中藥材質(zhì)量檢測標(biāo)準(zhǔn)操作手冊1前言本手冊依據(jù)《中華人民共和國藥品管理法》《中國藥典》（2020版）《藥品檢驗操作規(guī)范》等法律法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)制定，旨在規(guī)范中藥材質(zhì)量檢測的操作流程，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性和可追溯性，適用于中藥材生產(chǎn)、經(jīng)營、使用單位及檢驗機構(gòu)的質(zhì)量檢測工作。2范圍本手冊規(guī)定了中藥材質(zhì)量檢測的樣品接收與處理、常規(guī)檢查、鑒別、含量測定、有害物質(zhì)檢查、結(jié)果判定與報告、記錄與檔案管理等環(huán)節(jié)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）。3規(guī)范性引用文件《中國藥典》（2020版）一部及通則《藥品檢驗操作規(guī)范》（2019版）《中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（GAP）《電子天平檢定規(guī)程》（JJG____）《液相色譜儀檢定規(guī)程》（JJG____）4術(shù)語和定義中藥材：來源于藥用植物、動物、礦物的藥用原料，未經(jīng)過加工或僅經(jīng)過簡單加工（如干燥、粉碎）。對照藥材：經(jīng)鑒定符合規(guī)定的藥材樣品，用于鑒別或含量測定。對照品：用于鑒別、檢查、含量測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（如皂苷、生物堿對照品）。恒重：連續(xù)兩次稱量的差異不超過0.3mg（干燥或熾灼后）。雜質(zhì)：中藥材中混有的非藥用部分（如泥沙、石塊、其他植物組織）。5樣品接收與處理5.1樣品接收1.信息核對：接收樣品時，應(yīng)核對送檢單與樣品的一致性，包括：樣品名稱、來源（產(chǎn)地/供應(yīng)商）、批號、數(shù)量、包裝規(guī)格。2.狀態(tài)檢查：檢查樣品包裝是否完整，有無破損、受潮、霉變、蟲蛀等異常情況；記錄樣品外觀狀態(tài)（如顏色、氣味變化）。3.登記流轉(zhuǎn)：填寫《樣品接收記錄》，內(nèi)容包括：樣品編號、接收日期、送檢方信息、樣品狀態(tài)、檢測項目。將樣品流轉(zhuǎn)至預(yù)處理環(huán)節(jié)。5.2樣品預(yù)處理1.粉碎：取樣品適量，用不銹鋼粉碎機粉碎，過四號篩（孔徑0.85mm），用于理化鑒別、含量測定；過二號篩（孔徑2.0mm）用于雜質(zhì)、水分、灰分測定。粉碎過程中應(yīng)清理設(shè)備，防止交叉污染。2.分樣：將粉碎后的樣品混合均勻，用四分法取適量作為檢測用樣，剩余樣品密封保存（標(biāo)注樣品編號、日期），以備復(fù)檢。6常規(guī)檢查6.1性狀鑒別操作步驟：取樣品適量，置自然光下（避免強光直射），觀察形狀、大小、顏色、表面特征（如皺紋、皮孔）、質(zhì)地（硬/軟、韌/脆）、斷面特征（如紋理、裂隙、髓部）。聞氣味（用手輕扇樣品上方，避免直接嗅聞）；嘗味道（有毒藥材如附子、川烏不宜嘗，可描述“味極苦”“味辛”等）。判定標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國藥典》對該藥材性狀的描述（如黃芪：“表面淡棕黃色或淡棕褐色，有不整齊的縱皺紋或縱溝；質(zhì)硬而韌，不易折斷，斷面纖維性強，并顯粉性”）。6.2雜質(zhì)檢查操作步驟：取樣品10g（精密稱定，記為W1），攤于白紙上，揀出雜質(zhì)（如泥沙、石塊、非藥用部位），精密稱定雜質(zhì)重量（記為W2）。計算雜質(zhì)含量：雜質(zhì)%=(W2/W1)×100%。判定標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國藥典》規(guī)定的雜質(zhì)限量（如黃芪≤2%、人參≤1%）。6.3水分測定（烘干法，通則0832第一法）操作步驟：取樣品2-5g（精密稱定，記為W），平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中（厚度≤5mm），開啟瓶蓋，在105℃干燥箱中干燥5小時。蓋好瓶蓋，移至干燥器中冷卻30分鐘，精密稱定（記為W1）；再干燥1小時，冷卻，稱定（記為W2），至連續(xù)兩次稱量差異≤0.3mg（恒重）。計算水分含量：水分%=[(W-W2)/W]×100%。判定標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國藥典》規(guī)定的水分限量（如黃芪≤10%、當(dāng)歸≤15%）。6.4灰分測定6.4.1總灰分（通則0831第一法）操作步驟：取樣品2-3g（精密稱定，記為W），置熾灼至恒重的坩堝中（記為M0），稱定坩堝+樣品重量（記為M1）。緩緩熾熱至樣品完全炭化（無黑煙），再在____℃馬弗爐中熾灼至恒重（記為M2）。計算總灰分含量：總灰分%=[(M2-M0)/W]×100%。6.4.2酸不溶性灰分（通則0831第二法）操作步驟：取總灰分殘渣（M2-M0），加入稀鹽酸10ml，煮沸5分鐘，用無灰濾紙過濾。