一、課程基本信息（一）課程名稱藥物分析（PharmaceuticalAnalysis）（二）課程性質(zhì)專業(yè)核心課程（藥學(xué)類專業(yè)）（三）學(xué)分與學(xué)時(shí)3學(xué)分（理論教學(xué)2學(xué)分/32學(xué)時(shí)，實(shí)驗(yàn)教學(xué)1學(xué)分/16學(xué)時(shí)）（四）適用專業(yè)藥學(xué)、藥物制劑、臨床藥學(xué)、中藥學(xué)（部分院校）（五）先修課程分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、藥物化學(xué)、儀器分析二、教學(xué)目標(biāo)（一）知識(shí)目標(biāo)1.掌握藥物分析的基本概念、任務(wù)與發(fā)展趨勢(shì)；2.熟悉《中國(guó)藥典》及其他國(guó)家藥典（USP、EP、JP）的結(jié)構(gòu)與應(yīng)用；3.掌握藥物鑒別、檢查、含量測(cè)定的常用方法（化學(xué)法、光譜法、色譜法等）及原理；4.掌握化學(xué)藥物（芳酸類、胺類、巴比妥類、甾體類等）、中藥、生物藥物（蛋白質(zhì)、多肽、核酸）、藥物制劑（片劑、注射劑、緩控釋制劑）的質(zhì)量控制要點(diǎn)與分析方法；5.了解藥物分析中的新技術(shù)（質(zhì)譜聯(lián)用、毛細(xì)管電泳、生物芯片等）。（二）能力目標(biāo)1.能獨(dú)立完成藥物的鑒別、檢查、含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)（如阿司匹林的鑒別與滴定、對(duì)乙酰氨基酚片的HPLC測(cè)定）；2.能進(jìn)行分析方法驗(yàn)證（線性、精密度、準(zhǔn)確度、專屬性等參數(shù)的考察）；3.能解讀藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（如《中國(guó)藥典》正文的“鑒別”“檢查”“含量測(cè)定”項(xiàng)）；4.能解決藥物分析中的常見(jiàn)問(wèn)題（如輔料干擾的消除、雜質(zhì)峰的識(shí)別）。（三）素質(zhì)目標(biāo)1.培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度（如實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性、準(zhǔn)確性）；2.樹(shù)立職業(yè)道德意識(shí)（如遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)范、保證藥品質(zhì)量安全）；3.提升創(chuàng)新思維（如新技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用探索）。三、教學(xué)內(nèi)容與學(xué)時(shí)分配（一）理論教學(xué)（32學(xué)時(shí)）章節(jié)教學(xué)內(nèi)容學(xué)時(shí)第一章緒論1.藥物分析的定義與任務(wù)；2.發(fā)展趨勢(shì)；3.《中國(guó)藥典》結(jié)構(gòu)與應(yīng)用；4.其他國(guó)家藥典簡(jiǎn)介2第二章藥物分析的基本方法1.鑒別試驗(yàn)（化學(xué)、光譜、色譜鑒別）；2.檢查項(xiàng)目（一般/特殊雜質(zhì)）；3.含量測(cè)定方法（化學(xué)法、儀器法）；4.方法驗(yàn)證6第三章化學(xué)藥物分析1.芳酸類（阿司匹林、布洛芬）；2.胺類（普魯卡因、對(duì)乙酰氨基酚）；3.巴比妥類（苯巴比妥）；4.甾體類（氫化可的松）8第四章中藥分析1.中藥特點(diǎn)與質(zhì)量控制要點(diǎn)；2.鑒別（性狀、顯微、理化）；3.檢查（水分、灰分、重金屬）；4.含量測(cè)定（HPLC、GC）6第五章生物藥物分析1.生物藥物特點(diǎn)（蛋白質(zhì)、多肽、核酸）；2.鑒別（電泳、免疫法）；3.檢查（純度、微生物）；4.含量測(cè)定（紫外、HPLC）4第六章藥物制劑分析1.制劑特點(diǎn)與常規(guī)檢查（崩解時(shí)限、溶出度）；2.含量測(cè)定方法調(diào)整（消除輔料干擾）；3.典型制劑分析（片劑、注射劑）4第七章新技術(shù)應(yīng)用1.質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS、GC-MS）；2.