中藥材鑒定畢業(yè)實驗報告樣本實驗名稱：市售黃芪（*Astragalusmembranaceus*）真?zhèn)渭百|(zhì)量鑒定實驗班級：20XX級中藥學(xué)1班實驗小組：第3組實驗成員：張三、李四、王五指導(dǎo)教師：趙六實驗日期：202X年5月10日-202X年6月20日摘要本實驗以市售“黃芪”樣品為研究對象，采用性狀鑒定、顯微鑒定、理化鑒定（薄層色譜法、高效液相色譜法）結(jié)合《中國藥典》（2020版）標準，對樣品的真?zhèn)渭百|(zhì)量進行系統(tǒng)鑒定。結(jié)果表明：1號樣品（甘肅產(chǎn)正品）符合黃芪的性狀、顯微及理化特征，黃芪甲苷含量為0.06%（符合藥典≥0.04%的要求）；2號樣品（市售疑似偽品）性狀與正品差異顯著，顯微結(jié)構(gòu)無黃芪特征性纖維束，薄層色譜未檢出黃芪甲苷，判定為偽品。本實驗為黃芪的市場監(jiān)管及臨床用藥安全提供了技術(shù)參考。1引言1.1研究背景黃芪為豆科植物蒙古黃芪（*Astragalusmembranaceus*var.*mongholicus*）或膜莢黃芪（*A.membranaceus*）的干燥根，是我國傳統(tǒng)常用中藥材，具有補氣升陽、固表止汗、利水消腫等功效（《中國藥典》2020版）。近年來，由于市場需求增長，黃芪偽品（如紫花苜蓿根、白香草木樨根）及劣品（如硫熏、摻雜）泛濫，嚴重影響用藥安全及療效。因此，建立準確、高效的黃芪鑒定方法具有重要意義。1.2實驗?zāi)康模?）通過性狀鑒定區(qū)分黃芪正品與偽品的外觀差異；（2）利用顯微鑒定識別黃芪的特征性組織構(gòu)造；（3）采用理化鑒定（薄層色譜、含量測定）驗證樣品的真實性及質(zhì)量。2材料與方法2.1實驗材料樣品編號樣品來源標注名稱備注S1甘肅定西某種植基地黃芪正品對照（經(jīng)指導(dǎo)教師鑒定）S2本地藥材市場黃芪疑似偽品對照品：黃芪甲苷（中國食品藥品檢定研究院，批號：____）；試劑：乙醇（分析純）、濃硫酸（分析純）、甲醇（色譜純）、乙腈（色譜純）、香草醛試液（自制）；儀器：生物顯微鏡（OlympusCX31）、薄層色譜儀（CAMAGTLCScanner3）、高效液相色譜儀（Agilent1260）、電子天平（梅特勒-托利多AL204）、超聲波清洗器（KQ-500DE）。2.2實驗方法2.2.1性狀鑒定按照《中國藥典》2020版黃芪項下“性狀”描述，觀察樣品的形狀、顏色、表面特征、質(zhì)地、斷面、氣味，并記錄差異。2.2.2顯微鑒定（1）橫切片制備：取樣品根段，用石蠟切片法制備橫切片（厚度8-10μm），番紅-固綠染色后，顯微鏡下觀察組織構(gòu)造；（2）粉末制片：取樣品粉末（過40目篩），用蒸餾水制片，觀察細胞形態(tài)及內(nèi)含物；（3）特征記錄：重點觀察木栓層、皮層、韌皮部纖維束、形成層、木質(zhì)部導(dǎo)管等結(jié)構(gòu)。2.2.3理化鑒定（1）薄層色譜法（TLC）：參照《中國藥典》2020版黃芪項下“薄層色譜”方法：供試品溶液制備：取樣品粉末2g，加甲醇20mL，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至2mL，作為供試品溶液；對照品溶液制備：取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液；展開與顯色：吸取上述兩種溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13:7:2）的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，置日光下檢視。（2）高效液相色譜法（HPLC）測定黃芪甲苷含量：色譜條件：C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相為乙腈-水（32:68）；檢測波長203nm；流速1.0mL/min；柱溫30℃；供試品溶液制備：取樣品粉末（過60目篩）1g，精密稱定，加甲醇50mL，加熱回流2小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10mL溶解，用水飽和的正丁醇提取3次（20mL、20mL、10mL），合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌2次（20mL、10mL），棄去氨試液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；對照品溶液制備：取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液；測定：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定峰面積，計算黃芪甲苷含量。