2025年綜合類-臨床醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)(士)-流式細胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用歷年真題摘選帶答案(5卷單選100題合輯)2025年綜合類-臨床醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)(士)-流式細胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用歷年真題摘選帶答案(篇1)【題干1】流式細胞儀的基本工作原理主要基于哪種檢測技術(shù)？【選項】A.光散射和熒光檢測B.電泳遷移率C.紅外吸收D.核磁共振【參考答案】A【詳細解析】流式細胞儀通過光散射技術(shù)檢測細胞形態(tài)和顆粒大小，熒光檢測技術(shù)識別熒光標記的分子。選項B、C、D屬于其他分析技術(shù)，與流式細胞儀原理無關(guān)?！绢}干2】熒光染料的選擇需考慮哪些關(guān)鍵因素？【選項】A.染料顏色與目標分子匹配B.激發(fā)光源波長C.細胞類型D.試劑保存溫度【參考答案】A【詳細解析】熒光染料需與目標分子（如抗體、酶）的熒光特性匹配，確保檢測靈敏度。選項B是光源選擇依據(jù)，C影響分選精度，D屬于試劑管理要求，非核心選擇因素。【題干3】流式細胞儀電壓設(shè)置過高可能導(dǎo)致哪種問題？【選項】A.信號噪聲增加B.細胞重疊率降低C.熒光淬滅加劇D.鞘液穩(wěn)定性下降【參考答案】A【詳細解析】電壓過高會放大背景噪聲，降低信噪比，導(dǎo)致檢測結(jié)果不可靠。選項C需通過染料濃度控制，選項B與鞘液無關(guān)，選項D與電壓無直接關(guān)聯(lián)。【題干4】流式細胞儀補償設(shè)置的主要目的是？【選項】A.消除熒光交叉干擾B.提高細胞分選速度C.調(diào)整鞘液黏度D.校準光源強度【參考答案】A【詳細解析】補償技術(shù)用于消除不同熒光通道間的信號重疊，確保各標記物獨立分析。選項B與設(shè)備硬件無關(guān)，選項C、D屬于日常維護內(nèi)容?！绢}干5】鞘液在流式細胞儀中的作用不包括？【選項】A.維持流體穩(wěn)定B.提供細胞懸浮環(huán)境C.消除靜電吸附D.激發(fā)熒光信號【參考答案】D【詳細解析】鞘液通過緩沖液和聚合物維持流體穩(wěn)定，防止細胞聚集。選項D是光源作用，與鞘液無關(guān)。【題干6】熒光淬滅現(xiàn)象通常與哪種因素相關(guān)？【選項】A.染料濃度過高B.細胞密度過低C.激發(fā)光源強度不足D.鞘液更換周期【參考答案】A【詳細解析】高濃度熒光染料會導(dǎo)致標記物過度結(jié)合，縮短熒光壽命（淬滅）。選項B影響統(tǒng)計量，選項C降低檢測靈敏度，選項D與鞘液更換周期無關(guān)?！绢}干7】熒光標記抗體的最佳操作步驟是？【選項】A.直接加入細胞懸液B.預(yù)溫至37℃后孵育C.使用預(yù)存抗體避免污染D.超聲波裂解細胞膜【參考答案】B【詳細解析】抗體需在37℃預(yù)溫以增強結(jié)合效率，孵育時間需根據(jù)說明書優(yōu)化。選項A未考慮溫度影響，選項C存在污染風(fēng)險，選項D屬于細胞處理技術(shù)。【題干8】細胞分選失敗最常見原因不包括？【選項】A.分選閾值設(shè)置不當(dāng)B.鞘液黏度異常C.熒光染料未淬滅D.細胞團塊過多【參考答案】C【詳細解析】分選失敗主要與閾值設(shè)置（A）、鞘液（B）、細胞團塊（D）相關(guān)。選項C是熒光檢測問題，與分選無直接關(guān)聯(lián)?！绢}干9】流式細胞儀質(zhì)控參數(shù)中，CV值異?？赡芴崾荆俊具x項】A.電壓設(shè)置偏差B.熒光染料污染C.細胞懸液濃度不均D.光源老化【參考答案】B【詳細解析】CV值（變異系數(shù)）反映檢測重復(fù)性，染料污染會導(dǎo)致信號波動。選項A影響電壓，選項C需調(diào)整細胞濃度，選項D需校準光源?！绢}干10】哪種熒光染料屬于pH敏感型標記物？【選項】A.碧桃紅B.熒光素C.碘化丙啶D.羧基熒光素【參考答案】C【詳細解析】碘化丙啶（PI）通過嵌入DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)顯色，其熒光強度與DNA含量相關(guān)，屬于pH敏感型染料。選項A、B、D為通用熒光染料?！绢}干11】流式細胞儀電壓和閾值設(shè)置需根據(jù)哪種參數(shù)調(diào)整？【選項】A.細胞類型B.染料種類C.儀器品牌D.實驗室海拔【參考答案】A【詳細解析】不同細胞類型（如淋巴細胞、上皮細胞）的光散射和熒光特性差異顯著，需針對性調(diào)整參數(shù)。選項B是染料選擇依據(jù)，選項C、D與設(shè)備無關(guān)?！绢}干12】熒光淬滅的預(yù)防措施不包括？【選項】A.降低染料濃度B.延長孵育時間C.使用避光保存的試劑D.