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ICSC T/CACM1326.34—TechnicalcodeofpracticeforcryopreservationofHedychiumcoronariumKoen. 中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)T/CACMT/CACM1326.34—目前 范 附錄A(規(guī)范性附錄)試劑的配置和保存方 前——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM GB/T1.1—20091部分:標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫(xiě)》給出的規(guī)則起草。T/CACMT/CACM1326.34—本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了姜花(HedychiumcoronariumKoen.)種子超低溫保存過(guò)程中的術(shù)語(yǔ)和定義、種子GB/T3543.6GB/T3543.7姜花Hedychiumcoronarium種子超低溫保存seedof℃4(1)GB/T3543.72,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)302內(nèi)側(cè)面向下,滴入TTC溶液浸沒(méi)種子,室溫(25℃)避光放置4h后觀察染色結(jié)果。TTCAA.1A.270
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×100%?????????????????(1)3h~6h75%~8045%~
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×100%……….900的凍存管(每管50)置于4℃冰箱中0.5h,取出立即放入-201h,之后迅速PVS2AA.3液氮中至少凍存24h后,取出2個(gè)凍存管,立即放入402min洗滌液(DS)35min,并用純凈水沖洗干凈。DS的配置方法見(jiàn)附錄A的A.4。取出1管解凍后的種子,按照5.1活力檢測(cè)方法進(jìn)行超低溫保存后的初始生活力檢測(cè)。當(dāng)種子生活力≥20%時(shí)視為保存成功。將剩下1管解凍后的姜花種子,播種到帶有無(wú)菌濾紙的帶蓋發(fā)芽盒中,溫度25℃~30℃,濕度70%~85%條件下培養(yǎng)。附錄TTC1.00g100mL1TTCpH6.5~7.54溶液I:9.08g磷酸二氫鉀溶于1L無(wú)菌水中;II:35.81g1LI﹕II2﹕3精密量取甘油23.8mL、乙二醇13.6mL、二甲亞砜13.6mL,稱取蔗糖13.7g,溶于MS溶液中,定容至100mL,調(diào)pH值至5.8,高溫高壓滅菌,4℃冷藏。41.1gMS100mLpH5.8,高溫高壓滅菌,4國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草(苗藥卷)[M].上??茖W(xué)技術(shù)出版16(2)M].WuTe-lin.KaiLarsen.Zingiberaceae[M]//FloraOfChinaBeijing:SciencePress/St.Louis:MissouriBotanicalGardenPress.200
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