3結(jié)果與分析3.1性狀鑒定結(jié)果特征S1（正品）S2（市售樣品）形狀圓柱形，略分枝，長10-30cm圓柱形，分枝多，長5-15cm表面黃白色或淡棕褐色，有縱皺紋及橫長皮孔灰棕色，表面粗糙，有不規(guī)則裂紋質(zhì)地硬而韌，不易折斷脆，易折斷斷面纖維性強，皮部黃白色，木部淡黃色，有放射狀紋理纖維性弱，皮部窄，木部灰白色，無放射狀紋理氣味氣微，味微甜，嚼之有豆腥味氣微，味淡，無豆腥味分析：S2樣品的形狀、表面特征、質(zhì)地、斷面及氣味均與《中國藥典》黃芪性狀描述不符，初步判斷為偽品。3.2顯微鑒定結(jié)果3.2.1橫切片特征S1（正品）：木栓層為數(shù)列細胞，皮層窄；韌皮部有多數(shù)纖維束，與篩管群交替排列；形成層成環(huán)；木質(zhì)部導(dǎo)管單個或成群，排列成放射狀；薄壁細胞含淀粉粒（圖1）。S2（市售樣品）：木栓層細胞排列疏松，皮層寬；韌皮部無纖維束；形成層不明顯；木質(zhì)部導(dǎo)管散在，無放射狀排列；薄壁細胞不含淀粉粒（圖2）。3.2.2粉末特征S1（正品）：纖維成束，壁厚，木化；導(dǎo)管為具緣紋孔導(dǎo)管，直徑____μm；淀粉粒單粒，類圓形或橢圓形，直徑2-10μm（圖3）。S2（市售樣品）：無纖維束；導(dǎo)管為網(wǎng)紋導(dǎo)管，直徑10-50μm；無淀粉粒（圖4）。分析：S2樣品缺乏黃芪特征性的韌皮部纖維束、放射狀排列的木質(zhì)部導(dǎo)管及淀粉粒，顯微結(jié)構(gòu)與正品差異顯著，進一步支持偽品判斷。3.3理化鑒定結(jié)果3.3.1薄層色譜（TLC）S1（正品）：在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的棕褐色斑點（圖5）；S2（市售樣品）：未顯示與對照品對應(yīng)的斑點（圖6）。分析：S2樣品未檢出黃芪甲苷，不符合《中國藥典》黃芪薄層色譜規(guī)定，判定為偽品。3.3.2高效液相色譜（HPLC）含量測定S1（正品）：黃芪甲苷含量為0.06%，符合《中國藥典》≥0.04%的要求；S2（市售樣品）：未檢出黃芪甲苷（含量<0.01%）。分析：S2樣品黃芪甲苷含量遠低于藥典標準，質(zhì)量不符合要求。4結(jié)論（1）真?zhèn)舞b定：市售樣品（S2）的性狀、顯微及理化特征均與《中國藥典》黃芪項下規(guī)定不符，未檢出黃芪特征性成分黃芪甲苷，判定為偽品（推測為紫花苜蓿*Medicagosativa*的根）。（2）質(zhì)量評價：正品樣品（S1）的性狀、顯微及理化特征符合藥典規(guī)定，黃芪甲苷含量為0.06%，質(zhì)量合格。（3）建議：市場監(jiān)管部門應(yīng)加強黃芪藥材的質(zhì)量檢測，杜絕偽品流入市場；臨床用藥時應(yīng)選擇來源明確、質(zhì)量合格的黃芪藥材。5參考文獻[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（2020版）一部[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020：____.[2]王崢濤，徐珞珊.中藥鑒定學(xué)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2016：____.[3]李萍，王強.中藥質(zhì)量標準分析方法驗證指導(dǎo)原則實施手冊[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2017：____.[4]張雪梅，李建明.黃芪偽品紫花苜蓿根的鑒別研究[J].中藥材，2019，42（5）：____.6附錄（1）圖1：S1（正品）黃芪根橫切片顯微照片（×100）；（2）圖2：S2（市售樣品）根橫切片顯微照片（×100）；（3）圖3：S1（正品）黃芪粉末顯微照片（×400）；（4）