202L2025年高考生物真題知識點分類匯編之發(fā)酵工程（二）

一,選擇題（共12小題）

1.（2024?湖北）制醋、制飴、制酒是我國傳統(tǒng)發(fā)酵技術。醋酸菌屬于好氧型原核生物，常用于食用醋的

發(fā)酵。下列敘述錯誤的是（）

A.食用醋的酸味主要來源于乙酸

B.醋酸菌不適宜在無氧條件下生存

C.醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶

D.葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解發(fā)生在線粒體內(nèi)

2.（2024?重慶）養(yǎng)殖場糞便是農(nóng)家肥的重要來源，其中某些微生物可使氨氮化合物轉化為尿素進而產(chǎn)生

NH3,影響畜禽健康。為篩選糞便中能利用氨氮化合物且減少NH3產(chǎn)生的微生物。興趣小組按圖進行實

驗獲得目的菌株，正確的是（）

菌種保存,

畜禽培養(yǎng)甲：不產(chǎn)不廢

利用氨奴

糞便牛肉杼蛋白培養(yǎng)、離心取

篩選_蚓A陳培養(yǎng)基篩選不能利用的菌株

樣本化合物的

尿素的多上清液檢測

①多個菌落

L磔＞=1②褊孤③

A尿素唯一----------乙：分泌麻酶

氮源培養(yǎng)基抑制劑的菌株

A.①通常在等比稀釋后用平板劃線法獲取單個菌落

B.②挑取在2種培養(yǎng)基上均能生長的用于后續(xù)的實驗

C.③可通過添加腺酶并檢測活性，篩選得到甲、乙

D.糞便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的減少

3.（2024?海南）某小組為檢測I株粗糙脈抱霉突變株的氨基酸缺陷類型，在相同培養(yǎng)溫度和時間的條件

下進行實驗，結果見表。下列有關敘述錯誤的是（）

組別培養(yǎng)條件實驗結果

①基礎培養(yǎng)基無法生長

②基礎培養(yǎng)基+甲、乙、丙3種氨基酸正常生長

③基礎培養(yǎng)基+甲、乙2種氨基酸無法生長

④基礎培養(yǎng)基+甲、丙2種氨基酸正常生長

⑤基礎培養(yǎng)基+乙、丙2種氨基酸正常生長

A.組別①是②③??的對照組

B.培養(yǎng)溫度和時間屬于無關變量

C.①②結果表明，甲、乙、丙3種氨基酸中有該突變株正營生長所必需的氨基酸

D.①?⑤結果表明，該突變株為氨基酸甲缺陷型

4.（2024?天津）實驗中常根據(jù)菌落外表特征鑒別微生物，進而對實驗結果做出判斷，下列實驗不是根據(jù)

菌落外表特征做出判斷的是（）

A.艾弗里證明肺炎鏈球菌的轉化因子是DNA

B.判斷分離酵母菌的固體培養(yǎng)基是否被毛霉污染

C.利用浸有抗生素的'濾紙片篩選大腸桿菌中耐藥性強的菌株

D.判斷在尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上生長的尿素降解菌是否有不同種類

5.（2024?湖南）微生物平板劃線和培養(yǎng)的具體操作如圖所示，下列操作正確的是（）

①灼燒接種環(huán)②冷卻接種環(huán)，拔出試管棉塞③試管口通過火焰④接種環(huán)蘸取菌液

⑤試管口通過火焰⑥接種環(huán)劃線操作⑦接種環(huán)劃線方法⑧平板正置培養(yǎng)

并塞上棉塞

A.①@⑤⑥B.③④C.⑧D.①③??

6.（2024?江蘇）關于“利用乳酸菌發(fā)酵制作酸奶或泡菜”的實驗，下列敘述正確的是（）

A.制作泡菜的菜料不宜完全淹沒在煮沸后冷卻的鹽水中

B.制作酸奶的牛奶須經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后再接種乳酸菌

C.發(fā)酵裝置需加滿菜料或牛奶并封裝，以抑制乳酸菌的無氧呼吸

D.控制好發(fā)酵時間，以避免過量乳酸影響酸奶或泡菜的口味和品質(zhì)

7.（2024?山東）在發(fā)酵過程中，多個黑曲霉菌體常聚集成團形戌菌球體，菌球體大小僅由菌體數(shù)量決定。

黑曲霉利用糖類發(fā)酵產(chǎn)生檸檬酸時需要充足的氧。菌體內(nèi)鍍離了一濃度升高時，可解除檸檬酸對其合成途

徑的反饋抑制。下列說法錯誤的是（）

A.相同菌體密度卜，菌球體越人檸株酸產(chǎn)生速率越慢

B.發(fā)酵中期添加一定量的硫酸錢可提高檸檬酸產(chǎn)量

C.發(fā)酵過程中pH下降可抑制大部分細菌的生長

D.發(fā)酵結束后，將過濾所得的固體物質(zhì)進行干燥即可獲得檸檬酸產(chǎn)品

8.（2024?廣西）“揚美豆豉”制作技藝屬于廣西非物質(zhì)文化遺產(chǎn)，該技術包括選豆、洗豆、煮豆、制曲、

洗曲、調(diào)味和發(fā)酵等。下列說法錯誤的是（）

A.煮豆可使蛋白質(zhì)適度變性，易于被微生物利用

B.制曲目的是促使有益微生物生長繁殖，并分泌多種酶

C.調(diào)味時加入食鹽，主要目的是促進微生物的生長繁殖

D.發(fā)酵過程中，微生物將原料轉化為特定代謝產(chǎn)物，使豆豉風味獨特

9.（2024?福建）蝦醬是以蝦為原料的傳統(tǒng)發(fā)酵食品。在乳酸菌、芽胞桿菌等多種微生物共同作用下，原

料中的蛋白質(zhì)和脂肪發(fā)生水解，形成蝦醬的特有風味。下列敘述錯誤的是（）

A.蝦醬特有風味的形成受發(fā)酵時間的影響

B.傳統(tǒng)蝦醬的制作過程需要嚴格執(zhí)行無菌操作

C.原料中的蛋白質(zhì)會被水解成小分子的肽和氨基酸

D.蝦醬發(fā)酵過程微生物種類和數(shù)量的分析有助于改良風味

10,（2024?江蘇）酵母菌是基因工程中常用的表達系統(tǒng)。下列相關敘述正確的是（）

A.酵母菌培養(yǎng)液使用前要滅活所有細菌，但不能滅活真菌

B.酵母菌是直核細胞，需放置在CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)