增加鞘液流速【參考答案】B【詳細解析】延長孵育時間會加劇熒光淬滅，需控制時間在說明書范圍內(nèi)。選項A、C、D均屬于有效預(yù)防措施?！绢}干13】流式細胞儀檢測時，細胞分選失敗最可能的原因為？【選項】A.分選閾值未覆蓋目標群體B.鞘液未過濾C.染料保存不當(dāng)D.電壓設(shè)置過低【參考答案】A【詳細解析】閾值設(shè)置不當(dāng)（如未覆蓋目標群體）會導(dǎo)致分選漏檢。選項B影響細胞流控，選項C導(dǎo)致熒光異常，選項D降低信號強度?！绢}干14】流式細胞儀熒光染料需避光保存的條件是？【選項】A.4℃冷藏B.避光干燥C.常溫避光D.-20℃冷凍【參考答案】C【詳細解析】熒光染料需避光保存以防止光降解，但溫度影響穩(wěn)定性，4℃冷藏（A）或-20℃冷凍（D）可延長保存期，但需避光?！绢}干15】流式細胞儀電壓設(shè)置過高會導(dǎo)致哪種后果？【選項】A.信號噪聲增加B.細胞重疊率降低C.熒光淬滅加劇D.鞘液穩(wěn)定性下降【參考答案】A【詳細解析】電壓過高會放大背景噪聲，降低信噪比，導(dǎo)致檢測結(jié)果不可靠。選項C需通過染料濃度控制，選項B與鞘液無關(guān)，選項D與電壓無直接關(guān)聯(lián)。【題干16】熒光標記抗體的操作步驟中，哪一步需嚴格避光？【選項】A.細胞懸液制備B.抗體稀釋C.預(yù)溫抗體D.孵育后洗滌【參考答案】B【詳細解析】熒光抗體易受光照降解，稀釋步驟需避光操作。選項A、C、D均在避光條件下進行?！绢}干17】流式細胞儀質(zhì)控參數(shù)異常時，應(yīng)首先采取的措施是？【選項】A.重新檢測樣本B.調(diào)整電壓和閾值C.更換鞘液D.檢查光源強度【參考答案】A【詳細解析】質(zhì)控參數(shù)異常（如CV值升高）需優(yōu)先重新檢測樣本，排除操作失誤。選項B、C、D屬于設(shè)備調(diào)試步驟?！绢}干18】哪種熒光染料常用于細胞膜固定標記？【選項】A.碧桃紅B.熒光素C.碘化丙啶D.羧基熒光素【參考答案】C【詳細解析】碘化丙啶（PI）通過結(jié)合細胞膜或細胞核中的DNA/RNA顯色，常用于膜固定標記。選項A用于細胞體積分析，選項B、D為通用標記。【題干19】流式細胞儀電壓和閾值設(shè)置需根據(jù)哪種條件調(diào)整？【選項】A.細胞類型B.染料種類C.儀器品牌D.實驗室海拔【參考答案】A【詳細解析】不同細胞類型（如淋巴細胞、上皮細胞）的光散射和熒光特性差異顯著，需針對性調(diào)整參數(shù)。選項B是染料選擇依據(jù)，選項C、D與設(shè)備無關(guān)?！绢}干20】熒光淬滅的預(yù)防措施不包括？【選項】A.降低染料濃度B.延長孵育時間C.使用避光保存的試劑D.增加鞘液流速【參考答案】B【詳細解析】延長孵育時間會加劇熒光淬滅，需控制時間在說明書范圍內(nèi)。選項A、C、D均屬于有效預(yù)防措施。2025年綜合類-臨床醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)(士)-流式細胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用歷年真題摘選帶答案(篇2)【題干1】流式細胞術(shù)熒光標記過程中，熒光染料與細胞結(jié)合后發(fā)射的熒光類型屬于哪種？【選項】A.內(nèi)源性熒光B.外源性熒光C.自發(fā)性熒光D.激發(fā)性熒光【參考答案】A【詳細解析】正確答案為A。內(nèi)源性熒光是細胞自身含有的熒光物質(zhì)（如葉綠素）發(fā)出的光，而外源性熒光是外源性熒光染料結(jié)合后發(fā)出的光。自發(fā)性熒光指物質(zhì)自發(fā)產(chǎn)生熒光的特性，激發(fā)性熒光是熒光物質(zhì)在特定波長激發(fā)下發(fā)出的光，但題干明確描述為“結(jié)合后發(fā)射”，故選外源性熒光（A）?！绢}干2】流式細胞儀進行細胞分選時，主要依據(jù)的物理參數(shù)是？【選項】A.熒光強度B.細胞體積C.細胞表面抗原D.熒光淬滅程度【參考答案】B【詳細解析】正確答案為B。流式細胞儀分選機制基于物理參數(shù)（如細胞體積、熒光強度）與邏輯門控結(jié)合。細胞體積通過光散射檢測，而熒光強度反映標記抗原。表面抗原是分選的觸發(fā)條件，但需通過熒光強度量化實現(xiàn)。選項D的熒光淬滅與分選無關(guān)?！绢}干3】熒光淬滅現(xiàn)象最常見的原因是？【選項】A.熒光染料濃度過高B.固定劑未完全滲透C.激光功率設(shè)置過低D.樣品保存時間過長【參考答案】B【詳細解析】正確答案為B。熒光淬滅指熒光強度隨時間或重復(fù)檢測下降的現(xiàn)象，主要因固定劑（如甲醛）與染料結(jié)合導(dǎo)致共價結(jié)合，阻礙能量傳遞。選項A濃度過高會抑制標記效率，但非淬滅主因；C和D與儀器參數(shù)或保存條件相關(guān)，但非直接原因。【題干4】流式細胞儀校準中，熒光補償（Compensation）的主要目的是？