殘渣用熱水洗滌至洗液不顯氯化物反應(yīng)（取洗液1ml，加硝酸銀試液1滴，無白色沉淀）。將殘渣連同濾紙置原坩堝中，熾灼至恒重（記為M3）。計算酸不溶性灰分含量：酸不溶性灰分%=[(M3-M0)/W]×100%。判定標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國藥典》規(guī)定的灰分限量（如黃芪總灰分≤5%、酸不溶性灰分≤1%）。7鑒別7.1顯微鑒別（通則0512）操作步驟：制片：取樣品根/莖段，用徒手切片法制成薄片（厚度約10μm），或用石蠟切片法制備切片；取粉末樣品，用甘油醋酸試液或水合氯醛試液裝片。觀察：置顯微鏡下，觀察組織構(gòu)造（如木栓層、韌皮部、木質(zhì)部）、細胞形態(tài)（如纖維、導(dǎo)管、石細胞）、內(nèi)含物（如淀粉粒、草酸鈣結(jié)晶）。判定標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國藥典》對該藥材顯微特征的描述（如人參根橫切面：“韌皮部有樹脂道散在，內(nèi)含黃色分泌物；薄壁細胞含草酸鈣簇晶”）。7.2理化鑒別操作步驟（以黃芪皂苷反應(yīng)為例）：供試品溶液制備：取樣品粉末1g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml溶解。對照藥材/對照品溶液制備：取黃芪對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成1mg/ml溶液。薄層色譜法（通則0502）：吸取上述溶液各2μl，點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13:7:2）下層溶液為展開劑，展開后晾干，噴10%硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。判定標(biāo)準(zhǔn)：供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色斑點（紫外光燈365nm下顯橙黃色熒光）。7.3色譜鑒別7.3.1高效液相色譜法（HPLC，通則0512）操作步驟（以人參皂苷鑒別為例）：色譜條件：C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相乙腈-水（梯度洗脫：0-30分鐘，乙腈19%-29%；30-60分鐘，29%-40%）；檢測波長203nm；柱溫30℃；流速1ml/min。供試品溶液：取樣品粉末0.5g，加甲醇50ml，超聲30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇定容至10ml。對照品溶液：取人參皂苷Rb1、Re、Rg1對照品，加甲醇制成各1mg/ml混合溶液。測定：吸取對照品與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀。判定標(biāo)準(zhǔn)：供試品色譜中，與對照品色譜保留時間一致的峰，其紫外吸收光譜應(yīng)一致。8含量測定8.1一般規(guī)定含量測定方法應(yīng)符合《中國藥典》通則（如HPLC、GC、UV）。供試品溶液應(yīng)平行制備2份，測定結(jié)果相對偏差≤2%。對照品應(yīng)使用法定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（如中國藥品生物制品檢定所提供）。8.2高效液相色譜法（HPLC，通則0512）操作步驟（以黃芪甲苷含量測定為例）：色譜條件：C18柱；流動相乙腈-水（32:68）；蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）；柱溫30℃；流速1ml/min。供試品溶液：取樣品粉末0.5g，加甲醇50ml，超聲30分鐘，濾過，取續(xù)濾液25ml蒸干，殘渣用水飽和正丁醇提取4次（每次10ml），合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，蒸干，殘渣加甲醇定容至5ml。對照品溶液：取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成0.5mg/ml溶液。測定：吸取對照品溶液10μl、20μl，供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，用外標(biāo)兩點法對數(shù)方程計算含量。判定標(biāo)準(zhǔn)：本品按干燥品計算，含黃芪甲苷（C41H68O14）不得少于0.040%（《中國藥典》2020版）。8.3氣相色譜法（GC，通則0521）適用范圍：含揮發(fā)油或揮發(fā)性成分的中藥材（如薄荷、當(dāng)歸）。操作步驟：色譜條件：毛細管柱（聚乙二醇20M）；載氣氮氣；火焰離子化檢測器（FID）；柱溫程序升溫（如50℃保持2分鐘，以5℃/min升至250℃）；進樣口溫度250℃；檢測器溫度280℃。供試品溶液：取樣品粉末1g，加乙醚20ml，超聲15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醚1ml溶解。