毛細(xì)管電泳（CE）；3.過(guò)程分析技術(shù)（PAT）2（二）實(shí)驗(yàn)教學(xué)（16學(xué)時(shí)）實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)一阿司匹林的鑒別與含量測(cè)定掌握酯類藥物的鑒別（三氯化鐵反應(yīng)）與中和滴定法含量測(cè)定4實(shí)驗(yàn)二葡萄糖的雜質(zhì)檢查掌握一般雜質(zhì)（氯化物、硫酸鹽、重金屬）的檢查原理與操作4實(shí)驗(yàn)三對(duì)乙酰氨基酚片的HPLC測(cè)定掌握片劑含量測(cè)定的HPLC方法（消除輔料干擾）與標(biāo)示量百分含量計(jì)算4實(shí)驗(yàn)四某藥物的方法驗(yàn)證掌握方法驗(yàn)證的核心參數(shù)（線性、精密度、準(zhǔn)確度）與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)4四、教學(xué)方法1.課堂講授：采用案例教學(xué)（如“某抗生素的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定”），結(jié)合多媒體課件（含藥典截圖、實(shí)驗(yàn)操作視頻）；2.實(shí)驗(yàn)教學(xué)：分組操作（4-5人/組），教師現(xiàn)場(chǎng)指導(dǎo)（重點(diǎn)講解滴定終點(diǎn)判斷、HPLC進(jìn)樣操作），實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求包含“結(jié)果討論”（如雜質(zhì)檢查結(jié)果異常的原因分析）；3.研討課：每學(xué)期2次，主題包括“《中國(guó)藥典》2020版修訂解讀”“生物藥物分析的挑戰(zhàn)與對(duì)策”，學(xué)生分組匯報(bào)，教師點(diǎn)評(píng)；4.線上教學(xué)：利用中國(guó)大學(xué)MOOC（如南京大學(xué)《藥物分析》課程）補(bǔ)充知識(shí)點(diǎn)（如“質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用”），布置線上作業(yè)（如“查找某藥物的USP標(biāo)準(zhǔn)”）。五、考核方式考核環(huán)節(jié)考核內(nèi)容占比平時(shí)成績(jī)考勤（10%）、作業(yè)（10%，如“簡(jiǎn)述藥物鑒別試驗(yàn)的要求”）、實(shí)驗(yàn)報(bào)告（10%）30%中期考試筆試（選擇題、簡(jiǎn)答題，重點(diǎn)考察前4章內(nèi)容）20%期末考試筆試（40%，含計(jì)算題、綜合分析題）+實(shí)驗(yàn)操作（10%，如“HPLC進(jìn)樣與數(shù)據(jù)處理”）50%高校藥物分析課程輔導(dǎo)資料一、章節(jié)重點(diǎn)總結(jié)（一）緒論核心知識(shí)點(diǎn)：藥物分析的任務(wù)（鑒別、檢查、含量測(cè)定、穩(wěn)定性考察）；《中國(guó)藥典》的結(jié)構(gòu)（一部：中藥；二部：化學(xué)藥；三部：生物藥；四部：通則）；凡例的作用（解釋藥典術(shù)語(yǔ)，統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)）。關(guān)鍵考點(diǎn)：《中國(guó)藥典》的正文結(jié)構(gòu)（鑒別、檢查、含量測(cè)定、貯藏）；其他國(guó)家藥典的縮寫(xiě)（USP：美國(guó)藥典；EP：歐洲藥典；JP：日本藥典）。（二）藥物分析的基本方法鑒別試驗(yàn)：要求（專屬性、靈敏度、簡(jiǎn)便性）；常用方法（化學(xué)鑒別：如重氮化-偶合反應(yīng)（胺類藥物）；光譜鑒別：如紫外分光光度法（對(duì)乙酰氨基酚的λmax=257nm）；色譜鑒別：如HPLC保留時(shí)間比對(duì)）。檢查項(xiàng)目：一般雜質(zhì)（氯化物：硝酸銀試液；硫酸鹽：氯化鋇試液；重金屬：硫代乙酰胺法）；特殊雜質(zhì)（如阿司匹林中的“游離水楊酸”：HPLC法檢查）。含量測(cè)定：化學(xué)法（中和滴定法：阿司匹林；亞硝酸鈉滴定法：普魯卡因）；儀器法（HPLC：片劑；紫外分光光度法：對(duì)乙酰氨基酚）。方法驗(yàn)證：核心參數(shù)（線性：r≥0.999；精密度：RSD≤2%；準(zhǔn)確度：回收率98%-102%；專屬性：雜質(zhì)峰與主峰分離度≥1.5）。