1、溶解型青蒿素貼劑的研究(1)                         作者：王乃婕,邱琳,杜豐,梁秉文,葉祖光【摘要】  目的 通過對壓敏膠、結(jié)晶抑制劑、促滲劑的篩選,研究溶解型青蒿素貼劑的處方工藝。方法 采用TK-6A型透皮擴散儀,以SD大鼠腹部皮膚為透皮屏障,以透皮速率為考察指標,篩選壓敏膠、結(jié)晶抑制劑、促滲劑。結(jié)果 青蒿素在國民淀粉壓

2、敏膠中透皮速率最高,PVP K30對青蒿素結(jié)晶抑制效果較好,各促滲劑對青蒿素促滲作用大小依次為：丙二醇(PG)氮酮(Azone),兩者配伍使用有協(xié)同作用。結(jié)論 國民淀粉壓敏膠、PVP K30、PGAzone分別作為分散型青蒿素貼劑的壓敏膠、結(jié)晶抑制劑、促滲劑。 【關(guān)鍵詞】  青蒿素；貼劑；壓敏膠；結(jié)晶抑制劑；促滲劑Abstract: Objective To determine the effect of pressure-sensitive adhesives, additives and penetration enhancers on the percutaneous abso

3、rption of artemisinin, and study on the formulation of artemisinin transdermal delivery systems. Methods The effects of various additives on the crystallization of artemisinin in polyacrylate adhesive matrix were investigated. The effects of pressure- sensitive adhesives, various additives and penet

4、ration enhancers on the in vitro permeation of artemisinin across SD rat abdominal skin were studied. Results National Starch polyacrylate pressure-sensitive adhesive was found to be the most efficient adhesive matrix. PVP-K30 significantly inhibited the crystallization of artemisinin in polyacrylat

5、e adhesive matrix. The enhancing effectiveness of the enhancers decreased in the order: PGAzone. PG combined with azone showed a higher synergic effect of enhancing effectiveness. Conclusion National Starch polyacrylate pressure-sensitive adhesive was the most effective pressure-sensitive adhesive m

6、atrix, PVP-K30 was the most effective crystallization inhibitor, PG combined with azone were the most effective penetration enhancers.Key words：artemisinin；patch；pressure-sensitive adhesive；crystallization inhibitor；penetration enhancers     青蒿素具有退熱快、原蟲轉(zhuǎn)陰時間短的特點,尤其適于搶救兇險型瘧疾,但存在半衰期

7、短、瘧原蟲易復(fù)燃等缺點。為了克服青蒿素半衰期短的缺點,我們將其制備成經(jīng)皮給藥緩釋制劑。經(jīng)皮給藥制劑可避免肝臟的首過效應(yīng)和對胃腸道的破壞、維持較長的作用時間、減少給藥次數(shù)、維持恒定的有效血藥濃度、降低藥物毒性和不良反應(yīng)、提高療效等,在減少給藥劑量的同時,大大降低瘧原蟲復(fù)燃率。本研究通過體外透皮試驗對溶解型青蒿素貼劑的處方工藝進行了研究,為青蒿素貼劑的新藥開發(fā)提供參考。1  儀器與試藥    Waters高效液相色譜儀；工作站：2695-2996版；泵：Waters2695四元泵；檢測器：Waters2996紫外檢測器；透皮擴散使用儀TK-20A,上海鍇凱科

8、技貿(mào)易有限公司；電子天平,美國Mettler Toledo AB135-S；甲醇為色譜純,水為自制超純水,其他試劑均為分析純；青蒿素對照品,批號100202-200402,購于中國藥品生物制品檢定所。2  方法與結(jié)果2.1  皮膚的處理    雄性SD大鼠,體重180200 g,處死后用電動剃毛器將其脫毛,取腹部皮膚。剝離脂肪層,用蒸餾水沖洗后備用。2.2  體外透皮試驗2.2.1  試驗條件 采用立式Franz擴散池(體積：6 mL,擴散面積：2.92 cm2)；水浴溫度：(37±1)；轉(zhuǎn)速：400 r

9、/min。將預(yù)處理皮膚置于擴散室與接受室之間(角質(zhì)層面向擴散室),在角質(zhì)層表面貼上藥貼,固定好。在接收室中加入40%PEG 400約6 mL,液面恰與皮膚內(nèi)層接觸,在設(shè)定的時間(2、4、6、8、24 h)取樣,每次取完,補充相同體積的新鮮接收液。2.2.2  體外透皮試驗含量測定方法的建立2.2.2.1  色譜條件 色譜柱：Kromasil C18(4 mm×250 mm,5 m)；流動相：甲醇-磷酸鹽緩沖液(0.01 mol/L Na2HPO4-NaH2PO4)6040；流速：1.0 mL/min；檢測波長：260 nm；柱溫：30 1-2。在此條件下

10、青蒿素與其他成分能達到基線分離,青蒿素對照品色譜圖見圖1,樣品色譜圖見圖2。2.2.2.2  供試品溶液的制備取接收液5.0 mL置10 mL容量瓶中,加2.0 mL 0.56%氫氧化鈉溶液,搖勻,于50 水浴中反應(yīng)30 min,取出,放冷,加0.19 mol/L冰醋酸至刻度,搖勻,過微孔濾膜,即得。2.2.2.3  陰性對照試驗 在選定的色譜條件下,取不含青蒿素的空白貼片,按照“2.2.1”項下條件進行試驗,得陰性對照接收液,按照供試品溶液制備方法制備陰性對照供試液,進樣測定,結(jié)果表明,陰性對照液在青蒿素色譜峰位置無相應(yīng)峰出現(xiàn)。色譜圖見圖3。2.2.2.4

