2025年實驗醫(yī)學(xué)細胞培養(yǎng)實驗操作考核答案及解析一、單項選題1.細胞培養(yǎng)過程中，常用的pH緩沖劑是（）A.Tris-HClB.HEPESC.PBSD.NaHCO?2.以下哪種細胞培養(yǎng)器皿適合大規(guī)模細胞培養(yǎng)（）A.培養(yǎng)皿B.培養(yǎng)瓶C.多孔板D.細胞工廠3.細胞傳代時，常用的消化液是（）A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.膠原蛋白酶D.纖維素酶4.細胞培養(yǎng)的最佳溫度一般為（）A.25℃B.30℃C.37℃D.40℃5.細胞培養(yǎng)中，防止微生物污染的重要措施不包括（）A.無菌操作B.使用抗生素C.定期更換培養(yǎng)液D.增加細胞接種密度6.培養(yǎng)細胞時，加入血清的主要作用不包括（）A.提供營養(yǎng)物質(zhì)B.促進細胞貼壁C.調(diào)節(jié)細胞代謝D.防止細胞污染7.細胞凍存時，常用的保護劑是（）A.DMSOB.甘油C.乙二醇D.葡萄糖8.以下哪種細胞不適合用貼壁培養(yǎng)法（）A.成纖維細胞B.上皮細胞C.淋巴細胞D.癌細胞9.細胞培養(yǎng)過程中，觀察細胞形態(tài)常用的儀器是（）A.電子顯微鏡B.倒置顯微鏡C.熒光顯微鏡D.相差顯微鏡10.細胞培養(yǎng)的基本條件不包括（）A.合適的培養(yǎng)基B.適宜的溫度C.充足的氧氣D.強烈的光照二、多項選題1.細胞培養(yǎng)過程中，可能導(dǎo)致細胞污染的因素有（）A.操作不規(guī)范B.培養(yǎng)液被污染C.培養(yǎng)器皿未消毒D.細胞本身攜帶病原體2.以下屬于細胞培養(yǎng)基本設(shè)備的有（）A.二氧化碳培養(yǎng)箱B.超凈工作臺C.離心機D.移液器3.細胞凍存和復(fù)蘇的原則包括（）A.慢凍快融B.快凍慢融C.凍存液中含有保護劑D.復(fù)蘇時迅速將細胞從液氮中取出放入37℃水浴中4.培養(yǎng)細胞時，需要注意的事項有（）A.定期觀察細胞形態(tài)和生長狀況B.及時更換培養(yǎng)液C.避免細胞過度生長D.嚴格遵守無菌操作原則5.以下哪些細胞培養(yǎng)技術(shù)可以用于細胞增殖實驗（）A.MTT法B.平板克隆形成實驗C.流式細胞術(shù)D.細胞劃痕實驗三、填空題1.細胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基有_____、_____等。2.細胞培養(yǎng)過程中，常用的無菌操作技術(shù)包括_____、_____等。3.細胞計數(shù)常用的方法有_____、_____等。4.細胞凋亡的檢測方法有_____、_____等。5.細胞培養(yǎng)中，常用的抗生素有_____、_____等。四、判斷題（√/×）1.細胞培養(yǎng)過程中，只要操作規(guī)范，就不會發(fā)生細胞污染。（）2.培養(yǎng)細胞時，血清的濃度越高越好。（）3.細胞凍存后，可以無限期保存。（）4.所有細胞都適合用貼壁培養(yǎng)法。（）5.細胞培養(yǎng)過程中，不需要對培養(yǎng)器皿進行清洗和消毒。（）6.培養(yǎng)細胞時，不需要考慮細胞的生長特性。（）7.細胞傳代時，消化時間越長越好。（）8.細胞培養(yǎng)過程中，不需要對培養(yǎng)環(huán)境進行監(jiān)測。（）9.細胞培養(yǎng)常用的氣體是氧氣和二氧化碳。（）10.細胞培養(yǎng)過程中，不需要對細胞進行鑒定。（）五、簡答題1.簡述細胞培養(yǎng)的基本步驟。2.簡述細胞污染的類型及預(yù)防措施。六、案例分析患者，男性，45歲，因“咳嗽、咳痰1個月，加重伴發(fā)熱1周”入院?；颊?個月前無明顯誘因出現(xiàn)咳嗽、咳痰，為白色黏液痰，量不多，無咯血、胸痛等不適。1周前咳嗽、咳痰加重，伴有發(fā)熱，體溫最高達38.5℃，無畏寒、寒戰(zhàn)等。