DB2302DB2302/T012—2021馬鈴薯試管苗繼代培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程2021-12-26發(fā)布2022-01-26實施齊齊哈爾市市場監(jiān)督管理局發(fā)布I III 1 1 13.1試管苗 1 1 1 1 14.1癥狀學觀察 24.1.1繁殖材料 24.1.2癥狀學觀察 24.2類病毒與病毒病檢測 2 2 34.3材料選擇 3 35.1器材與試劑 35.2操作程序 35.2.1洗滌 3 3 35.2.4培養(yǎng)基的分裝和滅菌 4 46.1器材與試劑 46.2操作程序 46.2.1無菌操作室內(nèi)消毒殺菌 46.2.1.1操作前消毒殺菌 46.2.1.2操作中消毒 46.2.2莖段剪切 4 57.1器材 5 5II 5 6III請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的將馬鈴薯莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用于馬鈴薯種質(zhì)1本文件適用于齊齊哈爾地域內(nèi)馬鈴薯試管苗繼代培養(yǎng)的安GB/T29378-2012馬鈴薯脫毒種薯生產(chǎn)技NY/T401-2000脫毒馬鈴薯種薯（苗）檢測技術(shù)規(guī)程方法NY/T1606-2008馬鈴薯種薯生產(chǎn)技術(shù)操作規(guī)程在組織培養(yǎng)中成苗前的過渡階段，在試管中培育后逐漸轉(zhuǎn)移移24材料選擇4.1癥狀學觀察4.1.1繁殖材料4.1.2癥狀學觀察1、頂端壞死（主莖和分支頂部先壞死2、系統(tǒng)壞死（有壞死的條斑、斑4.2類病毒與病毒病檢測34.3材料選擇5培養(yǎng)基制備5.1器材與試劑高壓蒸氣滅菌鍋、蒸餾水器、鍋、試管、燒杯、量5.2操作程序5.2.1洗滌洗凈，清水沖洗3遍，達到瓶壁水珠分布非4數(shù)量取規(guī)定的量。(2)用量杯量出配制培養(yǎng)基所需蒸餾水的4/5，將稱好的瓊脂或卡拉膠倒人鍋內(nèi)加熱，加入量見附錄A，最后用蒸餾水定容至所需體積。(3)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值，用酸度計檢驗pH值小于5.85.2.4培養(yǎng)基的分裝和滅菌6.2.1.1.1熏蒸無菌室酒精燃燒消毒，然后進行切段工作，每次使用工具放置到臺面前都應(yīng)蘸取95培鉤或長鑷子將基礎(chǔ)苗取出2/3，手握試管或組培瓶根部上揚使試管苗頂部懸于培養(yǎng)基容器上方，基礎(chǔ)苗試管口或組培瓶口與新培養(yǎng)基容器口呈45°角為宜。用剪刀將基礎(chǔ)苗剪成若干段帶一片小葉的“上試管苗，立刻將其移出培養(yǎng)室。健康的試管苗25d～30d可再繼代或作為扦插用苗，培養(yǎng)3～4個月再用于繼代培養(yǎng)的基礎(chǔ)苗。組培室每3d～4d使用臭氧機消毒2h。8檔案管理6MS培養(yǎng)基配方1334加蒸餾水溶解后定容至2乙二胺四乙酸二鈉加蒸餾水溶解后定容至3碘化鉀KI25mgO2.5mgO2.5mg3加蒸餾水溶解后定容至4分別加蒸餾水溶解后定容5678