標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 18652-2025 致病性嗜水氣單胞菌檢驗方法》是一項國家標(biāo)準(zhǔn),旨在提供一套科學(xué)、準(zhǔn)確的方法來檢測致病性嗜水氣單胞菌。該標(biāo)準(zhǔn)適用于食品、水質(zhì)及環(huán)境樣本中致病性嗜水氣單胞菌的定性和定量分析。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn),整個檢驗過程分為幾個關(guān)鍵步驟:樣品采集與處理、增菌培養(yǎng)、分離純化以及最終的確證試驗。

首先,在樣品采集階段,需確保采樣工具無菌,并按照不同類型的樣本(如食品、水體)采取相應(yīng)的采集方法。接下來是樣品前處理,這一步驟對于后續(xù)實驗的成功至關(guān)重要,包括但不限于均質(zhì)化處理、過濾或離心等技術(shù)手段的應(yīng)用,以濃縮目標(biāo)微生物。

之后進(jìn)入增菌培養(yǎng)環(huán)節(jié),通過選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件,使待檢樣本中的致病性嗜水氣單胞菌得以生長繁殖至可檢測水平。常用的增菌培養(yǎng)基有TCBS瓊脂平板等。

分離純化階段,則利用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)一步篩選出疑似陽性菌落,并通過劃線接種等方式獲得單一菌株。此過程中可能還會結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察、生化反應(yīng)測試等多種方法進(jìn)行初步鑒定。

最后的確證試驗通常采用分子生物學(xué)技術(shù),如PCR擴(kuò)增特定基因片段,或使用免疫學(xué)方法如ELISA測定特異性抗原抗體反應(yīng),以此確認(rèn)分離得到的菌株是否為致病性嗜水氣單胞菌。

整個流程強(qiáng)調(diào)了操作規(guī)范性和結(jié)果準(zhǔn)確性的重要性,要求實驗室具備相應(yīng)資質(zhì)和技術(shù)能力,同時對人員培訓(xùn)、設(shè)備維護(hù)等方面也提出了明確要求,以保證檢驗工作的可靠性和重復(fù)性。


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....

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  • 即將實施
  • 暫未開始實施
  • 2025-08-29 頒布
  • 2026-03-01 實施
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GB/T 18652-2025致病性嗜水氣單胞菌檢驗方法_第1頁
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GB/T 18652-2025致病性嗜水氣單胞菌檢驗方法_第3頁
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文檔簡介

ICS11220

CCSB.41

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T18652—2025

代替GB/T18652—2002

致病性嗜水氣單胞菌檢驗方法

MethodsfordetectionofpathogenicAeromonashydrophila

2025-08-29發(fā)布2026-03-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T18652—2025

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

術(shù)語和定義

3………………1

縮略語

4……………………1

儀器設(shè)備

5…………………1

試劑和材料

6………………2

檢驗程序

7…………………2

樣品采集運輸和保存

8、……………………3

細(xì)菌的分離和純化

9………………………4

嗜水氣單胞菌的鑒定

10……………………4

嗜水氣單胞菌致病性鑒定

11………………6

綜合判定

12…………………6

附錄規(guī)范性培養(yǎng)基和試劑的配制

A()…………………7

附錄資料性嗜水氣單胞菌鑒定基因的產(chǎn)物電泳和參考序列

B()PCR………………9

GB/T18652—2025

前言

本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

本文件代替致病性嗜水氣單胞菌檢驗方法與相比除

GB/T18652—2002《》,GB/T18652—2002,

結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動外主要技術(shù)變化如下

,:

更改了范圍見第章年版的第章

a)(1,20021);

增加了縮略語一章見第章

b)“”(4);

增加了儀器設(shè)備一章見第章

c)“”(5);

增加了試劑和材料一章見第章

d)“”(6);

增加了樣品采集運輸和保存見第章

e)“、”(8);

增加了鑒定試驗方法見

f)PCR(10.2);

刪除了斑點酶聯(lián)免疫試驗見年版的

g)(20022.3.2);

增加了血平板試驗見

h)(11.2);

增加了綜合判定見第章

i)(12)。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任

。。

本文件由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出

。

本文件由全國動物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本文件起草單位南京農(nóng)業(yè)大學(xué)中國檢驗檢疫科學(xué)研究院

:、。

本文件主要起草人劉永杰董雨豪王娜陸承平

:、、、。

本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為

:

年首次發(fā)布為

———2002GB/T18652—2002;

本次為第一次修訂

———。

GB/T18652—2025

引言

嗜水氣單胞菌Aeromonashydrophila在自然界中分布廣泛有致病菌株和非致病菌株之分致

(),。

病菌株能感染魚類兩棲類爬行類鳥類哺乳類等動物導(dǎo)致急性敗血癥或皮膚潰瘍等局部感染在

、、、、,。

水產(chǎn)養(yǎng)殖上致病性嗜水氣單胞菌是引起淡水魚細(xì)菌性敗血癥的主要病原人類感染致病性嗜水氣單

,。

胞菌主要表現(xiàn)為急性胃腸炎

嗜水氣單胞菌的致病性與其產(chǎn)生的毒力因子密切相關(guān)其中胞外產(chǎn)物如毒素和蛋白酶在該菌致病

,,

過程中發(fā)揮重要的作用嗜水氣單胞菌產(chǎn)生的毒素主要有氣溶素溶血素細(xì)胞毒性腸毒素和細(xì)胞興奮

。、、

性腸毒素這些毒素屬于穿孔毒素在結(jié)構(gòu)和功能上非常相似具有相同的生物學(xué)活性表現(xiàn)為溶血性

,,,,、

腸毒性和細(xì)胞毒性嗜水氣單胞菌還分泌多種蛋白酶降解酪蛋白彈性蛋白等對組織造成直接損

。,、,

傷也是非常重要的毒力因子因此凡是溶血陽性或蛋白酶陽性的嗜水氣單胞菌均具有致病性通過

,。,。

檢測菌株的溶血活性和或蛋白酶活性能夠鑒定嗜水氣單胞菌的致病性

/,。

GB/T18652—2025

致病性嗜水氣單胞菌檢驗方法

1范圍

本文件描述了嗜水氣單胞菌分離純化理化鑒定和鑒定方法以及致病性嗜水氣單胞菌檢驗的

、PCR

脫脂奶平板和血平板試驗鑒定方法

本文件適用于嗜水氣單胞菌和致病性嗜水氣單胞菌的檢驗

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

出入境動物檢疫采樣

GB/T18088

水生動物產(chǎn)地檢疫采樣技術(shù)規(guī)范

SC/T7103

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義

。

4縮略語

下列縮略語適用于本文件

脫氧核糖核酸

DNA:(Deoxyribonucleic

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