ICS65.020.20CCSB23DB50代替DB50/T142-2003重慶市市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB50/T142—2023本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替DB50/T142－2003。與DB50/T142－2003相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動外，主要技術(shù)變化如下：a)修改了規(guī)范性引用文件；b)重新定義了部分術(shù)語和定義；c)增加了脫毒試管苗生產(chǎn)條件條款，對脫毒試管苗、原原種、原種、生產(chǎn)用種的生產(chǎn)、水肥和病蟲害管理等過程中的部分內(nèi)容進行細化完善，使之更具操作性；d)對各等級種薯生產(chǎn)的必備項作出了明確要求。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由重慶市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委員會提出、歸口并組織實施。本文件起草單位：重慶市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站。本文件主要起草人員：歐建龍、黃振霖、趙雨佳、何佳洋、李義江、李明聰、梁峰銘、劉芳、胡斯剛、佘興蓉、王開周、胡黎華。本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：—2003年9月18日首次發(fā)布為DB50/T142-2003；—本次為第一次修訂。IDB50/T142—2023馬鈴薯脫毒種薯繁育技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了病毒脫除、原原種生產(chǎn)、原種繁育、生產(chǎn)種繁殖等操作規(guī)程。本文件適用于馬鈴薯脫毒試管苗、原原種、原種、生產(chǎn)用種的繁育和生產(chǎn)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB18133馬鈴薯種薯GB/T29375馬鈴薯脫毒試管苗繁育技術(shù)規(guī)程GB/T29376馬鈴薯脫毒原原種繁育技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1脫毒試管苗in-virtovirusfreeplantlet經(jīng)檢測確認不帶馬鈴薯X病毒(PotatovirusX,PVX)、馬鈴薯Y病毒(PotatovirusY,PVY)、馬鈴薯S病毒(PotatovirusS,PVS)、馬鈴薯卷葉病毒(Potatoleafrollvirus,PLRV)、馬鈴薯M病毒（PotatovirusM,PVM）、馬鈴薯A病毒（PotatovirusA,PVA）和馬鈴薯紡錘塊莖類病毒(Potatospindletuberdisease,PSTVd)的再生試管苗。3.2原原種pre-elite用脫毒試管苗在溫室和防蟲網(wǎng)室等隔離條件下生產(chǎn)出的符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的種薯。3.3原種elite用原原種作種薯，在隔離蚜蟲和病害的良好條件下生產(chǎn)出的符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的種薯。3.4生產(chǎn)用種certifiedseedpotato用原種作種薯，在隔離蚜蟲和病害的良好條件下生產(chǎn)出的符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的種薯。