對照品溶液：取薄荷腦對照品，加乙醚制成0.5mg/ml溶液。測定：吸取對照品與供試品溶液各1μl，注入氣相色譜儀，計算含量。9有害物質(zhì)檢查9.1重金屬（通則0821第一法）操作步驟：供試品溶液：取樣品粉末1.0g，熾灼至完全灰化，加鹽酸2ml蒸干，再加蒸餾水15ml與醋酸銨緩沖液（pH3.5）2ml，溶解后定容至50ml。對照品溶液：取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（10μgPb/ml）適量，加醋酸銨緩沖液（pH3.5）2ml，定容至50ml。測定：用原子吸收分光光度計在283.3nm波長處測定吸光度，計算重金屬含量。判定標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國藥典》規(guī)定（如人參≤20mg/kg、黃芪≤20mg/kg）。9.2農(nóng)藥殘留（通則0212）操作步驟：提?。喝悠贩勰?g，加乙腈10ml，超聲30分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml。凈化：用固相萃取柱（C18）凈化，洗脫液濃縮至1ml。測定：用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）測定有機氯（如六六六、滴滴涕）、有機磷（如敵敵畏）、擬除蟲菊酯（如氰戊菊酯）等農(nóng)藥殘留。判定標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國藥典》及《中藥材中農(nóng)藥殘留限量》（GB____）規(guī)定（如六六六總殘留≤0.1mg/kg、滴滴涕總殘留≤0.1mg/kg）。9.3黃曲霉毒素（通則2351）操作步驟：供試品溶液：取樣品粉末10g，加甲醇-水（7:3）50ml，超聲20分鐘，濾過，取續(xù)濾液10ml定容至25ml。對照品溶液：取黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2對照品，加甲醇制成混合溶液（B11μg/ml、B20.3μg/ml、G11μg/ml、G20.3μg/ml）。測定：用HPLC法，熒光檢測器（激發(fā)波長360nm，發(fā)射波長450nm）測定，計算含量。判定標(biāo)準(zhǔn)：黃曲霉毒素B1≤5μg/kg，總黃曲霉毒素（B1+B2+G1+G2）≤10μg/kg（《中國藥典》2020版）。10結(jié)果判定與報告10.1結(jié)果判定合格：所有檢測項目（常規(guī)檢查、鑒別、含量測定、有害物質(zhì)檢查）均符合《中國藥典》及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。不合格：有一項或一項以上檢測項目不符合規(guī)定。10.2報告編制報告內(nèi)容：樣品信息：名稱、來源、批號、數(shù)量、包裝。檢測信息：檢測日期、檢測項目、檢測方法（如“水分測定：烘干法（通則0832第一法）”）。檢測結(jié)果：具體數(shù)值（如“水分：8.5%”）、限量要求（如“≤10%”）。判定結(jié)論：“合格”或“不合格”（不合格項需注明“不符合《中國藥典》2020版一部××項規(guī)定”）。簽字蓋章：檢測人員（簽字）、審核人員（簽字）、檢測機構(gòu)名稱（蓋章）。報告發(fā)放：報告應(yīng)及時發(fā)放給送檢方，留存副本歸檔。11記錄與檔案管理11.1記錄要求及時性：檢測過程中及時填寫記錄，不得事后補記。準(zhǔn)確性：記錄內(nèi)容應(yīng)真實、準(zhǔn)確，包括操作步驟、試劑用量、儀器條件、測定結(jié)果等。完整性：記錄應(yīng)包含所有關(guān)鍵信息，如樣品編號、檢測日期、檢測人員、審核人員?？勺匪菪裕河涗洸坏猛扛?，如需修改，應(yīng)在修改處注明修改原因、修改日期和修改人簽字（如“原記錄‘水分9.0%’改為‘8.5%’，原因：計算錯誤，修改人：張三，____”）。11.2檔案保存檢測記錄、報告及相關(guān)資料（如送檢單、對照品證書）應(yīng)保存5年，以備追溯。檔案應(yīng)分類存放（如按樣品編號、檢測日期），便于查閱。12異常情況處理12.1樣品異常若樣品包裝破損、受潮、霉變或信息不符，應(yīng)及時與送檢方聯(lián)系，確認(rèn)是否接收；若接收，應(yīng)在《樣品接收記錄》中注明異常情況，并在檢測報告中說明。12.2檢測結(jié)果異常若檢測結(jié)果超過限量或與預(yù)期不符，應(yīng)重新取同批樣品進行復(fù)檢（復(fù)檢項目為不合格項目）。若復(fù)檢結(jié)果仍不合格，判定為不合格；若復(fù)檢結(jié)果合格，應(yīng)查找第一次檢測的原因（如樣品處理不當(dāng)、儀器誤差、試劑問題），并記錄《異常情況處理記錄》。13附錄13.1常用試劑配制10%硫酸乙醇溶液：取硫酸10ml，緩緩加入乙醇90ml中，混勻，放冷。稀鹽酸：取鹽酸234ml，加水稀釋至1000ml，搖勻。醋酸銨緩沖液（pH3.5）：取醋酸銨25g，加水25ml溶解后，加鹽酸調(diào)節(jié)pH至3.5，加水至100ml。13.2儀器校準(zhǔn)方法電子天平：按照《電子天平檢定規(guī)程》（