HPV感染與宮頸癌臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)教研室馬淑君第一頁，共四十三頁。看看這位英年早逝的藝人，

她死于宮頸癌……第二頁，共四十三頁。主要內(nèi)容什么是宮頸癌？關(guān)于HPV宮頸病變與HPV感染有什么關(guān)系？宮頸癌篩查指南幾種篩查方法介紹如何預(yù)防宮頸癌？第三頁，共四十三頁。一、什么是宮頸癌？第四頁，共四十三頁。什么是子宮頸癌？子宮頸癌又稱宮頸侵潤癌，簡稱宮頸癌，由癌前病變逐步開展而來的。是目前唯一病因明確、可以預(yù)防的惡性腫瘤。第五頁，共四十三頁。子宮頸癌現(xiàn)狀女性第二大常見惡性腫瘤全世界每年新病例數(shù)為56.5萬在開展中國家宮頸癌的發(fā)生率為興旺國家6倍，有50%的病例發(fā)生在中國和印度中國每年新病例為18.15萬中國每年有3萬多的婦女死于宮頸癌第六頁，共四十三頁?，F(xiàn)在根本明確宮頸癌的病因就是高危型HPV的持續(xù)性感染感染HPV病毒到開展成浸潤癌需要大約十年的歷程，只要定期進(jìn)行婦科健康檢查，就可以及早發(fā)現(xiàn)子宮頸癌癌前病變并加以治療，就可預(yù)防子宮頸癌的發(fā)生宮頸癌可以預(yù)防和治愈第七頁，共四十三頁。二、關(guān)于HPV

(humanpapillomaviral,人乳頭狀瘤病毒)第八頁，共四十三頁。

電鏡下HPV第九頁，共四十三頁。HPV具有正常細(xì)胞永生化能力及高度種屬特異性和特殊嗜上皮性，病毒DNA以整合形式存在于宿主細(xì)胞中病毒DNA儲(chǔ)存于具生發(fā)活性的基內(nèi)幕胞，呈隱性狀態(tài)HPV僅限于在人上皮中具有一定分化程度的角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)才能增殖皮膚、粘膜的柱狀上皮和鱗狀上皮是HPV侵犯最敏感之處HPV不進(jìn)入血液，不產(chǎn)生病毒血癥第十頁，共四十三頁。HPV感染10－30％成人感染HPV,性活潑人群甚至更高〔50％－80％〕好發(fā)年齡20-29歲(40%)潛伏期:3周–8月(平均2.8月)第十一頁，共四十三頁。HPV感染轉(zhuǎn)歸1%－2%發(fā)生臨床可見的濕疣大多數(shù)感染無病癥，成為潛伏感染或亞臨床感染(SPI),與機(jī)體天然免疫有關(guān)一般1－2年內(nèi)自行去除,70%女性可以于于二年內(nèi)通過自身免疫消除第十二頁，共四十三頁。HPV傳染脫落角質(zhì)層細(xì)胞或鱗狀上皮細(xì)胞內(nèi)的病毒顆粒釋放與皮損部位的直接接觸，或與污染物品的間接接觸生殖器HPV感染更多的是通過性接觸傳播無病癥HPV生殖道隱性感染，成為HPV主要傳染源，這是造成HPV感染很常見的原因第十三頁，共四十三頁。SOURCE:GRAPHADAPTEDFROMR.L.WINERETAL.,AMERICANJOURNALOFEPIDEMIOLOGY

