高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1江蘇省鹽城市七校聯(lián)盟2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中試卷分值：100分考試時(shí)間：75分鐘一、單項(xiàng)選擇題：本題包括14小題，每小題2分，共計(jì)28分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題意。1.中國傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是中華文化的重要組成部分，具有豐富的歷史背景和獨(dú)特的工藝特色。這些技術(shù)在食品制作中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，不僅增強(qiáng)了食品的風(fēng)味，還有助于食品的保存和營養(yǎng)成分的轉(zhuǎn)化。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種的固體發(fā)酵及半固體發(fā)酵為主，通常是家庭式或作坊式的B.在制作果酒、果醋發(fā)酵過程中，培養(yǎng)液的pH均會下降C.制作泡菜時(shí)，發(fā)酵液表面的白膜可能是乳酸菌大量繁殖引起的D.泡菜腌制過程中，隨著發(fā)酵時(shí)間的延長，亞硝酸鹽含量先增加后減少【答案】C〖祥解〗傳統(tǒng)發(fā)酵是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次發(fā)酵保存下來的發(fā)酵物中的微生物進(jìn)行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)?！驹斘觥緼、傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種的固體發(fā)酵及半固體發(fā)酵為主，通常是家庭式或作坊式的，A正確；B、果酒發(fā)酵過程中，會產(chǎn)生CO2，果醋發(fā)酵過程中，會產(chǎn)生醋酸，CO2和醋酸都會使培養(yǎng)液的pH下降，B正確；C、在制作泡菜時(shí)，發(fā)酵液表面的白膜可能是產(chǎn)膜酵母大量繁殖引起的。產(chǎn)膜酵母在有氧條件下可大量繁殖，形成白膜，C錯(cuò)誤；D、在泡菜的腌制過程中，隨著發(fā)酵時(shí)間的延長，亞硝酸鹽含量先增加后減少，D正確。故選C。2.聚氨基甲酸酯（PU）被廣泛應(yīng)用于工業(yè)、醫(yī)療、建筑和汽車等領(lǐng)域，但其在自然條件下難以降解，會污染土壤或水體。研究人員發(fā)現(xiàn)塔賓曲霉菌對PU有生物降解作用?，F(xiàn)從富含PU垃圾的土壤中篩選出能降解PU的目的菌，流程如圖1所示，對其降解能力的檢測如圖2所示。下列敘述正確的是（）A.圖2中不同菌落對PU的降解能力不同，其中E菌落是最理想菌株B.可分別使用濕熱滅菌法和干熱滅菌法對溶有土樣的培養(yǎng)液和培養(yǎng)瓶進(jìn)行滅菌C.相同條件下通過接種無菌水可檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否符合無菌要求D.圖1中劃線純化過程，需要對接種環(huán)灼燒5次【答案】A〖祥解〗一、選擇培養(yǎng)基：抑制大多數(shù)其他微生物的生長，或者造成有利于該菌生長的環(huán)境，培養(yǎng)一段時(shí)間后使得該菌成為優(yōu)勢菌，再通過稀釋涂布平板法對它進(jìn)行純化、培養(yǎng)、分離。二、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：(1)稀釋涂布平板法，①當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌；②通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來推測樣品中大約含有的活菌數(shù)。(2)利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。【詳析】A、實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，E菌落周圍的透明圈/菌落直徑最大，說明E菌株降解PU的能力最強(qiáng)，A正確；B、土樣是目的菌的來源，不能進(jìn)行滅菌，培養(yǎng)瓶可以用干熱滅菌法滅菌，B錯(cuò)誤；C、要檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否符合無菌要求，需將未接種的平板置于適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，看是否有菌落長出，C錯(cuò)誤；D、平板劃線法接種前需要對接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，每一次劃線前后都要進(jìn)行灼燒滅菌，圖1中劃線純化過程，需要對接種環(huán)灼燒6次，D錯(cuò)誤。故選A。3.在微生物學(xué)中使用選擇培養(yǎng)基讓特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的過程稱為選擇培養(yǎng)。在選擇培養(yǎng)基中添加一些特殊物質(zhì)，則可配制成鑒別培養(yǎng)基。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)基中添加青霉素從而將真菌從混有細(xì)菌的培養(yǎng)基上篩選出來B.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基分離出的細(xì)菌可能不止一種C.固氮菌能在不加氮源的培養(yǎng)基中生長，說明固氮菌為自養(yǎng)型生物D.制備單克隆抗體過程中，經(jīng)歷HAT選擇培養(yǎng)基篩選后獲得雜交瘤細(xì)胞，均能產(chǎn)生抗體，且無限增殖【答案】C〖祥解〗選擇培養(yǎng)基的原理是：不同微生物在代謝過程中所需要的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同。有的適于酸性環(huán)境，有的適于堿性環(huán)境；例如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽?！驹斘觥緼、青霉素可抑制細(xì)菌的生長，故分離酵母菌、霉菌等真菌時(shí)，可在培養(yǎng)基中加入青霉素，A正確；B、能分解尿素的細(xì)菌有多種，B正確；C、自養(yǎng)型微生物可自己制造有機(jī)物，固氮菌不能自己制造有機(jī)物，C錯(cuò)誤；D、制備單克隆抗體過程中，經(jīng)歷HAT選擇培養(yǎng)基篩選后獲得雜交瘤細(xì)胞，均能產(chǎn)生抗體，且具有無限增殖的能力，D正確。故選C。4.圖1和圖2是分別用平板劃線法和稀釋涂布平板法對豆腐鹵汁中的微生物進(jìn)行分離的示意圖。據(jù)圖分析，下列說法正確的是（）A.完成圖1所示的接種需要對接種環(huán)進(jìn)行4次灼燒滅菌B.圖1的最后一個(gè)區(qū)域不一定能獲得由目的微生物繁殖而來的菌落C.圖1和圖2都可以用于微生物計(jì)數(shù)，圖2的計(jì)數(shù)值一般低于實(shí)際值D.若圖2培養(yǎng)基中出現(xiàn)45個(gè)菌落，則10mL鹵汁中的微生物有4.5×109個(gè)【答案】B〖祥解〗一、稀釋涂布平板法：將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個(gè)細(xì)胞存在，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。