血液凝血功能檢測(cè)技術(shù)及應(yīng)用血液凝固是人體維持生命活動(dòng)的重要生理機(jī)制，它既是機(jī)體防止出血的保護(hù)屏障，也可能成為血栓性疾病的潛在誘因。因此，準(zhǔn)確、及時(shí)地評(píng)估血液凝血功能，對(duì)于臨床診斷、治療監(jiān)測(cè)及預(yù)后判斷均具有不可替代的價(jià)值。本文將系統(tǒng)闡述當(dāng)前主流的血液凝血功能檢測(cè)技術(shù)原理、主要檢測(cè)項(xiàng)目及其在臨床實(shí)踐中的應(yīng)用要點(diǎn)，旨在為相關(guān)領(lǐng)域的醫(yī)療工作者提供參考。一、凝血功能檢測(cè)的基礎(chǔ)與技術(shù)演進(jìn)凝血功能的檢測(cè)并非單一指標(biāo)的測(cè)定，而是對(duì)一個(gè)涉及血管內(nèi)皮、血小板、凝血因子、抗凝物質(zhì)及纖溶系統(tǒng)等多環(huán)節(jié)復(fù)雜生理過程的綜合評(píng)估。傳統(tǒng)的凝血功能檢測(cè)多基于血漿，側(cè)重于凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)中特定階段的終點(diǎn)測(cè)定。隨著技術(shù)的進(jìn)步，更能反映凝血全過程動(dòng)態(tài)變化的檢測(cè)方法逐漸應(yīng)用于臨床，使得對(duì)凝血狀態(tài)的判斷更為精準(zhǔn)和全面。（一）經(jīng)典凝血因子檢測(cè)技術(shù)此類技術(shù)主要通過檢測(cè)血漿在特定激活劑或鈣離子作用下的凝固時(shí)間，來反映內(nèi)源性或外源性凝血途徑的功能狀態(tài)。1.凝血酶原時(shí)間（PT）：在受檢血漿中加入足量的組織凝血活酶（含TF）和鈣離子，觀測(cè)血漿凝固所需的時(shí)間。PT主要反映外源性凝血途徑（因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ）及共同途徑中凝血酶原、纖維蛋白原的水平。國際標(biāo)準(zhǔn)化比值（INR）是通過特定公式將PT結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化，目前廣泛用于口服抗凝藥（如華法林）治療的監(jiān)測(cè)，以減少不同實(shí)驗(yàn)室、不同試劑間的差異。2.活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）：在受檢血漿中加入接觸因子激活劑（如白陶土、鞣花酸）和部分凝血活酶（代替血小板磷脂），經(jīng)孵育后加入鈣離子，觀測(cè)血漿凝固所需的時(shí)間。APTT主要反映內(nèi)源性凝血途徑（因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ等）及共同途徑的凝血功能狀態(tài)。它是篩查內(nèi)源性凝血因子缺陷及監(jiān)測(cè)普通肝素抗凝治療的常用指標(biāo)。3.凝血酶時(shí)間（TT）：在受檢血漿中直接加入標(biāo)準(zhǔn)化的凝血酶溶液，觀測(cè)血漿凝固所需的時(shí)間。TT主要反映血漿中纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白的過程是否正常，受纖維蛋白原濃度、結(jié)構(gòu)異常以及血漿中是否存在抗凝血酶物質(zhì)（如肝素、FDPs）的影響。4.纖維蛋白原（FIB）測(cè)定：通常采用凝固法（Clauss法），即基于TT測(cè)定的原理，通過加入足量的凝血酶，使血漿中的纖維蛋白原迅速轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，其凝固時(shí)間與纖維蛋白原濃度呈負(fù)相關(guān)，從而計(jì)算出纖維蛋白原的含量。FIB是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，其水平升高與血栓風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)，降低則可能提示出血傾向。（二）血栓彈力圖（TEG/ROTEM）技術(shù)血栓彈力圖（Thromboelastography,TEG）及旋轉(zhuǎn)血栓彈力測(cè)定（RotationalThromboelastometry,ROTEM）是一類能夠動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)全血從凝血開始至血凝塊形成及隨后溶解的整個(gè)過程的檢測(cè)技術(shù)。