13基于反射光度法的多層膜 從下至上可分為支持層、試劑層、輔助試劑層、光漫射層和分布層。加樣入射光反射光分布層光漫射層輔助試劑層試劑層支持層第13頁,共32頁。
7、14檢測原理比較第14頁,共32頁。15原理2-離子選擇電極法采用離子選擇電極技術(shù)直接測定離子電極與參比電極之間的電勢差 K、Na、Cl 三個項目組合在一個試劑片上快速,1分鐘就能出結(jié)果第15頁,共32頁。16Two Types of FDC Slides第16頁,共32頁。17干式生化的檢測原理和特征干式生化的檢測原理 所謂干式生化,就是將原來發(fā)生在液相反應(yīng)物中的反應(yīng),轉(zhuǎn)換到一個固相載體上,然后被檢測。其原理是將某項測定所需要的全部試劑成分固化在具有特定結(jié)構(gòu)反應(yīng)裝置(試劑載體)上,當把樣品加到載體上之后,液體成分將試劑溶解并發(fā)生反應(yīng),然后通過檢測器檢測反應(yīng)信號。干式生化的特征無須供/排水設(shè)備
8、:不需要準備生化用水和廢液處理快速檢測:一個測試所需時間為比色項目26分/電解質(zhì)1分無須定標:使用磁卡校正不同批號試劑片之間的差異(除Vitros)微量標本:可對應(yīng)極微量標本,一般為幾uL即可進行檢測第17頁,共32頁。18生化分析儀: FDC 3500v第18頁,共32頁。19日本干化學市場濕 化 學185億日圓(92%)干 化 學15億日圓(8%)F U J I10億日圓(67%) ARKRAY 3億日圓 (20%)J&J2億日圓(13%)各廠家儀器儀器市場份額-約200億日圓第19頁,共32頁。20第20頁,共32頁。21日本干化學市場-市場分類第21頁,共32頁。22FDC3500儀器
9、的特征(1)一、全自動設(shè)計,操作簡單只需簡單的三步,即能完成操作適合于急診操作和非專業(yè)人員放置試劑放置標本按啟動鍵 第22頁,共32頁。23FDC3500儀器的特征(2)二、快速檢測,無需定標比色法2-6分鐘,電極法1分鐘只要刷一下校正磁卡,就能校正不同批號間的差異第23頁,共32頁。24FDC3500儀器的特征(3)三、高精度保證比色時只要6-10ul就能檢測獨特的分光檢測系統(tǒng),不受溶血、脂血和黃疸等因素的干擾和影響,保證檢測的精度第24頁,共32頁。25FDC3500儀器的特征(4)采用步進馬達,保證精度10ul0.2ul富士專利注射器,內(nèi)有礦物油,極低阻力有溫度校正功能,在不同溫度下吸樣量有所微調(diào)有液面感應(yīng)功能第25頁,共32頁。26FDC3500儀器的特征(5)五、完善的試劑配套目前檢測項目含蓋了大部分的急診項目有配套的質(zhì)控品,有很好的質(zhì)量管理體系針對于標本量特點,設(shè)計了單獨的鋁箔包裝,不存在浪費第26頁,共32頁。27FDC3500儀器的特征(6)六、人性化的設(shè)計有多種樣品管可選,并且原始管可直接上機顯示檢測完成時間第27頁,共32頁。28FDC3500儀器特征(7)檢測完畢,自動將用完的試劑片和一次性加樣頭丟棄至儀器的廢棄箱里面,減少污染的同時大大地降低了操作者被感染的可能性(見右圖)。第28頁,共3
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