二、平板劃線法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞，用接種環(huán)在平板表面上作多次由點(diǎn)到線的劃線稀釋而獲得較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，并讓其成長為單菌落的方法。【詳析】A、接種環(huán)每次使用前后都要進(jìn)行灼燒滅菌，完成圖1所示的接種需要對接種環(huán)進(jìn)行5次灼燒滅菌，A錯(cuò)誤；B、隨著劃線次數(shù)的增多菌液逐漸稀釋，可能獲得單菌落，但不一定是目的微生物繁殖而來，B正確；C、圖1是平板劃線法，不能用于微生物計(jì)數(shù)，只有圖2稀釋涂布平板法才能計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；D、若圖2的培養(yǎng)基中出現(xiàn)45個(gè)菌落，則0.1mL中含有45個(gè)微生物，1mL中有450個(gè)，該1mL相對于錐形瓶中的1mL稀釋了10000倍，故開始的錐形瓶中100mL，共有450×100×10000=4.5×108個(gè)，因此10mL鹵汁中的微生物有4.5×108個(gè)，D錯(cuò)誤。故選B。5.如圖為重慶啤酒廠啤酒釀造工藝流程，有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.“糖化”是利用麥芽中的淀粉酶、麥芽糖酶等將蒸煮后大米中的淀粉水解為酵母菌容易吸收利用的物質(zhì)B.糖化液添加酒花煮沸的目的是產(chǎn)生風(fēng)味組分，終止酶進(jìn)一步作用，并對糖漿殺菌C.發(fā)酵初期適當(dāng)充氧、攪拌可縮短發(fā)酵時(shí)間D.“精釀”啤酒不進(jìn)行過濾和消毒，故發(fā)酵過程不需要在無菌條件進(jìn)行【答案】D〖祥解〗啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都是在主發(fā)酵階段完成的；后發(fā)酵即在低溫、密閉的條件下儲存一段時(shí)間?！驹斘觥緼、“糖化”利用了酶的催化作用，用麥芽中的淀粉酶、麥芽糖酶催化淀粉水解，形成糖漿，便于酵母菌吸收利用，A正確；B、糖化液添加酒花煮沸可以產(chǎn)生風(fēng)味組分，并對糖漿進(jìn)行滅菌，高溫會破壞酶的空間結(jié)構(gòu)，因此煮沸還可以終止酶進(jìn)一步作用，B正確；C、發(fā)酵初期適當(dāng)充氧、攪拌可以讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，可縮短發(fā)酵時(shí)間，C正確；D、精釀啤酒不進(jìn)行過濾和消毒，但發(fā)酵過程必須在無菌條件下進(jìn)行，防止雜菌繁殖對發(fā)酵過程產(chǎn)生影響，D錯(cuò)誤。故選D。6.大麗花為菊科大麗花屬，是多年生草本植物。大麗花為世界名花之一，除具觀賞價(jià)值外，還具有藥用價(jià)值。大麗花在栽培過程中易受病毒感染，造成品質(zhì)退化。研究小組嘗試通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗，操作流程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.應(yīng)選取大麗花植株無病毒的莖尖作為外植體，并用70%酒精溶液浸泡30minB.誘導(dǎo)愈傷組織時(shí)，在酒精燈火焰旁將外植體的1/3～1/2正向插入培養(yǎng)基C.過程①為再分化，目的是使細(xì)胞失去原特有的結(jié)構(gòu)和功能，該過程無需光照D.2號和3號培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長素用量的比值分別為大于1和小于1【答案】B〖祥解〗圖示分析，①為外植體脫分化形成愈傷組織過程，②為愈傷組織經(jīng)過再分化形成叢壯苗的過程，③為叢壯苗在生根培養(yǎng)基中形成試管苗過程。【詳析】A、莖尖病毒很少或幾乎不含病毒，作為外植體培養(yǎng)脫毒苗，外植體需要在酒精中浸泡30s，A錯(cuò)誤；B、誘導(dǎo)愈傷組織時(shí)，在酒精燈火焰旁將外植體的1/3～1/2正向插入培養(yǎng)基，以避免雜菌污染，B正確；C、過程①為外植體經(jīng)過脫分化過程形成愈傷組織，目的是使細(xì)胞失去原特有的結(jié)構(gòu)和功能，該過程不需要光照，C錯(cuò)誤；D、2號培養(yǎng)基中脫分化過程所用的培養(yǎng)基細(xì)胞分裂素與生長素用量的比值等于1，3號培養(yǎng)基發(fā)芽培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長素用量的比值大于1，D錯(cuò)誤。故選B。7.我國科學(xué)家成功構(gòu)建了具有高比例胚胎干細(xì)胞的活產(chǎn)嵌合體猴。如圖所示，研究人員將4CL體系下培育的、可表達(dá)綠色熒光蛋白的供體獼猴的胚胎干細(xì)胞（簡稱4CL干細(xì)胞）注射至與其遺傳信息不同的獼猴胚胎中，并最終得到嵌合體猴。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.嵌合體猴中僅部分位置能發(fā)出綠色熒光是基因重組的結(jié)果B.嵌合體猴中來源于4CL干細(xì)胞的遺傳信息不一定能遺傳給后代C.植入胚胎前通常需要對代孕母猴注射相關(guān)的激素促使其同期發(fā)情D.嵌合囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞將發(fā)育為嵌合體猴的各種組織【答案】A〖祥解〗胚胎干細(xì)胞來源于早期胚胎或原始性腺分離出來的一類細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞，是高度未分化的細(xì)胞。如果進(jìn)行體外培養(yǎng)，能夠無限的增殖和分化。胚胎肝細(xì)胞還可以分化成多功能的細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞具有多能性，可以分化成多種組織的能力但是無法獨(dú)自發(fā)育成一個(gè)個(gè)體細(xì)胞。胚胎里的干細(xì)胞被稱為一種“全能”細(xì)胞，可以分化成所有類型的細(xì)胞，并且攜帶生物體的全套遺傳信息。【詳析】A、4CL胚胎干細(xì)胞與桑葚胚細(xì)胞嵌合發(fā)育成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，進(jìn)而共同發(fā)育成幼猴的各種組織，故嵌合體猴體內(nèi)綠色熒光散亂分布，未發(fā)生基因重組，A錯(cuò)誤；B、如果來源于4CL干細(xì)胞的遺傳信息位于體細(xì)胞中，則遺傳信息一般不能遺傳給后代，B正確；C、嵌合胚胎移植前，需要對代孕母猴注射孕激素，進(jìn)行同期發(fā)情處理，C正確；D、嵌合囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞會發(fā)育成個(gè)體（嵌合體猴）的各種組織，D正確。故選A。8.科研人員把豬卵母細(xì)胞進(jìn)行人為的孤雌激活處理，使其發(fā)育成胚胎，將胚胎移植到代孕母豬體內(nèi)，獲得世界上第一批成活的孤雌生殖克隆豬。這種克隆豬不同于體細(xì)胞核移植獲得的克隆豬，現(xiàn)將兩種技術(shù)進(jìn)行比較。下列表述正確的是（）A.移植前需要對受體進(jìn)行免疫抑制劑處理，增加胚胎移植成功率B.核移植操作之前，必須先用顯微操作法對供核細(xì)胞進(jìn)行取核C.