C.可用稀釋涂布平板法對酵母菌計數(shù)

D.該表達系統(tǒng)不能對合成的蛋白質(zhì)進行加工和修飾

11.（2024?浙江）喔酶催化尿素水解，產(chǎn)生的氨可作為細菌的氮源。麻酶被去除銀后失去活性。下列敘述

錯誤的是（）

A.鍥是組成服酶的重要元素

B.銀能提高尿素水解反應的活化能

C.產(chǎn)麻酶細菌可在以NH4C1為唯?氮源的培養(yǎng)基生長繁殖

D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可用于篩選產(chǎn)腺酶細菌

12.（2024?江西）井岡霉素是我國科學家發(fā)現(xiàn)的一種朝基其糖類抗生素，它由吸水鏈霉菌井岡變種（JGs,

一種放線菌，菌體呈絲狀生長）發(fā)酵而來，在水稻病害防治等領域中得到廣泛應用。下列關于JGs發(fā)酵

生產(chǎn)井岡霉素的敘述，正確的是（）

A.JGs可發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素，因為它含有能夠編碼井岡毒素的基因

產(chǎn)磷脂酶的微生物。

（4）將以I:獲得的微生物接種到鑒別培養(yǎng)基（在牛肉膏蛋白除液體培養(yǎng)基中添加2%的瓊脂粉和適量的

卵黃磷脂）平板上培養(yǎng)，可以通過觀察卵黃磷脂水解圈的大小，初步判斷微生物產(chǎn)磷脂酶的能力，但不

能以水解圈大小作為判斷微生物產(chǎn)磷脂酹能力的唯一依據(jù)。從平板制作的角度分析，其原因可能

是Q

16.（2024?上海）蘇氨酸的生物合成大腸桿菌可高產(chǎn)蘇氨酸，但會混有大腸桿菌自身產(chǎn)生的有毒物質(zhì)。谷

氨酸棒狀桿菌也能產(chǎn)生蘇氨酸，雖產(chǎn)量低，但不會產(chǎn)生有毒物質(zhì)。因此科學家想利用通過改良谷氨酸棒

狀桿菌使其達到高產(chǎn)蘇嵐酸的H的。圖1顯示了谷斑酸棒狀桿菌和大腸桿菌合成蘇氨酸的部分途徑。其

中細胞膜上的字母代表的是轉運蛋白。

f單步反應

....A多步反應

——I抵制

—?物質(zhì)轉運

圖1

（1）據(jù)圖1可知，谷氨酸棒狀桿菌細胞合成蘇氨酸的場所是o

（2）據(jù)圖1可知，維持細胞內(nèi)蘇氨酸含量穩(wěn)定的調(diào)節(jié)機制是（正反饋/負反饋）調(diào)節(jié)。

（3）據(jù)圖1可知，兩種細胞產(chǎn)生的蘇氨酸的過程中不同的是o（多選）

A.轉運蛋白的種類

B.外排的氨基酸種類

C.蘇氨酸的碳骨架

D.合成的起始底物

科學家從土壤中篩選出了谷氨酸棒狀桿菌，得到了一株產(chǎn)蘇氮酸的菌株a。通過對菌株a的AK酶改良,

得到了蘇氨酸高產(chǎn)菌株b。部分操作過程如圖2,其中培養(yǎng)基【和培養(yǎng)基U的配方相同。

土壤稀釋液

挑取單的落測定蘇氨酸

“舁麗產(chǎn)他

T出

高產(chǎn)蘇氨酸

菌株b懸液

（4）培養(yǎng)基I屬于（通用/選擇/鑒定）培養(yǎng)基；培養(yǎng)基I和H上獲得的細菌種類數(shù)

（相同/不同）；在培養(yǎng)基II上采用的接種方法是。

（5）若AK酶結構未知，為迅速獲得AK酶突變株，應選用的策略是（定點突變/隨機

突變）。

（6）據(jù)題意可知，與菌株a相比，菌株b中的AKo（單選）

A.與天冬氨酸結合力增強

B.與蘇氨酸結合力增強

C.與天冬氨酸結合力下降

D.與蘇氨酸結合力下降

科學家利用基因工程技術將大腸桿菌Hl、H2、H3三種轉運蛋白基因分別導入菌株b中，獲得了菌株

hl、h2、h3,并測定蘇氨酸產(chǎn)量和導入基因相對表達量，結果如圖3。

6

5「

均

4?