【選項】A.消除背景熒光B.校正不同熒光通道的交叉干擾C.提高細胞分選效率D.延長儀器使用壽命【參考答案】B【詳細解析】正確答案為B。熒光補償通過測量各通道間非特異性結(jié)合的熒光信號，建立數(shù)學(xué)模型消除交叉干擾，確保各通道獨立分析。選項A是背景熒光校正的范疇，C和D與補償無關(guān)?！绢}干5】流式細胞術(shù)樣品制備中，溶血劑的主要作用是？【選項】A.固定細胞形態(tài)B.去除紅細胞干擾C.增強細胞膜通透性D.抑制酶活性【參考答案】B【詳細解析】正確答案為B。溶血劑用于裂解紅細胞，避免其散射光干擾后續(xù)細胞（如白細胞、血小板）的檢測。選項A需固定劑完成，C是固定劑或通透劑的作用，D通常通過EDTA等試劑實現(xiàn)?！绢}干6】流式細胞儀檢測時，若出現(xiàn)“雙峰現(xiàn)象”，可能的原因是？【選項】A.熒光染料濃度不足B.細胞標記不均C.儀器電壓設(shè)置過高D.樣品保存溫度不當(dāng)【參考答案】B【詳細解析】正確答案為B。雙峰現(xiàn)象指同一抗原標記出現(xiàn)兩個熒光強度峰，通常因標記不均導(dǎo)致部分細胞未充分結(jié)合染料。選項A濃度不足會導(dǎo)致信號弱而非雙峰，C電壓過高可能引起信號飽和，D影響保存穩(wěn)定性但非直接原因?！绢}干7】流式細胞儀的熒光通道通常需要多少個標準微球進行校準？【選項】A.1個B.3個C.5個D.10個【參考答案】C【詳細解析】正確答案為C。標準微球校準需至少5個不同熒光強度的微球，覆蓋各通道檢測范圍，確保線性響應(yīng)和準確性。1個無法覆蓋范圍，3個可能不足，10個超出常規(guī)需求。【題干8】流式細胞儀檢測凋亡細胞時，常用熒光染料是？【選項】A.異硫氰酸熒光素（FITC）B.藻紅蛋白（PE）C.7-氨基乙基咔唑（7-ECD）D.四甲基異噻唑羧酸酯（TdT）【參考答案】C【詳細解析】正確答案為C。7-ECD（7-Ethyl-2-carboxyethyl-7-hydroxy-9,9,9-trifluoro-9-oxo-9H-fluorene）標記末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT），用于檢測DNA末端斷裂的凋亡細胞。選項A標記CD3等表面抗原，B標記CD4等，D用于TdT酶活性檢測?！绢}干9】流式細胞儀的電壓設(shè)置過高會導(dǎo)致哪種現(xiàn)象？【選項】A.信號丟失B.背景噪聲增加C.熒光淬滅D.細胞分選效率降低【參考答案】B【詳細解析】正確答案為B。電壓過高使激發(fā)光能量過剩，導(dǎo)致光電倍增管飽和，產(chǎn)生大量背景噪聲。選項A信號丟失多因電壓過低，C與熒光淬滅無關(guān)，D分選效率受電壓影響但非直接原因。【題干10】流式細胞儀進行多色分析時，熒光通道的設(shè)置原則是？【選項】A.所有通道同時采集B.按順序逐個采集C.根據(jù)標記類型分組采集D.避免相鄰?fù)ǖ乐丿B【參考答案】D【詳細解析】正確答案為D。相鄰熒光通道（如PE和Cy5）可能因光譜重疊導(dǎo)致信號交叉干擾，需通過熒光補償校正。選項A同時采集可能因時間限制導(dǎo)致信號丟失，B和C不符合實際操作流程?！绢}干11】流式細胞儀檢測時，若發(fā)現(xiàn)同一細胞在兩個不同熒光通道均出現(xiàn)高信號，可能的原因是？【選項】A.雙標記抗體交叉反應(yīng)B.熒光淬滅未完成C.儀器電壓設(shè)置不匹配D.樣品制備污染【參考答案】A【詳細解析】正確答案為A。雙標記抗體可能因非特異性結(jié)合在多個通道產(chǎn)生信號，需通過熒光補償排除交叉干擾。選項B會導(dǎo)致信號減弱而非雙通道高信號，C需調(diào)整電壓參數(shù)，D污染可能引起背景升高?！绢}干12】流式細胞儀的鞘液（SheathFluid）主要作用是？【選項】A.固定細胞B.維持細胞懸浮C.提供穩(wěn)定流動環(huán)境D.增強熒光信號【參考答案】C【詳細解析】正確答案為C。鞘液通過負壓形成穩(wěn)定鞘流，包裹細胞并引導(dǎo)其單列通過檢測孔，確保檢測重復(fù)性和準確性。選項A需固定劑完成，B是緩沖液作用，D需調(diào)整激光或染料濃度。【題干13】流式細胞儀檢測時，若出現(xiàn)“鬼影細胞”（GhostCells），最可能的原因是？【選項】A.細胞膜通透性不足B.熒光染料未充分結(jié)合C.鞘液流速不穩(wěn)定D.儀器光學(xué)系統(tǒng)污染【參考答案】C【詳細解析】正確答案為C。鬼影細胞指未進入檢測孔但被誤計數(shù)的現(xiàn)象，多因鞘液流速波動導(dǎo)致細胞脫離流線。選項A和D會減少信號而非產(chǎn)生假陽性，B影響標記效率但非直接原因?！绢}干14】流式細胞術(shù)分析凋亡細胞時，需使用的酶是？【選項】A.末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）B.末端轉(zhuǎn)移酶（末端轉(zhuǎn)移酶）C.β-半乳糖苷酶D.