11、60; 線性關(guān)系考察精密稱取青蒿素對照品10 mg,置10 mL容量瓶中,加乙醇至刻度,搖勻。精密吸取上述青蒿素對照品1.0 mL,置25 mL容量瓶中,加40% PEG 400至刻度,搖勻,分別精密吸取此溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.8、1.0 mL于10 mL容量瓶中,補充40% PEG 400至5.0 mL。加2.0 mL 0.2%氫氧化鈉溶液搖勻,于50 水浴中反應(yīng)30 min。冷卻至室溫,加0.19 mol/L冰醋酸至刻度,搖勻,過微孔濾膜,作為對照品溶液；分別吸取20 L進樣,按上述色譜條件測定,以青蒿素對照品的量(ng)為橫坐標,相應(yīng)峰面積積分值為縱坐標

12、,計算回歸方程為：Y1 024.3X1 362.5,r0.999 4,n3。青蒿素在880 ng范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。2.2.2.5  精密度試驗 精密吸取供試品溶液20 L,注入液相色譜儀,測定,并重復(fù)進樣6次。結(jié)果RSD1.58%。本篇論文由網(wǎng)友投稿，讀書人只給大家提供一個交流平臺，請大家參考，如有版權(quán)問題請聯(lián)系我們盡快處理。2.2.2.6  穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液,分別于0、4、8、12、24 h進樣測定。結(jié)果表明,樣品供試液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。2.2.2.7  回收率試驗  分別吸取青蒿素標準品溶液(56.62 g/mL

13、) 0.2、0.5、0.8 mL,各3份,置10 mL容量瓶中,用陰性對照接收液補足至5.0 mL,按供試品溶液制備方法制備,進樣測定,計算回收率,9份平均回收率為102.59%,RSD5.53%,本法回收率符合規(guī)定。2.3  壓敏膠的篩選    根據(jù)壓敏膠的性質(zhì),丙烯酸酯壓敏膠的載藥量較聚異丁烯類和硅酮類高,因此,我們分別對國民淀粉Duro-Tak 87-2677、羅門哈斯RodermTMMD-607和江門3家公司生產(chǎn)的丙烯酸酯類壓敏膠進行篩選,考察青蒿素的透皮速率。結(jié)果青蒿素在國民淀粉壓敏膠中透皮速率最大,故選擇國民淀粉壓敏膠。見表1。表1 

14、; 壓敏膠對青蒿素透皮速率的影響（略）2.4  載藥量的考察    載藥量為70、100、150 mg/4 g壓敏膠時,分別考察其體外透皮速率,并考察青蒿素在基質(zhì)中的狀態(tài)。結(jié)果青蒿素在國民淀粉壓敏膠中的載藥量為4%左右,當青蒿素含量達到6%時,其體外透皮速率達到穩(wěn)態(tài)。故青蒿素的含量確定為6%,并通過加入結(jié)晶抑制劑的方法解決其結(jié)晶問題。見表2。表2  載藥量的考察（略）2.5  結(jié)晶抑制劑的考察參考文獻3-4,分別考察了PVP K30和PEG 4000、PEG 6000對青蒿素的結(jié)晶抑制作用,試驗發(fā)現(xiàn),PVP K30對青蒿素的結(jié)晶抑制作

15、用較好,且不影響壓敏膠性質(zhì),而PEG 4000和PEG 6000對壓敏膠的粘度有較大影響,故選擇PVP K30作為結(jié)晶抑制劑,通過透皮速率和制劑成型結(jié)果,考察其加入量。結(jié)果結(jié)晶抑制劑的加入影響青蒿素的透皮速率,加入10%PVP K30即可解決青蒿素結(jié)晶問題,故確定PVP K30的加入量為10%。見表3。表3  結(jié)晶抑制劑的考察（略）2.6  促滲劑的篩選    2005年版中華人民共和國藥典收載的促滲劑有丙二醇(PG)、氮酮(Azone),故分別考察這2種促滲劑對青蒿素的促滲作用,結(jié)果2.5%PG、2%Azone對青蒿素的透皮效果較好。見表4。

16、 表4  促滲劑的考察（略）2.7  促滲劑配伍及貼片厚度考察    將上述2種促滲劑配伍使用,考察其是否有協(xié)同作用,并分別考察厚度對其透皮速率的影響,結(jié)果2種促滲劑配伍使用具有協(xié)同作用,厚度對其透皮速率沒有影響。見表5。表5  促滲劑配伍及貼片厚度考察（略）3  討論    貼劑一般載藥量較小,只適合于活性高、用量少的藥物。本試驗針對臨床用藥劑量較高的青蒿素貼劑進行了研究,通過添加結(jié)晶抑制劑的方法提高了壓敏膠載藥量,使藥物長時間維持穩(wěn)定的透皮速率,為臨床劑量較高的藥物經(jīng)皮給藥制劑的研究提供了新的思路。    各促滲劑對青蒿素促滲作用大小依次為：PGAzone,兩者配伍使用時有協(xié)同作用,貼劑的厚度對透皮速率沒有影響,只是起到單位面積增加藥量的作用,可以延長藥物作用時間?！緟⒖嘉墨I】  1 曾美怡,趙世善.青蒿素分析中的各種定量反應(yīng)J.藥物分析雜志, 1986,6(3)：183185.2 汪文來.HPLC法測定類風(fēng)濕膠囊中青蒿素的含量J.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2003,9(12)：43,47.3 Wang Q, Tomohiro H, Kakuji T. Skin penetra