匚二導入基因

來I

3

要■蘇氨酸

2畫

1涮

0

圖3

（7）分析并闡述h3蘇氨酸產(chǎn)量最高的原因。

17.（2024?安徽）丁二醇廣泛應用于化妝品和食品等領域。興趣小組在已改造的大腸桿菌中引入合成丁二

醉的關鍵基因X,以提高丁二醉的產(chǎn)量?；卮鹣铝袉栴}。

（I）擴增X基因時，PCR反應中需要使用TaqDNA聚合酶，原因是。

（2）使用BamHI和SalI限制酶處理質(zhì)粒和X基因，連接后轉化大腸桿菌，并涂布在無抗生素平板

上（如圖）。在此基礎上，進一步篩選含目的基因菌株的實驗思路是O

（3）研究表明，碳源和氮源的種類、濃度及其比例會影響微生物生長和發(fā)酵產(chǎn)物積累。如果培養(yǎng)基中

碳源相對過多，容易使其氧化不徹底，形成較多的,引起發(fā)酵液pH值下降。興趣小

組通過單因子實驗確定了木薯淀粉和酵母粉的最適濃度分別為l（）Og?Lr和15g?LZ在此基礎.匕設

置不同濃度的木薯淀粉（90g?L“、lOOgC'110g?L”）和酵母粉（12g?L「、15g?L“、18g?L/1）

篩選碳源和氮源濃度的最佳組合，以獲得較高發(fā)酵產(chǎn)量，理論上應設置（填數(shù)字）組實驗（重

復組不計算在內(nèi)）。

（4）大腸桿菌在發(fā)酵罐內(nèi)進行高密度發(fā)酵時，溫度會升高，其原因是。

（5）發(fā)酵工業(yè)中通過菌種選育、擴大培養(yǎng)和發(fā)酵后，再經(jīng)，最終獲得發(fā)酵產(chǎn)品。

18.（2024?海南）釀酒酵母是重要的發(fā)酵菌種，廣泛應用于釀酒、食品加工及生物燃料生產(chǎn)等。研究人員

對釀酒酵母菌株A進行基因工程改造以提高發(fā)酵中的乙醉產(chǎn)量?；卮鸩?列問題：

（I）釀酒酵母在有氧和無氧的條件下都能生存，屬于微生物，在無氧條件下能進行

發(fā)酵，可用于制作果酒等。

（2）傳統(tǒng)發(fā)酵中，新鮮水果不接種釀酒酵母也能制備果酒,原因是。

（3）工業(yè)上常采用單一菌種發(fā)酵生產(chǎn)食品。菌株A存在于環(huán)境中，實驗室獲得該單一菌和的分離方法

有和o

（4）菌株A含有1個FLO基因，其表達的FLO蛋白可提高發(fā)酵中乙醇產(chǎn)量，且FLO蛋白量與乙醇產(chǎn)

量成正相關，研窕人員基于菌株A構建得到菌株B、C、D（如圖1）。該實驗中，構建菌株B的目的

是,預期菌株A、B、C、D發(fā)酵中乙醇產(chǎn)量的高低

為。

（5）菌株A中，X和Y基因的表達均可以提高發(fā)酵中乙醇產(chǎn)量。研究人員將X和Y基因融合在一起，

構建了XY融合基因能表達的菌株E（如圖2）,其在發(fā)酵中具有更高的乙醇產(chǎn)量。菌株E中無單獨的X

和丫基因，且其他基因未被破壞。簡要寫出由菌株A到菌株E的構建思路。

19.（2024?廣東）駒形桿菌可合成細菌纖維素（BC）并將其分泌到胞外組裝成膜。作為一種性能優(yōu)異的生

物材料，BC膜應用廣泛。研究者設計了酪氨酸酶（可催化酪氨酸形成黑色素）的光控表達載體，將其

轉入駒形桿菌后構建出一株能合成BC膜井可實現(xiàn)光控染色的工程菌株，為新型紡織原料的綠色制造及

印染工藝升級提供了新思路（圖一）。

圖一

藍光光敏蛋白標簽

無活性的T7RNAP有活性的T7RNAP

l啟動子①｛終正不啟動予②便卿菊上子H啟動子③國畫］終止子k

注：基因1編碼酪氨酸酶，基因2編碼T7RNAPN端一nMag,基因3編碼

pMag-T7RNAPC端。

b

圖二

回答F列問題：

（1）研究者優(yōu)化了培養(yǎng)基的（答兩點）等營養(yǎng)條件，并控制環(huán)境條件，大規(guī)模培養(yǎng)工

程菌株后可在氣液界面處獲得BC菌膜（菌體和BC膜的復合物）。

（2）研究者利用T7噬菌體來源的RNA聚合酶（T7RNAP）及藍光光敏蛋白標簽，構建了一種可被藍

光調(diào)控的基因表達載體（光控原理見圖二a,載體的部分結構見圖二b）。構建載體時，選用了通用型啟

動子PBAD（被工程菌RNA聚合酶識別）和特異型啟動子PT7（僅被T7RNAP識別）。為實現(xiàn)藍光控制

染色，啟動子①②及③依次為，理由是o

（3）光控表達載體攜帶大觀每素（抗生素）抗性基因。長時間培養(yǎng)時在培養(yǎng)液中加入大觀霉素，其作

用為（答兩點）。

（4）根據(jù)預設的圖案用藍光照射已長出的BC菌膜并繼續(xù)培養(yǎng)一段時間，隨后將其轉至染色池處理，

發(fā)現(xiàn)只有經(jīng)藍光照射的區(qū)域被染成黑色，其原因是。

（5）有企業(yè)希望生產(chǎn)其他顏色圖案的BC膜。按照上述菌株的構建模式提出一個簡單思

路：。

20.（2024?甘肅）源于細菌的纖維素酶是一種復合酶，能降解纖維素。為了提高纖維素酶的降解效率，某

課題組通過篩選高產(chǎn)纖維素酶菌株，克隆表達降解纖維素的三種酷（如圖），研究了三種酶混合的協(xié)同

降解作用，以提高生物質(zhì)資源的利用效率?；卮鹣铝袉栴}。

（1）過程①②采用以潑甲基纖維索鈉為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選菌株X,能起到篩選作用的原因

是O高產(chǎn)纖維素的菌株篩選時，剛果紅培養(yǎng)基上的菌落周圍透明圈大小反映

了O

（2）過程④擴增不同目的基因片段需要的關鍵酶是。

（3）過程⑤在基因工程中稱為,該過程需要的主要酶有。

（4）過程⑥大腸桿菌作為受體細胞的優(yōu)點有o該過程用Ca2+處理細胞，使

其處于一種的生理狀態(tài)。

（5）課題組用三種酶及酹混合物對不同生物質(zhì)原料進行降解處理，結果如下表。表中協(xié)同系數(shù)存在差

異的原因是（答出兩點）。

生物質(zhì)原降解率（％）協(xié)同系數(shù)

料酶A的B酶C混1混2混1混2

小麥秸稈7.086.038.198.6126.9874.33114.64

玉米秸稈2.621.483.763.929.8824.9877.02

玉米芯0.620.480.860.986.791.8211.34

注：混1和混2表示三種酶的混合物

202L2025年高考生物真題知識點分類匯編之發(fā)酵工程（二）

參考答案與試題解析

一.選擇題（共12小題）

題號1234567891011

答案DCDCDDDCBCB

題號12

答案D

二,多選題（共2小題）

題號1314

答案CDARD

一,選擇題（共12小題）

1.（2024?湖北）制醋、制飴、制酒是我國傳統(tǒng)發(fā)酵技術。醋酸菌屬于好氧型原核生物，常用于食用醋的

發(fā)酵。下列敘述錯誤的是（）

A.食用醋的酸味主要來源于乙酸

B.醴酸菌不適宜在無氧條件下生存

C.醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶

D.葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解發(fā)生在線粒體內(nèi)