過氧化物酶【參考答案】A【詳細解析】正確答案為A。TdT酶催化脫氧核苷酸與凋亡細胞DNA末端連接，形成熒光標記的寡聚核苷酸鏈，用于檢測DNA斷裂。選項B為同義詞，但標準術(shù)語為TdT；C和D用于其他檢測（如酶標法）?！绢}干15】流式細胞儀的熒光通道通常需要校準的參數(shù)包括？【選項】A.線性范圍B.閾值C.熒光強度D.熒光補償【參考答案】A【詳細解析】正確答案為A。熒光通道校準需確定線性范圍（0-100%熒光強度），確保檢測信號在儀器響應(yīng)線性區(qū)間內(nèi)。選項B閾值用于確定信號起點，C為測量結(jié)果，D是校準后的參數(shù)調(diào)整。【題干16】流式細胞儀檢測時，若發(fā)現(xiàn)熒光信號呈多峰分布，可能的原因是？【選項】A.熒光染料濃度過高B.細胞標記不均C.儀器電壓設(shè)置過低D.樣品保存溫度異常【參考答案】B【詳細解析】正確答案為B。多峰分布通常因標記不均導(dǎo)致部分細胞未結(jié)合染料（低信號峰）或過度標記（高信號峰）。選項A濃度過高會抑制標記效率，C電壓過低導(dǎo)致信號弱，D影響保存穩(wěn)定性但非直接原因。【題干17】流式細胞儀的熒光淬滅率通常應(yīng)控制在？【選項】A.＜5%B.5%-10%C.10%-15%D.＞20%【參考答案】A【詳細解析】正確答案為A。熒光淬滅率反映熒光信號穩(wěn)定性，標準要求＜5%。選項B和C屬于可接受范圍，但現(xiàn)代儀器需更嚴格；D表明淬滅嚴重需調(diào)整實驗條件（如固定劑濃度或檢測時間）?！绢}干18】流式細胞儀檢測時，若發(fā)現(xiàn)同一細胞在兩個不同熒光通道均出現(xiàn)高信號，應(yīng)首先進行？【選項】A.熒光補償B.調(diào)整電壓C.更換染料D.清洗樣品【參考答案】A【詳細解析】正確答案為A。雙通道高信號可能因熒光交叉干擾，需通過熒光補償（Compensation）矩陣消除非特異性結(jié)合的信號。選項B需針對性調(diào)整電壓參數(shù)，C和D是后續(xù)處理步驟。【題干19】流式細胞儀的細胞分選閾值通常設(shè)置為？【選項】A.10%B.20%C.50%D.80%【參考答案】B【詳細解析】正確答案為B。分選閾值（SortingThreshold）通常設(shè)為20%-30%，確保分選細胞與未分選細胞的比例合理。閾值過低會導(dǎo)致非目標細胞分選，過高則影響分選效率。選項A和C不符合常規(guī)標準，D閾值過高難以分選。【題干20】流式細胞儀檢測凋亡細胞時，7-ECD標記的原理是？【選項】A.與細胞膜結(jié)合B.與DNA末端共價結(jié)合C.與細胞器結(jié)合D.與表面抗原結(jié)合【參考答案】B【詳細解析】正確答案為B。7-ECD標記末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT），催化脫氧核苷酸連接到凋亡細胞DNA的3'羥基末端，形成熒光標記的寡核苷酸鏈，特異性檢測DNA斷裂。選項A是固定劑作用，C和D與標記無關(guān)。2025年綜合類-臨床醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)(士)-流式細胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用歷年真題摘選帶答案(篇3)【題干1】流式細胞術(shù)檢測熒光標記細胞時，熒光染料的熒光強度主要取決于哪種機制？【選項】A.光子吸收效率B.熒光量子產(chǎn)率C.能量傳遞過程D.環(huán)境溫度變化【參考答案】C【詳細解析】熒光標記的強度與能量傳遞過程直接相關(guān)。熒光染料通過吸收光能轉(zhuǎn)化為激發(fā)態(tài)，再通過非輻射躍遷釋放能量并發(fā)射熒光。量子產(chǎn)率反映熒光物質(zhì)將吸收能量轉(zhuǎn)化為熒光光子的效率，而能量傳遞過程（如F?rster共振能量轉(zhuǎn)移）可增強熒光信號。選項A和B屬于能量吸收與轉(zhuǎn)化效率，D與物理環(huán)境無關(guān)，故正確答案為C。【題干2】流式細胞儀進行細胞分選時，若分選效率低于預(yù)期，最可能的原因是？【選項】A.電壓設(shè)置過低B.樣本濃度過高C.熒光染料未充分滲透D.儀器未校準【參考答案】B【詳細解析】樣本濃度過高會導(dǎo)致細胞在分選通道中堆積，增加細胞間碰撞概率，降低分選精度和效率。電壓設(shè)置過低（A）可能影響信號采集而非分選，染料未滲透（C）通常影響熒光強度而非分選功能。儀器未校準（D）屬于系統(tǒng)性誤差，但分選效率問題更直接關(guān)聯(lián)樣本濃度。【題干3】流式細胞儀電壓閾值設(shè)置過高的主要后果是？【選項】A.背景信號增強B.細胞信號丟失C.儀器噪聲降低D.分選精度提高【參考答案】A【詳細解析】閾值電壓過高會忽略低熒光強度信號，導(dǎo)致背景信號（未標記細胞或弱信號細胞）被錯誤納入分析。選項B正確的前提是閾值過高覆蓋有效信號，但通常背景信號增強更直接。