1、ICS 65.120B 25DB11北京市地方標(biāo)準(zhǔn)DB11/T 17592020全株玉米青貯飼料分級(jí)技術(shù)規(guī)范Technical specification for grading of whole corn silage feed2020 - 09 - 17 發(fā)布2021 - 01 - 01 實(shí)施北京市市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā) 布DB11/T 17592020目次前言II范圍1規(guī)范性引用文件1術(shù)語(yǔ)和定義1技術(shù)要求1綜合分級(jí)3測(cè)定方法3附錄 A（資料性） 30h 中性洗滌纖維降解率的測(cè)定5附錄 B（資料性） 氨態(tài)氮/總氮含量的測(cè)定7附錄 C（資料性） 氣相色譜法測(cè)定青貯飼料中有機(jī)酸含量9IDB11/T

2、17592020前言本文件按照GB/T 1.12020標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定起草。本文件由北京市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出并歸口。本文件由北京市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局組織實(shí)施。 本文件起草單位：北京市畜牧總站。本文件起草人：郭江鵬、趙連生、付瑤、馬露、王俊、齊志國(guó)、呂中旺、卜登攀、陳雅坤、沈旖帆、梁曉維。IIDB11/T 17592020全株玉米青貯飼料分級(jí)技術(shù)規(guī)范范圍本文件規(guī)定了全株玉米青貯飼料技術(shù)要求、綜合分級(jí)和測(cè)定方法。本文件適用于對(duì)全株玉米青貯飼料的分級(jí)。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件， 僅該日期對(duì)應(yīng)的版

3、本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6432飼料中粗蛋白質(zhì)的測(cè)定 凱氏定氮法GB/T6435飼料中水分的測(cè)定GB/T10468水果和蔬菜產(chǎn)品pH值的測(cè)定方法GB 13078 飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB/T 14699.1 飼料 采樣GB/T20194動(dòng)物飼料中淀粉含量的測(cè)定 旋光法GB/T20195動(dòng)物飼料 試樣的制備GB/T20806飼料中中性洗滌纖維(NDF)的測(cè)定NY/T1459飼料中酸性洗滌纖維的測(cè)定術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1全株玉米青貯飼料 whole corn silage feed將新鮮全株玉米收獲調(diào)制后，置于密閉條件下

4、，通過(guò)乳酸菌等微生物厭氧發(fā)酵作用制成的飼料。3.230h 中性洗滌纖維降解率 neutral detergent fiber degradation rate for 30 hours飼料中中性洗滌纖維通過(guò)體外發(fā)酵30 h所降解的部分占原樣中中性洗滌纖維的百分比。技術(shù)要求感官分級(jí)1DB11/T 17592020全株玉米青貯飼料感官分級(jí)指標(biāo)包括氣味、色澤、質(zhì)地和籽實(shí)破損度4項(xiàng)指標(biāo)，分級(jí)按照表1的指標(biāo)設(shè)定進(jìn)行判定。以4項(xiàng)感官指標(biāo)單項(xiàng)得分之和作為分級(jí)依據(jù)，判定81100分為優(yōu)良、6180分為中等、4160分為較差、040分為差，感官評(píng)分記為S1。表1 全株玉米青貯飼料感官評(píng)分評(píng)分氣味（25分）色澤（

5、25分）質(zhì)地（25分）籽實(shí)破碎度（25分）1825分酸香味，無(wú)丁酸味黃綠色，淡綠色松散柔軟、不粘手無(wú)可見(jiàn)完整籽實(shí)1017分醋酸味較強(qiáng)，酸香味較弱黃褐色，淡褐色或淡黃色柔軟、水分稍干或稍濕整粒籽實(shí)1-2個(gè)，半粒籽實(shí)很少19分刺鼻酸味，丁酸味頗重墨綠色，淡黃褐色略帶粘性，干燥整粒籽實(shí)超過(guò)3個(gè)，半粒籽實(shí)多0分腐爛味、霉?fàn)€味，有很強(qiáng)的丁酸味嚴(yán)重變色，褐色或黑色腐爛發(fā)粘、結(jié)塊無(wú)籽實(shí)營(yíng)養(yǎng)分級(jí)全株玉米青貯飼料營(yíng)養(yǎng)分級(jí)指標(biāo)包括干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、中性洗滌纖維、30h 中性洗滌纖維降解率、酸性洗滌纖維、淀粉6項(xiàng)指標(biāo)，分級(jí)按照表2的指標(biāo)設(shè)定進(jìn)行判定。以6項(xiàng)營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)中單項(xiàng)得分最低的分級(jí)及評(píng)分判定為該全株玉米青貯飼料的