（三）化學(xué)藥物分析芳酸類藥物（阿司匹林）：結(jié)構(gòu)特點(diǎn)（芳環(huán)+酯基）；鑒別（水解后三氯化鐵反應(yīng)：紫堇色）；檢查（游離水楊酸：HPLC法，限量0.1%）；含量測(cè)定（中和滴定法：1mol阿司匹林消耗1molNaOH）。胺類藥物（對(duì)乙酰氨基酚）：結(jié)構(gòu)特點(diǎn)（芳胺+酚羥基）；鑒別（三氯化鐵反應(yīng)：藍(lán)紫色）；檢查（對(duì)氨基酚：HPLC法，限量0.005%）；含量測(cè)定（紫外分光光度法：λ=257nm）。巴比妥類藥物（苯巴比妥）：結(jié)構(gòu)特點(diǎn)（丙二酰脲環(huán)）；鑒別（銀鹽反應(yīng)：白色沉淀；銅鹽反應(yīng)：紫色）；含量測(cè)定（銀量法：1mol苯巴比妥消耗1molAgNO?）。（四）中藥分析中藥特點(diǎn)：成分復(fù)雜（多組分）、基質(zhì)干擾大（如多糖、鞣質(zhì)）、質(zhì)量差異大（產(chǎn)地、炮制工藝）。鑒別方法：性狀鑒別（如“黃連”的“雞爪狀”形態(tài)）；顯微鑒別（如“大黃”的“草酸鈣簇晶”）；理化鑒別（如“丹參”的薄層色譜法：與丹參酮ⅡA對(duì)照品比對(duì)）。檢查項(xiàng)目：水分（烘干法，限量≤15%）；灰分（總灰分：≤10%；酸不溶性灰分：≤1%）；重金屬（硫代乙酰胺法，限量0.001%）。含量測(cè)定：指標(biāo)成分選擇（有效成分：如“人參”中的人參皂苷Rg1；毒性成分：如“馬錢子”中的士的寧）；常用方法（HPLC：中藥飲片；GC：揮發(fā)油類中藥）。（五）生物藥物分析生物藥物特點(diǎn)：分子量較大（如胰島素：5808Da）、結(jié)構(gòu)復(fù)雜（如蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)）、穩(wěn)定性差（易降解）。蛋白質(zhì)藥物（胰島素）：鑒別（電泳法：SDS，與標(biāo)準(zhǔn)品遷移率一致）；檢查（分子量分布：凝膠過(guò)濾色譜法）；含量測(cè)定（HPLC法：反相色譜分離）。核酸藥物（質(zhì)粒DNA）：鑒別（瓊脂糖凝膠電泳：條帶位置）；檢查（純度：A260/A280比值，≥1.8）；含量測(cè)定（紫外分光光度法：A260=1對(duì)應(yīng)50μg/mlDNA）。（六）藥物制劑分析制劑特點(diǎn)：處方復(fù)雜（含輔料：如片劑中的淀粉、硬脂酸鎂）、劑型多樣（片劑、注射劑、緩控釋制劑）。常規(guī)檢查：崩解時(shí)限（片劑：≤15分鐘；膠囊劑：≤30分鐘）；溶出度（難溶性藥物：如阿司匹林腸溶片，≥85%）；含量均勻度（小劑量制劑：如地高辛片，A+1.8S≤15）。含量測(cè)定調(diào)整：消除輔料干擾（如片劑：用甲醇提取藥物，過(guò)濾除去淀粉；注射劑：用超濾除去蛋白質(zhì)）；標(biāo)示量百分含量計(jì)算（=（實(shí)測(cè)含量/標(biāo)示量）×100%，限度：90%-110%）。（七）藥物分析中的新技術(shù)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LC-MS）：用于藥物代謝產(chǎn)物鑒定（如某藥物的體內(nèi)代謝物分析）、雜質(zhì)結(jié)構(gòu)解析（如未知雜質(zhì)的分子量測(cè)定）；毛細(xì)管電泳（CE）：用于蛋白質(zhì)、多肽的分離（如胰島素的異構(gòu)體分離）；過(guò)程分析技術(shù)（PAT）：用于生產(chǎn)過(guò)程中的實(shí)時(shí)質(zhì)量控制（如片劑壓制過(guò)程中的硬度監(jiān)測(cè)）。二、習(xí)題示例（一）選擇題1.《中國(guó)藥典》中，收載生物藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的部分是（）A.一部B.二部C.三部D.四部答案：C2.藥物鑒別試驗(yàn)中，專屬性最強(qiáng)的方法是（）A.化學(xué)鑒別B.紫外分光光度法C.HPLC法D.紅外分光光度法答案：C（HPLC法通過(guò)保留時(shí)間與對(duì)照品比對(duì)，專屬性優(yōu)于光譜法）3.下列雜質(zhì)中，屬于特殊雜質(zhì)的是（）A.氯化物B.硫酸鹽C.游離水楊酸D.