C和D與閾值設(shè)置無關(guān)?！绢}干4】熒光淬滅現(xiàn)象最常見于哪種熒光染料？【選項】A.紫外熒光染料B.綠色熒光染料C.紅色熒光染料D.橙色熒光染料【參考答案】C【詳細解析】紅色熒光染料（如藻紅蛋白）因發(fā)射波長較長（>600nm），易受儀器光源和檢測器干擾，導(dǎo)致熒光淬滅。綠色（B）和橙色（D）染料波長較短，淬滅風(fēng)險較低。紫外（A）染料因激發(fā)光強度高，淬滅概率更低?！绢}干5】流式細胞儀校準過程中，必須定期校準的部件是？【選項】A.激發(fā)光源B.液流控制閥C.熒光檢測器D.樣本加載口【參考答案】C【詳細解析】熒光檢測器的校準至關(guān)重要，因其波長和靈敏度直接影響熒光信號準確性。光源（A）需定期檢查但非強制校準，液流控制閥（B）和樣本加載口（D）屬于機械部件，校準周期更長?！绢}干6】在流式細胞術(shù)數(shù)據(jù)分析中，單參數(shù)分析主要用于？【選項】A.區(qū)分兩種異質(zhì)群體B.同時分析三個特征C.檢測細胞凋亡D.精確分選特定細胞【參考答案】A【詳細解析】單參數(shù)分析（如CD4+vsCD8+）可快速區(qū)分兩種主要群體，多參數(shù)分析（B）需結(jié)合多個特征。凋亡檢測（C）通常需結(jié)合熒光強度變化，分選（D）依賴分選技術(shù)而非單參數(shù)?！绢}干7】流式細胞儀的補償校正主要解決哪種問題？【選項】A.細胞碎片干擾B.熒光信號重疊C.電壓閾值設(shè)置偏差D.樣本體積不均【參考答案】B【詳細解析】熒光信號重疊（如FSC與SSC）會導(dǎo)致特征通道混淆，補償校正通過計算各熒光通道間的相關(guān)性，調(diào)整原始數(shù)據(jù)以消除干擾。選項A需通過預(yù)濾除碎片解決，C和D屬于操作誤差。【題干8】流式細胞儀檢測凋亡細胞時，常用哪種熒光染料標記？【選項】A.7-AADB.PIC.AnnexinVD.CD45【參考答案】A【詳細解析】7-AAD（7-氨基乙基咔唑）可特異性結(jié)合凋亡細胞膜磷脂，PI（B）用于檢測細胞核膜完整性，AnnexinV（C）標記磷脂酰絲氨酸外翻，CD45（D）為白細胞表面標志。【題干9】流式細胞儀的熒光補償算法中，需輸入哪些參數(shù)？【選項】A.細胞體積B.熒光強度C.群體比例D.激發(fā)光波長【參考答案】B【詳細解析】熒光補償需計算各熒光通道間的交叉干擾，通過已知比例的熒光標準品（如熒光標記的陰性/陽性對照）輸入原始信號強度（B）。細胞體積（A）和群體比例（C）用于聚類分析，激發(fā)光波長（D）影響激發(fā)效率。【題干10】流式細胞術(shù)檢測免疫細胞亞群時，哪種熒光染料需避光保存？【選項】A.PE-Cy5B.APC-Cy7C.eFluor610D.CD3-PE【參考答案】C【詳細解析】eFluor610（C）屬于新型熒光染料，需避光保存以防止光漂白。PE-Cy5（A）、APC-Cy7（B）和CD3-PE（D）均可在常溫避光條件下穩(wěn)定保存?！绢}干11】流式細胞儀的液流控制閥故障會導(dǎo)致哪種異常？【選項】A.熒光信號偏移B.細胞分選失敗C.電壓閾值漂移D.數(shù)據(jù)采集延遲【參考答案】B【詳細解析】液流控制閥（如分選閥或樣品閥）故障會導(dǎo)致液流速率異常，細胞無法按設(shè)定參數(shù)分選，表現(xiàn)為分選失敗或通道堵塞。熒光信號（A）與檢測器相關(guān)，電壓（C）和采集延遲（D）與液流無關(guān)?！绢}干12】流式細胞儀檢測造血干細胞時，常聯(lián)用哪兩種標志物？【選項】A.CD34+和CD133+B.CD45+和CD117+C.CD38+和KDR+D.CD105+和Flk-2+【參考答案】A【詳細解析】CD34+和CD133+是造血干細胞的典型表面標志物，CD45+（B）為白細胞共同抗原，KDR+（C）和Flk-2+（D）多用于血管內(nèi)皮細胞或祖細胞檢測。【題干13】流式細胞儀的熒光信號強度與哪種因素呈正相關(guān)？【選項】A.染料濃度B.細胞數(shù)量C.激發(fā)光強度D.儀器增益設(shè)置【參考答案】A【詳細解析】在染料未飽和的前提下，熒光強度與染料濃度（A）成正比。細胞數(shù)量（B）影響信號總和而非單個細胞強度，激發(fā)光強度（C）過高會導(dǎo)致光漂白，增益設(shè)置（D）改變信號放大倍數(shù)?！绢}干14】流式細胞儀檢測細胞周期時，常用哪種染色方法？【選項】A.PI染色B.BrdU染色C.flowcytometry-specific染料D.AnnexinV染色【參考答案】B【詳細解析】BrdU（B）通過抗BrdU抗體結(jié)合DNA，反映S期細胞比例。PI（A）用于檢測凋亡或壞死，flowcytometry-specific染料（C）為定制化熒光，AnnexinV（D）用于凋亡檢測?！绢}干15】流式細胞儀的熒光檢測器波長設(shè)置錯誤會導(dǎo)致？【選項】A.信號強度降低B.熒光類型混淆C.細胞分選失敗D.