【分析】果酒、果醋制作過程中防止雜菌污染的措施

（I）榨汁機、發(fā)酵瓶等器具要用洗潔精清洗干凈，并用體積分數(shù)為70%的酒精消毒，晾干。

（2）清洗葡萄時要先沖洗，后去除枝梗和腐爛的籽粒，防止先去梗時損傷葡萄，再沖洗的增加被雜菌

污染的機會。

（3）用帶蓋的瓶子制作果酒的過程中，每隔12h左右排氣時只需擰松瓶蓋，不要完全打開瓶蓋。

（4）在制作果酒時，為更好地抑制其他微生物的生長，提高果酒品質(zhì)，可以直接在果汁中加入人工培

養(yǎng)的酵母菌進行發(fā)酵：制作果醋時，也可利用相同原理加入人工培養(yǎng)的醋酸菌進行發(fā)酵。

【解答】解：A、乙酸是醋酸菌產(chǎn)生的，是食用醋的酸味主要來源，A正確：

B、醋酸菌是好氧細菌，不適宜在無氧條件下生存，B正確；

C、醋酸菌含有催化乙醉氧化成乙酸的酶，可糖源不充足的條件下，可催化乙醇氧化成乙酸，C正確；

D、醋酸菌為原核生物，沒有線粒體，飾萄糖在醋酸菌中的氧化分解發(fā)生在細胞質(zhì)中，D錯誤。

故選：Do

【點評】本題考查了果酒、果醋的制作的相關知識，意在考查考生理解所學知識要點、把握知識間內(nèi)在

聯(lián)系的能力；能運用所學知識，對生物學問題作出準確的判斷，難度適中。

2.（2024?重慶）養(yǎng)殖場糞便是農(nóng)家肥的重要來源，其中某些微生物可使氨氮化合物轉化為尿素進而產(chǎn)生

NH3,影響畜禽健康。為篩選糞便中能利用氨氮化合物且減少NH3產(chǎn)生的微生物。興趣小組按圖進行實

驗獲得目的菌株，正確的是（）

養(yǎng)

培

畜禽

選

篩

糞便

樣本①

A.①通常在等比稀釋后用平板劃線法獲取單個菌落

B.②挑取在2種培養(yǎng)基上均能生長的用于后續(xù)的實驗

C.③可通過添加腺酶并檢測活性，篩選得到甲、乙

D.糞便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的減少

【分析】微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)，在線的

開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀樣后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單

個菌落。

【解答】解：A、①培養(yǎng)篩選可用平板劃線法和稀釋涂布平板法，而平板劃線法無需進行稀釋，A錯誤；

B、牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基和尿素唯一氮源培養(yǎng)基作為對照實險，②篩選不能在尿素唯一氮源培養(yǎng)基上生

長，而能在牛肉音蛋口豚培養(yǎng)基上生長的菌株用于后續(xù)的實驗，B錯誤；

C、所篩選出的菌株不能利用尿素的原因可能是不產(chǎn)生腺陋或分泌服酹抑制劑，③通過添加版施并檢測

活性，有活性的為甲而沒活性的為乙，從而篩選得到甲、乙，C正確；

D、糞便中可能還含有其他能產(chǎn)生腺酹的菌株使甲能夠產(chǎn)生NH3,因此糞便中添加菌株乙比甲更有利于

NH3的減少，D錯誤。

故選：Co

【點評】本題考杳學生從題中獲取相關信息，并結合所學微生物實驗室培養(yǎng)的知識做出正確判斷，屬于

識記和理解層次的內(nèi)容，難度適中。

3.（2024?海南）某小組為檢測1株粗糙脈施霉突變株的基基酸缺陷類型，在相同培養(yǎng)溫度和時間的條件

下進行實驗，結果見表。下列有關敘述錯誤的是（）

組別培養(yǎng)條件實驗結果

①基礎培養(yǎng)基無法生長

②基礎培養(yǎng)基十甲、乙、丙3種氨基酸正常生K

③基礎培養(yǎng)基+甲、乙2種氨基酸無法生長

④基礎培養(yǎng)基+甲、丙2種氨基酸正常生長

⑤基礎培養(yǎng)基+乙、丙2種氨基酸正常生長

A.組別①是②③④⑤的對照組

B.培養(yǎng)溫度和時間屬于無關變量

C.①②結果表明，甲、乙、丙3種氨基酸中有該突變株正常生長所必需的氨基酸

D.①?⑤結果表明，該突變株為氨基酸甲缺陷型

【分析】根據(jù)題中表格的實驗條件設置分析，該實驗的自變量為培養(yǎng)條件，即基礎培養(yǎng)基中是否添加氨

基酸及添加氨基酸的種類，而因變量為粗糙脈泡霉突變株的生長狀況。

【解答】解：A、根據(jù)表格培養(yǎng)條件設置可知，除了①組外，其他組別的基礎培養(yǎng)基中都添加了氨基酸，

因此①組是②③④⑤組的對照組，A正確；

B、根據(jù)培養(yǎng)條件分析可知，該實驗的自變量為培養(yǎng)條件，即基礎培養(yǎng)基中是否添加氨基酸及添加氨基

酸的種類，各組別的培養(yǎng)溫度和時間均為無關變量，應保持相同，B正確；

C、由①②兩組的結果可知，粗糙脈泡霉突變株在基礎培養(yǎng)基中無法生長，但在添加了甲、乙、丙3種

氨基酸的基礎培養(yǎng)基中能正常生長，由此可以說明甲、乙、丙3種氨基酸中有該突變株正常生長所必需

的氨基酸，C正確；

D、與①組相比，在基礎培養(yǎng)基中，若添加的氨基酸中含有丙種氨基酸，則粗糙脈抱霉突變株都能正常

生長，但在只添加甲、乙2種氨基酸的基礎培養(yǎng)基中無法生長，說明該突變株為氨基酸丙缺陷型，D錯

誤。

故選：Do

【點評】本題考查微生物培養(yǎng)的相關知識和實驗設計與分析，要求考生理解識記有關技術的原理及操作

步驟，掌握實驗設計、分析的方法，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。

4.（2024?天津）實驗中常根據(jù)菌落外表特征鑒別微生物，進而對實驗結果做出判斷，下列實驗不是根據(jù)