孤雌生殖克隆豬與核移植克隆豬相比，缺少父方染色體，基因減少一半D.動物體細(xì)胞核移植的難度高于胚胎細(xì)胞核移植【答案】D〖祥解〗分析題圖：圖示為體細(xì)胞克隆豬的培育流程。其中①表示孤雌激活處理，②表示早期胚胎發(fā)育過程，③表示胚胎移植技術(shù)，④表示妊娠形成克隆豬，⑤表示核移植過程，⑥表示早期胚胎培養(yǎng)過程?！驹斘觥緼、胚胎移植前不需要對受體進(jìn)行免疫抑制劑處理，A錯(cuò)誤；B、因?yàn)槁?母)細(xì)胞大，容易操作，卵(母)細(xì)胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富，含有促使細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)，因此體細(xì)胞核移植時(shí)，需要選擇去核的減數(shù)第二次分裂的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，通過顯微操作去除卵母細(xì)胞中的核，采用電融合的方法促進(jìn)兩細(xì)胞融合，供核細(xì)胞無需取核，B錯(cuò)誤；C、孤雌生殖克隆豬與核移植克隆豬相比，缺少父方染色體，但染色體基因并未減少，C錯(cuò)誤；D、由于體細(xì)胞的分化程度較高，所以動物體細(xì)胞核移植的難度高于胚胎細(xì)胞核移植，D正確。故選D。9.在制備單克隆抗體的過程中HAT選擇培養(yǎng)基可以篩選出融合成功的雜交瘤細(xì)胞，一種雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)一種抗體?？茖W(xué)家通過動物細(xì)胞融合技術(shù)，將兩株不同的雜交瘤細(xì)胞（A和B）融合形成雙雜交瘤細(xì)胞AB。雙雜交瘤細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長繁殖，可以產(chǎn)生雙特異性抗體AB。據(jù)圖分析，下列說法正確的是（）A.雙雜交瘤細(xì)胞同時(shí)識別α、β抗原后，才能產(chǎn)生雙特異性抗體B.雙雜交瘤細(xì)胞的篩選需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測C.對培養(yǎng)到一定密度的雙雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，需要使用胰蛋白酶使之分散D.體外培養(yǎng)雙克隆抗體需要定期更換培養(yǎng)液以創(chuàng)設(shè)無菌環(huán)境【答案】B〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。【詳析】A、雜交瘤細(xì)胞是由已免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，無需接觸抗原就能產(chǎn)生抗體，A錯(cuò)誤；B、單克隆抗體制備過程中，雜交瘤細(xì)胞需要進(jìn)行兩次篩選，第一次利用選擇培養(yǎng)基篩選出能在特定培養(yǎng)基生長且能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選可用抗原-抗體雜交的方法篩選出產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，雙雜交瘤細(xì)胞是由兩個(gè)雜交瘤細(xì)胞融合而成，需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，B正確；C、雙雜交瘤細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長繁殖，若要傳代培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)液直接離心，去除上清液培養(yǎng)基，加入新鮮培養(yǎng)基即可，不用胰蛋白酶處理，C錯(cuò)誤；D、體外培養(yǎng)雙克隆抗體需要定期更換培養(yǎng)液以補(bǔ)充營養(yǎng)，減少代謝廢物的產(chǎn)生，D錯(cuò)誤。故選B。10.體外受精技術(shù)是提高動物繁殖能力的有效措施，該技術(shù)還可為胚胎移植提供可用的胚胎。下列關(guān)于體外受精和胚胎移植的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.在精子的刺激下，卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后形成雌原核B.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”利用了體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)和遺傳學(xué)診斷技術(shù)C.對胚胎進(jìn)行分割時(shí)，可選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚進(jìn)行均等分割D.體外受精時(shí)，用高濃度的ATP溶液處理采集到的精子使其獲能【答案】D〖祥解〗體外受精包括精子的采集和獲能、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、體外受精，該技術(shù)產(chǎn)生的動物稱為試管動物。【詳析】A、精子入卵后卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ、排出第二極體、形成雌原核，A正確；B、設(shè)計(jì)試管嬰兒是指體外受精形成胚胎在植入母體孕育前，根據(jù)人們的需要，將胚胎的一個(gè)細(xì)胞取出，進(jìn)行某些基因檢測，設(shè)計(jì)試管嬰兒利用了體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)和植入前胚胎遺傳學(xué)診斷技術(shù)，B正確；C、對胚胎進(jìn)行分割時(shí)，可選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚進(jìn)行均等分割，C正確；D、獲能是指獲得受精的能力，而不是獲得能力，因此不是用高濃度的ATP溶液處理采集到的精子使其獲能，而是需要用特殊的培養(yǎng)液使其處于獲能狀態(tài)，D錯(cuò)誤。故選D。11.下圖表示PCR過程中某個(gè)階段反應(yīng)體系的情況，①②③④表示相關(guān)物質(zhì)，L、R表示方向。下列敘述正確的是（）A.②鏈從L到R的方向?yàn)?′→5′，①②鏈均可作為子鏈合成的模板B.PCR過程需要通過解旋酶斷開氫鍵，且為邊解旋邊復(fù)制C.以1個(gè)DNA為模板經(jīng)3次循環(huán)需消耗7個(gè)引物③D.通過PCR擴(kuò)增出目的基因是基因工程的核心工作【答案】C〖祥解〗PCR技術(shù)：（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。（2）原理：DNA復(fù)制。（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對引物。（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開?！驹斘觥緼、由圖可知，④鏈從L到R的方向?yàn)?′→5′，DNA雙鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械模c之配對的②鏈從L到R的方向?yàn)?