6、營(yíng)養(yǎng)分級(jí)及評(píng)分，營(yíng)養(yǎng)評(píng)分記為S2。表2 全株玉米青貯飼料營(yíng)養(yǎng)評(píng)分分級(jí)干物質(zhì)，%鮮重粗蛋白質(zhì)，%DM中性洗滌纖維，%DM30h 中性洗滌纖維降解率，%DM酸性洗滌纖維，%DM淀粉，%DM優(yōu)良（81100分）3038845552730中等（6180分）2830或384074550505527302530較差（4160分）2528或404275055455030322025差（040分）25或42755453220發(fā)酵分級(jí)全株玉米青貯飼料發(fā)酵分級(jí)指標(biāo)包括pH值、氨態(tài)氮/總氮、乳酸/總酸、乙酸/總酸、丁酸/總酸，分級(jí)按照表3指標(biāo)設(shè)定進(jìn)行判定。以5項(xiàng)發(fā)酵指標(biāo)單項(xiàng)得分之和作為分級(jí)依據(jù)，判定81100分為優(yōu)

7、良、61 80分為中等、4160分為較差、040分為差，發(fā)酵評(píng)分記為S3。表3 全株玉米青貯飼料發(fā)酵評(píng)分pH值(20分)氨態(tài)氮/總氮，%（30分）乳酸/總酸，%（25分）乙酸/總酸，%（15分）丁酸/總酸，%（10分）3.9（1720分）8（2430分）60（2125分）20（1215分）2（810分）2DB11/T 17592020表 3 全株玉米青貯飼料發(fā)酵評(píng)分（續(xù)）pH值(20分)氨態(tài)氮/總氮，%（30分）乳酸/總酸，%（25分）乙酸/總酸，%（15分）丁酸/總酸，%（10分）3.94.2（1316分）810（1823分）5060（1620分）2030（811分）210（57分）4.24

8、.4（912分）1012（1217分）4050（1115分）3040（57分）1020（34分）4.44.8（58分）1215（611分）3040（610分）4050（24分）2030（02）4.8（04分）15（05分）30（05分）50（01分）30（-10-1）衛(wèi)生要求全株玉米青貯飼料衛(wèi)生指標(biāo)應(yīng)符合GB 13078 的要求。綜合分級(jí)在全株玉米青貯飼料衛(wèi)生指標(biāo)符合GB 13078要求的前提下，對(duì)其按照以下規(guī)則進(jìn)行綜合評(píng)分和分級(jí)。綜合評(píng)分包括感官評(píng)分、營(yíng)養(yǎng)評(píng)分和發(fā)酵評(píng)分，規(guī)定感官評(píng)分占總分30%，營(yíng)養(yǎng)評(píng)分占總分40%，發(fā)酵評(píng)分占總分30%。按式（1）計(jì)算綜合評(píng)分： . （1）式中：Q 綜合評(píng)

9、分； S1感官評(píng)分； S2營(yíng)養(yǎng)評(píng)分； S3發(fā)酵評(píng)分。根據(jù)綜合評(píng)分對(duì)青貯飼料進(jìn)行分級(jí)，判定81100分為優(yōu)良、6180分為中等、4160分為較差、040分為差。測(cè)定方法取樣方法按照GB/T 14699.1的規(guī)定執(zhí)行。試樣制備營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)分析樣品制備，按照GB/T 20195的規(guī)定執(zhí)行。發(fā)酵指標(biāo)分析樣品制備，快速用切刀或剪刀將青貯飼料樣品切成0.2 cm0.5 cm長(zhǎng)，稱(chēng)取20.00 g 于200 mL具塞三角瓶中，加入180 mL蒸餾水，搖勻，置于4 冰箱浸出24 h，并不時(shí)搖動(dòng)，用濾紙過(guò)濾， 得到試樣浸出液。感官評(píng)估3DB11/T 17592020稱(chēng)取500 g樣品,均勻放置在不透明的白色瓷盤(pán)中，

