pcr上崗證考試題及答案

一、單項選擇題（每題2分，共10題）

1.PCR技術(shù)中，用于擴增DNA的酶是：

A.限制性內(nèi)切酶

B.逆轉(zhuǎn)錄酶

C.聚合酶

D.連接酶

答案：C

2.PCR反應(yīng)中，變性溫度通常設(shè)置為：

A.4°C

B.25°C

C.94°C

D.37°C

答案：C

3.下列哪種物質(zhì)不是PCR反應(yīng)體系中必需的？

A.模板DNA

B.引物

C.聚合酶

D.抗生素

答案：D

4.PCR產(chǎn)物的電泳分析中，通常使用的染色劑是：

A.伊紅

B.甲基綠

C.乙酰胺基苯甲酰胺

D.金胺O

答案：C

5.PCR技術(shù)中，用于檢測PCR產(chǎn)物特異性的常用方法是：

A.DNA測序

B.DNA雜交

C.DNA電泳

D.DNA合成

答案：B

6.PCR反應(yīng)中，延伸溫度的設(shè)置主要取決于：

A.模板DNA的長度

B.引物的序列

C.聚合酶的種類

D.反應(yīng)體系的體積

答案：C

7.PCR技術(shù)中，用于提高特異性的措施不包括：

A.使用高純度的引物

B.使用高純度的模板DNA

C.使用低純度的聚合酶

D.使用熱啟動聚合酶

答案：C

8.PCR產(chǎn)物的純化方法中，不包括：

A.乙醇沉淀

B.柱層析

C.凝膠電泳回收

D.離心分離

答案：D

9.PCR技術(shù)中，用于檢測DNA聚合酶活性的常用方法是：

A.PCR擴增

B.酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）

C.DNA測序

D.凝膠電泳

答案：A

10.PCR產(chǎn)物的定量分析中，不常用的方法是：

A.紫外分光光度計測定

B.熒光定量

C.凝膠電泳

D.實時定量PCR

答案：C

二、多項選擇題（每題2分，共10題）

1.PCR技術(shù)中，以下哪些因素會影響PCR產(chǎn)物的產(chǎn)量？

A.模板DNA的純度

B.引物的濃度

C.聚合酶的活性

D.反應(yīng)體系的體積

答案：ABC

2.PCR反應(yīng)體系中，以下哪些物質(zhì)是必須的？

A.模板DNA

B.引物

C.聚合酶

D.核酸染料

答案：ABC

3.PCR產(chǎn)物的純化方法包括：

A.乙醇沉淀

B.柱層析

C.凝膠電泳回收

D.離心分離

答案：ABC

4.PCR技術(shù)中，以下哪些措施可以提高特異性？

A.使用高純度的引物

B.使用高純度的模板DNA

C.使用低純度的聚合酶

D.使用熱啟動聚合酶

答案：ABD

5.PCR產(chǎn)物的檢測方法包括：

A.DNA測序

B.DNA雜交

C.DNA電泳

D.DNA合成

答案：ABC

6.PCR技術(shù)中，以下哪些因素會影響延伸溫度的設(shè)置？

A.模板DNA的長度

B.引物的序列

C.聚合酶的種類

D.反應(yīng)體系的體積

答案：BC

7.PCR產(chǎn)物的定量分析方法包括：

A.紫外分光光度計測定

B.熒光定量

C.凝膠電泳

D.實時定量PCR

答案：ABD

8.PCR技術(shù)中，以下哪些物質(zhì)不是必需的？

A.模板DNA

B.引物

C.抗生素

D.聚合酶

答案：C

9.PCR產(chǎn)物的純化后，以下哪些檢測方法可用于驗證純度？

A.紫外分光光度計測定

B.凝膠電泳

C.實時定量PCR

D.DNA測序

答案：AB

10.PCR技術(shù)中，以下哪些因素會影響PCR產(chǎn)物的特異性？

A.引物的序列

B.聚合酶的種類

C.反應(yīng)體系的體積

D.引物的濃度

答案：ABD

三、判斷題（每題2分，共10題）

1.PCR技術(shù)是一種體外DNA擴增技術(shù)。（對）

2.PCR反應(yīng)中，變性溫度通常設(shè)置為56°C。（錯）

3.PCR反應(yīng)體系中，聚合酶是必需的。（對）

4.PCR產(chǎn)物的電泳分析中，通常使用的染色劑是甲基綠。（錯）

5.PCR技術(shù)中，DNA測序是一種檢測PCR產(chǎn)物特異性的方法。（對）

6.PCR反應(yīng)中，延伸溫度的設(shè)置主要取決于模板DNA的長度。（錯）

7.PCR技術(shù)中，使用低純度的聚合酶可以提高特異性。（錯）

8.PCR產(chǎn)物的純化方法中，包括離心分離。（錯）

9.PCR技術(shù)中，DNA合成是一種檢測DNA聚合酶活性的常用方法。（錯）

10.PCR產(chǎn)物的定量分析中，凝膠電泳是一種常用的方法。（錯）

四、簡答題（每題5分，共4題）

1.簡述PCR技術(shù)的原理。

答案：PCR技術(shù)是一種體外DNA擴增技術(shù)，通過反復(fù)的變性、退火和延伸步驟，利用DNA聚合酶在體外條件下擴增特定的DNA片段。

2.描述PCR反應(yīng)體系的基本組成。

答案：PCR反應(yīng)體系通常包括模板DNA、引物、DNA聚合酶、dNTPs（四種脫氧核苷酸三磷酸）、緩沖液和Mg2+等。

3.說明PCR產(chǎn)物純化的重要性。

答案：PCR產(chǎn)物純化可以去除反應(yīng)體系中的雜質(zhì)，如未反應(yīng)的引物、dNTPs和聚合酶等，提高產(chǎn)物的純度，便于后續(xù)的分析和應(yīng)用。

4.描述PCR產(chǎn)物檢測的常用方法。

答案：PCR產(chǎn)物檢測的常用方法包括凝膠電泳、DNA測序、DNA雜交和實時定量PCR等。

五、討論題（每題5分，共4題）

1.討論PCR技術(shù)在分子生物學(xué)研究中的應(yīng)用。

答案：PCR技術(shù)在分子生物學(xué)研究中有著廣泛的應(yīng)用，包括基因克隆、基因表達(dá)分析、基因突變檢測、病原體檢測等。

2.討論提高PCR反應(yīng)特異性的策略。

答案：提高PCR反應(yīng)特異性的策略包括使用高純度的引物和模板DNA、優(yōu)化引物設(shè)計、使用熱啟動聚合酶、優(yōu)化反應(yīng)條件等。

3.討論PCR產(chǎn)物純化的方法及其優(yōu)缺點。

答案：PCR產(chǎn)物純化的方法包括乙醇沉淀、柱層析和凝膠電泳回收等。乙醇沉淀操作簡單但純度不高；