菌落外表特征做出判斷的是（）

A.艾弗里證明肺炎鏈球菌的轉化因子是DNA

B.判斷分離酵母菌的固體培養(yǎng)基是否被毛霉污染

C.利用浸有抗生素的濾紙片篩選大腸桿菌中耐藥性強的菌株

D.判斷在尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上生長的尿素降解菌是否有不同種類

【分析】1、艾弗里肺炎鏈球菌轉化實驗關鍵思路：單獨研究S型菌各種成分的作用，例如在培養(yǎng)基中

添加加熱殺死的S型菌和DNA酶，與R型菌混合培養(yǎng)。

2、微生物培養(yǎng)中空白平板的作用：將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上

是否有菌落產(chǎn)生。

3、利用浸有抗生素的濾紙片篩選大腸桿菌中耐藥性強的菌株可從抑菌圈邊緣菌落挑取大腸桿菌，可能

獲得目的菌株。

4、分離分解尿素的微生物：將一定稀釋度的樣品接種在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上，并在適宜的條

件下培養(yǎng)。分解尿素的微生物能在該培養(yǎng)基上生長繁殖，而不能利用尿素的微生物不能生長繁殖，這是

因為只有能夠分解尿素的微生物能夠產(chǎn)生麻酶，從中獲取氮源。

【解答】解：A、艾弗里在培養(yǎng)基中添加加熱殺死的S型菌以及DNA酶、RNA酶、蛋白酶等，并培養(yǎng)

R型菌，通過觀察培養(yǎng)基上菌落特征來判斷是否產(chǎn)生了S型菌，進而判斷轉化是否成功的，A正確；

B、毛霉屬于多細胞的真菌，可以產(chǎn)生細長的菌絲，例如制作腐乳時產(chǎn)生的“白毛”，而酵母菌的菌落

與之有明顯區(qū)別，因此可以根據(jù)毛霉菌落的形態(tài)特征判定固體培養(yǎng)基是否是被毛霉污染了，R正確：

C、抗生素可抑制細菌的生長繁殖，利用浸有抗生素的濾紙片篩選大腸桿菌中耐藥性強的菌株是從抑菌

圈邊緣菌落挑取大腸桿菌來獲得目的菌株，并沒有依靠菌落外表形態(tài)特征做出判斷，C錯誤；

D、利用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選獲得的尿素降解菌可能有多種，不同種類的尿素降解菌降解尿

素的能力不同，其菌落特征也不相同，因此可以根據(jù)菌落特征判斷尿素降解菌是否有不同種類，D正確。

故選：Co

【點評】本題綜合考查了多個課本經(jīng)典實驗，要求學生掌握相關實驗的設計思路與原理，掌握微生物培

養(yǎng)的有關基礎知識，能夠結合題干信息靈活運用所學知識進行分析判斷。

5.（2024?湖南）微生物平板劃線和培養(yǎng)的具體操作如圖所示，下列操作正確的是（)

①灼燒接種環(huán)②冷卻接種環(huán)，拔出試管棉塞③試管口通過火焰④接種環(huán)蘸取菌液

⑤試管門通過火焰⑥接種環(huán)劃線操作⑦接種環(huán)劃線方法⑧平板正置培養(yǎng)

并塞上棉塞

A.①②⑤⑥B.③??⑦C.①@?⑧D.①③??

【分析】微生物平板劃線和培養(yǎng)的過程中要保證始終沒有雜菌的污染，接種環(huán)、培養(yǎng)基、試管等都需要

進行滅菌，實驗操作過程應該在酒精燈火焰旁進行。

【解答】解：由圖可知，②中撥出棉塞后應握住棉塞上部；⑥中劃線時不能將培養(yǎng)皿的皿蓋完全拿開,

應只打開一條縫隙；⑦中劃線時第5次的劃線不能與第1次的劃線相連；⑧中平板應倒置培養(yǎng)。

①③??正確。

故選：D。

【點評】本題考查微生物培養(yǎng)的相關知識，學生要掌握平板劃線的具體操作，結合題干圖片正確解答本

題。

6.（2024?江蘇）關于“利用乳酸菌發(fā)酵制作酸奶或泡菜”的實驗，下列敘述正確的是（）

A.制作泡菜的菜料不宜完全淹沒在煮沸后冷卻的鹽水中

B.制作酸奶的牛奶須經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后再接種乳酸菌

C.發(fā)酵裝置需加滿菜料或牛奶并封裝，以抑制乳酸菌的無氧呼吸

D.控制好發(fā)醉時間，以避免過后乳酸影響酸奶或泡菜的U味和品質(zhì)

【分析】泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹?/p>

菜中的葡萄糖氧化為乳酸。

【解答】解：A、制作泡菜的菜料應該完全淹沒在煮沸后冷卻的鹽水中，以防雜菌污染，A錯誤；

B、制作酸奶的牛奶不需要經(jīng)過高壓蒸汽滅菌，否則會破壞牛奶的營養(yǎng)成分，B錯誤；

C、發(fā)酵裝置應加入菜料或牛奶至八成滿井封裝，避免發(fā)酵液溢出壇外，C錯誤；

D、發(fā)酵時間過短或過長，都會影響產(chǎn)品的口味和品質(zhì)，因此需要控制好發(fā)酵時間，以避免過量乳酸影

響酸奶或泡菜的口味和品質(zhì)，D正確。

故選：Do

【點評】本題考查微生物的發(fā)酵在食品制作和生產(chǎn)中的應用，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，