重金屬答案：C（特殊雜質(zhì)是藥物本身特有的雜質(zhì)，如阿司匹林中的游離水楊酸）（二）簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述藥物分析的任務(wù)。答案：藥物分析的核心任務(wù)是“保證藥品質(zhì)量”，具體包括：（1）鑒別藥物的真?zhèn)危ㄈ绨⑺酒チ值娜然F反應(yīng)）；（2）檢查藥物的純度（如葡萄糖中的重金屬檢查）；（3）測(cè)定藥物的含量（如對(duì)乙酰氨基酚片的HPLC測(cè)定）；（4）考察藥物的穩(wěn)定性（如維生素C注射液的降解研究）；（5）研究生物利用度與生物等效性（如仿制藥與原研藥的吸收比較）。2.簡(jiǎn)述《中國(guó)藥典》中“溶出度”的定義與測(cè)定意義。答案：溶出度是指藥物從片劑、膠囊劑等固體制劑中溶出的速度和程度。測(cè)定意義包括：（1）評(píng)價(jià)難溶性藥物制劑的質(zhì)量（如硝苯地平片，溶出度低會(huì)導(dǎo)致生物利用度差）；（2）預(yù)測(cè)藥物的生物利用度（溶出度與生物利用度相關(guān)性好的制劑，可替代生物等效性試驗(yàn)）；（3）控制制劑的工藝一致性（如片劑的壓制壓力過(guò)大，會(huì)降低溶出度）。（三）計(jì)算題用紫外分光光度法測(cè)定某維生素C注射液的含量。已知標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為20μg/ml，吸光度（A標(biāo)）為0.400；供試品溶液經(jīng)稀釋10倍后，吸光度（A供）為0.380。注射液的標(biāo)示量為100mg/2ml，求該注射液的標(biāo)示量百分含量（%）。解：（1）根據(jù)朗伯-比爾定律，C供=（A供/A標(biāo)）×C標(biāo)=（0.380/0.400）×20=19μg/ml；（2）供試品原始濃度=19×10=190μg/ml=0.19mg/ml；（3）假設(shè)供試品溶解體積為100ml（實(shí)驗(yàn)中通常為100ml），則總質(zhì)量=0.19×100=19mg=0.019g；（4）標(biāo)示量百分含量=（0.019g/0.1g）×100%=19%？（注：此處需修正，正確計(jì)算應(yīng)為：注射液的標(biāo)示量為100mg/2ml，即50mg/ml。供試品溶液的濃度為190μg/ml=0.19mg/ml，稀釋倍數(shù)為10，所以原始濃度為0.19×10=1.9mg/ml。標(biāo)示量百分含量=（1.9mg/ml/50mg/ml）×100%=3.8%？（注：實(shí)際實(shí)驗(yàn)中，維生素C注射液的濃度通常為50mg/ml或100mg/ml，此處假設(shè)標(biāo)示量為100mg/2ml（即50mg/ml），供試品溶液的濃度為190μg/ml=0.19mg/ml，稀釋倍數(shù)為10，所以原始濃度為0.19×10=1.9mg/ml。標(biāo)示量百分含量=（1.9/50）×100%=3.8%？這顯然不符合實(shí)際，可能是稀釋倍數(shù)的假設(shè)錯(cuò)誤。正確的稀釋倍數(shù)應(yīng)為：取維生素C注射液1ml，加蒸餾水稀釋至100ml，此時(shí)稀釋倍數(shù)為100倍。假設(shè)供試品溶液的吸光度為0.380，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為20μg/ml，吸光度為0.400，則供試品溶液的濃度=（0.380/0.400）×20=19μg/ml。原始濃度=19×100=1900μg/ml=1.9mg/ml。標(biāo)示量為100mg/2ml=50mg/ml，所以標(biāo)示量百分含量=（1.9/50）×100%=3.8%？這顯然過(guò)低，可能是示例中的數(shù)據(jù)設(shè)置不合理。此處僅作方法演示，實(shí)際實(shí)驗(yàn)中需根據(jù)具體稀釋倍數(shù)調(diào)整。）正確計(jì)算邏輯：標(biāo)示量百分含量=（實(shí)測(cè)濃度×稀釋倍數(shù)×溶解體積）/（標(biāo)示量×取樣量）×100%（注：因示例數(shù)據(jù)可能存在不合理，建議教師在教學(xué)中調(diào)整為更符合實(shí)際的數(shù)值，如標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為50μg/ml，吸光度為0.500，供試品溶液吸光度為0.450，稀釋倍數(shù)為20，標(biāo)示量為100mg/10ml（即10mg/ml），則計(jì)算如下：C供=（0.450/0.500）×50=45μg/ml；原始濃度=45×20=900μg/ml=0.9mg/ml；標(biāo)示量百分含量=（0.9/10）×100%=90%（符合規(guī)定，限度為90%-110%）。）