數(shù)據(jù)采集延遲【參考答案】B【詳細解析】波長設(shè)置錯誤（如將紅色通道設(shè)為綠色）會導(dǎo)致熒光類型混淆（B）。信號強度（A）與染料和檢測器靈敏度相關(guān)，分選（C）依賴液流參數(shù)，延遲（D）與機械部件無關(guān)?！绢}干16】流式細胞術(shù)檢測細胞增殖時，常用哪種染料標記？【選項】A.5-EMAB.BrdUC.EdUD.PI【參考答案】C【詳細解析】EdU（C）通過抗5-ethyl-2’-deoxyuridine抗體檢測S期細胞，5-EMA（A）用于細胞凋亡，BrdU（B）需結(jié)合抗體，PI（D）用于檢測細胞核膜完整性?！绢}干17】流式細胞儀的熒光淬滅現(xiàn)象可通過以下哪種方法緩解？【選項】A.降低激發(fā)光強度B.增加染料濃度C.避免長時間檢測D.使用低溫保存樣本【參考答案】C【詳細解析】熒光淬滅（C）可通過縮短檢測時間或降低激發(fā)光強度（A）緩解，但最佳方法是避免長時間檢測（C）。增加染料濃度（B）可能加劇淬滅，低溫保存（D）僅影響樣本穩(wěn)定性?！绢}干18】流式細胞儀檢測腫瘤細胞表面標志物時，哪種抗體需采用間接免疫熒光法？【選項】A.CD15-FITCB.Her2/neu-PE-Cy5C.CD3-APCD.TGF-β-BrilliantViolet470【參考答案】B【詳細解析】Her2/neu（B）為跨膜蛋白，需間接法（一抗結(jié)合抗原，二抗標記熒光）。CD15（A）、CD3（C）為單次跨膜蛋白，可用直接法；TGF-β（D）為分泌蛋白，需間接法但非題目最佳選項?！绢}干19】流式細胞儀的液流速率設(shè)置為50μl/min時，若樣本體積為1ml，預(yù)計需要多長時間完成檢測？【選項】A.2分鐘B.20分鐘C.120分鐘D.240分鐘【參考答案】B【詳細解析】液流速率=50μl/min，1ml=1000μl，檢測時間=1000/50=20分鐘（B）。選項A為1000/50=20，但單位錯誤；C和D計算錯誤?！绢}干20】流式細胞儀檢測細胞凋亡時，若補償校正未正確執(zhí)行，會導(dǎo)致哪種結(jié)果？【選項】A.背景信號升高B.特征通道信號丟失C.細胞分選失敗D.數(shù)據(jù)采集延遲【參考答案】B【詳細解析】補償校正錯誤會導(dǎo)致熒光信號重疊未被修正，特征通道（如AnnexinV-FITC）信號被錯誤扣除，表現(xiàn)為信號丟失（B）。背景信號（A）與閾值設(shè)置相關(guān)，分選（C）和延遲（D）與補償無關(guān)。2025年綜合類-臨床醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)(士)-流式細胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用歷年真題摘選帶答案(篇4)【題干1】流式細胞術(shù)分析中，熒光標記物與細胞結(jié)合的關(guān)鍵機制是？【選項】A.熒光素與細胞膜結(jié)合B.熒光蛋白直接嵌入細胞膜C.熒光素與細胞表面抗原特異性結(jié)合D.細胞內(nèi)酶催化熒光素活化【參考答案】C【詳細解析】熒光標記物需通過特異性抗原-抗體結(jié)合實現(xiàn)標記，熒光素與細胞表面抗原的特異性結(jié)合是核心機制。選項A未說明特異性，B和D不符合熒光標記原理?！绢}干2】流式細胞儀的熒光檢測閾值設(shè)置錯誤會導(dǎo)致？【選項】A.熒光信號丟失B.非特異性信號增加C.淋巴細胞比例計算偏差D.儀器校準周期縮短【參考答案】B【詳細解析】閾值設(shè)置過低易導(dǎo)致背景熒光信號疊加，造成非特異性信號升高；過高則丟失弱信號。選項C與閾值無直接關(guān)聯(lián)，D與校準無關(guān)?！绢}干3】流式細胞儀進行細胞分選時，閾值設(shè)置過高會導(dǎo)致？【選項】A.分選效率降低B.空分選事件增多C.細胞碎片比例上升D.熒光信號信噪比下降【參考答案】B【詳細解析】閾值過高會過濾掉正常細胞，僅分選閾值以上細胞，空分選事件顯著增加。選項A因細胞被過濾而成立，但核心問題是分選目標缺失?！绢}干4】流式細胞術(shù)數(shù)據(jù)分析中，門控技術(shù)的主要作用是？【選項】A.調(diào)節(jié)儀器流速B.篩選特定亞群細胞C.校準熒光強度D.優(yōu)化細胞固定效果【參考答案】B【詳細解析】門控技術(shù)通過設(shè)定熒光或細胞參數(shù)范圍，篩選目標細胞亞群（如CD4+T細胞）。選項A屬于儀器調(diào)節(jié)功能，C為校準步驟，D與固定無關(guān)?！绢}干5】熒光淬滅現(xiàn)象最常見于哪種熒光類型？【選項】A.紫外熒光標記B.綠色熒光蛋白（GFP）標記C.紅色熒光素標記D.藍色熒光素標記【參考答案】B【詳細解析】GFP標記易發(fā)生熒光淬滅，因分子結(jié)構(gòu)暴露于細胞質(zhì)中易發(fā)生光降解。其他選項中，紫外熒光對光敏感但淬滅較少，紅/藍熒光素穩(wěn)定性較高?！绢}干6】流式細胞儀進行細胞周期分析時，常用哪種染色劑？