如實驗的原理、實驗步驟、實驗條件等，需要考生在平時的學習過程中注意積累。

7.（2024?山東）在發(fā)酵過程中，多個黑曲霉菌體常聚集成團形戊菌球體，菌球體大小僅由菌體數(shù)量決定。

黑曲霉利用糖類發(fā)酵產(chǎn)生檸檬酸時需要充足的氧。菌體內(nèi)鉞離子濃度升高時，可解除檸檬酸對其合成途

徑的反饋抑制。下列說法錯誤的是（）

A.相同菌體密度下，菌球體越大檸檬酸產(chǎn)生速率越慢

B.發(fā)醉中期添加一定量的硫酸錢可提高檸檬酸產(chǎn)量

C.發(fā)醉過程中pH下降可抑制大部分細菌的生長

D.發(fā)酵結束后，將過濾所得的固體物質(zhì)進行干燥即可獲得檸檬酸產(chǎn)品

【分析】發(fā)酵工程：（1）定義：利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術，規(guī)模化生產(chǎn)對人類有用的

產(chǎn)品；主要為微生物細胞本身或者其代謝產(chǎn)物。（2）分離、提純產(chǎn)物：產(chǎn)品若是微生物細胞，在發(fā)酵結

束后，采用過濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥：產(chǎn)品若是微生物代謝物，則根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當

的提取、分離和純化措施。

【解答】解：A、黑曲霉在氧氣充足的條件下，可以利用糖類發(fā)酵產(chǎn)生檸檬酸：在相同菌體密度下，菌

球體越大，越不容易獲得氧氣，檸檬酸產(chǎn)生速率越慢，A正確；

R、由題目所給信息”菌體內(nèi)鉞離子濃度升高時，可解除檸棣酸對其合成途徑的反饋抑制”可推出發(fā)酵

中期添加一定量的硫酸鉉可提高檸檬酸的產(chǎn)量，B正確；

C、大部分細菌適合在中性或弱堿性環(huán)境中生存；發(fā)酵過程口pH下降可抑制大部分細菌的生長，C正

確：

D、檸檬酸屬于代謝物；發(fā)酵結束后，可根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當?shù)奶崛?、分離和純化措施來獲得產(chǎn)品，

D錯誤。

故選；Do

【點評】本題考查發(fā)酵工程的相關知識，意在考查考生的理解能力和實驗與探究能力，進一步考杳生命

觀念、科學思維、科學探究和社會責任等核心素養(yǎng)。

8.（2024?廣西）“揚美豆豉”制作技藝屬于廣西非物質(zhì)文化遺產(chǎn)，該技術包括選豆、洗豆、煮豆、制曲、

洗曲、調(diào)味和發(fā)酵等。下列說法錯誤的是（）

A.煮豆可使蛋白質(zhì)適度變性，易于被微生物利用

B.制曲目的是促使有益微生物生長繁殖，并分泌多種酶

C.調(diào)味時加入食鹽，主要目的是促進微生物的生長繁殖

D.發(fā)酵過程中，微生物將原料轉化為特定代謝產(chǎn)物，使豆豉風味獨特

【分析】豆豉的制作原理與腐乳的制作類似：起主要作用的是真菌中的毛霉，適宜溫度為15C?18℃；

毛霉能夠產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酹，將蛋白質(zhì)和脂肪分別水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。

【解答】解：A、煮豆可使蛋白質(zhì)適度變性，使蛋白質(zhì)中的肽犍暴露，從而易于被微生物利月，A正確；

B、制曲是指培養(yǎng)有益微生物來進行食品發(fā)酵的過程，即制曲是使有益微生物在基質(zhì)上生長、繁殖、并

分泌各種酶，B正確；

C、調(diào)味時加入食鹽，主要目的是抑制微生物的生長繁殖，而不是促進微生物的生長繁殖，C錯誤：

D、發(fā)酵過程中，微生物將原料轉化為特定代謝產(chǎn)物，使豆豉風味獨特，D正確。

故選：C。

【點評】本題主要考查發(fā)酵過程的內(nèi)容，要求考生識記相關知識，并結合所學知識準確答題。

9.（2024?福建）蝦醬是以蝦為原料的傳統(tǒng)發(fā)酵食品。在乳酸菌、芽抱桿菌等多種微生物共同作用下，原

料中的蛋白質(zhì)和脂肪發(fā)生水解，形成蝦醬的特有風味。下列敘述錯誤的是（）

A.蝦醬特有風味的形成受發(fā)酵時間的影響

B.傳統(tǒng)蝦醬的制作過程需要嚴格執(zhí)行無菌操作

C.原料中的蛋白質(zhì)會被水解成小分子的肽和氨基酸

D.蝦醬發(fā)酵過程微生物種類和數(shù)最的分析有助于改良風味

【分析】發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術，規(guī)模化生產(chǎn)人類所需的產(chǎn)品，一般

包括菌種的選育和培養(yǎng)、產(chǎn)物的分離和提純等方面。發(fā)酵工程在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)及其他工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)

上有重要的應用價值。

【解答】解：A、發(fā)酵時間不同，微生物發(fā)酵的程度不同，因此蝦醬特有的風味形成受發(fā)酵時間影響，

A正確：

B、蝦醬是以蝦為原料的傳統(tǒng)發(fā)酵食品，無需嚴格執(zhí)行無菌操作，B錯誤；

C、在微生物作用下，原料中的蛋白質(zhì)會被水解成小分子的肽和氨基酸，C正確；

D、在乳酸菌、芽抱桿菌等多種微生物共同作用下，原料中的蛋白質(zhì)和脂肪發(fā)生水解，形成蝦醬的特有

風味，蝦醬發(fā)酵過程微生物種類和數(shù)量的分析有助于改良風味，D正確。

故選：Bo

【點評】本題主要考查傳統(tǒng)發(fā)酵的相關知識，要求學生有一定的理解分析能力，能夠結合題干信息和所

學知識進行分析應用。

10.（2024?江蘇）醉母菌是基因工程中常用的表達系統(tǒng)。下列相關敘述正確的是（)

A.酵母菌培養(yǎng)液使用前要滅活所有細菌，但不能滅活真菌

B.酵母菌是真核細胞，需放置在C02培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)