三、實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)（一）實(shí)驗(yàn)一阿司匹林的鑒別與含量測(cè)定1.實(shí)驗(yàn)原理鑒別：阿司匹林（乙酰水楊酸）具有酯結(jié)構(gòu)，水解后生成水楊酸（含酚羥基），與三氯化鐵反應(yīng)生成紫堇色絡(luò)合物；含量測(cè)定：阿司匹林與氫氧化鈉反應(yīng)（1:1），用鹽酸滴定剩余的氫氧化鈉，計(jì)算含量。2.實(shí)驗(yàn)材料試劑：阿司匹林樣品、三氯化鐵試液、氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.1mol/L）、鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.1mol/L）、酚酞指示劑、中性乙醇（對(duì)酚酞中性）；儀器：滴定管、移液管、燒杯、水浴鍋。3.實(shí)驗(yàn)步驟（1）鑒別：取阿司匹林樣品0.1g，加乙醇10ml溶解，加三氯化鐵試液1滴，觀察顏色變化（應(yīng)為紫堇色）；（2）含量測(cè)定：取阿司匹林樣品0.4g（精密稱定），加中性乙醇20ml溶解，加酚酞指示劑3滴，用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至粉紅色（記錄消耗體積V1）；再加氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液10ml，煮沸10分鐘，放冷，用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至紅色褪去（記錄消耗體積V2）；計(jì)算阿司匹林的含量（%）。4.注意事項(xiàng)中性乙醇的制備：加酚酞指示劑，用氫氧化鈉試液調(diào)至微紅色；煮沸時(shí)間要足夠（10分鐘），確保阿司匹林完全水解；滴定終點(diǎn)判斷：粉紅色持續(xù)30秒不褪色。（二）實(shí)驗(yàn)二葡萄糖的雜質(zhì)檢查1.實(shí)驗(yàn)原理氯化物檢查：硝酸酸性條件下，Cl?與AgNO?反應(yīng)生成白色AgCl沉淀，與標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液比較；硫酸鹽檢查：鹽酸酸性條件下，SO?2?與BaCl?反應(yīng)生成白色BaSO?沉淀，與標(biāo)準(zhǔn)K?SO?溶液比較；重金屬檢查：硫代乙酰胺法（pH3.5），H?S與Pb2?反應(yīng)生成棕色硫化物沉淀，與標(biāo)準(zhǔn)Pb溶液比較。2.實(shí)驗(yàn)材料試劑：葡萄糖樣品、標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液（10μgCl?/ml）、標(biāo)準(zhǔn)K?SO?溶液（100μgSO?2?/ml）、標(biāo)準(zhǔn)Pb溶液（10μgPb2?/ml）、硝酸銀試液、氯化鋇試液、硫代乙酰胺試液、醋酸鹽緩沖液（pH3.5）；儀器：比色管（25ml）、移液管、燒杯。3.實(shí)驗(yàn)步驟（1）氯化物檢查：取葡萄糖0.5g，加蒸餾水25ml溶解，加硝酸1ml，搖勻，加硝酸銀試液1ml，搖勻，放置5分鐘，與標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液5ml（含50μgCl?）制成的對(duì)照液比較，不得更濃（限量0.01%）；（2）硫酸鹽檢查：取葡萄糖1.0g，加蒸餾水40ml溶解，加鹽酸1ml，搖勻，加氯化鋇試液5ml，搖勻，放置10分鐘，與標(biāo)準(zhǔn)K?SO?溶液1ml（含100μgSO?2?）制成的對(duì)照液比較，不得更濃（限量0.01%）；（3）重金屬檢查：取葡萄糖1.0g，加蒸餾水20ml溶解，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，搖勻，加硫代乙酰胺試液2ml，搖勻，放置2分鐘，與標(biāo)準(zhǔn)Pb溶液1ml（含10μgPb2?）制成的對(duì)照液比較，不得更深（限量0.001%）。4.注意事項(xiàng)比色管應(yīng)配對(duì)