4病毒脫除4.1生產(chǎn)條件4.1.1車間條件1DB50/T142—2023生產(chǎn)車間應(yīng)遵循方便消毒、減少污染的原則，并滿足以下條件：a）周圍環(huán)境無污染源，與大田生產(chǎn)隔離；b）具有相互隔離的更衣室、清洗室、配藥室、滅菌室、接種室、培養(yǎng)室等；c）組培室應(yīng)具有充足的自然光或人工光源；d）生產(chǎn)環(huán)境清潔、干燥。4.1.2消毒處理消毒處理操作應(yīng)符合GB/T29375的要求。a）接種室、組培室每周定期消毒一次，按照每立方米空間用量，將40%的甲醛溶液10mL迅速倒入5g高錳酸鉀容器內(nèi)進行熏蒸，密閉1d后，進行通風(fēng)；b）接種前，超凈工作臺用紫外燈滅菌20min，超凈工作臺臺面及內(nèi)壁用75%酒精擦拭消毒；c）操作所用鑷子、解剖刀等工具接觸植物材料前應(yīng)灼燒或高溫消毒，冷卻后使用；d）操作人員需穿消毒工作服，用肥皂洗凈雙手，帶工作手套，操作過程中，手和工作臺面要經(jīng)常用75%酒精消毒；培養(yǎng)室發(fā)現(xiàn)污染及時清除。4.2脫毒試管苗的培育4.2.1材料選擇應(yīng)選用田間具備品種典型性狀的健康植株的頂芽或腋芽，作莖尖脫毒材料。4.2.2培養(yǎng)基制備莖尖分化培養(yǎng)基：MS+GA30.2mg/L+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L+白糖3%+瓊脂0.6%；擴繁培養(yǎng)基：MS+白糖3%+瓊脂0.6%。4.2.3培養(yǎng)基滅菌在0.11Mpa/cm2壓力下滅菌15min～20min，冷卻備用。4.2.4莖尖剝離接種將選用的材料放入紗布袋，用自來水沖洗1h后，在無菌條件下用75%酒精中浸30s，再用0.1%的升汞溶液消毒3min～6min。取出材料后，用無菌水沖洗3次～5次，用滅菌濾紙吸干材料表面水分。在體視解剖鏡下用手術(shù)刀剝?nèi)ビ兹~，切取帶l個～2個葉原基(0.1mm～0.4mm大小)的生長點，迅速接入裝有莖尖分化培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，每瓶接種1個莖尖。做好標(biāo)注。4.2.5脫毒試管苗擴繁對生長到具有7片～8片葉、經(jīng)檢測不帶病毒和類病毒的試管苗進行切段擴繁，每個切段至少帶1個葉片。將剪下的切段扦插到擴繁培養(yǎng)基，每瓶放20個切段。培養(yǎng)條件為溫度20℃~25℃,光照時數(shù)l2h/d左右，光照強度20001x～30001x。切段長成具有7片～8片葉后，再次切段繁殖。4.2.6培養(yǎng)條件溫度20℃~25℃,光照時數(shù)l2h/d，光照強度20001x～30001x。4.3病毒檢測2DB50/T142—2023用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法進行病毒檢測，無病毒的材料送國家法定檢驗部門復(fù)檢合格后擴4.4品種真實性觀察取出一部分脫毒試管苗移栽到溫（網(wǎng)）室內(nèi)，結(jié)出的小薯種植到田間觀察是否發(fā)生變異，應(yīng)符合原品種的典型性狀。5原原種生產(chǎn)5.1生產(chǎn)條件應(yīng)符合GB/T29376要求。5.2脫毒試管苗扦插5.2.1基質(zhì)宜采用蛭石等作為基質(zhì)，用50%多菌靈可濕性粉劑800倍液噴灑消毒。5.2.2煉苗將長到7片～8片葉，苗齡20d以上的試管苗煉苗3d～5d。5.2.3扦插將煉苗后的脫毒試管苗用鑷子輕輕取出，用剪刀切除根部，自來水沖洗干凈附著的瓊脂，用NAA溶液50ppm浸泡5min后扦插。5.3管理5.3.1水分管理扦插后在5d～10d內(nèi)應(yīng)保持相對濕度90%以上，適當(dāng)遮陰。