第1節(jié)培養(yǎng)基對(duì)微生物選擇作用1/281.能說(shuō)出培養(yǎng)基類型、用途和基本成份。2.比較消毒和滅菌區(qū)分。3.舉例說(shuō)明慣用消毒與滅菌方法。4.能記住培養(yǎng)基配制方法。5.研究培養(yǎng)基對(duì)微生物選擇作用。2/28一二一、培養(yǎng)基制備1.培養(yǎng)基(1)概念培養(yǎng)基是人工配制適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物

營(yíng)養(yǎng)基質(zhì),用以培養(yǎng)、分離、判定和保留各種微生物。(2)成份普通包含水分、碳源、氮源、微量元素和無(wú)機(jī)鹽等。(3)種類培養(yǎng)基按物理狀態(tài)可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。后者慣用瓊脂做凝固劑。3/28一二2.培養(yǎng)基配制和滅菌(1)培養(yǎng)基制備包含配制和滅菌兩大步驟。(2)配制關(guān)鍵:準(zhǔn)確稱量、調(diào)準(zhǔn)pH、規(guī)范制作棉塞、徹底滅菌。(3)主要制作流程:稱量→溶化→調(diào)pH→分裝→加塞和包扎→滅菌→擺斜面及倒平板。(4)因?yàn)榕渲婆囵B(yǎng)基各類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和容器等含有各種不一樣微生物,配制好培養(yǎng)基必須馬上滅菌,及時(shí)殺滅培養(yǎng)基中微生物,同時(shí)預(yù)防微生物大量繁殖造成培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成份改變。(5)慣用滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。經(jīng)過(guò)高壓、高溫蒸汽使菌體蛋白質(zhì)凝固變性以到達(dá)滅菌目標(biāo)。4/28一二思索：日常生活中牛奶在進(jìn)入市場(chǎng)銷(xiāo)售前要進(jìn)行消毒,可采取哪種消毒方法呢?提醒:用巴氏消毒法對(duì)牛奶進(jìn)行消毒,能夠殺死牛奶中微生物,同時(shí)使牛奶營(yíng)養(yǎng)成份不會(huì)被破壞。5/28一二二、培養(yǎng)基對(duì)微生物選擇作用1.菌落微生物經(jīng)過(guò)某種方法接種到適于生長(zhǎng)固體培養(yǎng)基表面上,在適宜溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間后,單個(gè)菌體或孢子就能夠生長(zhǎng)繁殖成一個(gè)個(gè)肉眼可見(jiàn)細(xì)胞群體,稱為菌落。2.培養(yǎng)基對(duì)微生物選擇作用原理不一樣種微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不一樣,經(jīng)過(guò)選擇不一樣培養(yǎng)基,人為控制培養(yǎng)基pH、碳源、氮源、滲透壓等條件,使選擇培養(yǎng)基利于某類或某種微生物生長(zhǎng),而不利于其它微生物生存,能夠到達(dá)分離、培養(yǎng)不一樣微生物目標(biāo)。比如,細(xì)菌生長(zhǎng)需要氮源高,pH中性或微堿性,所以培養(yǎng)細(xì)菌常采取牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。酵母菌和霉菌生長(zhǎng)所需碳源含量高,pH偏酸性,所以分離真菌常采取馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。6/28一二3.培養(yǎng)基對(duì)微生物選擇作用意義在科研和生產(chǎn)實(shí)踐中含有主要意義,它是分離和純化不一樣類型微生物基礎(chǔ)。7/281.培養(yǎng)基成份與微生物生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)

8/289/282.培養(yǎng)基類型及其應(yīng)用

10/2811/283.配制培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)(1)目標(biāo)要明確(2)營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)(3)pH要適宜4.消毒與滅菌比較二者區(qū)分:前者去除是部分微生物,后者去除是全部微生物。12/285.三種慣用滅菌方法比較

13/286.倒平板注意事項(xiàng)(1)培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50~60℃后,才能用來(lái)倒平板。能夠用手觸摸盛有培養(yǎng)基錐形瓶,感覺(jué)錐形瓶溫度下降到剛才不燙手時(shí),就能夠進(jìn)行倒平板了。(2)倒平板前,要將裝有培養(yǎng)基錐形瓶瓶口經(jīng)過(guò)火焰灼燒,以預(yù)防瓶口微生物污染培養(yǎng)基。(3)平板冷凝后,需將平板倒置。平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后培養(yǎng)基表面濕度也比較高,將平板倒置,既能夠使培養(yǎng)基表面水分更加好地?fù)]發(fā),又能夠預(yù)防皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。(4)倒平板過(guò)程中,假如不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間部位,空氣中微生物可能會(huì)在皿蓋與皿底之間培養(yǎng)基上滋生,所以不要再繼續(xù)使用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。14/28題型一題型二題型三題型四微生物營(yíng)養(yǎng)【例題1】

以下關(guān)于微生物營(yíng)養(yǎng)說(shuō)法,正確是(

)A.同一個(gè)物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外無(wú)機(jī)物僅提供無(wú)機(jī)鹽D.無(wú)機(jī)氮源也可能提供能量解析:對(duì)一些微生物來(lái)說(shuō),含C、H、O、N化合物既能夠作為碳源,又能夠作為氮源。CO2能夠作為光能自養(yǎng)微生物碳源,但不能提供能量。CO2和N2是無(wú)機(jī)物,也能夠分別作為微生物碳源和氮源。硝化細(xì)菌所利用氮源是無(wú)機(jī)氮源氨,同時(shí)氨也為硝化細(xì)菌提供用以化能合成作用能量。答案:D15/28題型一題型二題型三題型四易錯(cuò)警示含C、H、O、N化合物既能夠作為一部分微生物碳源,又能夠作為氮源;有機(jī)碳源能提供能量,無(wú)機(jī)碳源不能提供能量。16/28題型一題型二題型三題型四無(wú)菌操作相關(guān)技術(shù)【例題2】