10、并保持室內(nèi)空氣的流通，通過(guò)嗅覺(jué)和視覺(jué)等感官器官進(jìn)行辨別。干物質(zhì)測(cè)定按照GB/T 6435的規(guī)定測(cè)定水分含量，按式（2）計(jì)算干物質(zhì)含量：Y 1 D（2）式中：Y干物質(zhì)含量（%）； D飼料水分含量（%）。粗蛋白質(zhì)含量測(cè)定按照GB/T 6432的規(guī)定執(zhí)行。中性洗滌纖維含量測(cè)定按照GB/T 20806的規(guī)定執(zhí)行。30h 中性洗滌纖維降解率測(cè)定體外發(fā)酵法測(cè)定30h 中性洗滌纖維降解率，參見(jiàn)附錄A。酸性洗滌纖維含量測(cè)定按照NY/T 1459的規(guī)定執(zhí)行。淀粉含量測(cè)定按照GB/T 20194的規(guī)定執(zhí)行。pH 值測(cè)定按照GB/T 10468的規(guī)定執(zhí)行。氨態(tài)氮/總氮含量測(cè)定苯酚-次氯酸鹽顯色法測(cè)定青貯飼料中氨態(tài)氮

11、/總氮含量，參見(jiàn)附錄B。有機(jī)酸含量測(cè)定（乳酸、乙酸、丙酸、丁酸、總酸）氣相色譜法測(cè)定青貯飼料中有機(jī)酸含量，參見(jiàn)附錄C。總酸為乳酸、乙酸、丙酸和丁酸之和。衛(wèi)生指標(biāo)測(cè)定按照GB 13078的規(guī)定執(zhí)行。4DB11/T 17592020附 錄 A（資料性）30h 中性洗滌纖維降解率的測(cè)定試劑按照比例配置緩沖液：準(zhǔn)確稱(chēng)取1.00 g 碳酸氫氨（NH4HCO3）、8.75 g碳酸氫鈉（NaHCO3） 、1.55 g 磷酸二氫鉀（KH2PO4）、1.43 g 磷酸氫二鈉（Na2HPO4）、0.52 g 硫化鈉（Na2S）、0.15 g 硫酸鎂（MgSO47H2O）、0.002 g 氯化鈷（CoCl6H2O）

12、、0.015 g 氯化錳（MnCl24H2O）、0.017 g 氯化鈣（CaCl22H2O）、0.012 g 氯化鐵（FeCl36H2O）和1.25 mg刃天青，將上述試劑溶解于1000 mL的蒸餾水中，混合均勻，將高純CO2緩慢的通入到溶液底部，直至pH值到6.8，試驗(yàn)前預(yù)熱至39 。儀器試驗(yàn)用儀器包括：發(fā)酵瓶（100 mL）；CO2 鋼瓶；水浴恒溫培養(yǎng)箱；pH 計(jì)。瘤胃液采集瘤胃液供體需為3頭以上健康、泌乳期相同、體況相近的泌乳牛。于晨飼前1 h通過(guò)瘤胃瘺管采集瘤胃液，混合后裝于保溫瓶（保溫瓶?jī)?nèi)裝39 的熱水預(yù)熱處理）， 密封好后迅速帶回實(shí)驗(yàn)室，用4層紗布過(guò)濾，過(guò)濾同時(shí)通入CO2，整個(gè)操作

13、置于39 水浴中進(jìn)行，直至接種完畢。接種準(zhǔn)確稱(chēng)取0.5 g飼料樣品于150 mL厭氧發(fā)酵瓶中。接種前向每個(gè)瓶中持續(xù)通入CO2 5 s后，接種時(shí)迅速將每個(gè)瓶中加入預(yù)熱的液體培養(yǎng)基50 mL和經(jīng)4層紗布過(guò)濾的新鮮瘤胃液25 mL，向瓶中持續(xù)通入CO2 5 s后，立即加上瓶塞，蓋緊橡膠塞及鋁蓋并用壓桿器壓緊瓶口，將發(fā)酵瓶放于39 恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵。降解率測(cè)定發(fā)酵30 h，取出發(fā)酵瓶，震蕩、經(jīng)300目尼龍袋過(guò)濾。用蒸餾水沖洗上述過(guò)濾降解殘?jiān)敝了吻澹?5 下烘干至恒重（約48 h）。飼料降解率按式（A.1）計(jì)算：P (1 A) 100%（A.1）B式中：5DB11/T 17592020P 30h

