飼料中阿散酸、洛克沙胂的測定高效液相色譜法2013-08-15發(fā)布2013-08-15發(fā)布湖南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I前言 Ⅱ 2規(guī)范性引用文件 13原理 4試劑和材料 5儀器和設(shè)備 26采樣和試樣制備 27測定步驟 28結(jié)果計(jì)算 2 3附錄A(資料性附錄)阿散酸、洛克沙胂高效液相色譜圖 4本標(biāo)準(zhǔn)按GB/T1.1-2009的規(guī)則編制。本標(biāo)準(zhǔn)由湖南省畜牧水產(chǎn)局提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：湖南省獸藥飼料監(jiān)察所、湖南省畜禽水產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)檢測中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：陳福華、隆雪明、易建希、譚美英、胡保國、魏群、何紅艷、魏唯、鄧均紅。1凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682國家實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法4試劑和材料4.2檸檬酸。4.5甲醇水(1:1)溶液：取50mL水與50mL甲醇混合均勻，使用前配制。4.6離子對試劑緩沖液：準(zhǔn)確稱2.02g庚烷磺酸鈉和2.10g檸檬酸，加入約980mL水溶解，用磷酸調(diào)pH至2.1后，定容至1L備用。4.7流動相：離子對試劑緩沖液+甲醇=92+8(v+v)。4.8微孔濾膜：0.22μm,有機(jī)4.10洛克沙胂對照品，純度≥98.5%。4.11阿散酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液：稱取阿散酸對照品0.025g(精確至0.01mg),用一級水溶解并定容至25.0mL,即為1.0mg/mL的阿散酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液。置冰箱中(2～8)℃保存，有效期為12個月。4.12洛克沙胂標(biāo)準(zhǔn)儲備液：稱取洛克沙胂對照品0.025g(精確至0.01mg),用一級水溶解并定容至25.0mL,即為1.0mg/mL的阿散酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液。置于冰箱中(2～8)℃保存，有效期為12個月。2洛克沙腫為：0.8ug/mL、4.0ug/mL、16.0ug/mL、32.0ug/mL、40.0ug/mL、80.0ug/mL。5.2分析天平：感量0.01mg和0.001g。5.4pH計(jì)：精度為0.02。6采樣和試樣制備6.1采樣步驟：按GB/T14699.1的規(guī)定執(zhí)行。6.2試樣的制備：按GB/T20195的規(guī)定執(zhí)行。稱取飼料試樣5g(精確至0.001g),置于50mL離心管中，加入20mL甲醇水(1:1)溶液，渦旋混合，于10000r/min離心5min,上清液移入50mL容量瓶中；重復(fù)提取一次，合并上清液，用甲醇水 色譜柱：C18柱(250mm×4.6mm,5μm)或相當(dāng)者。流速：0.8mL/min。酸、洛克沙胂高效液相色譜圖參見附錄A。阿散酸、洛克沙胂標(biāo)準(zhǔn)工作液色譜圖參見附錄A中圖A.1,飼料中添加阿散酸、洛克沙胂標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖參見附錄A中圖A.2。以峰面積為橫坐標(biāo)，濃度為縱坐標(biāo)作單點(diǎn)或多點(diǎn)校準(zhǔn)。試樣中阿散酸、洛克沙胂的含量由色譜數(shù)3Cs——標(biāo)準(zhǔn)工作液中阿散酸、洛克沙胂的濃度，單位為微克/毫升(μg/mL);計(jì)算結(jié)果需扣除空白試樣，測定結(jié)果用兩次平行測定的算術(shù)平均值表阿散酸、洛克沙胂在飼料中的定量限分別為2mg/kg、8mg/kg。本方法阿