′→3′，A錯(cuò)誤；B、PCR過程是通過高溫將雙鏈DNA之間的氫鍵斷開，并且是全部解旋之后才進(jìn)行復(fù)制，B錯(cuò)誤；C、以1個(gè)DNA為模板經(jīng)3次循環(huán)共需消耗23×2-2=14個(gè)引物，分別消耗③、④引物7個(gè)，C正確；D、基因工程的核心工作是構(gòu)建重組表達(dá)載體，D錯(cuò)誤。故選C。12.下列關(guān)于基因工程的說法正確的是（）A.基因工程所需要的工具酶有限制酶、DNA連接酶和載體B.起始密碼子是RNA聚合酶的識別并結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNAC.利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因插入T-DNA上進(jìn)而整合到受體細(xì)胞的DNA中，其實(shí)質(zhì)是基因重組D.將某藥用蛋白基因?qū)肴橄偌?xì)胞中，獲得乳腺生物反應(yīng)器【答案】C〖祥解〗基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、動植物病毒?！驹斘觥緼、載體不屬于工具酶，基因工程所需要的工具酶有限制酶、DNA連接酶，A錯(cuò)誤；B、啟動子是RNA聚合酶的識別并結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，B錯(cuò)誤；C、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是，農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，其實(shí)質(zhì)是基因重組，C正確；D、要獲得乳腺生物反應(yīng)器，應(yīng)將藥用蛋白基因?qū)胧芫阎校皇侨橄偌?xì)胞，因?yàn)槭芫丫哂腥苄?，D錯(cuò)誤。故選C。13.下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”、“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述，錯(cuò)誤的是（）A.洋蔥切碎后加研磨液研磨過濾后，濾液放置4℃冰箱放置，DNA存在于沉淀物中B.可以利用洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料，也可以選擇雞血、豬肝等作為DNA粗提取的實(shí)驗(yàn)材料，提取方法可能稍有不同C.瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭等需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌D.電泳鑒定DNA時(shí)，先將PCR產(chǎn)物與含指示劑的凝膠載樣緩沖液混合，再加入加樣孔中【答案】A〖祥解〗DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；②DNA不溶于酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離；③在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍(lán)色?！驹斘觥緼、洋蔥切碎后加研磨液研磨過濾后，濾液放置4℃冰箱放置，DNA存在于上清中，A錯(cuò)誤；B、理論上只要含有DNA的生物組織均可作為該實(shí)驗(yàn)的材料，因此洋蔥、雞血，豬肝等均可作為提取DNA的材料，B正確；C、PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、蒸餾水等在使用前都必須進(jìn)行高壓滅菌處理，C正確；D、電泳鑒定DNA時(shí)，需要將PCR產(chǎn)物與含指示劑的凝膠載樣緩沖液混合后再加入加樣孔中?，D正確。故選A。14.生物技術(shù)是以現(xiàn)代生命科學(xué)理論為基礎(chǔ)，在個(gè)體、細(xì)胞分子水平上研究及制造產(chǎn)品或改造動物、植物、微生物等，并使其具有所期望的品質(zhì)和特性。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.生物武器是用微生物、毒素、抗生素及重組致病菌等來形成殺傷力B.將基因編輯技術(shù)應(yīng)用于生殖性克隆，不符合人類倫理道德C.轉(zhuǎn)基因生物可能會破壞生態(tài)平衡D.干細(xì)胞培養(yǎng)在臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域前景廣泛，但也可能面臨安全性問題【答案】A〖祥解〗生物技術(shù)是一門涉及對生物進(jìn)行研究和改造的學(xué)科。干細(xì)胞培養(yǎng)具有很大的應(yīng)用潛力，但也存在一些潛在的安全風(fēng)險(xiǎn)?；蚋脑炜梢愿纳频鞍踪|(zhì)的性質(zhì)，提高其穩(wěn)定性。基因編輯技術(shù)在生殖性克隆方面存在倫理道德問題?！驹斘觥緼、生物武器是用微生物、毒素及重組致病菌等來形成殺傷力，抗生素是一種用于治療疾病的藥物，不是用于制造生物武器的成分，A錯(cuò)誤；B、將基因編輯技術(shù)應(yīng)用于生殖性克隆，會引發(fā)一系列倫理道德問題，不符合人類倫理道德，B正確；C、轉(zhuǎn)基因生物可能具有更強(qiáng)的生存競爭能力，可能會破壞原有的生態(tài)平衡，C正確；D、干細(xì)胞培養(yǎng)在臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域前景廣泛，比如用于治療一些疑難疾病，但由于干細(xì)胞的分化和增殖等特性，也可能面臨安全性問題，如免疫排斥、腫瘤形成等，D正確。故選A。二、多選題：本部分包括5題，每題3分，共計(jì)15分。每題有不止一個(gè)選項(xiàng)符合題意。每題全選對者得3分，選對但不全的得1分，錯(cuò)選或不答的得0分。15.科研人員以裙帶菜下腳料根莖為原料，以糧食加工副產(chǎn)品為輔料，通過微生物發(fā)酵技術(shù)開發(fā)裙帶菜醬油，下圖是其生產(chǎn)工藝流程，相關(guān)敘述正確的是（）A.裙帶菜莖、麥麩、豆粕和小麥混合物中的淀粉均可為米曲霉提供碳源和氮源B.蒸料可以殺死原料中部分雜菌，蒸料后冷卻的目的是防止高溫殺死菌種C.通風(fēng)培養(yǎng)有利于黑曲霉和米曲霉快速生長繁殖、分泌多種水解酶D.鹽濃度過低容易引起酸醅腐敗，濃度過高會抑制蛋白酶活性【答案】BCD〖祥解〗發(fā)酵是指人們利用微生物，在適宜的條件下，將原料通過微生物的代謝轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。【詳析】A、淀粉只含C、H、O，不能提供氮源，A錯(cuò)誤；B、蒸料在高溫下進(jìn)行，可以殺死部分雜菌。蒸料后要接種菌種，因此蒸料后要先冷卻，防止高溫殺死菌種，B正確；C、黑曲霉和米曲霉是需氧型生物，通風(fēng)培養(yǎng)有利于黑曲霉和米曲霉快速生長繁殖、分泌多種水解酶，C正確；D、適宜濃度食鹽有抑制微生物繁殖的作用，鹽濃度過低抑制作用弱，容易引起酸醅腐敗，濃度過高會抑制蛋白酶活性，D正確。故選BCD。16.如圖為核移植實(shí)驗(yàn)過程示意圖，根據(jù)圖示分析下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.去核的時(shí)期應(yīng)該在MⅠ期，原因是該時(shí)期第一極體和卵細(xì)胞核較近B.桑葚胚細(xì)胞應(yīng)提取出細(xì)胞核后，盡快注入去核的卵母細(xì)胞中C.電融合法可促使重構(gòu)胚形成，后期還需要其他方法激活重構(gòu)胚D.