14、中性洗滌纖維降解率（%）；A 殘?jiān)兄行韵礈炖w維重量（g）；B 放入發(fā)酵瓶中的樣品中性洗滌纖維重量（g）。6DB11/T 17592020附 錄 B（資料性）氨態(tài)氮/總氮含量的測(cè)定試劑試驗(yàn)用試劑包括：亞硝基鐵氰化鈉（Na2Fe(CN)5NO2H2O）；結(jié)晶苯酚（C6H5O）；氫氧化鈉（NaOH）；磷酸氫二鈉（Na2HPO67H2O）；次氯酸鈉（NaClO）：含活性氯 5.25 %；氯化銨 NH4Cl；苯酚顯色劑：將取 0.1 g 亞硝基鐵氰化鈉、20 g 結(jié)晶苯酚，蒸餾水定容至 2 L，溶液放入棕色瓶中 210 避光保存，保質(zhì)期 6 個(gè)月；次氯酸鹽試劑：稱(chēng)取 10 g 氫氧化鈉、75.7 g

15、磷酸氫二鈉溶于蒸餾水中。待冷卻后。加 100 mL次氯酸鈉混勻后定容于 2 L，溶液使用濾紙過(guò)濾后 210 避光保存，保質(zhì)期 6 個(gè)月；氨標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱(chēng)取 1.0045 g 氯化銨溶于適量蒸餾水中，用稀鹽酸調(diào)節(jié) pH 值至 2.0，用蒸餾水定容至 1 L，得到含氨濃度為 32 mg/dL 的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。儀器試驗(yàn)用儀器包括：分光光度計(jì)；恒溫水浴鍋；移液槍?zhuān)?00 L、1 mL、5 mL。測(cè)定步驟標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立用蒸餾水稀釋氨標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，得到氨態(tài)氮濃度分別為：32 mg/dL、16 mg/dL、8 mg/dL、4 mg/dL、2 mg/dL、1 mg/dL和0 mg/dL的系列標(biāo)準(zhǔn)液。取系列標(biāo)

16、準(zhǔn)工作液各40 L至貼好標(biāo)簽的試管中，依次加入2.5 mL苯酚顯色液、2 mL次氯酸鹽試劑。注意加入每種試劑后均要混勻。將樣品放置37 水浴中發(fā)色30 min。冷卻后，使用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)550 nm測(cè)定吸光度。以吸光度和標(biāo)準(zhǔn)液濃度為坐標(biāo)軸建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品的檢測(cè)向每支試管中加入40 L6.2中所述制備的青貯飼料浸出液，按檢測(cè)步驟測(cè)定樣本液的吸光度。水分測(cè)定7DB11/T 17592020按GB/T 6435的規(guī)定執(zhí)行?？偟臋z測(cè)按GB/T 6432的規(guī)定執(zhí)行。結(jié)果計(jì)算氨態(tài)氮的含量按式（B.1）計(jì)算：式中：W C1 N (180 m1 D1 )m1 M 1.（B.1）W 氨態(tài)氮含量，單位為占總

17、氮的質(zhì)量百分比（總氮%）；C1 樣液的濃度（mg/dL）；N 稀釋倍數(shù)；D1 樣品的水分含量（%）；M1 試樣的總氮含量，單位為占鮮樣的質(zhì)量百分比（鮮樣%）；m1 制取青貯液時(shí)樣品重量（g）。8DB11/T 17592020附 錄 C（資料性）氣相色譜法測(cè)定青貯飼料中有機(jī)酸含量試劑和材料乳酸、乙酸、丙酸、丁酸標(biāo)準(zhǔn)品，超純水，15%高碘酸溶液。儀器氣相色譜儀、火焰離子化檢測(cè)器（FID）。測(cè)定程序上機(jī)前處理取正文中所述制備青貯飼料浸出液1 mL于1.5 mL離心管中，加入0.4 mL 15%高碘酸溶液，以10 000 r/min離心10 min，取上清液上機(jī)分析。氣相色譜條件色譜柱：2.0 m3.9 mm不銹鋼柱，內(nèi)填充0.171 mm0.149 mm粒度的Porapak Q；柱溫：210 ；