ICS6502030

B40..

江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB32/T3685—2019

豬薩佩羅病毒檢測技術(shù)規(guī)程

DetectiontechnicalregulationforPorcineSapelovirus

2019-12-03發(fā)布2019-12-25實(shí)施

江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)

豬薩佩羅病毒檢測技術(shù)規(guī)程

DB32/T3685—2019

*

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

:400-168-0010

年月第一版

20203

*

書號

:155066·5-1622

版權(quán)專有侵權(quán)必究

DB32/T3685—2019

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出并歸口

。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人李彬范寶超孫杰何孔旺郭容利周金柱俞正玉

:、、、、、、。

Ⅰ

DB32/T3685—2019

豬薩佩羅病毒檢測技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬薩佩羅病毒的核酸檢測法血清學(xué)檢測間接方法等要求

(RT-PCR)、(ELISA)。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于血清學(xué)的普查

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

獸醫(yī)診斷樣品采集保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范

NY/T541、

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

豬薩佩羅病毒PorcineSapelovirusPSV

,

單股正鏈病毒屬于小病毒科薩佩羅病毒屬該病毒能引起中度或嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)紊

RNA,RNA。

亂腹瀉繁殖障礙和肺炎感染豬康復(fù)后仍然會繼續(xù)排毒成為重要的病毒傳播源

,、,,。

4核酸檢測RT-PCR法

()

41材料準(zhǔn)備

.

材料包括引物和

:PCRP15'-GAGAAGGTAAAGATGGGCAAAAC-3'P25'-AATACAG-

參見附錄相關(guān)試劑豬薩佩羅病毒陽性病料提取物反轉(zhuǎn)

GATGACACAGGAAGGG-3'(B);PCR;RNA

錄為作為陽性對照水作為陰性對照高速離心機(jī)儀電泳儀水平電泳槽

cDNA,;(10000r/min)、PCR、、、

凝膠成像系統(tǒng)或紫外投射儀移液器等儀器

()、。

42操作步驟

.

421DNA模板制備

..

按照規(guī)定的方法采集待檢豬的病料置于以下冰箱保存臨床組織病料樣品加

NY/T541,-20℃。

入緩沖液進(jìn)行充分研磨后凍融次高速離心取上清液提取病毒總

1×PBS3,(10000r/min)5min,

參照提取試劑盒說明書并反轉(zhuǎn)錄成利用反轉(zhuǎn)錄試劑盒保存?zhèn)溆?/p>

RNA(RNA),cDNA(),。

422PCR

..

反應(yīng)體系模

PCR:2×TaqMaster