受體動物應(yīng)選擇與供體相同的品種，防止出現(xiàn)免疫排斥現(xiàn)象【答案】ABD〖祥解〗受精前的準(zhǔn)備階段：（1）準(zhǔn)備階段1-精子獲能，剛剛排出的精子，不能立即與卵子受精，必須在雌性動物生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后，才能獲得受精能力。（2）準(zhǔn)備階段2-卵子的準(zhǔn)備，動物排出的可能是初級卵母細(xì)胞也可能是次級卵母細(xì)胞，都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)，才具備與精子受精的能力。【詳析】A、去核的時(shí)期應(yīng)該在MⅡ期，A錯(cuò)誤；B、由圖可知，桑葚胚細(xì)胞不需要提取出細(xì)胞核，可直接注入去核的卵母細(xì)胞中，B錯(cuò)誤；C、電融合法可促使重組胚胎形成，后期還需要其他方法（如電刺激、Ca2+載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等）激活重組胚胎，C正確；D、受體動物應(yīng)選擇與供體相同的品種，一般不會出現(xiàn)免疫排斥現(xiàn)象，兩者之間無關(guān)，D錯(cuò)誤。故選ABD。17.甲植物具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀，乙植物的細(xì)胞質(zhì)中含有抗除草劑基因，下圖是將乙細(xì)胞的抗性基因引入甲細(xì)胞的體細(xì)胞雜交流程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.若甲、乙兩種植株存在生殖隔離，該實(shí)驗(yàn)無法成功B.過程B體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動性，細(xì)胞膜是植物細(xì)胞的邊界C.兩兩融合的細(xì)胞有三種，同種融合的細(xì)胞無法存活可以達(dá)到篩選目的D.雜種植株抗除草劑基因的遺傳遵循孟德爾遺傳規(guī)律【答案】AD〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交過程：先用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，借助物理或化學(xué)方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，得到的雜種細(xì)胞再經(jīng)過誘導(dǎo)形成愈傷組織，并進(jìn)一步發(fā)育成完整植株?！驹斘觥緼、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和，A錯(cuò)誤；B、原生質(zhì)體的融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動性，細(xì)胞壁具有全透性，因此細(xì)胞膜是植物細(xì)胞的邊界，B正確；C、甲原生質(zhì)體的細(xì)胞質(zhì)失去活性，乙原生質(zhì)體的細(xì)胞核失去活性，細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)對于細(xì)胞完成生命活動缺一不可，兩兩融合的細(xì)胞有三種（甲與甲融合、乙與乙融合，甲與乙融合），只有甲乙融合的細(xì)胞能夠存活，同種融合的細(xì)胞無法存活可以達(dá)到篩選目的，C正確；D、抗除草劑基因存在于細(xì)胞質(zhì)，該基因不遵循孟德爾遺傳規(guī)律，D錯(cuò)誤。故選AD。18.研究發(fā)現(xiàn)，大豆GmNF-YA19基因在干旱脅迫中有響應(yīng)。科研人員利用PCR擴(kuò)增GmNF-YA19基因，構(gòu)建GmNF-YA19基因表達(dá)載體并轉(zhuǎn)化煙草，實(shí)驗(yàn)過程如圖1、2所示。下列說法正確的是（）A.PCR擴(kuò)增GmNF-YA19基因的前提是根據(jù)已知核苷酸序列合成兩種引物B.為獲得能正確表達(dá)目的基因的重組質(zhì)粒，應(yīng)選用限制酶KpnI、EcoRI進(jìn)行切割C.終止子為一段DNA序列，其作用是使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停下來D.重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化煙草后，可使用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基來篩選目的細(xì)胞【答案】ACD〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳析】A、PCR擴(kuò)增GmNF-YA19基因的前提是根據(jù)已知核苷酸序列合成兩種引物，因?yàn)樽渔湹难由旆绞皆谝锏?'端，A正確；B、根據(jù)圖中信息，在質(zhì)粒的啟動子和終止子中間含有的限制酶為PvuⅡ、KpnI和EcoRI三種限制酶切割位點(diǎn)，由于KpnI在質(zhì)粒中不止一個(gè)識別位點(diǎn)，因此最好選用PvuⅡ和EcoRI進(jìn)行切割，且在目的基因的兩端也存在著兩種酶的識別位點(diǎn)，即選用PvuⅡ和EcoRI兩種限制酶切割含目的基因的DNA片段和載體，這樣可以保證目的基因和質(zhì)粒正向連接、避免發(fā)生自身環(huán)，B錯(cuò)誤；C、終止子是位于基因末端的一段特殊的DNA序列，其作用是使轉(zhuǎn)錄過程在所需要的地方停下來，C正確；D、重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化煙草后，重組質(zhì)粒中含有抗氨芐青霉素的基因，該基因可作為標(biāo)記基因，因而使用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基來篩選成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的目的細(xì)胞，D正確。故選ACD。19.用A和B兩種限制酶同時(shí)或分別處理某DNA分子，酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物的電泳結(jié)果如圖乙所示。下列敘述正確的是（）A.圖甲中X代表的堿基對數(shù)為4500，Y是限制酶A的酶切位點(diǎn)B.圖乙中①代表酶A，②代表酶BC.圖中DNA片段經(jīng)酶A和酶B同時(shí)處理后，得到4個(gè)末端D.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著與它所帶電荷相反的電極移動的原理【答案】ABD〖祥解〗電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程。許多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解離的基團(tuán)，在一定的pH下，這些基團(tuán)會帶上正電或負(fù)電。在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動。電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小，形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離?！