C.可用稀釋涂布平板法對酵母菌計數(shù)

D.該表達系統(tǒng)不能對合成的蛋白質(zhì)進行加工和修飾

【分析】培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，分為固體

培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，在提供上述幾種主要營養(yǎng)成分的基

礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對特殊營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣等條件的要求。

【解答】解：A、酵母菌培養(yǎng)液使用前要滅活所有微生物，包括細菌、真菌等，然后再接種酵母菌，A

錯誤；

B、酵母菌是真核細胞，但不需要放置在C02培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，C02培養(yǎng)箱用于培養(yǎng)動物細胞，B錯

誤；

C、菌液經(jīng)過充分稀釋后，平板上的一個菌落來自一個活菌，因此可用稀釋涂布平板法對酵母菌計數(shù)，

C正確；

D、酵母菌是真核細胞，具有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等結構，因此該表達系統(tǒng)可以對合成的蛋白質(zhì)進行加工

和修飾，D錯誤。

故選：Co

【點評】本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關知識，要求學生掌握相關的基礎知識，再結合選項進行分析判

斷，難度適中.

II.（2024?浙江）麻酶催化尿素水解，產(chǎn)生的氨可作為細菌的氮源。胭能被去除銀后失去活性。下列敘述

錯誤的是（）

A.銀是組成麻酶的重要元素

B.鋰能提高尿素水解反應的活化能

C.產(chǎn)麻酶細菌可在以NH4C1為唯一氮源的培養(yǎng)基生長繁殖

D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可用于篩選產(chǎn)胭酶細菌

【分析】I、在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培

養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。

2、只有能合成腺酶的微生物才能分解尿素，利用以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可以從土壤中分

離出分解尿素的細菌。

【解答】解：A、根據(jù)題意，麻酶被去除銀后失去活性，說明銀是組成麻酶的重要元素，A正確：

B、脈酶催化尿素水解的機理為降低化學反應所需的活化能，鏗作為麻酶的重要組成元素，應該與降低

尿素水解反應的活化能有關，B錯誤；

C、產(chǎn)版酶細菌可利用NKC1里的氮源進行代謝活動，因此產(chǎn)胭酶細菌可在以NH40為唯一氮源的培

養(yǎng)基生長繁殖，C正確；

D、產(chǎn)服酶細菌能利用腺酶催化尿素分解產(chǎn)生NH3,NH3可作為細菌生長的氮源，不能產(chǎn)服酶的細菌則

無法分解尿素獲得氮源，因此以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可用于篩選產(chǎn)眠前細菌，D正確,

故選：Bo

【點評】本題考查微生物實驗室培養(yǎng)的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，具備運用所學

知識綜合分析問題的能力是解答本題的關鍵。

12.（2024?江西）井岡霉素是我國科學家發(fā)現(xiàn)的?種氨基寡糖類抗生素，它由吸水鏈霉菌井岡變種（JGs,

一種放線菌，菌體呈絲狀生長）發(fā)酵而來，在水稻病害防治等領域中得到廣泛應用。下列關于JGs發(fā)酵

生產(chǎn)井岡霉素的敘述，正確的是（）

A.JGs可發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素，，因為它含有能夠編碼井岡霉素的基因

B.JGs接入發(fā)酵^前需要擴大培養(yǎng)，該過程不影響井岡霉素的產(chǎn)量

C.提高JGs發(fā)酵培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度，會提高井岡霉素的產(chǎn)量

D.稀釋涂布平板法不宜用于監(jiān)控JGs發(fā)酵過程中活細胞數(shù)量的變化

【分析】發(fā)酵工程的應用：

1、在食品工業(yè)的應用：生產(chǎn)傳統(tǒng)的發(fā)酵產(chǎn)品，生產(chǎn)各種各樣的食品添加劑，生產(chǎn)酶制劑等。

2、在醫(yī)藥工業(yè)的應用：如生產(chǎn)抗生素、氨基酸、激素、免疫調(diào)節(jié)劑等.

3、在農(nóng)牧業(yè)上的應用：生產(chǎn)微生物肥料、微生物農(nóng)藥、微生物飼料等

【解答】解：A、根據(jù)題意，井岡霉素是由吸水鏈霉菌井岡變種（JGs,一種放線菌，菌體呈絲狀生長）

發(fā)酵產(chǎn)生的一種氨基寡糖類抗生素，而基因表達的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，推測JGs含有能夠編碼井岡霉素合成

的相關酶的基因，A錯誤：

B、JGs接入發(fā)酵罐前需要擴大培養(yǎng)，該過程會影響JGs的數(shù)量，進而影響井岡霉素的產(chǎn)量，B錯誤：

C、適度提高JGs發(fā)醉培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度，會提高井岡霉素的產(chǎn)異，但若濃度過大，反而會降低