【選項】A.7-AADB.BrdUC.PI染色D.碘化丙啶（PI）【參考答案】A【詳細解析】7-AAD結(jié)合于細胞膜破裂后釋放的DNA，反映細胞凋亡或死亡狀態(tài)。BrdU用于S期分析，PI和碘化丙啶均為DNA染料但需細胞裂解?！绢}干7】流式細胞儀使用前必須進行哪種校準？【選項】A.淋巴細胞比例校準B.熒光強度線性校準C.細胞體積補償D.空分選校準【參考答案】B【詳細解析】熒光強度線性校準是必要步驟，確保檢測范圍覆蓋樣本實際信號強度。選項C屬于參數(shù)補償，D為分選功能校準?！绢}干8】流式細胞術(shù)檢測細胞表面抗原時，固定劑選擇不當(dāng)會導(dǎo)致？【選項】A.抗原脫落B.染色劑結(jié)合失效C.細胞皺縮D.熒光淬滅加速【參考答案】A【詳細解析】非特異性固定劑（如甲醇）會破壞細胞膜完整性，導(dǎo)致表面抗原脫落。選項B需通過緩沖液優(yōu)化解決，C與固定劑無關(guān)?！绢}干9】流式細胞儀檢測鈣離子濃度時，常用哪種熒光染料？【選項】A.Fura-2B.Fluo-3C.Indo-1D.TAMRA【參考答案】A【詳細解析】Fura-2是經(jīng)典鈣指示劑，需鈣依賴熒光增強，F(xiàn)luo-3為非鈣依賴型，Indo-1用于雙向鈣成像，TAMRA為通用熒光染料。【題干10】流式細胞儀檢測凋亡細胞時，常用哪種雙染組合？【選項】A.AnnexinV-FITC/PIB.7-AAD/CD45C.BrdU/EdUD.CD3ε/CD4【參考答案】A【詳細解析】AnnexinV-FITC結(jié)合磷脂酰絲氨酸外露（凋亡標志），PI染色檢測DNA碎片，組合可區(qū)分凋亡與壞死。其他選項為不同功能檢測組合。【題干11】流式細胞儀檢測細胞增殖時，EdU染色的最佳細胞周期階段是？【選項】A.G1期B.S期C.G2/M期D.靜息期【參考答案】B【詳細解析】EdU通過胸苷類似物摻入DNA復(fù)制活躍的S期細胞，G1期細胞不摻入，G2/M期DNA復(fù)制停止?！绢}干12】流式細胞儀檢測細胞毒性時，常用哪種染色劑？【選項】A.7-AADB.PIC.DAPID.Cytosinegreen【參考答案】A【詳細解析】7-AAD結(jié)合凋亡或壞死的細胞膜碎片，反映細胞毒性損傷。PI檢測細胞核DNA，DAPI為核內(nèi)熒光染料，Cytosinegreen用于細胞質(zhì)染色?！绢}干13】流式細胞術(shù)分析細胞骨架時，常用哪種染色劑？【選項】A.Phalloidin-TRITCB.DAPIC.PropidiumiodideD.Hoechst33342【參考答案】A【詳細解析】Phalloidin-TRITC特異性結(jié)合微絲（F-actin），DAPI和Hoechst染核DNA，PI為活細胞染色劑。【題干14】流式細胞儀檢測細胞內(nèi)游離鈣時，需補充哪種離子？【選項】A.鈣離子（Ca2+）B.鉀離子（K+）C.鈉離子（Na+）D.鎂離子（Mg2+）【參考答案】A【詳細解析】鈣指示劑（如Fura-2）需在含Ca2+的緩沖液中檢測，其他離子濃度需保持穩(wěn)定?！绢}干15】流式細胞術(shù)檢測細胞增殖時，雙標記組合Brdu/EdU的原理是？【選項】A.同步標記不同增殖階段B.區(qū)分DNA復(fù)制速率差異C.檢測細胞周期同步性D.鑒別S期與G2期細胞【參考答案】B【詳細解析】BrdU標記早期S期，EdU標記晚期S期，通過熒光強度差異區(qū)分復(fù)制速率。其他選項與雙染原理無關(guān)?！绢}干16】流式細胞儀檢測細胞凋亡時，AnnexinV結(jié)合的分子是？【選項】A.膜磷脂酰絲氨酸B.膜膽固醇C.細胞膜蛋白D.細胞骨架蛋白【參考答案】A【詳細解析】凋亡早期細胞膜磷脂酰絲氨酸外翻，AnnexinV-FITC特異性結(jié)合，其他選項為膜結(jié)構(gòu)或細胞質(zhì)成分。【題干17】流式細胞儀檢測細胞毒性時，細胞膜完整性破壞的標志是？【選項】A.AnnexinV-FITC陽性B.7-AAD陽性C.PI陽性D.CD45陽性【參考答案】B【詳細解析】7-AAD結(jié)合凋亡或壞死的細胞膜碎片，反映膜完整性破壞。AnnexinV陽性提示早期凋亡，PI陽性為細胞核損傷?！绢}干18】流式細胞儀檢測細胞內(nèi)ATP水平時，常用哪種熒光染料？【選項】A.CellTrackerGreenB.Hoechst33342C.CFSED.DAPI【參考答案】A【詳細解析】CellTrackerGreen特異性結(jié)合ATP，通過熒光強度反映細胞代謝活性。其他選項為DNA或膜染色劑?！绢}干19】流式細胞術(shù)檢測細胞周期時，G2/M期細胞的比例異?？赡芴崾?？【選項】A.DNA復(fù)制異常B.細胞凋亡C.調(diào)亡小體形成D.細胞周期調(diào)控蛋白失活【參考答案】D【詳細解析】G2/M期阻滯通常由CDK或p53調(diào)控蛋白異常導(dǎo)致，與DNA復(fù)制完成無關(guān)（A選項為S期異常）。凋亡（B）和調(diào)亡小體（C）與G2/M阻滯無直接關(guān)聯(lián)。