細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中分別采取了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾個(gè)不一樣處理方法,這些方法依次用于殺滅哪些部位雜菌?(

)A.接種針、手、培養(yǎng)基 B.高壓鍋、手、接種針C.培養(yǎng)基、手、接種針 D.接種針、手、高壓鍋解析:高壓蒸汽滅菌鍋通慣用于培養(yǎng)基滅菌。用酒精擦拭雙手能夠進(jìn)行消毒?；鹧孀茻軌蚩焖?gòu)氐椎販缇?適合用于微生物接種工具,如接種針。答案:C17/28題型一題型二題型三題型四反思領(lǐng)悟微生物培養(yǎng)過(guò)程中無(wú)菌操作包含消毒和滅菌兩大類,各自含有不一樣方法。應(yīng)對(duì)試驗(yàn)操作空間、操作者衣著和手進(jìn)行清潔和消毒;對(duì)用于培養(yǎng)微生物器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。18/28題型一題型二題型三題型四培養(yǎng)基制備【例題3】

以下關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基敘述,錯(cuò)誤是(

)A.操作次序?yàn)榉Q量、溶化、分裝、調(diào)pH、加塞和包扎、滅菌、擺斜面及倒平板B.將配制培養(yǎng)基分裝入試管或錐形瓶?jī)?nèi)C.待培養(yǎng)基冷卻至50~60℃后,制成斜面或平板后備用D.配制好培養(yǎng)基必須馬上滅菌解析:制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基操作次序是稱量、溶化、調(diào)pH、分裝、加塞和包扎、滅菌、擺斜面及倒平板。答案:A19/28題型一題型二題型三題型四選擇培養(yǎng)基特點(diǎn)與應(yīng)用【例題4】

氯苯化合物是主要有機(jī)化工原料,不易降解,會(huì)污染環(huán)境。某研究小組依照以下試驗(yàn)方案(圖甲)篩選出能高效降解氯苯化合物微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方以下表。20/28題型一題型二題型三題型四(1)配制Ⅱ號(hào)固體培養(yǎng)基時(shí),除添加Ⅱ號(hào)液體培養(yǎng)基成份外,還應(yīng)添加1%

。

(2)培養(yǎng)基配制時(shí),滅菌與調(diào)pH先后次序是

。(3)從用途上來(lái)說(shuō),Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基和Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基分別屬于

培養(yǎng)基和

培養(yǎng)基。在Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基中,為SP1菌提供氮源成份是

。

(4)在營(yíng)養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時(shí),SP1菌體會(huì)變成一個(gè)圓形休眠體,這種休眠體被稱為

。

21/28題型一題型二題型三題型四(5)將SP1菌接種在含不一樣濃度氯苯Ⅲ號(hào)培養(yǎng)液中培養(yǎng),得到生長(zhǎng)曲線(圖乙)。從圖乙可知,SP1菌在

培養(yǎng)條件下最早停頓生長(zhǎng),其原因是

。22/28題型一題型二題型三題型四解析:(1)固體培養(yǎng)基必須含有適量瓊脂。(2)配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)pH,后滅菌。(3)Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基是為了取得更多菌株,屬于通用培養(yǎng)基,Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基是為了選擇出SP1菌株,屬于選擇培養(yǎng)基,Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基成份中含N物質(zhì)為硝酸銨,則應(yīng)由它為SP1菌株提供氮源。(4)在惡劣環(huán)境下,一些菌體會(huì)形成芽孢休眠體,以抵抗不良環(huán)境影響。(5)SP1菌株以氯苯為碳源,當(dāng)氯苯耗盡時(shí),菌株因缺乏碳源而不能繼續(xù)生存,故氯苯含量越少,SP1菌株越早停頓生長(zhǎng)。答案:(1)瓊脂(2)先調(diào)pH,后滅菌(3)通用選擇硝酸銨(4)芽孢(5)20mg/L氯苯碳源最早耗盡23/28123451.以下敘述錯(cuò)誤是(

)A.微生物學(xué)試驗(yàn)普通都要求在無(wú)菌條件下進(jìn)行B.細(xì)菌生長(zhǎng)只需要氮源C.培養(yǎng)基配制包含配制和滅菌兩大步驟D.不一樣培養(yǎng)基對(duì)微生物選擇作用是分離和純化不一樣類型微生物基礎(chǔ)答案:B24/28123452.在微生物培養(yǎng)過(guò)程中,需要對(duì)培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌,其標(biāo)準(zhǔn)是(

)A.殺死全部病原微生物B.殺死全部微生物C.殺死全部微生物細(xì)胞、芽孢和孢子D.使病原菌不生長(zhǎng)答案:C25/28123453.以下相關(guān)培養(yǎng)基配制敘述,正確是(

)A.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水B.碳源和氮源必須含有一定百分比,碳元素含量最多,其次為氮元素C.微生物生長(zhǎng)除受營(yíng)養(yǎng)原因影響外,還受到溫度、pH、氧、滲透壓等影響D.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高越好答案:C解析:自養(yǎng)微生物培養(yǎng)基不需要加碳源,自生固氮菌培養(yǎng)基不需要加氮源。培養(yǎng)基中碳源和氮源必須含有一定百分比,但含量最多元素是氧。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度并不是越多越好,濃度過(guò)