157,218(2003)美國某大學(xué)467女性大學(xué)生常規(guī)婦檢:HPV的PCR檢測結(jié)果：生殖道HPV檢出率46%5年后60％的女性被查出過HPV感染70％女性一年內(nèi)生殖道HPV自行去除第十四頁，共四十三頁。根據(jù)病毒致癌性大小分為兩型：低危型HPV(非癌相關(guān)型，LRHPV)高危型HPV〔癌相關(guān)型，HRHPV〕HPV感染是引起宮頸癌的主要病因,99%的宮頸癌HPV陽性，主要HPV16、HPV18(約占70%〕1BoschFX,etal.JNatlCancerInst1995;87:796-8022MatsukuraM,etal.IntJCancer1995;61:13-22HPV分型及致癌性第十五頁，共四十三頁。三、宮頸病變與HPV感染有什么關(guān)系？第十六頁，共四十三頁。第十七頁，共四十三頁。HPV感染多數(shù)不開展成為宮頸癌，可以在9-16(8-10)個(gè)月消失;間隔半年2次HPV〔＋〕為HPV持續(xù)感染;28%的持續(xù)感染者,在2年內(nèi)開展為CIN1；70%的持續(xù)感染者4年內(nèi)開展為CIN2;第十八頁，共四十三頁。HPV致宮頸癌機(jī)理圖式HPV感染持續(xù)HPV感染細(xì)胞分化異常CIN高度CIN宮頸癌輔助致癌劑免疫因素第十九頁，共四十三頁。HPV致宮頸癌進(jìn)展示意8—10年〔100%治愈〕2—5年〔死亡〕正常低度病變高度病變?cè)话┣譂櫚┑诙?，共四十三頁。宮頸病變與HPV感染的關(guān)系

HPV感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件，其相對(duì)危險(xiǎn)度或危險(xiǎn)度比值比高達(dá)250。歸因危險(xiǎn)百分比超過95%；HPV陰性者幾乎不會(huì)發(fā)生宮頸癌

第二十一頁，共四十三頁。四、美國關(guān)于婦女宮頸癌篩查的最新指南意見

2022年11月20日

第二十二頁，共四十三頁。LevelA1.宮頸癌的篩查應(yīng)該從21歲以上的婦女開始，不要開始過早，以免在低危人群中帶來不必要的恐慌，以及不必要的治療2.21-29歲年齡段的婦女，應(yīng)該每兩年進(jìn)行一次篩查。3.30歲以上婦女，如果沒有CIN2或者CIN3，不是艾滋病病毒感染者，不處于免疫抑制狀態(tài)〔例如免疫病或者器官移植后患者，需要長期服用免疫抑制劑〕，沒有子宮內(nèi)的DES暴露史〔通常指本人的母親在妊娠期曾經(jīng)接受過不適當(dāng)?shù)拇萍に刂委煵∈贰?，而且連續(xù)三次篩查結(jié)果都正常，可以將篩查的間隔改為每三年一次。第二十三頁，共四十三頁。4.可以選擇的篩查方法，包括TCT和傳統(tǒng)的巴氏涂片5.如果婦女因?yàn)榱夹圆∽儭沧訉m肌瘤，或者良性的卵巢腫瘤〕已經(jīng)切除了子宮，而且既往沒有高級(jí)別宮頸病變的歷史，可以不再進(jìn)行宮頸癌的篩查6.對(duì)于30歲以上的婦女，最佳答案的篩查方式是同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞學(xué)篩查〔TCT〕和宮頸HPV病毒檢測，如果兩項(xiàng)結(jié)果都正常，屬于宮頸癌的低危人群，篩查的間隔最好在三年以上第二十四頁，共四十三頁。LevelB1.已經(jīng)開始性生活，而且處于性活潑狀態(tài)的21歲以下的青年女性，應(yīng)該針對(duì)性傳播疾病以及性行為的平安，避孕方法等進(jìn)行咨詢，不需要進(jìn)行宮頸癌的篩查，如果沒有病癥，也沒有必要使用窺具進(jìn)行陰道檢查。2.對(duì)于65-70歲的老年婦女，如果連續(xù)三次篩查結(jié)果正常，而且在過去10年里，沒有過異常的檢查結(jié)果，可以停止宮頸癌的篩查。3.既往有過CIN2-3或者宮頸癌的治療病史的患者，應(yīng)該堅(jiān)持每年進(jìn)行宮頸癌篩查，至少20年。4.既往有過CIN2-3的患者，即使已經(jīng)切除了子宮，仍應(yīng)該堅(jiān)持進(jìn)行宮頸癌篩查。第二十五頁，共四十三頁。五、幾種篩查方法介紹第二十六頁，共四十三頁。膜式液基薄層細(xì)胞學(xué)〔TCT〕TCT將檢出率提高了60%左右目前全球運(yùn)用范圍最廣、用于子宮頸癌癌前篩查最可靠和最成熟的方法之一被納入衛(wèi)生部、十年百項(xiàng)PCC工程之一第二十七頁，共四十三頁。液基薄層細(xì)胞學(xué)TCT第二十八頁，共四十三頁。采樣漂洗擰緊記錄標(biāo)本的采集第二十九頁，共四十三頁。傳統(tǒng)涂片新柏氏涂片第三十頁，共四十三頁。HPV-DNA檢測HC-II〔核酸雜交檢測〕第三十一頁，共四十三頁。