驹斘觥緼B、分析圖乙可知，該DNA分子總共有10000個(gè)堿基對，所以圖甲中X代表的堿基對數(shù)為10000-3500-1500-500=4500，結(jié)合圖甲和圖乙分析可知，限制酶B切后兩條帶的長度為8000bp和2000bp，所以圖甲中Y表示限制酶A酶切位點(diǎn)，經(jīng)限制酶A切后得到6000bp、3500bp和500bp三個(gè)片段，即圖乙中的代表酶A，②代表酶B，AB正確；C、圖中DNA片段經(jīng)酶A和酶B同時(shí)處理后，共有3個(gè)酶切位點(diǎn)，每個(gè)酶切位點(diǎn)得到2個(gè)末端，所以得到6個(gè)末端，C錯(cuò)誤；D、電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著與它所帶電荷相反的電極移動的原理，D正確。故選ABD。三、非選擇題：本部分包括5題，共計(jì)57分。除特殊標(biāo)明外，其余每空1分。20.我國古代勞動人民用不同原料釀酒的歷史已有五千多年，并總結(jié)了制作果酒、果醋、泡菜等發(fā)酵食品的豐富經(jīng)驗(yàn)和方法。圖1是制作蘋果酒、蘋果醋的簡要工藝流程。請回答問題：（1）制作蘋果酒的菌種的代謝類型是______，與制作蘋果醋的菌種相比，制作蘋果酒的菌種在結(jié)構(gòu)上的主要特點(diǎn)是______。（2）蘋果酒制作時(shí)，發(fā)酵瓶中不能裝滿蘋果汁，要留約1/3的空間，目的是_____（答出1點(diǎn)即可）。（3）在蘋果酒和蘋果醋的制作過程中，使用如圖2所示的發(fā)酵裝置。充氣口在制作蘋果酒時(shí)應(yīng)______（填“打開”或“關(guān)閉”）；排氣口要通過一個(gè)長而彎曲的膠管d與瓶身相連，這樣做的目的是________。（4）檢驗(yàn)蘋果酒的制作是否成功，除了嗅聞發(fā)酵液是否有酒味外，還可用______溶液進(jìn)行鑒定，若顯示灰綠色，則說明產(chǎn)生了酒精。（5）某同學(xué)欲統(tǒng)計(jì)蘋果醋中醋酸菌的總數(shù)，分別選用稀釋度為10-4、10-5、10-6的稀釋液采用________法接種于固體培養(yǎng)基表面，使用的接種工具是_______。每種稀釋液都設(shè)置了3個(gè)平板置于適宜條件下培養(yǎng)，設(shè)置3個(gè)平板的原因是________。（6）泡菜制作時(shí)要用適宜濃度的鹽水沒過新鮮蔬菜。所用鹽水需煮沸后冷卻，其冷卻的目的是_____（答出1點(diǎn)即可）。為了縮短制作時(shí)間，通常會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，目的是_____?！敬鸢浮浚?）①.兼性厭氧型②.有成形細(xì)胞核（2）讓酵母菌有氧呼吸大量繁殖，或防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2使發(fā)酵液溢出

（3）①.關(guān)閉②.防止空氣中雜菌污染（4）（酸性的）重鉻酸鉀（5）①.稀釋涂布平板法

②.涂布器③.（可求平均值），減小實(shí)驗(yàn)誤差（6）①.避免乳酸菌等發(fā)酵菌種死亡②.增加乳酸菌數(shù)量（相當(dāng)于接種乳酸菌）〖祥解〗參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。在有氧條件下，將葡萄糖氧化成二氧化碳和水，在無氧條件下將葡萄糖分解成酒精和二氧化碳；參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成乙酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)橐宜??！拘?詳析】果酒制作中起到主要作用的微生物是酵母菌，酵母菌只能利用現(xiàn)成有機(jī)物，是一種異養(yǎng)型生物，既能進(jìn)行有氧呼吸也能進(jìn)行無氧呼吸，屬于兼性厭氧型，因此酵母菌是一種異養(yǎng)兼性厭氧型生物；制作蘋果醋的菌種為醋酸菌，與醋酸菌（原核生物）相比，酵母菌（真核生物）在結(jié)構(gòu)上的主要特點(diǎn)是有核膜包被的細(xì)胞核?！拘?詳析】蘋果酒制作時(shí)，為了讓酵母菌有氧呼吸大量繁殖，或防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2使發(fā)酵液溢出，發(fā)酵瓶中不能裝滿蘋果汁，要留約1/3的空間?！拘?詳析】在蘋果酒和蘋果醋的制作過程中，發(fā)酵裝置的充氣口在制作蘋果酒時(shí)應(yīng)關(guān)閉，而需要在排氣口要連接一個(gè)長而彎曲的膠管d與瓶身相連?！拘?詳析】檢驗(yàn)蘋果酒的制作是否成功，除了嗅聞發(fā)酵液是否有酒味外，還可用酸性條件下的重鉻酸鉀溶液進(jìn)行鑒定，若表現(xiàn)灰綠色說明有酒精產(chǎn)生?！拘?詳析】稀釋涂布分離法可以對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，欲統(tǒng)計(jì)蘋果醋中醋酸桿菌的總數(shù)，分別選用稀釋度為10-4、10-5、10-6的稀釋液進(jìn)行涂布；涂布時(shí)需要接種工具涂布器（或三角刮刀）；每種稀釋液都設(shè)置了3個(gè)平板置于適宜條件下培養(yǎng)，設(shè)置3個(gè)平板求得平均值，重復(fù)實(shí)驗(yàn)可以減小實(shí)驗(yàn)誤差?！拘?詳析】制作泡菜時(shí)所用鹽水需煮沸，其目的是消滅雜菌，煮沸后需要冷卻，是為了避免高溫使乳酸菌死亡；為了縮短制作時(shí)間，有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入陳泡菜液是為了增加乳酸菌含量。21.在水體凈化和污水處理領(lǐng)域，因?yàn)榇竽c桿菌在糞便中數(shù)量較多，故常用為檢查水源是否被糞便污染的關(guān)鍵指標(biāo)。（1）為檢測水樣中的大腸桿菌，首先要配制培養(yǎng)基，步驟如下：稱取適量的蛋白胨、NaCl、瓊脂等，加入蒸餾水，攪拌加熱至完全溶解后_________，分裝到錐形瓶后________，再在無菌條件下加入滅菌的乳糖溶液、伊紅及美藍(lán)溶液，搖勻后立即倒平板。從培養(yǎng)基物理性質(zhì)上看，該培養(yǎng)基為________培養(yǎng)基。根據(jù)培養(yǎng)基成分可知，大腸桿菌的同化作用類型是_______。（2）取待檢水樣1mL加入到9mL無菌水中，制成接種樣液。實(shí)驗(yàn)組：將_______用_______法接種在上述培養(yǎng)基上。對照組：將_______接種在相同培養(yǎng)基上或不接種。相同條件下培養(yǎng)48h后觀察結(jié)果。如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)________，則可基本排除操作誤差對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。（3）某同學(xué)將提取到的大腸桿菌接種在含有利福平（一種廣譜抗生素）的伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，結(jié)果獲得了多個(gè)菌落，為確定菌落出現(xiàn)的原因，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下：①培養(yǎng)基中加入利福平的目的是_______。②采用________法接種大腸桿菌樣液，將接種后的培養(yǎng)皿________放在36℃的恒溫箱中培養(yǎng)相同時(shí)間。③該實(shí)驗(yàn)有兩個(gè)假設(shè)：假設(shè)一：大腸桿菌的抗利福平突變發(fā)生在大腸桿菌與利福平接觸之前。假設(shè)二：大腸桿菌的抗利福平突變發(fā)生在大腸桿菌與利福平接觸之后。你認(rèn)為圖中的實(shí)驗(yàn)結(jié)果支持假設(shè)_____（填“一或二”），如果另一個(gè)假設(shè)成立的話，實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)該是_____?！敬鸢浮浚?）①.調(diào)節(jié)pH②.高壓蒸汽滅菌③.固體④.異養(yǎng)型（2）①.接種樣液②.涂布平板