自服“感冒藥”后癥狀無明顯緩解。入院查體：T38.2℃，P88次/分，R20次/分，BP120/80mmHg。神志清楚，精神可，全身皮膚黏膜無黃染，淺表淋巴結(jié)未觸及腫大。雙肺呼吸音粗，可聞及少量濕啰音。心率88次/分，律齊，各瓣膜聽診區(qū)未聞及雜音。腹軟，無壓痛及反跳痛，肝脾肋下未觸及。實驗室檢查：血常規(guī)：WBC12.5×10?/L，N0.85，L0.15。胸部X線片示：雙肺紋理增多、增粗，右下肺可見斑片狀陰影。問題1：請分析該患者的初步診斷及診斷依據(jù)。問題2：為明確診斷，還需要進一步做哪些檢查？試卷答案一、單項選題（答案）1.答案：B解析：HEPES是一種常用的pH緩沖劑，能有效維持細胞培養(yǎng)環(huán)境的pH穩(wěn)定。2.答案：D解析：細胞工廠適合大規(guī)模細胞培養(yǎng)，可提高生產(chǎn)效率。3.答案：A解析：胰蛋白酶是細胞傳代常用的消化液，能使細胞間的連接松散。4.答案：C解析：大多數(shù)細胞培養(yǎng)的最佳溫度為37℃，接近人體體溫。5.答案：D解析：增加細胞接種密度并不能防止微生物污染，反而可能增加污染的風險。6.答案：D解析：血清主要提供營養(yǎng)、促進貼壁和調(diào)節(jié)代謝等作用，不能防止細胞污染。7.答案：A解析：DMSO是細胞凍存常用的保護劑，能減少冰晶對細胞的損傷。8.答案：C解析：淋巴細胞懸浮生長，不適合貼壁培養(yǎng)法。9.答案：B解析：倒置顯微鏡可用于觀察培養(yǎng)細胞的形態(tài)和生長狀況。10.答案：D解析：細胞培養(yǎng)需要適宜的光照，但不是強烈光照。二、多項選題（答案）1.答案：ABCD解析：操作不規(guī)范、培養(yǎng)液污染、培養(yǎng)器皿未消毒、細胞本身攜帶病原體等都可能導(dǎo)致細胞污染。2.答案：ABCD解析：二氧化碳培養(yǎng)箱、超凈工作臺、離心機、移液器都是細胞培養(yǎng)的基本設(shè)備。3.答案：ACD解析：細胞凍存和復(fù)蘇的原則是慢凍快融，凍存液中含保護劑，復(fù)蘇時迅速將細胞從液氮中取出放入37℃水浴中。4.答案：ABCD解析：培養(yǎng)細胞時需定期觀察、及時換液、避免過度生長、嚴格無菌操作。5.答案：ABC解析：MTT法、平板克隆形成實驗、流式細胞術(shù)可用于細胞增殖實驗，細胞劃痕實驗主要用于研究細胞遷移。三、填空題（答案）1.答案：DMEM、RPMI-1640解析：這兩種是常見的細胞培養(yǎng)基。2.答案：火焰滅菌、過濾除菌解析：這是細胞培養(yǎng)常用的無菌操作技術(shù)。3.答案：血細胞計數(shù)板計數(shù)法、臺盼藍拒染法解析：這兩種是常用的細胞計數(shù)方法。4.答案：AnnexinV-FITC/PI雙染法、TUNEL法解析：這兩種是常見的細胞凋亡檢測方法。5.答案：青霉素、鏈霉素解析：這兩種是細胞培養(yǎng)中常用的抗生素。四、判斷題（答案）1.答案：×解析：即使操作規(guī)范，也可能因其他因素導(dǎo)致細胞污染。2.答案：×解析：血清濃度過高可能對細胞產(chǎn)生不良影響。3.答案：×解析：細胞凍存后有一定的保存期限。4.答案：×解析：有些細胞不適合貼壁培養(yǎng)。5.答案：×解析：培養(yǎng)器皿需要清洗和消毒。6.答案：×解析：需要考慮細胞生長特性選擇合適培養(yǎng)方法。7.答案：×解析：消化時間過長會損傷細胞。8.答案：×解析：需要監(jiān)測培養(yǎng)環(huán)境的溫度、濕度等。9.答案：√解析：細胞培養(yǎng)常用氧氣和二氧化碳。10.答案：×解析：有時需要對細胞進行鑒定。五、簡答題（答案）1.答：細胞培養(yǎng)基本步驟包括：準備工作（清洗、消毒培養(yǎng)器皿等）、配制培養(yǎng)基、細胞接種、培養(yǎng)、觀察、傳代、凍存等。2.答：細胞污染類型有細菌污染、真菌污染、支原體污染等。預(yù)防措施包括：嚴格無菌操