與傳統(tǒng)的血漿檢測(cè)不同，它們保留了血小板、紅細(xì)胞等細(xì)胞成分對(duì)凝血過程的影響，更接近體內(nèi)凝血的真實(shí)環(huán)境。其基本原理是通過檢測(cè)一小份全血樣本在受到物理剪切力或扭矩作用時(shí)，血凝塊形成的強(qiáng)度和彈性變化，并將這些變化以圖形和參數(shù)的形式呈現(xiàn)出來。這些參數(shù)包括反映凝血啟動(dòng)時(shí)間、凝血塊形成速率、最大凝血塊強(qiáng)度以及纖維蛋白溶解等方面的信息。TEG/ROTEM在評(píng)估創(chuàng)傷患者的整體凝血狀態(tài)、指導(dǎo)成分輸血、監(jiān)測(cè)術(shù)中凝血功能異常以及鑒別出血原因（是凝血因子缺乏、血小板功能障礙還是纖溶亢進(jìn)）等方面展現(xiàn)出獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。（三）特定凝血因子與抑制物檢測(cè)對(duì)于一些遺傳性或獲得性凝血因子缺陷癥的診斷，以及凝血抑制物（如狼瘡抗凝物、因子Ⅷ抑制物）的篩查和確證，則需要更為特異性的檢測(cè)方法。1.凝血因子活性測(cè)定：通常采用一期法，即把受檢血漿與缺乏某一特定凝血因子的基質(zhì)血漿混合，通過APTT或PT測(cè)定結(jié)果，與正常血漿比較，計(jì)算出該因子的活性百分比。這是診斷血友?。ㄈ缫蜃英?、Ⅸ缺乏）等疾病的關(guān)鍵。2.凝血因子抗原測(cè)定：多采用免疫學(xué)方法（如ELISA）檢測(cè)凝血因子的蛋白含量，有助于區(qū)分凝血因子合成減少（抗原與活性均降低）還是功能異常（抗原正常而活性降低）。3.抑制物檢測(cè)：如狼瘡抗凝物（LA）的檢測(cè)，通常包括篩選試驗(yàn)（如APTT延長且不能被正常血漿糾正）、確證試驗(yàn)（加入高濃度磷脂后APTT縮短）以及混合試驗(yàn)等步驟。因子Ⅷ抑制物則可通過Bethesda法等進(jìn)行定量檢測(cè)。（四）血小板功能檢測(cè)血小板在初期止血和血栓形成中扮演關(guān)鍵角色。除了血小板計(jì)數(shù)外，血小板功能的評(píng)估也日益受到重視。1.血小板聚集試驗(yàn)（PAgT）：通過在富血小板血漿中加入不同的血小板激活劑（如ADP、膠原、花生四烯酸、瑞斯托霉素等），測(cè)定血小板發(fā)生聚集的程度和速度，以評(píng)估血小板的聚集功能。常用于阿司匹林、氯吡格雷等抗血小板藥物療效的監(jiān)測(cè)，以及血小板無力癥等疾病的診斷。2.血小板黏附試驗(yàn)（PAdT）：反映血小板黏附于血管內(nèi)皮下膠原或人工表面的能力。3.流式細(xì)胞術(shù)：可用于檢測(cè)血小板表面活化標(biāo)志物（如CD62P、PAC-1）的表達(dá)，能更靈敏地反映血小板的活化狀態(tài)。二、凝血功能檢測(cè)的臨床應(yīng)用凝血功能檢測(cè)的應(yīng)用貫穿于臨床多個(gè)學(xué)科，其結(jié)果解讀需緊密結(jié)合患者的臨床背景。（一）術(shù)前凝血功能評(píng)估手術(shù)前進(jìn)行常規(guī)凝血功能篩查（如PT、APTT、FIB、血小板計(jì)數(shù)）是預(yù)防術(shù)中及術(shù)后出血并發(fā)癥的重要環(huán)節(jié)。對(duì)于有出血史、肝腎功能不全、長期服用抗凝或抗血小板藥物、惡性腫瘤、產(chǎn)科高危因素等患者，更應(yīng)進(jìn)行全面的凝血功能評(píng)估，必要時(shí)檢測(cè)TEG/ROTEM或血小板功能，以制定合理的止血策略。（二）出血性疾病的診斷與鑒別診斷對(duì)于不明原因的出血（如皮膚黏膜出血、關(guān)節(jié)肌肉出血、術(shù)后異常出血）患者，凝血功能檢測(cè)是明確診斷的基石。通過PT、APTT的初步篩查，可大致判斷出血是由于外源性、內(nèi)源性還是共同途徑的凝血因子異常所致，進(jìn)而指導(dǎo)下一步的特異性檢查。例如，APTT明顯延長而PT正常，提示可能為內(nèi)源性凝血因子缺陷（如血友病）或存在LA；PT延長而APTT正常則可能提示外源性凝血因子缺陷（如維生素K缺乏、早期肝?。＃ㄈ┭ㄐ约膊〉娘L(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與監(jiān)測(cè)血栓性疾?。