原理：在分子水平采用基因雜交-化學(xué)發(fā)光-信號(hào)放大的檢測技術(shù)高危型：混合探針(雞尾酒探針)13種：16、18、31、33、35、39、4551、52、56、58、59、68型低危型：5種：6、11、42、43、44型唯一獲美國FDA認(rèn)證可用于臨床的HPVDNA檢測技術(shù),已獲歐洲CE及中國SDA認(rèn)證第三十二頁，共四十三頁。計(jì)算機(jī)判讀15min后DNA-RNA雜交60min抗體捕獲60min化學(xué)發(fā)光檢測30minDNA分解45minHC-II根本原理與實(shí)驗(yàn)步驟圖示原理是利用對(duì)抗體捕獲信號(hào)的放大和化學(xué)發(fā)光信號(hào)的檢測第三十三頁，共四十三頁。

HC2-HPV檢測的特點(diǎn)檢測方法簡單且效率高：高危HPV檢測敏感度高〔98%〕，高的陰性預(yù)測值〔99%〕如HPVDNA檢測陰性，該婦女在5～10年內(nèi)患宮頸癌的時(shí)機(jī)幾乎為零有統(tǒng)一的臨床判定標(biāo)準(zhǔn)〔≥1.0pg/ml為陽性〕,重復(fù)性好操作不受采集樣本的影響，不受操作環(huán)境的誤差影響檢測范圍：可同時(shí)檢測13種高危型第三十四頁，共四十三頁。標(biāo)本采集要求1．檢查前準(zhǔn)備：三天內(nèi)不要做陰道沖洗或使用陰道內(nèi)藥物；24小時(shí)內(nèi)不要有性生活；非月經(jīng)期做檢查2．采樣步驟：放置陰道張開器，用專用小刷子置于宮頸口與黏膜交界處逆時(shí)針轉(zhuǎn)三圈，停留10秒；將小刷子放于專用試管中，折斷多余局部；蓋上蓋子，可見小刷子存放于試管中3．標(biāo)本在室溫可保存二周，在4℃可保存三年第三十五頁，共四十三頁。六、子宮頸癌的生物學(xué)預(yù)防第三十六頁，共四十三頁。HPV基因結(jié)構(gòu)示意圖LCRE6E7E1E2E4E5L2L1長控制區(qū)早期轉(zhuǎn)錄基因區(qū):E6、E7基因

E6、E7蛋白晚期轉(zhuǎn)錄基因區(qū):病毒殼粒的蛋白質(zhì)第三十七頁，共四十三頁。HPV疫苗預(yù)防性疫苗：

針對(duì)健康人群。靶向病毒衣殼蛋白L1和L2，刺激機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性中和抗體，以阻斷HPV感染。治療性疫苗：

應(yīng)用對(duì)象為已感染人群。靶向病毒的E6、E7蛋白。主要用于去除在上皮基內(nèi)幕胞內(nèi)復(fù)制的病毒和HPV導(dǎo)致的異常細(xì)胞。

第三十八頁，共四十三頁。乳頭瘤病毒VLP的結(jié)構(gòu)模型*VLP(~20,000kD)

72CapsomeresL1殼粒(~280kD)5xL1L1蛋白(55–57kD)HPV病毒樣顆粒〔VLPs〕的組裝第三十九頁，共四十三頁。

值得注意的問題HPV16/18疫苗接種將會(huì)成為使婦女遠(yuǎn)離子宮頸癌危險(xiǎn)的有效方式。篩查會(huì)和疫苗接種同時(shí)存在很長的時(shí)間

HPV有很多不同的致癌型別，疫苗接種可以覆蓋所有的致癌型別么？1.SankaranarayananR

etal.IntJGynaecolObstet2005;89Suppl2:S4–12;2.Mu?oz

Netal.IntJCancer

2004;111:278–85;3.Goldie

SJetal.JNatlCancerInst2004;96:604–15;4.HarperDMetal.Lancet2004;364:1757–65;5.GoldieSJetal.IntJCancer2003;106:896–904.第