在結(jié)薯前應(yīng)適當(dāng)控水，在結(jié)薯期保證充足的水分，在成熟期減少供水。5.3.2肥料管理試管苗生根成活到收獲前7d～10d，噴0.2%～0.3%磷酸二氫鉀溶液3次～5次。5.3.3病蟲害防治生產(chǎn)過程中全程進行病蟲草害防治。重點防治晚疫病，根據(jù)晚疫病預(yù)警系統(tǒng)信息，先采用保護劑噴霧，后采用治療劑噴霧。保護劑選用75%代森錳鋅水分散粒劑，治療劑選用72%霜脲?錳鋅可濕性粉劑、687.5SC/L氟菌·霜霉威、50%氟啶胺等藥劑。生產(chǎn)全程應(yīng)防治4次～6次，每次間隔7d～10d，不同治療劑交替使用，均勻噴霧。5.4收獲收獲前1周應(yīng)停止?fàn)I養(yǎng)液和水分的供應(yīng)，收獲時避免損傷和品種混雜。5.5分級3DB50/T142—2023攤晾5d～7d后，嚴格剔除破損、畸形等非正常薯，按種薯個體重量大小依次分為10g以上、5g～10g、3g～5g、1g～3g四個等級。5.6貯藏按收獲期、等級分品種分裝，并做好標(biāo)簽。在15℃~20℃的溫度下預(yù)貯藏5d～7d，然后3℃~5℃、相對濕度80%～90%的條件下貯藏。5.7質(zhì)量檢測參照GB18133要求對貯藏的原原種質(zhì)量進行檢測。5.8包裝出庫采用清潔透氣且具有良好保護的編織袋、網(wǎng)袋或紙箱包裝，并貼好標(biāo)簽。6原種繁育6.1繁育地條件選擇海拔1200m以上，自然隔離和通風(fēng)條件好，周圍60m無十字花科、茄科植物種植，三年內(nèi)未種植茄科作物，土層深厚、結(jié)構(gòu)疏松的沙壤土、交通方便。6.2播種6.2.1播前處理選用通過休眠的原原種做種薯，剔除病薯、爛薯和缺陷薯，播前20d～25d催芽，芽長0.5cm~1cm可播種。6.2.2實時播種10cm以內(nèi)土層溫度穩(wěn)定達到8℃以上播種。6.2.3施肥重施底肥，每666.7㎡施農(nóng)家肥1000kg～1500kg，宜用總養(yǎng)分≥40%高鉀復(fù)合肥（N:P2O5:K2O=5:2:7）30kg～40kg作底肥；苗高3cm～5cm時，每666.7㎡以清糞水500kg加尿素5kg～8kg進行追肥；現(xiàn)蕾期每隔7d～10d用0.3%～0.5%磷酸二氫鉀進行根外追肥1次～26.3田間管理苗期中耕除草并培土，使壟高達到20cm～25cm。苗期施尿素10kg/667㎡作為齊苗肥；薯塊膨大期追施0.3％～0.5％磷酸二氫鉀作為促薯肥。在現(xiàn)蕾期、花期進行除雜，及時拔除病株，雜株及地下塊莖。6.4病蟲害防治蟲害主要防治蚜蟲，出苗后10d左右，每7d～10d噴施低毒高效殺蟲劑一次，連續(xù)3次～4次。馬鈴薯晚疫病防治根據(jù)晚疫病預(yù)警系統(tǒng)信息，先采用保護劑噴霧，后采用治療劑噴霧。保護劑選用75%4DB50/T142—2023代森錳鋅水分散粒劑，治療劑選用72%霜脲?錳鋅可濕性粉劑、687.5SC/L霜霉威·氟吡菌胺、50%氟啶胺等藥劑。生產(chǎn)全程應(yīng)防治4次～6次，每次間隔7d～10d，不同治療劑交替使用，均勻噴霧。6.5收獲在田間植株下部2/3葉片變黃時收獲，收獲前7d～10d機械或人工殺秧。宜晴天收獲，收獲后攤晾，去除泥土，清除雜物。6.6分級、包裝種薯的重量大小進行分級，分30g～50g、50g～100g、100g以上三個級別用網(wǎng)袋包裝。6.7貯藏種薯宜在15℃~20℃的溫度下預(yù)貯藏5d～7d，然后在3℃~5℃、相對濕度80%～90%的條件下貯藏。7生產(chǎn)用種薯繁殖7.1繁殖地條件按本文件6.1執(zhí)行。7.2播種7.2.1種薯選用打破休眠的原種做種薯。播前20d～25d催芽，小于50g的整薯播種，大于50g的切塊播種，每個切塊30g左右且?guī)?個以上芽眼，切刀須用5%次氯酸鈉或75%酒精消毒。7.2.2播種時期1