ㄈ缟铎o脈血栓形成、肺栓塞、心肌梗死、腦卒中等）的發(fā)生與凝血功能亢進(jìn)、抗凝或纖溶系統(tǒng)異常密切相關(guān)。1.血栓風(fēng)險(xiǎn)篩查：某些指標(biāo)如D-二聚體（交聯(lián)纖維蛋白的降解產(chǎn)物）的檢測(cè)，在排除急性血栓性疾?。ㄈ缫伤品嗡ㄈ獶-二聚體正常）方面具有較高的陰性預(yù)測(cè)價(jià)值。但D-二聚體升高的特異性較低，需結(jié)合臨床判斷。2.抗凝治療監(jiān)測(cè)：口服華法林需定期監(jiān)測(cè)INR，使其維持在治療窗內(nèi)；普通肝素治療時(shí)多監(jiān)測(cè)APTT；新型口服抗凝藥（如達(dá)比加群、利伐沙班）雖通常無需常規(guī)監(jiān)測(cè)，但在特殊人群（如腎功能不全、高齡、合并用藥）中，部分藥物可通過特定凝血試驗(yàn)（如ECT、抗Xa因子活性）進(jìn)行監(jiān)測(cè)。（四）肝病與凝血功能障礙肝臟是大多數(shù)凝血因子（除因子Ⅷ外）和抗凝物質(zhì)（如抗凝血酶、蛋白C、蛋白S）合成的場(chǎng)所，同時(shí)也參與纖溶系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。肝功能嚴(yán)重受損時(shí)，常出現(xiàn)復(fù)雜的凝血功能紊亂，表現(xiàn)為PT、APTT延長，低纖維蛋白原血癥，血小板減少等。此時(shí)，單一的凝血指標(biāo)可能難以全面反映患者的出血或血栓風(fēng)險(xiǎn)，TEG等整體評(píng)估方法可能更有幫助。（五）產(chǎn)科相關(guān)凝血功能異常妊娠期及產(chǎn)褥期女性的凝血系統(tǒng)會(huì)發(fā)生生理性變化（高凝狀態(tài)），以預(yù)防分娩時(shí)出血。但也可能出現(xiàn)一些特發(fā)性凝血疾病，如妊娠期高血壓疾?。ㄓ绕涫亲影B前期）可能并發(fā)HELLP綜合征，嚴(yán)重時(shí)可進(jìn)展為彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）。DIC的診斷依賴于對(duì)凝血功能（PT、APTT、血小板計(jì)數(shù)、纖維蛋白原、D-二聚體、FDP等）的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和綜合判斷。三、凝血功能檢測(cè)的質(zhì)量控制與結(jié)果解讀注意事項(xiàng)凝血功能檢測(cè)的結(jié)果易受多種因素影響，嚴(yán)格的質(zhì)量控制是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的前提。這包括標(biāo)本采集（如避免溶血、脂血、過度抗凝）、運(yùn)輸與處理（及時(shí)離心、低溫保存）、試劑質(zhì)量、儀器校準(zhǔn)以及操作人員的技術(shù)熟練程度等。在結(jié)果解讀時(shí)，需注意以下幾點(diǎn)：1.結(jié)合臨床：任何異常的凝血檢測(cè)結(jié)果都必須結(jié)合患者的病史、癥狀、體征及其他檢查進(jìn)行綜合分析，不能僅憑單一指標(biāo)下結(jié)論。2.實(shí)驗(yàn)室參考范圍：不同實(shí)驗(yàn)室因試劑、儀器、檢測(cè)方法不同，參考范圍可能存在差異，解讀時(shí)應(yīng)以本實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的參考范圍為準(zhǔn)。3.動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)：對(duì)于病情變化快的患者（如DIC、創(chuàng)傷），動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)凝血指標(biāo)的變化趨勢(shì)，比單次檢測(cè)結(jié)果更有臨床意義。4.干擾因素：某些藥物（如抗生素、抗凝藥）、標(biāo)本狀態(tài)（如溶血、黃疸）可能干擾檢測(cè)結(jié)果，需加以識(shí)別。結(jié)語血液凝血功能檢測(cè)技術(shù)正朝著更快速、更精準(zhǔn)、更貼近臨床需求的方向發(fā)展。從傳統(tǒng)的凝血四項(xiàng)到能夠提供全局視野的TEG/ROTEM，從單一因子的檢測(cè)到多參數(shù)的聯(lián)合評(píng)估，這些技術(shù)