1、微生物限度檢查法應用指導原則為更好應用微生物限度檢查法（附錄幻J），特制定本指導原則。微生物限度檢查法可用于判斷非規(guī)定滅菌制劑及原料、 輔料是否符合藥典的 規(guī)定，也可用于指導制劑、原料、輔料的微生物質(zhì)量標準的制定，及指導生產(chǎn)過 程中間產(chǎn)品微生物質(zhì)量的監(jiān)控。本指導原則將對標準和方法中的特定內(nèi)容及標準 的應用做進一步的說明。1. 微生物限度檢查過程中，如需要使用表面活性劑、滅活劑及中和劑，在確 定其能否適用于所檢樣品及其用量時，除應證明該試劑對所檢樣品的處理有效 外，還須確認該試劑不影響樣品中可能污染的微生物的檢出（即無毒性） ，因此 無毒性確認試驗的菌株不能僅局限于驗證試驗菌株， 而應當包括產(chǎn)品

2、中可能污染 的微生物。2. 供試液制備方法、抑菌成分的消除方法及細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)方法應 盡量選擇微生物限度檢查法中操作簡便、 快速的方法，且應避免損傷供試品中污 染的微生物。對于抑菌作用較強的供試品，在供試品溶液性狀允許的情況下，應 盡量選用薄膜過濾法進行試驗。3微生物限度檢查法（附錄幻J）收載的離心沉淀法僅適用于制備細菌計數(shù) 或控制菌（細菌）檢查用的供試液，規(guī)定的 500轉(zhuǎn)/分鐘、不超過 3 分鐘只用于 去除供試液中的沉淀物。采用該方法時，供試液中的樣品顆粒大小、粘稠度及污 染的微生物大小，轉(zhuǎn)速等直接影響著樣品中微生物的回收， 易造成檢驗結(jié)果不能 真實反映供試品的污染情況。因此，供試液

3、制備時盡量避免使用該方法， 更不宜 采用高速離心沉降集菌。4. 對照培養(yǎng)基系指按培養(yǎng)基處方特別制備、 質(zhì)量優(yōu)良的培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)基 適應性檢查。由中國藥品生物制品檢定所研制及分發(fā)。5. 進行驗證試驗時，若因沒有適宜的方法消除供試品中的抑菌作用而導致 微生物回收的失敗，應采用能使微生物生長的更高稀釋級供試液進行方法驗證試 驗。此時更高稀釋級供試液的確認要從低往高的稀釋級進行， 但最高稀釋級供試 液選擇應根據(jù)供試品應符合的微生物限度標準和菌數(shù)報告規(guī)則， 如供試品應符合 的微生物限度標準是1克細菌數(shù)不得過lOOOcfu，那么最高稀釋級是1: 10-3。若采用允許的最高稀釋級供試液進行驗證試驗還存在一

4、株或多株試驗菌的 回收率達不到要求，那么應選擇回收情況最接近要求的方法進行供試品的檢測。 如某種產(chǎn)品對某試驗菌有較強的抑菌性能，采用薄膜過濾法的回收率為40%，而采用培養(yǎng)基稀釋法的回收率為 30%，那么應選擇薄膜過濾法進行該供試品的檢測。 在此情況下，生產(chǎn)單位或研制單位應根據(jù)原輔料的微生物質(zhì)量、生產(chǎn)工藝及產(chǎn)品 特性進行產(chǎn)品的風險評估，以保證檢驗方法的可靠性，從而保證產(chǎn)品質(zhì)量。6. 微生物限度檢查法中控制菌檢查法沒有規(guī)定進一步確證疑似致病菌的方 法。若供試品檢出疑似致病菌，確證的方法應選擇已被認可的菌種鑒定方法， 如 細菌鑒定一般依據(jù)伯杰氏細菌鑒定手冊 。7. 在藥品的生產(chǎn)、貯存、銷售及新藥標準

5、制訂、進口藥品標準復核、考察藥 品質(zhì)量、仲裁中，除在品種項下及制劑通則項下另有規(guī)定外， 其微生物限度均以 藥典的“藥品微生物限度標準”為依據(jù)。8. 對于中國藥典2010 年版二部化學藥制劑通則項下有微生物限度要求 的制劑，微生物限度為必檢項目；對于只有原則性要求的制劑（如：丸劑、口服 片劑、膠囊劑、顆粒劑） ，應對其被微生物污染的風險進行評估。在保證產(chǎn)品對 患者安全的前提下，通過回顧性驗證或在線驗證積累的微生物污染數(shù)據(jù)表明每批 均符合微生物限度標準的要求，那么可不進行批批檢驗，但必須保證每批最終產(chǎn) 品均符合微生物限度規(guī)定。上述固體制劑若因制劑本身及工藝的原因?qū)е庐a(chǎn)品易 受微生物污染，應在品種項

6、下列出微生物限度檢查項及微生物限度標準， 如生化 類制劑。9. 用于手術、燒傷及嚴重創(chuàng)傷的局部給藥制劑應符合無菌檢查法要求。 用于 創(chuàng)傷程度難以判斷的局部給藥制劑，若沒有證據(jù)證明藥品不存在安全性風險則應 符合無菌檢查法要求。含動物類原藥材粉的口服中藥制劑要求不得檢出沙門菌。 其中的動物類原藥 材粉是指除蜂蜜、王漿、動物角、阿膠外的所有動物類原藥材粉，如牡蠣、珍珠 等貝類，海蜇、海帶、藻類等水產(chǎn)品，菌絲發(fā)酵粉、冬蟲夏草、人工牛黃等。10. 制定藥品的微生物限度標準時，除了依據(jù)“藥品微生物限度標準”外， 還應綜合考慮原料來源、性質(zhì)、生產(chǎn)工藝條件、給藥途徑及微生物污染對患者的 潛在危險等因素，提出合理安全的微生物限度標準，因此，必要時，特殊品種為 保證其療效、穩(wěn)定性及避免對使用者的潛在危害性，應制定更嚴格的微生物限度 標準，并在品種項下規(guī)定，