③.無菌水④.對照組無菌落生長

（3）①.選擇具有抗利福平突變的大腸桿菌②.稀釋涂布平板③.倒置④.一⑤.AB兩組中所有的培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)沒有顯著差異

〖祥解〗培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基，按照功能分為鑒定培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基作用，人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長?！拘?詳析】配制培養(yǎng)基時(shí)，稱取適量的蛋白胨、NaCl、瓊脂等，加入蒸餾水，攪拌加熱至完全溶解后需要調(diào)節(jié)pH，因?yàn)槲⑸锷L需要適宜的pH環(huán)境，分裝到錐形瓶后要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，目的是殺滅培養(yǎng)基中的雜菌，保證培養(yǎng)基的無菌狀態(tài)。由于培養(yǎng)基中加入了瓊脂作為凝固劑，從培養(yǎng)基物理性質(zhì)上看，該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中含有蛋白胨等有機(jī)物，大腸桿菌需要利用這些有機(jī)物作為碳源和氮源等，所以大腸桿菌的同化作用類型是異養(yǎng)型?！拘?詳析】實(shí)驗(yàn)組是檢測水樣中是否有大腸桿菌，所以將接種樣液用劃線法或涂布平板法接種在上述培養(yǎng)基上。對照組為了排除操作誤差等對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，將無菌水用劃線法接種在相同培養(yǎng)基上或不接種。如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)對照組無菌落生長，說明操作過程沒有引入雜菌，可基本排除操作誤差對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響?！拘?詳析】①加利福平的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，作用是選擇具有抗利福平突變的大腸桿菌，因?yàn)槔Ｆ绞且环N廣譜抗生素，能抑制不抗利福平的細(xì)菌生長。②采用稀釋涂布平板法接種大腸桿菌樣液，這樣可以使大腸桿菌均勻分布在培養(yǎng)基上，便于統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，將接種后的培養(yǎng)皿倒置放在36℃的恒溫箱中培養(yǎng)相同時(shí)間，倒置培養(yǎng)可以防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落污染培養(yǎng)基。③假設(shè)大腸桿菌的抗利福平突變發(fā)生在大腸桿菌與利福平接觸之后，AB兩組中所有的培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)沒有顯著差異，現(xiàn)由圖可知，AB兩組菌落差異較大，所以大腸桿菌的抗利福平突變發(fā)生在大腸桿菌與利福平接觸之前，實(shí)驗(yàn)結(jié)果支持假設(shè)一。22.Ⅰ．培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗，根據(jù)獲得試管苗的過程，回答下列問題：（1）從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基的原因是：ⅰ．誘導(dǎo)愈傷組織形成和誘導(dǎo)愈傷組織分化形成試管苗所需的生長素和細(xì)胞分裂素的比例不同；ⅱ．________。（2）⑥過程要進(jìn)行照光培養(yǎng)，其作用是__________________。（3）病毒在作物體內(nèi)逐年積累，就會導(dǎo)致作物產(chǎn)量較低，品質(zhì)變差。生產(chǎn)上，作物脫毒也用到了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，選擇莖尖為材料，原因是________。Ⅱ．科學(xué)家利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)成功獲得了番茄——馬鈴薯雜種植株，為了便于雜種細(xì)胞的篩選和鑒定，科學(xué)家利用紅色熒光和綠色熒光分別標(biāo)記番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體膜上的蛋白質(zhì)，其培育過程如圖所示。據(jù)圖回答下列問題：（4）為獲得原生質(zhì)體，過程①需要利用_______處理兩種植物細(xì)胞。兩種植物細(xì)胞的原生質(zhì)體融合成功的依據(jù)是________。（5）寫出促進(jìn)原生質(zhì)體融合的方法________（寫出兩個(gè)）。（6）過程③和④利用的植物細(xì)胞工程技術(shù)是_______。該技術(shù)依據(jù)的生物學(xué)原理是_______。（7）細(xì)胞融合完成后，融合細(xì)胞的細(xì)胞膜表面的熒光顏色可能是_________。（8）已知番茄細(xì)胞內(nèi)有12對同源染色體，馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)共48條染色體，則在“番茄一馬鈴薯”細(xì)胞分裂過程中最多可以觀察到______條染色體。【答案】（1）隨培養(yǎng)時(shí)間的增加，培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)不斷減少，有害代謝產(chǎn)物逐漸積累，會抑制植物的生長（2）誘導(dǎo)葉綠素的形成，使試管苗能夠進(jìn)行光合作用（3）莖尖(頂端分生區(qū))的病毒極少，甚至無病毒（4）①.纖維素酶和果膠酶

②.雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁（5）離心法、電融合法、聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法

（6）①.植物組織培養(yǎng)②.植物細(xì)胞具有全能性（7）紅色熒光和綠色熒光、紅色熒光、綠色熒光（8）144

〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交是指將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法：物理法（離心、振動、電激等）和化學(xué)法（聚乙二醇等）。植物體細(xì)胞雜交的意義：克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)大親本范圍，培育作物新品種?！拘?詳析】從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基，其原因是誘導(dǎo)愈傷組織形成和誘導(dǎo)愈傷組織分化形成試管苗所需的生長素和細(xì)胞分裂素的比例不同，同時(shí)隨培養(yǎng)時(shí)間的增加，培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)不斷減少，有害代謝產(chǎn)物逐漸積累，會抑制植物的生長?！拘?詳析】步驟⑥要進(jìn)行照光培養(yǎng)，其作用是誘導(dǎo)葉綠素形成，使試管苗能夠進(jìn)行光合作用?！拘?詳析】作物脫毒選擇莖尖作為材料是因?yàn)榍o尖(頂端分生區(qū))的病毒極少，甚至無病毒，切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植物就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗?！拘?詳析】植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因此根據(jù)酶的專一性原理，去除植物細(xì)胞壁常用纖維素酶和果膠酶；細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁?！拘?詳析】誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)方法有PEG融合法、高Ca2+-高pH融合法、離心法、電融合法?！拘?詳析】植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性，其過程為：離體的植物組織，器官或細(xì)胞經(jīng)過脫分化過程形成愈傷組織，愈傷組織經(jīng)過再分化過程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育成為植株，因此，過程③和④利用的是植物組織培養(yǎng)技術(shù)；該技術(shù)的原理是植物細(xì)胞到的全能性?！拘?詳析】番茄原生質(zhì)體用紅色熒光標(biāo)記，馬鈴薯原生質(zhì)體用綠色熒光標(biāo)記，雜種細(xì)胞的細(xì)胞膜上含有兩種顏色的熒光標(biāo)記，且均勻分布于細(xì)胞膜表面，但由于存在沒有融合的細(xì)胞和同種核融合的細(xì)胞，故細(xì)胞膜表面還有綠色熒光和紅色熒光?！拘?詳析】若番茄細(xì)胞內(nèi)有24條染色體，馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)有48條染色體，則在“番茄-馬鈴薯”細(xì)胞染色體數(shù)目為72，在有絲分裂后期著絲粒分裂，染色體數(shù)目加倍，因而可以觀察到144條染色體。23.CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細(xì)胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。某研究團(tuán)隊(duì)推測，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細(xì)胞的抑制作用，為此他們按照如下流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)?；卮鹣铝袉栴}：（1）實(shí)驗(yàn)前應(yīng)給模型小鼠注射______________，以刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。制備B淋巴細(xì)胞懸液時(shí)可采用機(jī)械方法或用__________酶處理。細(xì)胞培養(yǎng)中，為防止有害代謝物的積累，可采用___________的方法。（2）圖中形成融合細(xì)胞過程，誘導(dǎo)融合的方法與植物體細(xì)胞雜交相比特有的是用__________誘導(dǎo)融合過程，若只考慮細(xì)胞的兩兩融合，理論上融合的細(xì)胞有__________種類型，篩選1可使用特定的______________培養(yǎng)基進(jìn)行，得到的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是_____________。（3）篩選2過程，往往取一定稀釋倍數(shù)的雜交瘤細(xì)胞懸液加入到多孔玻璃板中，如圖2所示，適宜條件下培養(yǎng)并進(jìn)行抗體檢測，抗體檢測的原理是____________。若每個(gè)孔中有多個(gè)細(xì)胞，陽性反應(yīng)孔中的細(xì)胞還需多次稀釋培養(yǎng)并檢測，目的是____________。（4）為了檢測抗CD47的單克隆抗體的功能，科學(xué)家把制備的單克隆抗體加入到巨噬細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞的共同培養(yǎng)體系作為實(shí)驗(yàn)組，以__________作為對照組，統(tǒng)計(jì)各組中被吞噬的腫瘤細(xì)胞所占的比例。若實(shí)驗(yàn)組中該比例______________對照組，則可證明上述推測正確?！敬鸢浮浚?）①.CD47蛋白（或CD47)

②.胰蛋白酶或膠原蛋白③.定期更換培養(yǎng)液（2）①.滅活的病毒②.3或三③.選擇④.既能大量增殖，又能產(chǎn)生專一（特異性）抗體（3）①.抗原與抗體特異性結(jié)合②.篩選出能產(chǎn)生抗CD47抗體（所需抗體）的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞（4）①.不加單克隆抗體的巨噬細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞共同培養(yǎng)體系②.高于〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！拘?詳析】一般而言，一種抗原能刺激B細(xì)胞產(chǎn)生一種抗體，為獲得抗CD47的單克隆抗體，實(shí)驗(yàn)前應(yīng)給模型小鼠注射CD47蛋白，以刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；圖中制備B淋巴細(xì)胞懸液時(shí)可采用機(jī)械方法或用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理；為防止有害代謝物的積累，可采用定期更換培養(yǎng)液的方法處理?！拘?詳析】與植物體細(xì)胞雜交相比，動物細(xì)胞融合特有的方法是滅活的病毒誘導(dǎo)法；若只考慮細(xì)胞兩兩融合，理論上有3種，包括兩個(gè)骨髓瘤細(xì)胞融合的類型，兩個(gè)B淋巴細(xì)胞融合的類型，骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的類型；圖1中篩選1是將融合細(xì)胞放在選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在該培養(yǎng)基上未融合的細(xì)胞和同種融合的細(xì)胞都死亡，只有雜交瘤細(xì)胞能存活，得到的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能大量增殖，又能產(chǎn)生專一（特異性）抗體?！拘?詳析】圖2表示篩選2過程，取一定稀釋倍數(shù)的雜交瘤細(xì)胞懸液加入到多孔玻璃板中，適宜條件下培養(yǎng)，然后利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理進(jìn)行抗體檢測；檢測陽性反應(yīng)孔中的細(xì)胞還需多次稀釋培養(yǎng)并檢測，最終將能產(chǎn)生抗CD47抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞篩選出來?！拘?詳析】為研究抗CD47的單克隆抗體的功能，實(shí)驗(yàn)組為單克隆抗體加入到巨噬細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞的共同培養(yǎng)體系，根據(jù)單一變量原則，應(yīng)設(shè)置不加