【題干20】流式細胞儀檢測細胞表面受體時，固定劑選擇需考慮？【選項】A.避免破壞膜結(jié)構(gòu)B.增加熒光信號強度C.加速染色劑結(jié)合D.降低細胞聚集【參考答案】A【詳細解析】膜固定劑（如甲醛）需平衡膜結(jié)構(gòu)保留與抗原暴露，過度固定會導(dǎo)致受體失活。選項B需通過緩沖液優(yōu)化，C與固定時間相關(guān)，D需使用抗凝聚劑。2025年綜合類-臨床醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)(士)-流式細胞儀分析技術(shù)及應(yīng)用歷年真題摘選帶答案(篇5)【題干1】流式細胞儀的核心部件不包括以下哪項？【選項】A.光源系統(tǒng)B.檢測器C.計數(shù)器D.數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)【參考答案】C【詳細解析】流式細胞儀的核心部件包括光源系統(tǒng)（激發(fā)熒光）、檢測器（捕獲信號）、樣品導(dǎo)入系統(tǒng)（如鞘液系統(tǒng)）和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。計數(shù)器屬于分選模塊的輔助功能，非核心部件。選項C錯誤?！绢}干2】熒光染料的激發(fā)波長選擇主要依據(jù)染料的哪種特性？【選項】A.終末波長B.激發(fā)光譜范圍C.熒光強度D.細胞穿透性【參考答案】B【詳細解析】熒光染料的激發(fā)波長需匹配其激發(fā)光譜范圍，以最大化吸收效率。選項B正確。選項A為發(fā)射波長相關(guān)，選項C與信號強度無關(guān)，選項D屬于固定化染料的特性?！绢}干3】流式細胞術(shù)樣品制備中，必須進行哪項預(yù)處理？【選項】A.離心濃縮B.過濾去除顆粒C.固定化處理D.稀釋至1×10^6cells/mL【參考答案】B【詳細解析】顆粒物會堵塞檢測器光路，需通過0.22μm濾膜過濾。固定化處理（C）適用于活細胞分析，稀釋濃度（D）因檢測類型而異。選項B為必選項?！绢}干4】流式細胞儀的熒光補償技術(shù)主要用于解決哪種問題？【選項】A.激發(fā)光譜重疊B.發(fā)射光譜重疊C.細胞體積差異D.鞘液氣泡【參考答案】B【詳細解析】熒光補償通過調(diào)整各通道信號比例，消除發(fā)射光譜重疊導(dǎo)致的假陽性。選項A為激發(fā)光譜問題，需通過單色器調(diào)整；選項C通過體積參數(shù)區(qū)分，選項D需鞘液系統(tǒng)優(yōu)化?！绢}干5】流式細胞儀數(shù)據(jù)分析軟件中，用于生成細胞雙參數(shù)散點圖的常用軟件是？【選項】A.FlowJoB.FCSExpressC.ModFitLD.Cytometry101【參考答案】A【詳細解析】FlowJo是流式細胞術(shù)最主流的軟件，支持雙參數(shù)散點圖、門控分析及統(tǒng)計功能。FCSExpress側(cè)重高級數(shù)據(jù)分析，ModFit用于細胞周期分析，Cytometry101為教學(xué)軟件?！绢}干6】流式細胞儀檢測時，若發(fā)現(xiàn)熒光信號異常升高，可能的原因為？【選項】A.染料濃度過高B.激發(fā)光源功率不足C.細胞固定不充分D.鞘液流速過快【參考答案】A【詳細解析】染料濃度過高（A）會導(dǎo)致信號飽和或淬滅。光源功率不足（B）會降低信號強度，需校準光源。固定不充分（C）可能引起細胞脫落，鞘液流速過快（D）影響細胞分布?！绢}干7】流式細胞儀的熒光淬滅現(xiàn)象最常見于哪種樣本類型？【選項】A.活細胞樣本B.固定細胞樣本C.紅細胞樣本D.血清樣本【參考答案】B【詳細解析】固定細胞樣本（B）因固定劑（如甲醛）與熒光染料結(jié)合，易發(fā)生熒光淬滅?；罴毎麡颖荆ˋ）需使用無淬滅染料（如Fixableviabilitydyes）。紅細胞（C）因高血紅蛋白會干擾信號，血清（D）需避免溶血?！绢}干8】流式細胞儀的細胞分選技術(shù)中，基于哪種原理實現(xiàn)細胞分離？【選項】A.細胞體積差異B.熒光標記差異C.電荷差異D.膜電位差異【參考答案】B【詳細解析】熒光標記差異（B）通過熒光強度區(qū)分細胞亞群。體積差異（A）通過光散射參數(shù)區(qū)分，電荷差異（C）用于靜電分選，膜電位差異（D）需電化學(xué)傳感器。【題干9】流式細胞儀的鞘液系統(tǒng)主要作用是？【選項】A.提供均勻流動B.消除氣泡C.維持細胞密度D.防止細胞聚集【參考答案】A【詳細解析】鞘液系統(tǒng)（A）通過形成穩(wěn)定鞘流包裹細胞，確保單細胞通過檢測孔。消除氣泡（B）需優(yōu)化鞘液流速，維持密度（C）需調(diào)整樣本濃度，防止聚集（D）需添加EDTA等抗凝劑。【題干10】流式細胞儀檢測時，若發(fā)現(xiàn)前向散射光（FSC）信號異常，可能提示哪種問題？【選項】A.染料濃度異常B.細胞體積分布異常C.激發(fā)光源故障D.