井岡霉素的產(chǎn)量，C錯誤；

D、根據(jù)題意，JGs是一種放線菌，菌體呈絲狀生長，故形成的菌落難以區(qū)分，因此稀釋涂布平板法不

宜用于監(jiān)控JGs發(fā)酵過程中活細胞數(shù)量的變化，D正確。

故選：Do

【點評】本題主要考查發(fā)醉工程的相關知識，要求學生有一定的理解分析能力，能夠結合題干信息和所

學知識進行分析應用。

二多選題（共2小題）

（多選）13.（2024?選擇性）某些香蕉植株組織中存在的內(nèi)生菌可防治香蕉枯萎病，其篩選流程及抗性檢

測如圖。下列操作正確的是（）

,、,、，、,、內(nèi)生菌菌液劃線

〔樣品采集）■餌品消毒卜麗硒T樣品研磨）

，、,、,I:（?；“與病原菌菌斑

〔抗性檢測H獲得純培養(yǎng)物T稀釋涂布）'?…沙

抗性檢測

A.在大量感染香蕉枯萎病的香蕉種植園內(nèi)，從感病植株上采集樣品

B.將采集的樣品充分消毒后，用蒸儲水沖洗，收集沖洗液進行無菌檢測

C.將無菌檢測合格的樣品研磨，經(jīng)稀釋涂布平板法分離得到內(nèi)生菌的單菌落

D.判斷內(nèi)生菌的抗性效果需比較有無接種內(nèi)生菌的平板上的病原菌菌斑大小

【分析】培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理

性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采

用蛋白陳和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種

主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。例如，培

養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細菌時需將pH

調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。

【解答】解：A、由題干信息可知，某些香蕉植株組織中存在的內(nèi)生菌可防治香蕉枯萎病，所以在大量

感染香蕉枯萎病的香蕉種植園內(nèi)，從正常植株上可能會采集到內(nèi)共生菌，A錯誤；

B、將采集的樣品充分消毒后，應用無菌水（避免雜菌干擾）進行沖洗，收集沖洗液進行無菌檢測，B

錯誤；

C、將樣品研磨釋放香蕉組織內(nèi)的內(nèi)共生菌，經(jīng)稀釋涂布平板法分離得到內(nèi)生菌的單菌落，C正確；

D、無接種內(nèi)生菌的平板上做為對照組，接種內(nèi)生菌的平板為實驗組，與對照組相比，實驗組的病原菌

菌斑越小，則其抗菌效果越好，D止確。

故選：CDo

【點評】本題考查了微生物的培養(yǎng)與分離的相關知識，意在考查考生理解所學知識要點，把握知識間內(nèi)

在聯(lián)系的能力；能運用所學知識，對生物學問題作出準確的判斷，難度適中。

（多選）14.（2024?河北）中國傳統(tǒng)白酒多以泥窖為發(fā)酵基礎，素有“千年老窖萬年糟”“以窖養(yǎng)糟，以

糟養(yǎng)泥”之說。多年反復利用的老窖池內(nèi)壁窖泥中含有大量與釀酒相關的微生物。下列敘述正確的是

()

A.傳統(tǒng)白酒的釀造是在以釀酒酵母為主的多種微生物共同作用下完成的

B.窖池內(nèi)各種微生物形成了相對穩(wěn)定的體系，使釀造過程大易污染雜菌

C.從窖泥中分離的釀酒酵母擴大培養(yǎng)時，需在C02或N2環(huán)境中進行

D.從谷物原料發(fā)酵形成的酒糟中，可分離出產(chǎn)淀粉陋的微生物

【分析】利用酵母菌制作果酒的原理是：

在有氧條件下，酯母菌進行有氧呼吸，大量繁殖“反應方程式為：C6Hl2O6+6O2+6H2O場6co2+12H2O+

能量。

在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。反應方程式為：C6H120涯2co2+2C2H50H+能量。

【解答】解：AB、由題干信息“多年反復利用的老窖池內(nèi)壁窖泥中含有大量與釀酒相關的微生物”說

明傳統(tǒng)白酒的釀造是在以釀酒酵母為主的多種微生物參與，且窖池內(nèi)各種微生物形成了相對穩(wěn)定的體系,

使釀造過程不易污染雜菌，AB正確；

C、從窖泥中分離的釀酒酵母擴大培養(yǎng)時，酵母菌需要進行有氧呼吸，需在有02的環(huán)境中進行，C錯

誤；

D、谷物中的淀粉需在淀粉前的作用卜.分解為葡萄糖等物質(zhì)，才能被酵母菌利用，故從谷物原料發(fā)酵形

成的酒糟中，可分離出產(chǎn)淀粉前的微生物，D正確。

故選：ABD.

【點評】本題考查果酒;果醋的制作等相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識

綜合分析問題的能力是解答本題的關鍵。

三.解答題（共6小題）

15,（2024?江西）聚對苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一種聚酯塑料?，會造成環(huán)境污染。磷脂酶可催化PET

降解。為獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物，研究人員試驗了2種方法?；卮鹣铝袉栴}：

（1）方法1從土壤等環(huán)境樣品中篩選高產(chǎn)磷脂前的微生物。以磷脂酰乙醇胺（一種磷脂類物質(zhì)）為唯

一碳源制備選擇培養(yǎng)基，可提高該方法的篩選效率。除碳源外，該培養(yǎng)基中至少還應該有水、

無機鹽、氮源等營養(yǎng)物質(zhì)。

（2）方法2采用基因工程（或轉基因）技術定向改造現(xiàn)有微生物，以獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物。

除了編碼磷脂酶的基因外，該技術還需要限制酶、DNA連接酶、載體（或質(zhì)粒）等

“分子工具

（3）除了上述2種方法之外，還可以通過誘變育種技術非定向改造現(xiàn)有微生物，篩選獲得能夠

高產(chǎn)磷脂前的微生物。

（4）將以上獲得的微生物接種到鑒別培養(yǎng)基（在牛肉膏蛋白排液體培養(yǎng)基中添加2%的瓊脂粉和適量的

卵黃磷脂）平板上培養(yǎng)，可以通過觀察卵黃磷脂水解圈的大小，初步判斷微生物產(chǎn)磷脂酶的能力，但不

能以水解圈大小作為判斷微生物產(chǎn)磷脂酶能力的唯一依據(jù)。從平板制作的角度分析，其原因可能是不

同平板中培養(yǎng)基基的差異以及平板內(nèi)和不同平板間培養(yǎng)基厚度不均勻o

【分析】1、培養(yǎng)基一股包括：水、碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）、無機鹽，

此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

2、微生物的接種方法：最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

【解答】解：（1）方法1從土壤等環(huán)境樣品中篩選高產(chǎn)磷脂前的微生物。以磷脂酰乙醇酯為唯一碳源制

備的培養(yǎng)基中只有能利用磷脂酰乙醉酯的微生物能生長，其他微生物的生長被抑制，進而獲得篩選出所

需要的微生物，這種培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基。除碳源外，培養(yǎng)基中至應該有水分、無機鹽、碳源、氮源等

營養(yǎng)物質(zhì)。

（2）方法2定向改造現(xiàn)有微生物，可采用基因工程技術，以獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物?；蚬こ趟?/p>

的工具，除了編碼磷脂酶的基因，即目的基因外，還需要限制酶、DNA連接酶和載體（或質(zhì)粒）等“分

子工具”。

（3）基因突變具有不定向性，故可以通過誘變育種技術非定向改造現(xiàn)有微生物